Reflotron® CK

# 672 (2010) - DXO-LI - Frau Veselovski
Reflotron® CK
ES
Finalidad de uso
Test para la determinación cuantitativa de CK
(EC 2.7.3.2) en sangre, suero o plasma con
equipos de medición Reflotron.
Presentación
Envase de 15 portarreactivos, 5() 1 1126695
capilares, materiales de control, equipo normal de laboratorio para la extracción
de sangre.
Antes de realizar la determinación, leer atentamente las instrucciones para el uso
del equipo Reflotron y familiarizarse con la función del aparato.
Conectar el aparato.
Al aparecer el mensaje „LISTO”, extraer un portarreactivos del tubo.
Volver a cerrar el tubo inmediatamente con el tapón de agente desecante.
Retirar la lámina de protección del portarreactivos (a), evitando doblar el portarreactivos.
Absorber el material de muestra sin formar burbujas, p.ej. con una Reflotron Pipette,
y aplicarlo en localización central sobre la parte roja de la zona de aplicación (xx) –
sin tocar ésta con la punta de la pipeta – en forma de gota (b); volumen de aplicación
necesario: muestra de 30 µl (ver la ilustración).
En el plazo de 15 segundos introducir el portarreactivos horizontalmente, con la tapa
abierta, en la ranura provista hasta que encaje perceptiblemente (c ).
Cerrar la tapa.
(b)
(a)
(c)
Aspectos clínicos
La creatincinasa (CK) es una enzima dímera, la actividad total mensurable en el
suero se compone de las actividades de las isoenzimas citoplasmáticas, dímeras
CK-MM (tipo muscular), CK-BB (tipo cerebral) y CK-MB (tipo miocárdico) así como
de sus formas modificadas posteriormente a la síntesis y de las actividades de las
macro-creatincinasas (macro-CK).
Las determinaciones de la actividad de la CK y de la isoenzima CK sirven para el
diagnóstico y el control del desarrollo del infarto de miocardio así como de enfermedades musculares tales como la distrofia muscular progresiva de Duchenne.
En lesiones del miocardio tales como el infarto de miocardio agudo, las células
miocárdicas destruidas ceden CK. Un aumento de la actividad de la CK en sangre
es detectable en casos precoces al cabo de 4 horas después del infarto. La actividad
de la CK atraviesa el máximo después de 12–24 horas y vuelve a bajar al intervalo
de referencia al cabo de 3–4 días.
Principio del test1
En el presente Reflotron CK Test la muestra aplicada fluye a través de la zona de aplicación, realizándose la separación de los eritrocitos, al interior de la zona reactiva.
En presencia de CK, el creatinfosfato y el difosfato de adenosina son transformados
en creatina y trifosfato de adenosina. El glicerol reacciona en una segunda fase de
reacción con el trifosfato de adenosina generado, con la ayuda de la glicerocinasa,
formando glicerol-3-fosfato. Este reacciona en presencia de glicerolfosfatooxidasa
bajo formación de peróxido de hidrógeno, que en presencia de POD transfiere la
forma reducida, incolora, del indicador en la forma azul oxidada:
CK
creatinfosfato + ADP õõõú creatin + ATP
GK
glicerol + ATP õõõú glicerol-3-P + ADP
GPO
glicerol-3-P + O2 õõõú dihidroxiacetonfosfato + H2O2
POD
H2O2 + indicador (red.) õõõú indicador (ox.) + H2O
A una temperatura de 37°C se sigue en una medición cinética a 642 nm la formación del colorante como medida de la actividad enzimática de la CK y se indica el
resultado después de aprox. 190 segundos según el ajuste del aparato para 37°C,
30°C, respectivamente 25°C en U/l, respectivamente µkat/l.
Componentes por zona reactiva: creatinfosfato 116 µg; glicerolcinasa (Bacillus
stearothermophilus) ≥ 1,0 U; glicerol 4,4 µg; glicerolfosfatooxidasa (microorganismos rec.) ≥ 0,09 U; POD (rábano picante) ≥ 1,7 U; ascorbatooxidasa (Cucurbita
species) ≥ 0,41 U; ADP 4 µg; diadenosinapentafosfato 1 µg; 2-(3,5-di-terc.-butil4-hidroxifenil)-4-(5)-(9-julolidino)-5-(4)-metil-(1H)-imidazol (indicador) 9,4 µg;
N-acetilcisteína 11,3 µg; EGTA 16 µg; tampón.
Medidas de precaución y advertencias
Diagnóstico in vitro. Observar las medidas de precaución habituales en la manipulación de reactivos de laboratorio.
Almacenamiento y estabilidad
Estabilidad y almacenamiento a +2° C - + 8° C hasta la fecha de caducidad indicada
en el estuche, respectivamente en el tubo.
Después de la extracción de una tira reactiva se debe a cerrar el tubo inmediatamente para evitar que la exposición al polvo, la humedad, etc., vuelvan las tiras
reactivas inutilizables.
Obtención de las muestras y preparación2,3,6
Sangre capilar, sangre completa extraída con los tubos convencionales de extracción de muestras estándar, el suero obtenido de ella, sangre heparinizada o plasma
heparinizado.
