Reflotron® Alkal. Phosphatase

Reflotron®
Alkal. Phosphatase
ES
Finalidad de uso
Test para la determinación cuantitativa de la actividad
total de la fosfatasa alcalina (EC 3.1.3.1.) en sangre,
suero o plasma con equipos de medición Reflotron.
Presentación
Envase de 30 tests, 5() 1 1622773
Aspectos clínicos
La fosfatasa alcalina (ALP) está presente en diferentes tejidos, p.ej. en el
hígado, los huesos, los intestinos y la placenta. La causa más frecuente de
un aumento de los niveles de (de) la actividad total de la ALP en el suero son
afecciones hepáticas y de las vías biliares. Junto con otras determinaciones
enzimáticas tales como GOT, GPT y γ-GT, permite el reconocimiento de estados colestáticos mediante diagnóstico diferencial.
También se comprueba un aumento de la ALP en diferentes enferme-dades
óseas, respectivamente alteraciones del metabolismo óseo, como en Morbus
Paget, osteomalacia, raquitismo, hiperparatiroidismo. En enfermedades malignas, los valores elevados pueden ser debidos a la aparición de fosfatasas
tumorales o a un aumento de la ALP hepática u ósea.
En caso de intensificación de la actividad de los osteoblastos, así como durante
el crecimiento del esqueleto en edad infantil o adolescente, se detectan valores
elevados que vuelven a bajar después de la pubertad.
Durante el último trimestre del embarazo y hasta el parto puede producirse
un aumento de la ALP, debido a un aumento continuo de la isoenzima placentaria.
Principio del test1
En el presente Reflotron ALP Test la muestra aplicada fluye a través de la zona
de aplicación, realizándose la separación de los eritrocitos, al interior de la
zona reactiva. La ALP hidroliza el fosfato de o-cresolftaleína en o-cresolftaleína, transfiriendo el residuo de fosfato a la molécula aceptora metilglucamina.
El producto de hidrólisis coloreado o-cresolftaleína que se forma en caso de
valor pH alcalino por unidad de tiempo es directa-mente proporcional a la
actividad de la fosfatasa alcalina:
ALP
fosfato de o-cresolftaleína + metilglucamina õõú o-cresolftaleína
+ fosfato de metilglucamina
Calibración
La determinación de la curva funcional de Reflotron Alkal. Phosphatase para la
conversión de valores de reflexión en actividades se efectúa en dependencia
del lote utilizando el estuche de prueba ALP IFCC líquida (Roche Diagnostics)
a 37°C. Los datos son transferidos automáticamente al medidor durante la
realización de la prueba.
Realización del test
Material necesario adicionalmente (no suministrado con el equipo): Reflotron
Instrument; Reflotron Pipette y puntas de pipetas, respectivamente pipeta
capilar, capilares, materiales de control, equipo normal de laboratorio para
la extracción de sangre.
Antes de realizar la determinación, leer atentamente las instrucciones para el
uso del equipo Reflotron y familiarizarse con la función del aparato.
Conectar el aparato.
Al aparecer el mensaje „LISTO”, extraer un portarreactivos del tubo.
Volver a cerrar el tubo inmediatamente con el tapón de agente desecante.
Retirar la lámina de protección del portarreactivos (a), evitando doblar el
portarreactivos.
Absorber el material de muestra sin formar burbujas, p.ej. con una Reflotron
Pipette, y aplicarlo en localización central sobre la parte roja de la zona de
aplicación (xx) – sin tocar ésta con la punta de la pipeta – en forma de gota (b);
volumen de aplicación necesario: muestra de 30 µl (ver la ilustración).
En el plazo de 15 segundos introducir el portarreactivos horizontalmente, con
la tapa abierta, en la ranura provista hasta que encaje perceptiblemente (c).
Cerrar la tapa.
El aparato confirma con el mensaje „ALP“ que el código magnético específico
del test ha sido leído correctamente. Los segundos transcurridos hasta la
aparición del resultado son indicados en visualización digital. La actividad es
evaluada y automáticamente calculada con la ayuda de una función y factores
de conversión transferidos al equipo por la banda magnética que se encuentra
en cada portarreactivos. En función del ajuste del aparato se indica la actividad
enzimática en U/l o µkat/l. Retirar el portarreactivos usado y eliminarlo de
acuerdo con las disposiciones válidas para su laboratorio.
(a)
(b)
(c)
Intervalos de referencia4
Sangre, suero, plasma
Hombres 40 – 129 U/l, resp. 0,67 – 2,15 μkat/l (37°C, 30°C*, 25°C*).
Mujeres 35 – 104 U/l, resp. 0,58 – 1,74 μkat/l (37°C*, 30°C* 25°C*).
*Por razones técnicas, el Reflotron ofrece valores iguales a 37°C, 30°C y 25°C.
Cada laboratorio debería controlar la transferibilidad de los intervalos de
referencia para los propios grupos de pacientes y determinar en caso necesario intervalos de referencia propios. Para fines diagnósticos siempre se
deben valorar los resultados de la actividad total de la fosfatasa alcalina en
relación con la anamnesis, el reconocimiento clínico y otros resultados de
exámenes.
Medidas de precaución y advertencias
Diagnóstico in vitro. Observar las medidas de precaución habituales en la
manipulación de reactivos de laboratorio.
Rango de medición y técnica de dilución
El rango de medición es de 20 – hasta aprox. 1250 U/l, resp. de 0,33 hasta
aprox. 20,87 μkat/l.
Si la actividad medida de la ALP se encuentra por encima del intervalo de
medición del Reflotron Alkal. Phosphatase (el mensaje del display contiene
adicionalmente „*“ o visualiza DILUIR MUESTRA), se puede diluir la muestra de suero o de plasma con suero o plasma de actividades A0 de la ALP
conocidas en una relación de 1 + 1. La verdadera actividad A de la ALP
puede ser calculada de la actividad Adel hallada, según la fórmula siguiente:
A = 2 Adel – A0.
Obtención de las muestras y preparación2,3
Sangre capilar, sangre completa extraída con los tubos convencionales de extracción de muestras estándar, suero obtenido de ella, sangre
heparinizada o plasma heparinizado.
Sangre capilar o venosa fresca debe ser utilizada inmediatamente después
de la extracción de sangre.
Como anticoagulante solamente se debe utilizar heparina (de preferencia,
heparinato de litio). No utilizar otros anticoagulantes o aditivos.
La fosfatsa alcalina en la sangre heparinizada se mantiene durante 8 horas
en tubos cerrados a temperatura ambiente (25°C ). Después de la sedimentación de las fracciones celulares se puede utilizar el plasma sobrenadante
si se evita agitar la muestra.
Al utilizar pipetas capilares o recipientes desechables heparinizados se deben
observar las indicaciones del fabricante.
En el caso del plasma heparinizado, la estabilidad a temperatura ambiente
es de 1 día como mínimo.
En el suero, la ALP es estable durante una semana como mínimo a 4°C,
almacenado a temperatura ambiente se comprueba una disminución de la
actividad del 3 % al cabo de tres días.
Advertencias; restricciones del procedimiento – interferencias3
En comparación con la fosfatasa alcalina IFCC líquida, las actividades de la ALP
ósea se encuentran reducidas en un promedio del 11 %, las actividades de la ALP
placentaria incrementadas en un promedio del 24 %.
No se comprobó una influencia ejercida sobre los resultados del test por
las sustancias siguientes en los ámbitos de concentración examinados (criterio: recuperación ± 10 % del valor inicial): valores del hematócrito hasta
el 55 %, valores de bilirrubina hasta 12 mg/dl (205 µmol/l), hemólisis hasta
el 1%, colesterol hasta 300 mg/dl (7,8 mmol/l) así como triglicéridos hasta
1000 mg/dl (11,4 mmol/l).
