análise molecular do gene pax6 de um paciente com síndrome de

ANÁLISE MOLECULAR DO GENE PAX6 DE UM PACIENTE COM SÍNDROME DE
MORNING GLORY UTILIZANDO A TÉCNICA DE MLPA
França, ESS.1; Maciel-Guerra AT. 2; Guerra-Júnior, G. 2; De Mello, MP1.
(1) Centro de Biologia Molecular e Engenharia Genética – CBMEG - UNICAMP; (2) Departamento de Endocrinologia
Pediátrica - FCM - UNICAMP
RESUMO
O PAX6 é o principal gene para o controle da organização do sistema ocular durante o desenvolvimento.
Ele codifica um fator de regulação transcricional altamente conservado com funções importantes para o
desenvolvimento normal dos olhos e do sistema nervoso central. O gene PAX6 está localizado no
cromossomo 11 (11p13) em humanos e seus transcritos mais abundantes possuem 13 ou 14 éxons
dependendo da inclusão ou não do éxon 5a, sendo que a parte codificante se inicia no final do éxon 4.
Alterações no gene PAX6 em humanos foram associadas ao fenótipo de aniridia, da síndrome de Morning
Glory (MGS) e também de doenças associadas ao desenvolvimento ocular. MGS é uma anomalia
congênita do nervo óptico, comumente unilateral, podendo encontrar-se associada a estrabismo,
ambliopia e nistagmo. Inicialmente o DNA de um paciente com MGS foi analisado por seqüenciamento
em busca de possíveis mutações no PAX6. Como este indivíduo não apresentou alterações que
justificassem seu fenótipo, foi realizada a técnica de MLPA a fim de detectar possíveis deleções ou
inserções não detectadas por seqüenciamento. A análise foi realizada utilizando o Kit Salsa MLPA P219B1, que contém 43 sondas sendo 10 para o gene PAX6, 23 de genes do cromossomo 11, 3 sondas do
cromossomo 3 e 7 sondas utilizadas como referência para comparação. Não foram encontradas alterações
no PAX6, porém o experimento de MLPA do paciente revelou a diminuição da intensidade relativa de
hibridização correspondente ao éxon 9 do gene ELP4 localizado na extremidade 3’ do PAX6, sugerindo
uma possível micro-deleção ou mutação na região de ligação dessa sonda. Deleções do ELP4 foram
associadas anteriormente a pacientes com aniridia, que não possuíam alterações na estrutura do PAX6.
Essa alteração pode estar associada ao fenótipo de MGS, sendo necessários estudos mais detalhados sobre
possíveis interações do ELP4 com o gene de interesse.
Palavras-chave: PAX6. Síndrome Morning Glory. MLPA. ELP4.