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Roteiro de aula prática 1º ano Prática 10: Cloroplastos e Pigmentos Pergunta: As plantas possuem só um tipo de pigmento? Onde estes se localizam? Como é a estrutura do cloroplasto? Objetivo: Observar cloroplastos em células vivas. Mostrar a presença de pigmentos foliares. Compreender processos vistos no cotidiano. I) Introdução O cloroplasto é uma organela presente nas células das plantas e em outros organismos fotossintetizantes, como as algas e alguns protistas. Possui clorofila, pigmento responsável pela sua cor verde. Sua principal função está relacionada à fotossíntese. Os cloroplastos distinguem-se bem das organelas restantes da célula, pela cor, pela sua estrutura, geralmente laminar, possuem RNA, DNA e ribossomos, podendo assim sintetizar proteínas e multiplicar-se independentemente. Figura 1 - Estrutura do cloroplasto Figura 2 – Grânulo de amido no cloroplasto Os pigmentos, além de conferirem a coloração da folha, participam da fotossíntese, capturando a energia luminosa. A maioria está localizada na membrana do tilacóide. Além da clorofila, existem outros pigmentos que têm uma ação indireta, que são os carotenóides. Figura 4- Caretonóides Figura 3 - Clorofila a II) Materiais Prática 1: Extrato de pigmentos foliares, papel filtro 20 x 4 cm, pipeta de Pasteur, tetracloreto de carbono (CCl4), placa de Petri, cuba de vidro. Prática 2: Microscópio, lâmina, lamínula, Elodea sp. III) Procedimentos Prática 1: Separação de pigmentos por cromatografia em papel 1- Com uma pipeta de Pasteur, passe 5 a 10 camadas do extrato foliar em uma das extremidades do papel filtro, as quais devem ser finas e concentradas, devendo ventilar levemente o papel após a aplicação de cada camada; 2- Coloque 5 a 10 ml de CCl4 na cuba; 3- Fixe a tira de papel filtro numa placa de Petri invertida e introduza a fita no interior da cuba, de modo que sua extremidade encoste no solvente e não molhe a origem; 4- Após 1 a 2h observe e identifique os pigmentos. Comentários: Manuseie minimamente o papel filtro, pois a gordura da mão interfere no resultado. Tenha o menor contato possível com CCl4 e evite aspirá-lo. Deve-se explicar que o tetracloreto é solvente apolar e então arrastará os pigmentos apolares ao longo do papel-filtro. Os carotenóides são mais apolares que as clorofilas, assim, estes que se deslocarão mais. Prática 2 – Observação de cloroplastos em microscopia de luz. 1- Coloque uma folha de elódea sobre a lâmina e cubra com a lamínula; 2- Realize todas as etapas de focalização; 3- Observe os cloroplastos e o movimento de ciclose. Prática 2: Observação de cloroplastos em microscopia de luz. 1 - Coloque uma folha de Elódea sp. sobre a lâmina e cubra com a lamínula; 2 - Realize todas as etapas de focalização; 3 - Observe os cloroplastos e o movimento de ciclose. Comentários: Explicar o movimento de ciclose e destacar que em células vegetais, pode estar associado ao deslocamento dos cloroplastos de forma a posicioná-los em melhor local de captação luminosa. IV) Para pensar: 1- Por que as plantas são verdes? O que confere a cor verde a maioria dos vegetais são pigmentos presentes no cloroplasto denominados clorofilas. Isto acontece porque estes pigmentos absorvem luz principalmente nos comprimentos de onda azul, violeta, vermelho e refletem a luz verde. 2- O que ocorre para que as folhas se tornem amareladas/avermelhadas no outono? As chamadas "cores de outono" (pelo menos em clima temperado) são resultado da mistura de três pigmentos: clorofila (verde), carotenóides (amarelo-laranja) e antocianina (vermelho-violeta). Tanto a clorofila quanto os carotenóides são produzidos ao longo do ano todo, mas devido a grande produção do principal pigmento fotossintético, as cores amarelo-alaranjadas são mascaradas. Já os pigmentos de cores avermelhadas (antocianina) são produzidos especificamente no outono, logo antes da queda das folhas. E durante o processo de senescência do outono, a clorofila é degradada, fazendo com que as folhas adquiram coloração amarelada/avermelhada. 3- O que ocorre no amadurecimento de frutos? Em várias frutas, o amadurecimento é acompanhado de um aumento na carotenogênese, a clorofila é degradada e os cloroplastos são convertidos em cromoplastos. V) Referências -Figura 1 - Estrutura do cloroplasto Disponível em: www.usuarios.multimania.es/citologia/ Acessado em: fevereiro de 2009. -Figura 2 – Grânulo de amido no cloroplasto Disponível em: www.sobiologia.com.br/ Acessado em: fevereiro de 2009. -Figura 3 – Clorofila a Disponível em: http://www.prof2000.pt/ Acessado em: fevereiro de 2009. -Figura 4 – Carotenóides Disponível em: http://www.infoescola.com/ Acessado em: fevereiro de 2009.