Las muestras de pacientes con una composición inusual de isoenzimas
pueden dar resultados que difieren del método de referencia de la IFCC.
Utilização pretendida
Teste para determinação quantitativa da actividade
total de fosfatase alcalina (EC 3.1.3.1.) do sangue, soro
ou plasma com o aparelho Reflotron.
apresentação
Embalagem de 30 tiras, 5() 1 1622773
Aspectos clínicos
A fosfatase alcalina (ALP) existe em vários tecidos humanos, como por exemplo,
no fígado, ossos, intestino e placenta. A causa mais frequente do aumento total
da actividade de ALP no soro é a doença do fígado e/ou tracto biliar. Quando
medida juntamente com outras enzimas, tais como a GOT, GPT e γ-GT, a
ALP tem um valor diagnóstico consideravelmente diferencial para identificar a
doença colestática. Níveis elevados de ALP foram encontrados em vários tipos
de doenças de ossos e distúrbios do metabolismo do osso; exemplo Doença
de Paget, osteomalacia, raquitismo, hiperparatiróidismo. Valores patológicos
de ALP em distúrbios malignos podem ser devido ou à presença de fosfatases
tumorais ou elevação de ALP hepática e óssea.
O aumento da actividade osteoblástica, como a que ocorre nas fases de crescimento do esqueleto de crianças e adolescentes, está associado a níveis de ALP
que são elevados mas que diminuem depois da puberdade. Pode-se verificar
nas mulheres um aumento da fosfatase alcalina, durante o terceiro trimestre
de gravidez; a enzima adicional é de origem placentária.
Princípio do teste1
Depois de aplicada na tira teste, a amostra entra na zona reactiva, no caso de
sangue depois da separação dos eritrócitos do plasma. A fosfatase alcalina
hidrolisa o fosfato de o-cresolftaleína em o-cresolftaleína e transfere o grupo
de fosfato para a molécula aceitadora, metilglucamina. O produto corado da
hidrólise, o-cresolftaleína, que é produzido por unidade de tempo sob condições
alcalinas é directamente proporcional à actividade da fosfatase alcalina:
ALP
Fosfato de o-cresolftaleína + metilglucamina õõú o-cresolftaleína
+ fosfato de metilglucamina
A coloração é determinada cineticamente a 37 °C, como medida da actividade
da enzima da ALP. O resultado é apresentado após cerca de 135 segundos,
em U/L ou µkat/L.
Composição de cada tira teste:
Fosfato de o-cresolftaleína ' 394 µg; N-metil-D-glucamina ' 1005 µg; Magnésio ' 0,56 µg.
A una temperatura de 37°C se observa en una medición cinética a 567 nm la
formación del colorante como medida de la actividad enzimática de la fosfatasa
alcalina (ALP) y se indica el resultado al cabo de aprox. 135 segundos en U/l,
resp. en μkat/l.
Componentes por zona reactiva: fosfato de o-cresolftaleina ' 394 µg; N-metilD-glucamina ' 1005 µg; magnesio ' 0,56 µg.
Almacenamiento y estabilidad
Estabilidad y almacenamiento a +2°C - +30°C hasta la fecha de caducidad
indicada en el estuche, respectivamente en el tubo. Después de la extracción
de una tira reactiva se debe a cerrar el tubo inmediatamente para evitar que
la exposición al polvo, la humedad, etc., vuelvan las tiras reactivas inutilizables.
PT
Control de calidad
Reflotron Precinorm U, respectivamente Reflotron Check debe ser utilizado de
acuerdo con los requerimientos individuales del laboratorio, respectivamente
las correspondientes técnicas para el control de calidad. Los resultados tienen
que encontrarse dentro de los intervalos definidos. Cada laboratorio debería
describir medidas de corrección para el caso que hubiera valores situados
fuera del intervalo.
Características del rendimiento3
Los datos del Reflotron Alkal. Phosphatase fueron establecidos en exámenes
de ensayo. La mayoría de los datos del test se encontraron dentro de los
valores indicados.
Repetibilidad (imprecisión en la serie):
CV (coeficiente de variación) en el rango normal 2,2 %, en el rango patológico
2,9 %; material de muestra plasma heparinizado.
Reproducibilidad (imprecisión entre días): CV en el rango normal 5,0 %, en el
rango patológico 5,6 %; material de muestra suero de control.
Exactitud (comparaciones de métodos; U/l; ecuaciones de rectas de compensación, n muestras, coeficiente de correlación r): y = 0,966 x – 2,635, resp.
y = 1,050 x + 0,725; (n = 100, resp. 92; r = 0,996, resp. 0,993). Material de muestra plasma heparinizado; mayormente muestras de pacientes con afecciones
hepáticas. Método de comparación x: ALP IFCC líquida, Roche Diagnostics.
La explicación de los símbolos y las referencias bibliográficas se encuentran
al final del prospecto.
Fecha de la última revisión: 2011-12
Precauções e avisos
Para utilização de diagnóstico in vitro. Tenha em consideração as precauções
habituais para o tratamento de reagentes laboratoriais.
Armazenamento e validade
Armazene entre +2°C e +30°C. Nestas condições os testes podem ser usados
até à data de validade impressa na embalagem ou no tubo. Depois de retirar uma
tira teste, certifique-se que fechou imediatamente o tubo, pois caso contrário, as
tiras testes ficam danificadas devido à exposição ao pó, humidade, etc.
Colheita da amostra e tratamento2,3
Sangue capilar; sangue total colhido em tubos de amostra estandardizados, assim
como o soro preparado através deste processo; sangue heparinizado ou plasma
heparinizado. Utilize sangue capilar ou sangue venoso frescos imediatamente
depois da colheita de sangue.
Utilize apenas heparina (de preferência heparinato de lítio) como anticoagulante.
Não utilize outros anticoagulantes ou aditivos.
O sangue heparinizado mantido em recipientes fechados deverá ser usado
num prazo de 8 horas. Depois da precipitação dos componentes celulares,
o plasma excedente pode ser usado desde que a amostra e não tenha sido
agitada.
No caso de utilizar pipetas capilares ou recipientes de utilização única, observe
o prazo de conservação do material de amostra dado pelo fabricante.
No plasma heparinizado a ALP permanece estável durante pelo menos 1 dia,
à temperatura ambiente.
A uma temperatura de +4°C, a ALP no soro permanece estável durante uma
semana; quando à temperatura ambiente, perde 3% da sua actividade depois
de 3 dias.
Notas sobre limitações e interferências do método3
As actividades da ALP óssea são, em média, 11% inferiores às medidas com
Fosfatase Alcalina IFCC líquida. As actividades da ALP placentária são, em
média, 24% superiores.
As seguintes substâncias não influenciam os resultados (critério: recuperação
± 10% da linha basal) nos intervalos de concentração testados: valores de
hematócrito até 55%, valores de bilirrubina até 12 mg/dl (205 µmol/l), hemólise até 1%, colesterol até 300 mg/dl (7,8 mmol/l) assim como triglicéridos até
1000 mg/dl (11,4 mmol/l).
As amostras de pacientes que apresentam uma composição de isoenzimas
invulgar podem produzir resultados desviantes em comparação com o método
de referência IFCC.
Calibração
A curva da função Reflotron Alkal. Phosphatase, utilizada para converter os
valores de reflectância em actividades, é definida para cada lote com o teste
ALP IFCC líquido (Roche Diagnostics), a 37 °C. Os dados são automaticamente
programados no Reflotron durante o teste.
Procedimento do teste
Materiais adicionais necessários (não fornecidos): aparelho Reflotron; Reflotron Pipette e pontas para a pipeta ou pipeta capilar, controlos, equipamento
laboratorial habitual para efectuar a colheita de sangue.
Antes de efectuar o teste, leia atentamente o manual de instruções do Reflotron
para se familiarizar com o aparelho.
