desenvolvimento de um diluente a base de extrato bruto de aloe

Área:
CV ( X )
CHSA ( )
ECET ( )
DESENVOLVIMENTO DE UM DILUENTE A BASE DE EXTRATO BRUTO DE
ALOE VERA PARA ESPERMATOZOIDES EPIDIDIMÁRIOS DE BOVINOS DE
CORTE
Claudevan da Rocha Fontes (ITV/UFPI/CPCE),Janaina de Fatima Saraiva Cardoso
(Orientadora, depto de medicina veterinária – UFPI-CPCE), Ney Rômulo de Oliveira Paula
(Co-orientador, depto de medicina veterinária – UFPI-CPCE), Homero Batista ada Rocha
(Colaborador, Graduando em Medicina Veterinária UFPI-CPCE)
Introdução
De acordo com o censo (IBGE, 2010), o Brasil possui um rebanho bovino com cerca de
209.541.109 cabeças. Deste total a região nordeste conta com um efetivo de 28.762.119 cabeças.
Neste contexto, o estado do Piauí se encontra na décima nona posição com aproximadamente
1.679.957.
Para preservar a genética dos animais domésticos e futuras gerações de animais selvagens,
faz-se necessário manter os animais vivos ou manter suas células germinativas, espermatozoides e
oócitos criopreservados (KIKUCHI et al., 1999).
A colheita de espermatozoides epididimários pode ser a última chance para assegurar a
preservação do material genético após lesão ou morte do reprodutor. Estudos têm demonstrado que
espermatozoides epididimários podem ser usados na inseminação artificial, fertilização in vitro e
injeção intracitoplasmática de espermatozoides com resultados satisfatórios (JAMES et al., 2002).
Nesse contexto os objetivos desse estudo foi avaliar a toxicidade do extrato bruto de Aloe vera sobre
espermatozoides epididimários bovinos in vitro e testar a eficiência in vitro do extrato bruto de Aloe
vera para estocagem de espermatozoides epididimários bovinos na forma líquida.
Metodologia
Para obtenção do extrato bruto da planta Aloe vera foi realizada a retirada da camada externa
do catafilo, posteriormente, a extração do parênquima da folha, com aspecto de gel incolor. Foi então
filtrado e adicionado em um recipiente de vidro para divisão dos volumes a serem adicionados às
soluções específicas.
Foram coletados 15 pares (n=15) de testículos de bovinos de corte oriundos de abatedouros
da cidade de Bom Jesus-PI. As peças foram higienizadas com álcool 70%, os espermatozoides foram
recuperados da cauda do epidídimo por incisão e lavagem com solução fisiologica em tubos de 15
mL.
O extrato bruto foi diluído em solução salina fisiológica nas concentrações de 5, 10, 15 e 20%.
O sêmen foi diluído inicialmente à solução salina fisiológica. Neste teste, foi realizada a avaliação dos
parâmetros de volume, motilidade, vigor, concentração e morfologia. Nesta etapa foram utilizados 15
pares (n=15) de testículos de bovinos.
Analise estatistica
Área:
CV ( X )
CHSA ( )
ECET ( )
Os resultados foram analisados quanto a distribuição normal e submetidos ao teste T student a 5%
de significancia.
Resultados e Discussão
Os resultados estão expressos nas tabelas abaixo:
Tabela 1. Efeito da toxicidade de diferentes concentrações do extrato bruto de Aloe vera, sobre a motilidade espermatica,
durante a incubação a 37ºC.
Tempo
5min
Controle
40,000 ± 23,299ª
5%
19,333±16,676ᵇ
10%
18,667±16,847ᵇ
15%
10,667±11,629ᵇ
20%
3,667 ± 5,815ᶜ
10min
15min
38,000 ± 23,964ª
34,000 ± 25,014ª
18,000 ± 17,403ᵇ
15,000 ± 18,028ᵇ
17,333 ± 17,512ᵇ
13,333 ± 16,762ᵇ
9,333 ± 11,629ᵇ
7,333 ± 12,228ᵇ
1,667 ± 3,619ᶜ
0,667 ± 2,582ᶜ
30min
60min
27,333 ± 20,166ª
18,667 ± 15,055ª
8,333 ± 12,199ᵇ
2,667 ± 5,936ᵇ
7,333 ± 12,228ᵇ
2,667 ± 5,936ᵇ
2,333 ± 5,627ᵇᶜ
1,000 ± 2,803ᵇ
0,000 ± 0,000ᶜ
0,000 ± 0,000ᶜ
120min
8,667 ± 8,338ª
0,000 ± 0,000ᵇ
0,000 ± 0,000ᵇ
0,000 ± 0,000ᵇ
0,000 ± 0,000ᶜ
ᵃᵇᶜ Letras diferentes na mesma linha apresentaram diferença estatistíca (p≤0,05).
Tabela 2. Efeito da toxicidade de diferentes concentrações do extrato bruto de Aloe vera, sobre o vigor espermático, durante a
incubação a 37ºC.
