pcr gama para clonalidade t
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pcr gama para clonalidade t
Created by Simpo PDF Creator Pro (unregistered version) http://www.simpopdf.com PCR GAMA PARA CLONALIDADE T Método: Reação em cadeia da polimerase (PCR) Procedimentos: 1) Separação de células mononucleares por gradiente de ficoll; 2) Extração de DNA; 3) Avaliação quali-quantitativa; 4) PCR; 5) Eletroforese em gel de poliacrilamida Alvos moleculares: Rearranjos do gene do receptor de células T Gamma (Clonalidade T, PCR gamma) - PCR DNA MULTIPLEX seguido de análise de HETERODUPLEX Prazo de liberação de resultados: 5 dias Material Biológico: 3-5 ml de MO anticoagulada com EDTA 5-10 ml de sangue periférico em EDTA (tampa roxa) Líquido pleural /ascítico também podem ser enviados Bloco de parafina (Tecido fixado e impregnado em parafina, FIP) Biopsia de material suspeito em meio RPMI1640 suplementado com antibióticos Líquido pleural /ascítico também podem ser enviados Armazenamento/Transporte: amostras devem ser encaminhadas a temperatura ambiente. A amostra não pode entrar em contato com gelo nem ser submetida a agitação mecânica (Link Envio de amostras MO-SP). Requerimentos específicos: - Todo material encaminhado para análise, deverá chegar ao Laboratório Progenética em até 36 h após sua coleta. Alertamos para que seja observado o horário da coleta e o horário de envio, de forma que esse prazo não seja ultrapassado. - A amostra FIP (bloco de parafina) deverá ser acompanhada de uma cópia do laudo histopatológico - A amostra FIP enviada deve conter áreas suficientes e viáveis de tumor. - O fixador usado na amostra FIP deve ser formol tamponado, com tempo de fixação não maior que 24 horas. - Preencher os formulários de encaminhamento específicos (Link Formulário específico) - Enviar o sangue periférico caso o mesmo esteja com índice igual ou maior a 40% de blastos ou células anormais nas leucemias agudas e linfoproliferações suspeitas, respectivamente. Condições não aceitáveis: - Uso de anticoagulante incorreto. - Material congelado, coagulado ou severamente hemolisado. - Amostras recebidas em frascos não estéreis ou com vazamento. - Amostra FIP processada com fixadores metálicos (B4 ou B5) ou submetida a descalcificação ácida (biopsia de medula óssea) - Biopsia a fresco fixada em formol ou outros fixadores - Material sem identificação Interpretação de resultados: Teste: PCR gamma: Rearranjos do gene do receptor de células T Gamma por PCR Positivo: Uma linfoproliferação celular T monoclonal é detectada. Negativo: Uma linfoproliferação celular T monoclonal não é detectada. Inconclusivo: Material insuficiente para teste (Link) – Material não amplificável Nota: Enquanto um resultado positivo indica a presença de uma linfoproliferação monoclonal T na amostra estudada, um resultado negativo não exclui completamente a presença de monoclonalidade. Created by Simpo PDF Creator Pro (unregistered version) http://www.simpopdf.com Aplicações principais - Linfoproliferações T clonais vs. hiperplasias reativas - Definição de linhagem em leucemias agudas indiferenciadas (linfóide T vs. B ou mielóide) Sinonímia: Rearranjo do gene do TCR Gamma/ TCRg/ PCR-T / LNH-T.
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