Ligue o aparelho.
Quando aparecer “PRONTO” no visor, retire uma tira reactiva do tubo.
Feche imediatamente o tubo com a tampa contendo exsicante.
Utilize apenas tiras reactivas retiradas directamente do tubo.
Retire a banda protectora da zona reactiva (a) tendo atenção para não dobrar
a tira.
Utilizando a pipeta Reflotron, recolha o material de amostra evitando a inclusão
de ar, e aplique uma gota no centro da zona vermelha (xx), sem que a ponta
da pipeta toque na zona de aplicação (b): volume de amostra necessário para
aplicação 30 µl (veja a figura).
Após 15 segundos aproximadamente, abra a tampa (se não estiver já aberta),
coloque a tira na guia e introduza-a horizontalmente no aparelho até ouvir um
clic (c). Feche a tampa.
O aparecimento de “ALP” no visor confirma que a leitura do código magnético
específico do teste foi correctamente lido pelo aparelho.
O tempo é indicado em segundos, até surgir o resultado. A actividade ALP é
calculada automaticamente através das leituras efectuadas usando factores de
função ou conversão que são introduzidos no aparelho através da tira magnética,
existente no verso de cada tira reactiva. A actividade enzimática é indicada em
U/l ou µkat/l dependendo de como foi definido o aparelho (CON ou SI).
Expressa em mg/dl ou µmol/l dependendo da selecção de unidades.
Retire do Reflotron a tira reactiva usada e deite fora de acordo com o procedimento do seu laboratório.
(a)
(b)
(c)
της γ-GT, η µέτρηση της αλκαλικής φωσφατάσης καθιστά δυνατή τη διαφορική
διάγνωση χολοστατικών συνδρόµων.
Αύξηση της ALP απαντάται και σε διάφορες παθήσεις των οστών ή διαταραχές του µεταβολισµού αυτών, όπως στη νόσο του Paget, την οστεοµαλακία,
τη ραχίτιδα και τον υπερπαραθυρεοειδισµό. Σε κακοήθεις νόσους απαντώνται
επίσης αυξηµένες τιµές, είτε λόγω παρουσίας φωσφατασών του όγκου, είτε λόγω
αύξησης του ηπατικού ή του οστικού κλάσµατος της ALP από µεταστάσεις.
Αυξηµένες τιµές ανευρίσκονται και όταν είναι αυξηµένη η δραστηριότητα των
οστεοβλαστών, όπως κατά τη διάρκεια της αύξησης του σκελετού στην παιδική
και εφηβική ηλικία. Οι αυξηµένες αυτές τιµές υποχωρούν µετά την εφηβεία. Κατά
τη διάρκεια της εγκυµοσύνης, και µάλιστα στο τρίτο τρίµηνο και µέχρι τον τοκετό,
είναι δυνατόν να αυξηθεί η ALP, κυρίως λόγω αύξησης του ισοενζύµου της που
προέρχεται από τον πλακούντα.
Αρχή της δοκιµασίας1
Σε αυτήν τη Reflotron δοκιµασία, από το δείγµα που τοποθετήθηκε στη δοκιµαστική ταινία αποχωρίζονται τα ερυθρά αιµοσφαίρια και το υπόλοιπο αίµα ρέει
στη ζώνη αντίδρασης. Η ALP υδρολύει το ο-κρεζολφθαλεϊνφωσφορικό σε
ο-κρεζολφθαλεΐνη και µεταφέρει τη φωσφορική ρίζα στο µόριο – υποδοχέα
µεθυλγλυκαµίνη. Το προϊόν της υδρόλυσης, ο-κρεζολφθαλεΐνη, σε αλκαλικό
pH εµφανίζει χρώµα. Το ποσό της ο-κρεζολφθαλεΐνης που σχηµατίζεται στη
µονάδα του χρόνου είναι ευθέως ανάλογο µε τη δραστικότητα της αλκαλικής
φωσφατάσης:
ALP
o-κρεζολφθαλεϊνφωσφορικό + µεθυλγλυκαµίνη õõõú o-κρεζολφθαλεΐνη
+ µεθυλγλυκαµινοφωσφορικό
Ο σχηματισμός χρωστικής προσδιορίζεται κινητικά στους 37°C ως μέτρο της
ενζυμικής δραστικότητας της ALP. Το αποτέλεσμα εμφανίζεται μετά από 135
δευτερόλεπτα περίπου, σε μονάδες U/L ή µkat/L.
Περιεχόµενες ουσίες ανά πεδίο αντίδρασης: o- κρεζολφθαλεϊνφωσφορικό
≥ 394 µg, N-µεθυλ-D-γλυκαµίνη ≥ 1005 µg, Mαγνήσιο ≥ 0,56 µg.
Intervalos de referência4
Sangue, soro, plasma
Homens 40 – 129 U/L [0,67 – 2,15 µkat/L] (37 °C, 30 °C*, 25 °C*).
Mulheres 35 – 104 U/L [0,58 – 1,74 µkat/L] (37 °C, 30 °C*, 25 °C*).
*Devido ao modo de funcionamento do Reflotron, obtêm-se os mesmos valores a 37 °C,
30 °C e 25 °C.
Cada laboratório deverá verificar se os intervalos de referência são apropriados
aos seus grupos de doentes, e deverá estabelecer os seus próprios intervalos
de referência se for necessário. Para fins de diagnóstico, os resultados da
fosfatase alcalina deverão ser sempre avaliados juntamente com o histórico,
exame clínico e resultados de outros exames e testes efectuados.
Intervalo de medição e instruções de diluição
O intervalo de medição é de 20 a, aproximadamente, 1250 U/L [0,33 a, aprox.,
20,87 µkat/L].
Se a actividade ALP medida for superior ao intervalo de medição do Reflotron
Alkaline Phosphatase (indicado no visor por um asterisco junto do resultado ou
a mensagem DILUA ALP), a amostra de soro ou plasma podem ser diluídos
numa medida de 1+1 com soro ou plasma, tendo uma actividade ALP conhecida
de Ao. A verdadeira actividade ALP A pode ser calculada a partir da actividade
medida Adil usando a seguinte fórmula: A = 2 Adil - A0.
Controlo de Qualidade
Para o controlo de qualidade, utilize o Reflotron Precinorm U ou o Reflotron
Check para obedecer os requisitos de cada laboratório ou para obedecer aos
regulamentos. Os resultados devem estar dentro dos intervalos prescritos. Cada
laboratório deve especificar as medidas correctivas a serem aplicadas no caso
de os valores se encontrarem fora do intervalo.
Características do funcionamento3
Os dados do Reflotron Alkaline Phosphatase foram determinados numa série
de testes. A maioria dos dados do teste encontraram-se dentro dos intervalos
indicados.
Repetitividade (imprecisão entre séries): CV (coeficiente de variação) 2,2 %
no intervalo normal, 2,9 % no intervalo patológico; material de amostragem
plasma heparinizado.
Reprodutividade (imprecisão entre dias): CV 5,0 % no intervalo de valores
normais, 5,6 % no intervalo de valores patológicos; material de amostragem
soro de controlo.
Precisão (comparação de métodos; U/L; equações de regressão, n amostras,
coeficientes de correlação r): y = 0,966 x – 2,635 e y = 1,050 x + 0,725, respectivamente; (n = 100 e 92; r = 0,996 e 0,993). Material de amostragem plasma
heparinizado; amostras predominantemente de doentes do fígado. Método de
referência x: líquido ALP, IFCC, Roche Diagnostics).
Para obter uma explicação dos símbolos utilizados e uma lista de referências,
consulte a parte final deste folheto informativo.