Tempo
Controle
5%
10%
15%
20%
5min
1,933± 1,100ª
1,000± 0,756ᵇ
1,000± 0,756ᵇ
0,733± 0,594ᵇ
0,400± 0,507ᶜ
10min
1,867± 1,125ª
0,933± 0,206ᵇ
0,933± 0,206ᵇ
0,667± 0,617ᵇ
0,200± 0,414ᶜ
15min
1,600± 1,242ª
0,867± 0,834ªᵇ
0,733± 0,704ᵇ
0,467± 0,640ᵇ
0,067± 0,258ᶜ
30min
1,200± 0,941ª
0,533± 0,640ᵇ
0,467± 0,640ᵇ
0,200± 0,414ᵇᶜ
0,000± 0,000ᶜ
60min
0,933± 0,594ª
0,200± 0,414ᵇ
0,200± 0,414ᵇ
0,133± 0,352ᵇ
0,000± 0,000ᵇ
120min
0,667± 0,488ª
0,000±0,000ᵇ
0,000±0,000ᵇ
0,000±0,000ᵇ
0,000±0,000ᵇ
ᵃᵇᶜ Letras diferentes na mesma linha apresentaram diferença estatistíca (p≤0,05).
Tabela 3. Efeito da toxicidade de diferentes concentrações do extrato bruto de Aloe vera, sobre morfologia espermática,
durante a incubação a 37°C.
Tempo
Controle
5%
10%
15%
20%
5min
186,200±6,721ª
179,667±7,979ᵇ
179,667±7,345ᵇ
177,067±6,431ᵇ
174,733±5,970ᵇ
10min
185,333±6,894ª
179,400±7,109ᵇ
176,867±8,202ᵇᶜ
175,600±6,653ᵇᶜ
172,800±5,254ᶜ
15min
183,267±7,750ª
176,467±6,885ᵇ
176,267±7,226ᵇ
173,267±5,561ᵇᶜ
171,467±4,764ᶜ
30min
181,133±7,220ª
170,933±5,713ᵇ
172,267±6,330ᵇ
169,733±5,522ᵇ
168,133±6,512ᵇ
60min
178,000±6,845ª
168,467±5,718ᵇ
168,200±6,293ᵇ
166,933±5,775ᵇ
165,133±6,289ᵇ
120min
173,933±6,892ª
163,867±5,167ᵇ
162,533±3,777ᵇᶜ
161,667±4,577ᶜ
159,400±4,687ᶜ
ᵃᵇᶜ Letras diferentes na mesma linha apresentaram diferença estatistíca (p≤0,05).
Como o processo de formação e liberação dos espermatozóides ocorre de forma cíclica,
provavelmente nas colheitas foram obtidas populações de espermatozoides em vários estágios de
maturação (BARTH e OKO, 1989), fato que poderia explicar a baixa motilidade e vigor dos
espermatozoides epididimários.
Área:
CV ( X )
CHSA ( )
ECET ( )
Segundo SALOMON e MAXWELL (2000), quando há uma concentração elevada do
crioprotetor pode causar danos osmóticos e tóxicos aos espermatozoides. O que corrobora com
resultados obtidos nesse estudo.
A deficiência de trabalhos utilizando a Aloe vera como componente e aditivo do diluidor
seminal dificultou a comparação destes resultados com a literatura. Sendo assim tornam-se
necessárias novas pesquisas envolvendo a Aloe vera, para que possa enfatizá-lo como substância
adequada para a manutenção da sobrevivência e da qualidade espermática.
Conclusão
O uso do extrato bruto de Aloe vera em diferentes concentrações (5, 10, 15, 20%), apresenta
tóxidade aos espermatozoides epididimários de bovinos de corte.
Apoio: UFPI, grupo de pesquisa em sanidade e reprodução animal e Laboratório de reprodução
animal do campus CPCE.
Referências Bibliográficas
BARTH, A.D.; OKO, R.J. Abnormal morphology of bovine spermatozoa. Ames:
Iowa State University Press, p.285, 1989.
INSTITUTO BRASILEIRO DE GEOGRAFIA E ESTATISTICA- IBGE. Produção da Pecuária
Municipal, v.38, 2010.
JAMES, A.N.; GREEN, H.; HOFFMAN, S.; LANDRY, A.M.; PACCAMONTI, D.;
GODKE, R.A. Preservation of equine sperm stored in the epididymis at 4 ºC for 24,
48, 72 and 96 hours. Theriogenology, v.58, p.401-404, 2002.
KIKUCHI, K.; KASHIWAZAKI, N.; NAGAI, T.; NOGUCHI, J.; SHIMADA, A.;TAKAHASHI, R.;
HIRABASHI, M.; SHINO, M.; UEDA, M.; KANEKO, H.Reproduction in pigs using frozen-thawed
spermatozoa from epididymis stored at 4ºC. Journal of Reproduction, v.45, p.345-349, 1999.
SALAMON, S., MAXWELL, W. M. C. Storage of ram semen. Animal Reproduction Science 2000;
62:77-111.
Palavras chave: Aloe vera.espermatozoide.diluente