Procedimento para Submissão de Amostras - Cemib

CENTRO MULTIDISCIPLINAR PARA INVESTIGAÇÃO BIOLÓGICA NA ÁREA DE
CIÊNCIA DE ANIMAIS DE LABORATÓRIO
LABORATÓRIO DE CONTROLE DE QUALIDADE ANIMAL
CONTROLE SANITÁRIO
CEMIB/UNICAMP
PROCEDIMENTOS PARA ENVIO DE AMOSTRAS BIOLÓGICAS (SORO, FEZES E TECIDOS)
1) Envio de amostras biológicas
1.1)
Amostras de Soro ou Plasma
- As amostras de soro devem ser encaminhadas em caixas térmicas em gelo seco e
congeladas.
- As amostras de plasma ou soro devem ser enviadas de forma “pura” ou diluídas
1:5 em solução salina tamponada com fosfatos (PBS 0,01M, pH: 7,2) adicionandose 1 parte do soro ou plasma com 4 partes da solução tampão) com sua devida
identificação em tubos tipo Eppendorf ou em frascos ampolas de congelamento
(vials) bem vedadas para evitar vazamentos e perda do material.
- Encaminhar a planilha com os dados referentes às amostras [espécie, linhagem,
sexo, idade, condições de criação (sistema de barreiras sanitárias, racks ou estantes
ventilados, isoladores, gaiolas abertas) e idade ou data de nascimento.
- Recomenda-se não inativar o soro ou plasma pelo calor, nem enviar amostras
com hemólise, pois podem interferir nos resultados dos testes sorológicos, assim
como evitar encaminhar misturas (pools) de amostras de soro ou plasma devido a
resultados falso-negativos que podem ocorrer devido à diluição de amostras com
títulos de anticorpos baixos.
1.2) Amostras de Fezes
- Amostras de “pellets” fecais para realização de testes moleculares (PCR e RTPCR) devem ser de emissão recente e coletada individualmente de forma asséptica,
acondicionados em tubos tipo Eppendorf ou em ampolas de congelamento (vials) e
mantidos a temperatura ambiente ou refrigerados se forem enviados de forma
rápida para o laboratório. No caso da não possibilidade do envio imediato,
recomenda-se o congelamento e o envio do mesmo congelado à temperaturas ≤ 20 ºC.
- A coleta de 4 a 10 “pellets” fecais é adequada para a realização dos testes de
diagnóstico moleculares. Para animais de mesma linhagem, mantidos no mesmo
local e de mesmo padrão sanitário, pode ser feito “pool” de aproximadamente 10
amostras de “pellets” fecais ou mais;
- “Pellets” de fezes “frescos” coletados diretamente dos animais ou da própria
maravalha são recomendados;
- Para a realização de testes parasitológicos para pesquisa de endoparasitos e de
testes microbiológicos para pesquisa de bactérias entéricas patogênicas
recomenda-se o envio de “pellets” de fezes ou de conteúdo intestinal/material
fecal, recentemente coletado diretamente dos intestinos (duodeno, ceco, reto) e
mantidos sob-refrigeração a 4ºC. Não congelar as amostras. Enviar as amostras
refrigeradas para o laboratório imediatamente após a coleta ou no prazo máximo
de até 24 horas por meio de entrega rápida de encomendas (tipo Sedex 10).
1.3) Amostras de órgãos e tecidos
- Amostras de raspados de pele e de pelos coletadas para pesquisa de
ectoparasitos devem ser coletados de forma asséptica e acondicionados em
recipientes estéreis (tubos cônicos com tampa de rosca, tubos tipo Eppendorf ou
ampolas de congelamento), mantidos preferencialmente à temperatura ambiente
e enviados de forma rápida para o laboratório imediatamente após a coleta.
- As amostras devem ser coletadas de forma asséptica para evitar possível
contaminação e acondicionadas individualmente. Mantê-las á temperatura de
-20oC/freezer até o momento do transporte.
- Fragmentos de tecidos ou órgãos como fígado, baço, linfonodos mesentéricos,
pulmão e traquéia devem ser coletados de forma asséptica com material cirúrgico
estéril, acondicionados em recipientes estéreis (tubos cônicos com tampa de rosca,
tubos tipo Eppendorf ou ampolas de congelamento) e enviados de forma rápida
refrigerados á 4ºC imediatamente após a sua coleta, ou armazenados a
temperaturas ≤ - 20ºC e posteriormente enviados para o laboratório congelados
nas mesma condições de temperaturas.
2.4. Swab anal feito com fita gomada transparente (método de Grahan
modificado) para pesquisa de oxiurídeos Syphacia spp devem ser fixados
distendidos sobre a superfície de lâminas de vidro limpas utilizadas para
microscopia e devidamente identificadas.