Última actualização: 2011-12
ΕΛ
XrÆsh
Δοκιµασία για τον ποσοτικό προσδιορισµό της
ολικής δραστικότητας της αλκαλικής φωσφατάσης
(EC 3.1.3.1.) στο αίµα, στον ορό ή στο πλάσµα µε
τους αναλυτές Reflotron.
Syskeyas¡a
Syskeyas¡a tvn 30 dokimastikwn tainiwn,
5() 11622773
Κλινικά Στοιχεία
Η αλκαλική φωσφατάση (ALP) απαντάται σε διάφορους ιστούς, π.χ. στο ήπαρ,
τα οστά, το έντερο και τον πλακούντα. Η συχνότερη αιτία αυξηµένης (ολικής)
αλκαλικής φωσφατάσης στον ορό είναι παθήσεις του ήπατος και των χοληφόρων
οδών. Mαζί µε τον προσδιορισµό άλλων ενζύµων, όπως της GOT, GPT και
Προληπτικά µέτρα
In vitro διαγνωστικό µέσο. Τηρείτε τα συνήθη προληπτικά µέτρα που πρέπει να
λαµβάνονται όταν µεταχειρίζεται κανείς χηµικά αντιδραστήρια.
Διατήρηση
Οι δοκιµαστικές ταινίες διατηρούνται στους +2°C - +30°C µέχρι την ηµεροµηνία
λήξης που αναγράφεται στο κουτί ή στο σωληνάριό τους. Κάθε φορά που βγάζετε
µια δοκιµαστική ταινία θα πρέπει αµέσως µετά να κλείνετε καλά µε το πώµα το
σωληνάριο, διότι είναι δυνατόν διάφορες εξωτερικές επιδράσεις να καταστήσουν
άχρηστες τις δοκιµαστικές ταινίες.
Λήψη του δείγµατος. Προετοιµασία για τη µέτρηση2,3
Mπορούν να χρησιµοποιηθούν: Τριχοειδικό αίµα, φλεβικό αίµα ληφθέν σε
δοκιµαστικό σωληνάριο χωρίς αντιπηκτικό ή ορός αυτού, ηπαρινισµένο αίµα
ή πλάσµα.
Το πρόσφατο τριχοειδικό ή φλεβικό αίµα θα πρέπει να χρησιµοποιείται αµέσως
µετά τη λήψη του.
Vς αντιπηκτικό επιτρέπεται να χρησιµοποιηθεί µόνο η ηπαρίνη (κατά προτίµηση
άλας της µε λίθιο). Mη χρησιµοποιείτε άλλα αντιπηκτικά ή άλλες πρόσθετες
ουσίες.
Ηπαρινισµένο αίµα διατηρούµενο σε κλειστό σωληνάριο πρέπει να χρησιµοποιηθεί µέσα σε 8 ώρες. Mετά την καθίζηση των κυτταρικών στοιχείων, µπορεί
να χρησιµοποιηθεί το υπερκείµενο πλάσµα, εφόσον δεν έχει ανακινηθεί το
δείγµα.
Αν χρησιµοποιηθούν ηπαρινισµένα σωληνάρια µιας χρήσης ή τριχοειδικές πιπέτες, πρέπει να προσεχθούν τα δεδοµένα που δίνει ο κατασκευαστής.
Το ηπαρινισµένο πλάσµα διατηρείται σταθερό σε θερµοκρασία δωµατίου τουλάχιστον 1 ηµέρα.
Η ALP στον ορό του αίµατος διατηρείται σταθερή στους 4°C τουλάχιστον µία
εβδοµάδα, σε θερµοκρασία δωµατίου, όµως, χάνει µετά 3 ηµέρες το 3% της
δραστικότητάς της.
Παρατηρήσεις στους περιορισμούς και στις αλληλεπιδράσεις της μεθόδου3
Οι τιμές δραστικότητας της ALP των οστών είναι κατά μέσο όρο 11% χαμηλότερες από τις τιμές που μετρούνται με χρήση της μεθόδου υγρού αντιδραστηρίου
Αλκαλική φωσφατάση IFCC. Οι τιμές δραστικότητας της ALP του πλακούντα
είναι κατά μέσο όρο 24% υψηλότερες.
Ουδεµία επίδραση στα αποτελέσµατα της δοκιµασίας (κριτήριο: η νέα τιµή
να µην αποκλίνει περισσότερο από ± 10 % της αρχικής τιµής) βρέθηκε
να έχουν οι ουσίες που ακολουθούν στις συγκεκριµένες συγκεντρώσεις:
Τιµές αιµατοκρίτη ως 55%, χολερυθρίνη ως 12 mg/dl (205 µmol/l), αιµόλυση ως 1%, χοληστερόλη ως 300 mg/dl (7,8 mmol/l) και τριγλυκερίδια ως
1000 mg/dl (11,4 mmol/l).
Δείγματα ασθενών με ασυνήθιστη σύσταση ισοενζύμων μπορεί να προκαλέσουν
την εμφάνιση αποκλινόντων αποτελεσμάτων σε σύγκριση με τη μέθοδο
αναφοράς IFCC.
Βαθμονόμηση
Η καμπύλη της συνάρτησης της μεθόδου Αλκαλική φωσφατάση Reflotron, μέσω
της οποίας οι τιμές ανάκλασης μετατρέπονται σε τιμές δραστικότητας, καθορίζεται
για κάθε παρτίδα με χρήση της μεθόδου υγρού αντιδραστηρίου ALP IFCC (Roche
Diagnostics) στους 37°C. Τα δεδομένα μεταφέρονται αυτόματα στον αναλυτή
Reflotron κατά την εκτέλεση της δοκιμασίας.
Εκτέλεση της δοκιµασίας
Εκτός από τις ταινίες, είναι αναγκαία και τα εξής υλικά (δεν παρέχονται στη
συσκευασία): Αναλυτής Reflotron, πιπέτες Reflotron και tips πιπετών ή τριχοειδικές πιπέτες, υλικά για µέτρηση ελέγχου σωστής λειτουργίας και ο συνήθης
εξοπλισµός που απαιτείται για τη λήψη του αίµατος.
Πριν την εκτέλεση της µέτρησης, διαβάστε τις οδηγίες χρήσης του αναλυτή
Reflotron και εξοικειωθείτε µε τη λειτουργία του µηχανήµατος.
Ανάψτε τον αναλυτή.
Όταν στην οθόνη του µετρητή εµφανισθεί η ένδειξη "Ready", βγάλτε µια
δοκιµαστική ταινία από το σωληνάριο.
Αµέσως µετά κλείστε πάλι καλά το σωληνάριο µε το πώµα του που περιέχει
µια αποξηραντική ουσία.
Αφαιρέστε το προστατευτικό έλασµα από τη δοκιµαστική ταινία (a), αποφεύγοντας όµως να λυγίσετε την ταινία.
Πάρτε το δείγµα, π.χ. µε την πιπέτα Reflotron, προσέχοντας να µη σχηµατισθούν φυσαλίδες αέρα, και τοποθετήστε το σταγόνα – σταγόνα κεντρικά στο
05961769001(02)
V1/R1 (black) – 2011-12
κόκκινο τµήµα (xx) – χωρίς να το ακουµπήσετε µε την πιπέτα (b). Ο όγκος του
αίµατος που χρειάζεται να τοποθετηθεί είναι 30 µl (βλέπε εικόνα).
Mέσα σε 15 δευτερόλεπτα, και ενώ το καπάκι του µηχανήµατος είναι ανοικτό,
βάλτε τη δοκιµαστική ταινία στον οδηγό της και σπρώξτε την οριζόντια µέχρι
να φθάσει στο τέλος, γεγονός που γίνεται αντιληπτό ψηλαφητικά (c). Κλείστε
το καπάκι του αναλυτή.
