azul de cresil brilhante versao 01

AZUL DE CRESIL BRILHANTE
1. FINALIDADE
Solução corante para contagem de reticulócitos.
2. INTRODUÇÃO
Os eritrócitos são células que após passarem pelo processo de maturação,
perdem o núcleo. Algumas células conservam vestígios de material
nuclear, em especial o RNA, são os chamados reticulócitos.
3. IMPORTÂNCIA CLÍNICA
A presença de reticulócitos no sangue periférico é um sinal inequívoco de
produção de células vermelhas. Assim a contagem de reticulócitos é usada
para se avaliar a capacidade da medula óssea em produzir novas células
vermelhas, em casos de anemias hemolíticas e hemorragias.
4. AMOSTRA
- Preparo do paciente
Orientar o paciente a manter jejum prévio de 8-12h anteriores a coleta.
- Tipo de amostra
A amostra usada consiste sangue total coletado com EDTA ou com citrato
de sódio, isento de hemólise.
- Armazenamento e estabilidade da amostra
A amostra deve ser processada o mais rapidamente possível após
coletada, do contrário, manter em geladeira (2-8 oC) por até 24h.
- Critérios de rejeição
Rejeitar amostras que se apresentem hemolisadas ,coaguladas ou ainda
com micro-coágulos.
- Precauções e cuidados especiais
Todas as amostras devem ser manipuladas com extrema cautela, pois
podem veicular diversas doenças infecto-contagiosas (hepatite, SIDA
etc.). Seu descarte deve ser feito preferencialmente após sua
autoclavação devendo-se evitar seu descarte diretamente no meio
ambiente. Igual cuidado se recomenda no descarte de outros materiais
como ponteiras plásticas, agulhas e seringas.
5. INFORMAÇÕES GERAIS SOBRE O PRODUTO
a- Princípio
O sangue total é diluído em azul de cresil brilhante, e a diluição é usada
para fazer esfregaços hematológicos aonde serão contados os
reticulócitos.
C- Reagentes
- Solução a 1% de azul cresil brilhante em solução fisiológica (NaCl a
0,85%) com 0,4% de citrato de sódio .
c- Armazenamento e estabilidade
O material deve ser mantido em temperatura ambiente, em local fresco,
seco e isento da incidência direta de luz solar, permanecendo assim estável
até a data de validade expressa em rótulo, desde que isento de
contaminação química ou biológica.
e- Precauções e cuidados especiais
- Manter os frascos semrpe bem fechados;
- O reagente destina-se ao uso diagnóstico in vitro, não devendo ser
ingerido ou entrar em contato com a pele, olhos e mucosas.
c- Homogeneizar e preparar um esfregaço hematológico com a diluição;
d- Deixar secar e a lâmina estará pronta para a leitura (para uma melhor
visualização, recomenda-se contra-corar por um método hematológico
como panótico, Giensa etc.).
e- Observar ao microscópio e contar o número de reticulócitos (eritrócitos
com um filamento escuro de RNA em se interior) relativos a 1000
eritrócitos.
8. CÁLCULOS
- Dividindo-se por 10 o número de reticulócitos contados em 1000
eritrócitos obtém-se o percentual de reticulócitos;
Reticulócitos por mL = % de Reticulócitos
100
x número de eritrócitos por mL
9. RESULTADOS
- Expressar os resultados em percentual ou em reticulócitos por µL.
- Valores de referência: 0,56 - 2,72% (24.000-84.000/µL).
10. LIMITAÇÕES DO MÉTODO
Normalmente há interferências fisiológicas em pacientes submetidos a
grandes transfusões. A dificuldade em se visualizar os reticulócitos pode
ser contornada realizando-se uma coloração de fundo (panótico, Giensa
etc.). Uma causa de erro comum é não se obedecer os critérios de diluição
pelo hematócrito da amostra.
8. CONTROLE DA QUALIDADE
Recomenda-se a aferição constante do material com amostras clínicas . A
periodicidade do controle fica a ser estabelecida conforme a rotina do
laboratório. Resultados anormais devem ser criteriosamente estudados, e
até que sejam esclarecidas as causas, os resultados não devem ser
liberados.
9. GARANTIA DA QUALIDADE
A Laborclin obedece o disposto na Lei 8.078/90 - Código de Defesa do
Consumidor. Para que o produto apresente seu melhor desempenho, é
necessário :
- que o usuário conheça e siga rigorosamente o presente procedimento
técnico
- que os materiais estejam sendo armazenados em condições adequadas
- que os equipamentos e demais acessórios necessários estejam em boas
condições de uso e manutenção
Antes de ser liberado para venda, cada lote do produto é submetido a
testes específicos, que são repetidos periodicamente até a data de
vencimento expressa em rótulo. Os certificados de análise de cada lote
podem ser solicitados junto ao SAC - Serviço de Assessoria ao Cliente, bem
como em caso de dúvidas ou quaisquer problemas de or igem técnica,
através do telefone 0800-410027. Quaisquer problemas que inviabilizem
uma boa resposta do produto, que tenham ocorrido comprovadamente por
falha da Laborclin serão resolvidos sem ônus ao cliente, conforme o
disposto em lei.
10. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Oliveira Lima, Antonio et al.: Métodos de laboratório aplicados à
clínica, 6ª edição. Rio de Janeiro, Guanabara Koogan, 1985.
2. Moura, Roberto A. et al: Técnicas de laboratório, 3ª edição.S. Paulo,
Livraria Atheneu, 1992.
6.MATERIAL NECESSÁRIO (porém não fornecido)
- Lâminas para microscopia;
- Pipetas sorológicas e micropipetadores;
- Banho-maria 37 oC;
- Microscópio.
7. PROCEDIMENTO TÉCNICO
a- Preparar a diluição do sangue total homogeneizado em azul cresil
brilhante, usando o seguinte critério baseado no hematócrito:
- para hematócrito até 30%: 12 gotas de sangue para 3 gotas de corante;
- Para hematócrito entre 30-45%: 9 gotas de sangue para 3 gotas de
corante;
- para hematócrito superior a 45%: 6 gotas de sangue para 3 gotas de
corante;
b- Colocar em Banho-Maria a 37 oC por 20 minutos;
Dúvidas, sugestões
e/ou reclamações
ligue para o nosso:
LB 17xxxx - Rev. 01 - 05/04
Laborclin produtos para laboratórios ltda.
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