Vogal and Johnson Agar, Ágar Vogel Johnson, Product

ÁGAR VOGEL JOHNSON – VOGEL AND JOHNSON AGAR (7207)
Uso Previsto
O Ágar Vogel Johnson é utilizado para o isolamento de Staphylococcus.
Sumário e Explicação do Produto
Staphylococcus coagulase-positivos, principalmente Staphylococcus aureus, estão entre os
micro-organismos que causam a deterioração ou mudanças químicas em cosméticos.1 Para isolar
Staphylococcus coagulase-positivos, fermentadores de manitol, Vogel e Johnson2 modificaram o Ágar
Telurito-Glicina, desenvolvido por Zebovitz, Evans e Niven.3 A modificação incluiu o aumento de manitol e
adição de um indicador de pH. O Ágar Vogel Johnson seleciona e diferencia Staphylococcus
coagulase-positivos que fermentam manitol e reduzem Telurito.4
O Ágar Vogel Johnson (VJ) é indicado para testes padrões em cosméticos,1,5 artigos farmacêuticos6 e
suplementos nutricionais.7
Princípios do Procedimento
A Digestão Enzimática da Caseína fornece nitrogênio e minerais ao Ágar Vogel Johnson. O Extrato de
Levedura é a fonte de vitamina para estimular o crescimento bacteriano. O Manitol é o carboidrato
fermentável. Fosfato Dipotássico é o agente tamponante. Cloreto de Lítio, Glicina e Solução de Telurito de
Potássio 1% inibem o crescimento da maioria dos micro-organismos, exceto Staphylococcus. O Vermelho
de Fenol é o indicador de pH. O ágar é o agente solidificante.
Fórmula / Litro
Digestão Enzimática de Caseína ............................................... 10
Extrato de Levedura.................................................................. 5 g
Manitol .................................................................................... 10 g
Fosfato Dipotássico .................................................................. 5 g
Cloreto de Lítio .......................................................................... 5 g
Glicina ..................................................................................... 10 g
Vermelho de Fenol............................................................. 0,025 g
Ágar ........................................................................................ 15 g
pH Final: 7,2 ± 0,2 a 25°C
Suplemento # 7989
Solução de Telurito (1%) Chapman
Telurito de Potássio, 100 mg
10 mL
A fórmula pode ser ajustada e/ou suplementada conforme necessário para atender as especificações de desempenho.
Precauções
1. Somente para o uso em laboratório.
2. PREJUDICIAL. Prejudicial se ingerido, inalado ou absorvido através da pele. Irritação da pele pode ser
severa. Pode causar efeitos no sistema nervoso central.
Modo de Preparo
1. Suspenda 60 g do meio em 1 L de água purificada.
2. Aqueça, agitando frequentemente e ferva por 1 minuto para dissolver completamente o meio.
3. Autoclave a 121°C por 15 minutos.
4. Resfrie a 45 - 50°C e adicione 2 frascos (20 mL) do Suplemento Solução de Telurito (1%) Chapman
(7989) ou 20 mL da Solução estéril de Telurito de Potássio 1%. Nota: Não aqueça o meio após a adição
da Solução de Telurito.
5. Misture completamente antes de dispensar.
Especificações de Controle de Qualidade
Aparência Desidratado: O pó é homogêneo, fluxo livre e esbranquiçado a bege a bege rosado.
Aparência Preparado: O meio preparado apresenta traços a levemente turvo e laranja avermelhado.
PI 7207, Rev 4, Março 2012
Resposta Esperada de Cultivo: Resposta de cultivo do Ágar Vogel e Johnson incubado aerobiamente a 35
± 2°C e examinados para crescimento após 18 - 48 horas.
Micro-organismo
Enterococcus faecalis ATCC® 29212
Inóculo
Aproximado
(UFC)
~ 1000
Escherichia coli ATCC® 25922
Staphylococcus aureus ATCC® 25923
~ 1000
10 - 300
Staphylococcus epidermidis ATCC® 12228
~ 1000
Resultados Esperados
Resposta
Reação
Inibição parcial a
completa
Inibição
Crescimento
Inibição parcial a
completa
Colônias pretas
--Colônias pretas
com halo amarelo
Colônias pretas
Os organismos listados são os mínimos que devem ser avaliados para o teste de controle de qualidade.
Procedimento do Teste
Refira-se às referências apropriadas para o isolamento e identificação de Staphylococcus.
Resultados
Cepas de S. aureus coagulase-positivo reduzem o Telurito e formam colônias pretas no meio. Essas cepas
tipicamente fermentam o manitol e exibem halos amarelos ao redor das colônias pretas. A maioria dos
micro-organismos além de Staphylococcus coagulase-positivo é inibida durante as primeiras 24 horas de
incubação. Após 24 horas, outros organismos, especialmente Streptococcus fecal e S. epidermidis
coagulase-negativo podem crescer.
Armazenamento
Armazene o frasco contendo o meio desidratado devidamente fechado entre 2 - 30°C. Uma vez aberto e
fechado novamente, coloque o frasco em um ambiente de baixa umidade e na mesma temperatura de
armazenamento. Proteja contra a umidade e luz mantendo o frasco firmemente fechado.
Validade
Refira-se à data de validade no frasco. O meio desidratado deve ser descartado se não fluir livremente ou se
houver mudança na coloração original. A validade se aplica ao meio em sua embalagem intacta quando
armazenado como indicado.
Limitações do Procedimento
1. Algumas cepas podem apresentar um crescimento fraco ou ausência de crescimento neste meio.
2. É recomendado preparar o Ágar Vogel Johnson na noite anterior antes da inoculação.
Embalagem
Ágar Vogel Johnson
N° Código
Solução de Telurito (1%) Chapman
7207A
7207B
7207C
7989
500 g
2 kg
10 kg
10 mL
PI 7207, Rev 4, Março 2012
Referências
1.
2.
3.
4.
5.
6.
www.fda.gov/Food/ScienceResearch/LaboratoryMethods/BacteriologicalAnalyticalmanualBAM/default.htm.
Vogel, T. A., and M. Johnson. 1960. A modification of the Tellurite-Glycine Medium for use in the identification of Staphylococcus
aureus. Public Health Lab. 18:131.
Zebovitz, E., J. B. Evans, and C. F. Niven, Jr. 1955. Tellurite-Glycine Agar; a selective plating medium for the quantitative
detection of coagulase-positive staphylococci. J. Bacteriol. 70:686.
MacFaddin, J. F. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-maintenance of medical bacteria, vol.1, p. 846-849. Williams &
Wilkins, Baltimore, MD.
Curry, A. S., J. G. Graf, and G. N. McEwen, Jr. (eds.). 1993. CTFA microbiology guidelines. The Cosmetic, Toiletry, and
Fragrance Association, Washington, D.C.
United States Pharmacopeial Convention. 1995. The United States pharmacopeia, 23rd ed. The United States Pharmacopeial
Convention, Rockville, MD.
Informação Técnica
Contate a Neogen do Brasil para Serviços Técnicos ou questões envolvendo a preparação ou desempenho do meio de cultura
desidratado no telefone 19.3935-3727.
Contate a Acumedia Manufacturers, Inc. para Serviços Técnicos ou questões envolvendo a preparação ou desempenho do meio de
cultura desidratado no telefone +1 (517)372-9200 ou fax +1 (517)372-2006.
PI 7207, Rev 4, Março 2012