Ο αναλυτής επιβεβαιώνει µε την εµφάνιση στην οθόνη της ένδειξης „ALP“
ότι έγινε σωστά η ανάγνωση της ειδικής για τη δοκιµασία µαγνητικής ταινίας
κωδικοποίησης (στην πίσω επιφάνεια της ταινίας). Στη συνέχεια εµφανίζονται
στην οθόνη τα δευτερόλεπτα που αποµένουν µέχρι την εµφάνιση του αποτελέσµατος. Η δραστικότητα του ενζύµου υπολογίζεται αριθµητικά αυτοµάτως,
µε τη βοήθεια µιας συνάρτησης και ορισµένων συντελεστών µετατροπής, οι
οποίοι µεταφέρονται στον αναλυτή µέσω της µαγνητικής ταινίας που βρίσκεται
πάνω σε κάθε δοκιµαστική ταινία. Ανάλογα µε τη ρύθµιση του αναλυτή, η
ενζυµική δραστικότητα εκφράζεται για τους 25°C, τους 30°C ή τους 37°C σε
U/l ή µkat/l. Βγάλτε τη χρησιµοποιηµένη δοκιµαστική ταινία και αποµακρύνετέ
την σύµφωνα µε τις οδηγίες που ισχύουν στο εργαστήριό σας.
(a)
(b)
(c)
Τιμές αναφοράς5
Αίμα, ορός, πλάσμα
Άνδρες 40 – 129 U/L [0,67 – 2,15 µkat/L] (37°C, 30°C*, 25°C*).
Γυναίκες 35 – 104 U/L [0,58 – 1,74 µkat/L] (37°C*, 30°C*, 25°C*).
*Λόγω του τρόπου με τον οποίο λειτουργεί ο αναλυτής Reflotron, οι ίδιες τιμές λαμβάνονται
σε θερμοκρασία 37°C, 30°C και 25°C.
Το κάθε εργαστήριο θα πρέπει να ελέγχει κατά πόσον οι τιµές αναφοράς ισχύουν
και για τις οµάδες των δικών του ασθενών και, αν δεν ισχύουν, να ορίσει δικές
του τιµές αναφοράς. Για διαγνωστικούς σκοπούς τα αποτελέσµατα της δραστικότητας της ολικής αλκαλικής φωσφατάσης θα πρέπει πάντα να αξιολογούνται
σε συνάρτηση µε το ιστορικό, την κλινική εξέταση και τα αποτελέσµατα άλλων
εργαστηριακών εξετάσεων του ασθενούς.
Εύρος μέτρησης και οδηγίες αραίωσης
Το εύρος μέτρησης είναι από 20 έως περίπου 1250 U/L [0,33 έως περίπου
20,87 μkat/L].
Αν η µετρηθείσα δραστικότητα της ALP βρίσκεται πάνω από το ανώτερο όριο
µέτρησης της Reflotron Alkaline Phosphatase (σε αυτήν την περίπτωση η τιµή
που προβάλλεται στην οθόνη περιλαµβάνει και το „ * “ ή προβάλλεται η ένδειξη
(DILUTE ALP), το δείγµα, εφόσον είναι ορός ή πλάσµα, µπορεί να αραιωθεί
µε ορό ή πλάσµα που έχει γνωστή δραστικότητα ALP A0 σε αναλογία 1 : 1. Η
πραγµατική δραστικότητα της ALP A µπορεί να υπολογισθεί από τη µετρηθείσα
δραστικότητα AV σύµφωνα µε τον εξής τύπο: A = 2 Av – A0.
Έλεγχος ποιότητας
Ανάλογα µε τις απαιτήσεις του κάθε εργαστηρίου ή τις κατά περίπτωση προδιαγραφές για τον έλεγχο ποιότητας (σωστής λειτουργίας), χρησιµοποιήστε
Reflotron Precinorm U ή Reflotron Check. Τα αποτελέσµατα πρέπει να βρίσκονται
µέσα στο καθορισµένο εύρος τιµών. Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να προβλέπει
τα µέτρα που θα πρέπει να ληφθούν για τη διόρθωση στην περίπτωση που οι
τιµές βρίσκονται εκτός του καθορισµένου εύρους.
Χαρακτηριστικά της δοκιµασίας
Τα δεδοµένα για τη Reflotron Alkaline Phosphatase προέρχονται από πειραµατικές δοκιµασίες που έγιναν µε σκοπό την αξιολόγηση. Τα περισσότερα αποτελέσµατα της δοκιµασίας βρέθηκαν στα όρια των τιµών αναφοράς.
Επαναληψιμότητα (επαναληψιμότητα εντός σειράς): CV (συντελεστής μεταβλητότητας) στην περιοχή φυσιολογικών τιμών 2,2 %, στην περιοχή παθολογικών
τιμών 2,9 %. Υλικό δείγματος: ηπαρινισμένο πλάσμα.
Αναπαραγωγιμότητα (επαναληψιμότητα μεταξύ ημερών): CV στην περιοχή φυσιολογικών τιμών 5,0 %, στην περιοχή παθολογικών τιμών 5,6 %. Υλικό δείγματος:
ορός ελέγχου
Ακρίβεια (Σύγκριση μεθόδων, U/L, Εξισώσεις παλινδρόμησης, n δείγματα, συντελεστής συσχέτισης r): y = 0,966x – 2,635 και y = 1,050x + 0,725, αντίστοιχα
(n = 100 και 92, r = 0,996 και 0,993). Υλικό δείγματος: ηπαρινισμένο πλάσμα. Τα
δείγματα προέρχονται κυρίως από ασθενείς με ηπατοπάθεια. Μέθοδος αναφοράς
x: μέθοδος υγρού αντιδραστηρίου ALP IFCC, Roche Diagnostics.
3
Στο τέλος αυτού του ένθετου εντύπου θα βρείτε τις επεξηγήσεις των χρησιµοποιουµένων συµβόλων και έναν κατάλογο βιβλιογραφικών αναφορών.
Τελευταία ενηµέρωση: 2011-12
PL
Zastosowanie
Test do oznaczania ilościowego całkowitej aktywności
fosfatazy alkalicznej (EC 3.1.3.1) we krwi, surowicy lub
osoczu przy użyciu aparatu Reflotron.
Postać handlowa
Opakowanie 30 testów paskowych, 5() 1 1622773
Aspekty kliniczne
Fosfataza alkaliczna (ALP) jest obecna w różnych tkankach ludzkich, na przykład
w wątrobie, kościach, jelicie i łożysku. Najczęstszą przyczyną podwyższonej
całkowitej aktywności ALP w surowicy są choroby wątroby i dróg żółciowych.
Oznaczanie ilościowe ALP w połączeniu z pomiarem aktywności innych enzymów, takich jak GOT, GPT i γ-GT, umożliwia diagnostyczne różnicowanie chorób
cholestatycznych. Podwyższony poziom ALP stwierdza się w różnych typach
chorób kości i zaburzeniach metabolizmu kostnego, takich jak choroba Pageta,
osteomalacja, krzywica, nadczynność przytarczyc. Podwyższenie poziomu ALP
w chorobach złośliwych może być albo skutkiem obecności fosfataz pochodzenia
nowotworowego, albo podwyższenia poziomu ALP pochodzenia wątrobowego
lub kostnego. Zwiększona aktywność osteoblastyczna, występująca na przykład
w fazach rozwoju szkieletu w okresie dzieciństwa i dojrzewania, wiąże się z przejściowym podwyższeniem poziomu ALP, które przemija po osiągnięciu dojrzałości
płciowej. Podwyższony poziom fosfatazy alkalicznej obserwowany w trzecim
trymestrze ciąży jest powodowany głównie przez izoenzym łożyskowy.
Zasada pomiaru1
Próbka podana na test paskowy przepływa do strefy reakcji (w przypadku krwi –
po oddzieleniu erytrocytów od osocza). ALP hydrolizuje fosforan o-krezoloftaleiny
do o-krezoloftaleiny i przenosi grupę fosforanową do cząsteczki akceptora metyloglukaminy. Produkt barwny hydrolizy o-krezoloftaleiny wytwarzany w jednostce czasu w środowisku alkalicznym jest wprost proporcjonalny do aktywności
fosfatazy alkalicznej:
ALP
fosforan o-krezoloftaleiny + metyloglukamina õõú o-krezoloftaleina
+ fosforan metyloglukaminy
Szybkość powstawania produktu barwnego reakcji, która jest miarą aktywności
enzymu ALP, określa się pomiarem kinetycznym w temperaturze 37°C przy
długości fali 567 nm, a wynik zostaje wyświetlony po ok. 135 sekundach w
U/l lub μkat/l.
Jeden test paskowy zawiera:
fosforan o-krezoloftaleiny ≥ 394 µg; N-metylo-D-glukaminę ≥1005 µg; magnez
≥ 0,56 µg.
Uwagi i przestrogi
Diagnostyka in vitro. Należy stosować normalne środki ostrożności obowiązujące
podczas pracy z odczynnikami laboratoryjnymi.
Przechowywanie i okres trwałości
Temperatura przechowywania: od +2°C do +30°C. Testów przechowywanych w
tych warunkach można używać do daty ważności wydrukowanej na opakowaniu lub pojemniku. Po wyjęciu testu paskowego należy bezzwłocznie zamknąć
pojemnik, w przeciwnym razie pozostałe testy paskowe mogą stać się niezdatne
do użytku wskutek zetknięcia z pyłem, wilgocią itp.
2,3
Pobieranie i przetwarzanie próbek
Krew kapilarna; krew pełna pobrana do standardowych probówek, jak również
surowica uzyskana z takiej krwi; krew heparynizowana lub heparynizowane
osocze. Świeżą krew kapilarną lub żylną należy zbadać natychmiast po pobraniu. Jako antykoagulantu wolno używać jedynie heparyny (najlepiej heparyny
litowej). Nie wolno używać żadnych innych antykoagulantów ani modyfikatorów.
Krew heparynizowaną przechowywaną w zamkniętych pojemnikach należy
zbadać w ciągu 8 godzin. Po strąceniu składników komórkowych można do
badania wykorzystać sklarowane osocze, pod warunkiem, że próbka nie zostanie
wstrząśnięta. W razie stosowania jednorazowych pojemników lub pipet kapilarnych pokrytych heparyną należy przestrzegać podanych przez producenta
instrukcji. W heparynizowanym osoczu ALP zachowuje trwałość przez co
najmniej 1 dobę w temperaturze pokojowej.
W surowicy ALP zachowuje trwałość przez co najmniej 1 tydzień w temperaturze
4°C. W temperaturze pokojowej po 3 dobach następuje obniżenie aktywności
ALP o 3%.
Uwagi; ograniczenia metody – interferencje3
Aktywność ALP tkanki kostnej jest średnio o 11 % niższa niż zmierzona przy
użyciu fosfatazy alkalicznej IFFC liquid, a aktywność ALP łożyskowego o średnio
24 % wyższa. Następujące substancje nie mają żadnego wpływu na uzyskiwane wyniki (kryterium: odzysk ± 10% wartości początkowej) w przebadanym
zakresie stężeń: hematokryt do 55 %, bilirubina do 12 mg/dl (205 µmol/l),
hemoliza do 1%, cholesterol do 300 mg/dl (7,8 mmol/l) oraz trójglicerydy do
1000 mg/dl (11,4 mmol/l).
Próbki od pacjentów zawierające inny skład izoenzymu niż zwykle mogą dawać
wyniki odbiegające od wyników uzyskanych za pomocą metody referencyjnej
IFCC.
Kalibracja
W przypadku testu Reflotron Alkal. Phosphatase charakterystyka funkcji służącej
do przeliczania natężenia światła odbitego na aktywność, określana jest oddzielnie
dla każdej serii produkcyjnej przy użyciu testu ALP IFCC liquid (Roche Diagnostics) w temperaturze 37°C. Dane są automatycznie programowane w aparacie
podczas testów.
Procedura pomiaru
Niezbędne materiały dodatkowe (niezawarte w opakowaniu): aparat Reflotron,
pipeta Reflotron Pipette z końcówkami lub pipeta kapilarna, paski kontrolne oraz
standardowe wyposażenie laboratoryjne do pobierania krwi. Przed wykonaniem
testu należy uważnie zapoznać się z instrukcją obsługi aparatu Reflotron. Włącz
aparat. Gdy na wyświetlaczu pojawi się komunikat „READY” („GOTOWY”), wyjmij
test paskowy z pojemnika.
Pojemnik należy natychmiast zamknąć korkiem suszącym.
Rozpakuj pasek (a) uważając, aby go nie zgiąć. Unikając bąbelków powietrza,
wciągnij badaną próbkę do pipety, na przykład pipety Reflotron Pipette. Następnie, nie dotykając paska końcówką pipety (b), nanieś na środek czerwonego
obszaru (xx) kroplę próbki o objętości 30 µl (patrz ilustracja). Otwórz pokrywę
lub klapkę, w ciągu 15 sekund umieść test paskowy w prowadnicy i wsuń go
poziomo na miejsce (c). Zamknij pokrywę lub klapkę. Na wyświetlaczu pojawi się
komunikat ALP potwierdzający, że aparat prawidłowo odczytał kod magnetyczny
testu paskowego. Na ekranie odliczana jest również liczba sekund pozostała do
wyświetlenia wyniku. Aktywność ALP obliczana jest automatycznie na podstawie odczytów oraz charakterystyki funkcji i mnożników przeliczeniowych wprowadzonych do aparatu za pomocą paska magnetycznego umieszczonego na
spodniej stronie każdego testu paskowego. Aktywność enzymu jest podawana
w U/l lub µkat/l, w zależności od ustawień aparatu. Po zakończeniu pomiaru test
paskowy należy wyjąć z aparatu Reflotron i utylizować go zgodnie z procedurą
obowiązującą w danym laboratorium.
.
(a)
(b)
(c)
Önlemler ve uyarılar
In vitro tanısal kullanım için. Laboratuvar reaktiflerini kullanırken, lütfen alışılagelmiş önlemleri alın.
Saklama ve raf ömrü
+2°C ile +30°C arasındaki sıcaklıklarda saklayın. Bu koşullar altında test çubukları, paket veya kutu üzerinde yazılı olan son kullanım tarihine kadar kullanılabilir.
Bir test çubuğunu çıkardıktan sonra, kutunun tapasını hemen takınız; aksi takdirde toz, nem vb. gibi etmenler test çubuklarının kullanılmaz hale gelmelerine
neden olabilir.
Zakresy referencyjne4
Krew, surowica, osocze
Mężczyźni 40 – 129 U/l lub 0,67 – 2,15 μkat/l (37°C, 30°C*, 25°C*).
Kobiety 35 – 104 U/l lub 0,58 – 1,74 μkat/l (37°C*, 30°C* 25°C*).
*Reflotron z powodów technicznych wskazuje te same wartości przy 37°C, 30°C i 25°C.
Każde laboratorium powinno sprawdzić, czy podane zakresy referencyjne są
właściwe dla badanej grupy pacjentów, a w razie konieczności wyznaczyć własne
zakresy referencyjne. Dla celów diagnostycznych całkowitą aktywność fosfatazy alkalicznej należy zawsze interpretować z uwzględnieniem historii choroby,
badań klinicznych oraz wyników innych przeprowadzonych badań i testów.
Zakres pomiarowy i rozcieńczanie próbek
Zakres pomiarowy wynosi 20 – do ok. 1250 U/l lub 0,33 do ok. 20,87 μkat/l.
Jeśli zmierzona aktywność ALP przekracza zakres pomiarowy testu Reflotron
Alkaline Phosphatase (co wskazuje na wyświetlaczu gwiazdka obok wyniku lub
komunikat DILUTE ALP), próbkę surowicy lub osocza można rozcieńczyć w
stosunku 1 + 1 surowicą lub osoczem o znanej aktywność ALP A0.
Rzeczywistą aktywność ALP, A, można obliczyć na podstawie zmierzonej aktywności Adil, stosując następujący wzór: A = 2 Adil – A0.
Kontrola jakości
Do kontroli jakości stosuje się paski kontrolne Reflotron Precinorm U lub Reflotron Check, stosownie do indywidualnych wymogów danego laboratorium lub
regulacji prawnych. Wyniki muszą się mieścić w podanych granicach. Każde
laboratorium musi określić środki zaradcze stosowane w sytuacji, gdy wyniki
nie mieszczą się w dopuszczonym zakresie.
Charakterystyka testu3
Dane dotyczące testu Reflotron Alkaline Phosphatase zostały ustalone w serii
pomiarów. Większość pomiarów mieściła się w podanych zakresach. Powtarzalność (odchylenia w serii): CV (współczynnik zmienności) 2,2 % w zakresie
normalnym, 2,9 % w zakresie patologicznym; materiał próbki: heparynizowane
osocze.
Odtwarzalność (odchylenia z dnia na dzień): CV 5,0 % w zakresie normalnym,
5,6 % w; zakresie patologicznym; materiał próbki: surowica kontrolna.
Dokładność (porównanie metod; U/l; równanie regresji, n próbek, współczynnik korelacji r): y = 0,966 x – 2,635 lub y = 1,050 x + 0,725; (n = 100 lub 92;
r = 0,996 lub 0,993). Materiał próbki: heparynizowane osocze; przewaga próbek
pochodzących od pacjentów z chorobami wątroby. Metoda porównawcza x: ALP
IFCC liquid, Roche Diagnostics.
Objaśnienia symboli i spis literatury znajdują się na końcu niniejszej ulotki.
Ostatnia aktualizacja ulotki: 2011-12
TR
Kullanım Alanı
Reflotron kullanarak kan, serum veya plazmadaki
toplam alkalin fosfataz aktivitesi miktarının belirlenmesine yönelik test.
Sunum Şekli
30’lik test çubukları paketi, 5() 1 1622773
Klinik özellikler
Alkalin fosfataz (ALP), karaciğer, kemik, bağırsak ve plasenta gibi çeşitli insan
dokularında bulunur. Serumda toplam ALP aktivitesinin yüksek olmasının en sık
rastlanan nedenleri, karaciğer ve safra kesesi hastalıklarıdır. ALP aktivitesi, GOT,
GPT ve γ-GT gibi diğer enzimlerle birlikte ölçüldüğünde, kolestatik bozuklukların
ayıncı tanısının yapılmasını sağlar. Çeşitli kemik hastalığı türlerinde ve örneğin
Paget hastalığı, osteomalasi, raşitizm, hiperparatiroidizm gibi kemik metabolizması bozukluklarında yüksek ALP düzeylerine rastlanmıştır. Kötü huylu bozukluklardaki yüksek ALP düzeyleri gerek tümör fosfatazların varlığından gerekse
karaciğer ve kemikteki ALP düzeyinin yükselmesinden kaynaklanabilir. Çocukluk
ve gençlik dönemlerinin iskelet büyümesi evrelerinde görülen yüksek osteoblast
aktivitesi, o dönemlerde yüksek olan, ama erginlik döneminin ardından tekrar
düşen ALP düzeyleriyle bağlantılıdır. Gebeliğin son üç ayında görülen yüksek
alkalin fosfataz düzeylerine, özellikle plasenta izoenzimi neden olur.
Test prensibi 1
Numune, test çubuğuna uygulanmasının ardından, kan sözkonusuysa eritrositlerin plazmadan ayrılması ile tepkime bölgesine akar. ALP, o-krezolftalein fosfatı
suyla ayrıştırarak o-krezolftaleine dönüştürür ve fosfat grubunu, alıcı molekül
metilglukamin’e aktarır. Alkalin koşullar altında herbir zaman birimi için oluşturulan renkli suyla ayrıştırma (hidroliz) ürünü o-krezolftalein, alkalin fosfataz
aktivitesi ile doğru orantılıdır.
ALP
o-krezolftalein + metilglukamin fosfat õõú o-krezolftalein fosfat
+ metilglukamin
Boya maddesi oluşumu ALP’nin enzim aktivitesinin bir ölçütü olarak 37°C’de
kinetik olarak ölçülür. Sonuç yaklaşık 135 saniye sonra ekranda U/L veya µkat/L
cinsinden belirir.
Testteki bileşenler:
o-krezolftalein fosfat ≥ 394 µg; N-metil-D-glukamin ≥ 1005 µg; magnezyum
≥ 0,56 µg.
Numune alma ve işlem 2,3
Kapiler kan; standart örnek alma tüplerine alınmış tam kan ve bundan hazırlanan
serum; heparinli kan veya heparinli plazma. Taze kapiler kanı veya toplardamar kanını, alındıktan hemen sonra kullanın. Antikoagülan olarak yalnız
heparin (tercihen lityum heparinat) kullanılabilir. Başka hiçbir tür antikoagülan
veya katkı maddesi kullanmayın. Kapalı tüpler içinde tutulan heparinli kan 8
saat içinde kullanılmalıdır. Hücresel bileşenlerin çökelmesinden sonra, numunenin çalkalanmamasına özen gösterilmişse, üstte yüzen plazma kullanılabilir.
Tek kullanımlık heparinli tüpler veya kılcal pipetler kullanıyorsanız, lütfen üretici
firmanın talimatlarına uyun. ALP, heparinli plazma içinde oda sıcaklığında en az
1 gün boyunca stabil halde kalır.
ALP, serum içinde 4°C’de en az 1 hafta boyunca stabil halde kalır. Oda sıcaklığında tutulduğunda ise, 3 gün içinde aktivitesinin % 3’ünü yitirir.
Metodun kısıtlamaları ve etkileşimleriyle ilgili notlar3
Kemik ALP aktivitesi Alkalin Fosfataz IFCC sıvısıyla ölçülenden ortalama olarak
%11 daha düşük, plasental ALP aktivitesi ise ortalama olarak %24 daha yüksektir.
Aşağıdaki maddelerin, test edilen konsantrasyon aralıklarında sonuçlar üzerinde
herhangi bir etkisi yoktur (kriter: okunan değer ± referans değerinin % 10’u):
% 55’e kadar hematokrit, 12 mg/dlye (205 µmol/l) kadar bilirubin, % 1’e kadar
hemoliz, 300 mg/dl’e (7,8 mmol/l) kadar kolesterol ve 1000 mg/dlye (11,4 mmol/l)
kadar trigliseridler.
İzoenzim bileşimi olağandışı olan hasta numuneleri IFCC referans yöntemine
kıyasla sapma gösteren sonuçlar verebilir.
Performans karakteristikleri 3
Reflotron Alkaline Phosphatase verileri bir dizi test ile saptanmıştır. Testlerde
elde edilen verilerin büyük bir bölümü verilen aralıklar içinde yer almıştır.
Tekrarlanabilirlik (test dizileri dahilindeki sonuçların kesin olmama durumu): VK
(varyasyon katsayısı) normal aralıkta %2,2, patolojik aralıkta %2,9; numune:
heparinli plazma.
Çoğaltılabilirlik (test dizilerinin sonuçlarının günden güne değişen kesin olmama
durumu): VK (varyasyon katsayısı) normal aralıkta %5,0, patolojik aralıkta %5,6;
numune: kontrol serumu.
Doğruluk (metotların karşılaştırılması, U/L; regresyon denklemleri, n örnek,
korelasyon katsayısı r): sırasıyla y = 0.966 x – 2.635 ve y = 1.050 x + 0.725
(n = 100 ve 92; r = 0.996 ve 0.993). Numune heparinli plazma; numuneler
genelde karaciğer hastalığı olanlardan alınmıştır. Referans metodu x: ALP IFCC
sıvısı, Roche Diagnostics).
Kullanılan simgelerin açıklaması ve referans listesi için lütfen bu ekin sonuna
bakın.
Son güncelleme: 2011-12
Bibliografía / Referências / Βιβλιογραφικά / Literatura / Referanslar
1
E. Haenseler et al. A new Assay for the Reflotron System: Alkaline Phosphatase Activity. Poster presented at the Medlab 97, 12th IFCC European
Congress of Clinical Chemistry, 1997, Basel, Switzerland.
2
Heins W et al. Eur J Clin Chem Biochem 1995; 33: 231
3
Daten der Evaluierung,; Roche Diagnostics GmbH
4
Abicht K et al. Multicenter evaluation of new liquid GGT and ALP reagents with
new reference standardization and determination of 37°C reference intervals.
Poster Euromedlab 2001, Prague.
Kalibrasyon
Yansıtma gücü değerlerini aktivite değerlerine dönüştürmeye yönelik Reflotron
Alkal. Phosphatase fonksiyon eğrisi, her ürün partisi için 37°C’de ALP IFCC test
sıvısı (Roche Diagnostics) kullanılarak tanımlanır. Veriler test sırasında otomatik
olarak Reflotron’a programlanır.
Test prosedürü
Gereken ek malzemeler (cihazla birlikte verilmemiştir): Reflotron cihaz; Reflotron
Pipette ve pipet uçları veya kılcal pipet, karşılaştırma standartları, kan örneği
almaya yönelik alışılagelmiş laboratuar ekipmanları. Bir testi yapmadan önce,
lütfen Reflotron el kitabını okuyun ve cihazın kullanımına aşina olduğunuzdan
emin olun. Cihazı açın. Ekranda “READY” (HAZIR) mesajı belirdiğinde, kutudan
bir test çubuğunu çıkarın.
Kutu üzerindeki nem alıcı tapayı hemen yerine takınız
Çubuğu (a) eğmemeye dikkat ederek ambalajından çıkarın. Sözgelimi Reflotron
Pipette kullanarak, numuneyi pipet içine çekin (hava kabarcıklarının oluşmamasına dikkat ederek) ve kırmızı uygulama alanının (xx) ortasına, gereken miktarda,
yani bir damla damlatın- bunu yaparken pipetin ucunun (b) uygulama alanına
değmemesine dikkat edin. 30 µl (resme bakın). Sürgülü kapağı açarak 15 saniye
içinde test çubuğunu kılavuzun üzerine koyun ve kapak yerine oturuncaya kadar
yatay olarak kaydırın (c). Sürgülü kapağı kapatın. Cihaz ekranına, cihazın teste
özel manyetik kodu doğru okuduğunu gösteren “ALP” ibaresi gelir. Sonucun
görüntülenmesi için kalan süre, saniye olarak ekrana gelir. ALP etkinliği, her
test çubuğunun alt tarafında bulunan manyetik şerit aracılığıyla cihaza girilen
dönüştürme faktörleri ve bir fonksiyon kullanılarak alınan veri değerleri sayesinde
otomatik olarak hesaplanır. Enzim etkinliği, 25°C, 30°C ya da 37°C için, cihazın
ayarlanma şekline bağlı olarak U/l ya da µkat/l cinsinden gösterilir. Kullanılmış
test çubuğunu Reflotron’dan çıkarın ve laboratuar prosedürünüzün gerektirdiği
şekilde atın.
(a)
(b)
Fecha de caducidad / Prazo de validade / Ημερομηνία λήξης /
Użyć przed / Son kullanma tarihi
}
Código de lote / Código do lote / Αριθμός Παρτίδας /
Kod partii / Parti kodu
sanitario para diagnóstico in vitro / Dispositivo
Producto
médico para diagnóstico in vitro / In Vitro Διαγνωστικό
LOT
Ιατροτεχνολογικό προϊόν / Wyrób do diagnistyki In Vitro /
In vitro diagnostik tıbbi cihaz
l
El presente producto cumple con los requerimientos previstos
por la Directiva Europea 98/79 /CE de productos sanitarios
para el diagnóstico in vitro / Este produto preenche os
requisitos da Directiva Europeia 98/79/CE para dispositivos
médicos de diagnóstico in vitro / Το προϊόν αυτό πληροί τις απαιτήσεις της Ευρωπαϊκής Οδηγίας 98/79/ΕΚ για τα in
vitro διαγνωστικά ιατροτεχνολογικά βοηθήματα / Ten produkt
spełnia wymogi Dyrektywy Wspólnoty Europejskiej 98/79/EC
dotyczącej diagnostycznych urządzeń medycznych do
stosowania in vitro / Bu ürün, in vitro diagnostik tıbbi cihazlar
ile ilgili 98/79/ EC sayılı Avrupa Direktifinin gereklerini yerine
getirmektedir
5() Número de catálogo / Referência de catálogo / Αριθμός
καταλόγου / Numer katalogowy / Katalog numarası
Fabricante / Kαтασĸεuαστής / Producent / Üretici
0088
IVD
"
+30°C
+2°C (c)
Límite de temperatura (Conservar a) / Limites de temperatura
(Conservar a) / Περιορισμοί θερμοκρασίας (Αποθήκευση σε) /
Przestrzegać zakresu temperatury (Przechowywać w temp.) / Sıcaklık sınırlandırması (Saklama Sıcaklığı)
LOT
Referans aralıkları
Kan, serum, plazma
Erkekler 40 – 129 U/L [0.67 – 2.15 µkat/L] (37°C, 30°C*, 25°C*).
Kadýnlar 35 – 104 U/L [0.58 – 1.74 µkat/L] (37°C*, 30°C* 25°C*).
*Reflotron’un çalışma şekli nedeniyle 37°C, 30°C ve 25°C’de ayný değerler elde edilir.
Referans aralıklarının kendi hastalarına uygun olup olmadığını kontrol etmek ve
gerekirse kendi referans aralıklarını tespit etmek her laboratuvarın kendi sorumluluğundadır. Tanısal amaçlı toplam alkalin fosfataz aktivitesi daima hasta öyküsü,
klinik muayene ve yapılmış olan diğer muayenelerin ve testlerin sonuçlarıyla birlikte
değerlendirilmelidir.
Ölçme aralığı ve seyreltme talimatı
Ölçme aralığı 20 ile yaklaşık 1250 U/L arasıdır [0.33 - yaklaşık 20.87 µkat/L].
Ölçülen ALP aktivitesi Reflotron Alkaline Phosphatase ölçüm aralığının üzerindeyse (ekrandaki sonucun ya da DILUTE ALPmesajının yanındaki bir asterisk
ile gösterilir), serum ya da plazma numunesi A0 gibi bilinen bir ALP aktivitesine
sahip serum ya da plazma ile1 + 1 oranında seyreltilebilir.
Aseyr. için aşağıdaki formül kullanılır: A = 2 Aseyr. – A0
Kalite kontrol
Laboratuvarın kendi gerekliliklerini karşılamak veya yasal düzenlemelere uygunluk sağlamak açısından, kalite kontrolde Reflotron Precinorm U ya da Reflotron
Check kullanın. Sonuçlar, önerilen aralıklar içinde yer almalıdır. Her laboratuvar,
değerlerin önerilen aralık dışında yer alması durumunda uygulanacak düzeltici
önlemlerini belirlemelidir.
0088
Reflotron and Precinorm are trademarks of Roche.
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IVD
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+30°C
+2°C
05961769001(02)
R1 (black)