Sangre capilar o venosa fresca debe ser utilizada inmediatamente después de
la extracción de sangre.
Como anticoagulante solamente se debe utilizar heparina (de preferencia, heparinato de litio). No utilizar otros anticoagulantes o aditivos.
Si es conservada en un recipiente cerrado, la sangre heparinizada debe ser utilizada en el plazo de 8 horas. Después de la sedimentación de las fracciones celulares
se puede utilizar el plasma sobrenadante si se evita agitar la muestra.
Al utilizar pipetas capilares o recipientes desechables recubiertos se deben observar
las indicaciones del fabricante.
En el suero y el plasma heparinizado, la estabilidad de la muestra en un recipiente
cerrado a + 20°C - + 25°C asciende a 24 horas; a + 4°C - + 8°C, a siete días.
Observaciones; restricciones del procedimiento - interferencias2,4
Concentraciones tóxicas de ácido ascórbico, dobesilato y sulfametoxazol pueden
conducir a una disminución de los valores de medición de la CK.
No se comprobó una influencia ejercida sobre los resultados del test por las sustancias siguientes en los ámbitos de concentración examinados (criterio: recuperación
± 10 % del valor inicial): valores del hematócrito hasta un 50 %, hemólisis hasta
600 mg Hb/dl (0,37 mmol HB/l), concentraciones de bilirrubina hasta 20 mg/dl
(342 µmol/l), lipemia así como 25 principios activos más examinados.
Calibración
La determinación de la curva funcional del Reflotron CK para la conversión de valores de reflexión en actividades se realiza de forma específica para el lote utilizando
el método de creatincinasa líquida, IFCC de Roche Diagnostics a 37°C. Los datos
son transmitidos automáticamente al aparato durante la realización del test gracias
a la információn contenida en la banda magnética del portarreactivos.
Realización del test
Material necesario adicionalmente (no suministrado con el equipo): Reflotron Instrument; Reflotron Pipette y puntas de pipetas, respectivamente pipeta capilar,
El aparato confirma con el mensaje „CK“ que el código magnético específico
del test ha sido leído correctamente. Los segundos transcurridos hasta la aparición del resultado son indicados en visualización digital. La actividad de la CK es
evaluada y automáticamente calculada con la ayuda de una función y factores de
conversión transferidos al equipo por la banda magnética que se encuentra en cada
portarreactivos. En función del ajuste del aparato en una unidad convencional o SI
y la temperatura de referencia, se indica la actividad enzimática para 25°C, 30°C
ó 37°C en U/l o µkat/l. Retirar el portarreactivos usado y eliminarlo de acuerdo con
las disposiciones válidas para su laboratorio.
Intervalos de referencia5,6
Sangre, suero, plasma
Hombres
Mujeres
37°C
30°C
25°C
24–195 U/l
0,4–3,25 µkat/l
24–170 U/l
0,4–2,83 µkat/l
15–130 U/l
0,25–2,17 µkat/l
15–110 U/l
0,25–1,83 µkat/l
10–80 U/l
0,17–1,33 µkat/l
10–70 U/l
0,17–1,17 µkat/l
Factores de conversión de temperatura utilizados:
U/l (25°C) = 0,41 U/l · (37°C) respectivamente µkat/l (25°C) = 0,41 µkat/l · (37°C)
U/l (30°C) = 0,63 U/l · (37°C) respectivamente µkat/l (30°C) = 0,63 µkat/l · (37°C)
Cada laboratorio debería controlar la transferibilidad de los intervalos de referencia
para los propios grupos de pacientes y determinar en caso necesario intervalos de
referencia propios. Para fines diagnósticos siempre se deben valorar los resultados
de la CK en relación con la anamnesis, el reconocimiento clínico y otros resultados
de exámenes.
Intervalo de medición y técnica de dilución2
Intervalo de medición: 37°C: 24,4–aprox. 1400 U/l, resp. 0,407–23,33 µkat/l
30°C: 15,4–aprox. 900 U/l, resp. 0,256–15 µkat/l
25°C: 10,0–aprox. 600 U/l, resp. 0,167–10 µkat/l
La eventual alinealidad de la curva de reacción es indicada en el display mediante
el signo * antes del resultado de la medición.
Si la actividad medida de la CK se encuentra por encima del rango de medición del
Reflotron CK (mensaje del display: DILUIR MUESTRA), se puede diluir el suero o la
muestra de plasma de con suero o plasma de actividad Ao conocida en una relación
de 1 + 1. La verdadera actividad A de la CK puede ser calculada de la actividad Adel
de la CK hallada, según la fórmula siguiente: A = 2 Adel – A0.
Control de calidad
Reflotron Precinorm U, respectivamente Reflotron Check debe ser utilizado de
acuerdo con los requerimientos individuales del laboratorio, respectivamente las
correspondientes técnicas para el control de calidad. Los resultados tienen que
encontrarse dentro de los intervalos definidos. Cada laboratorio debería describir medidas de corrección para el caso que hubiera valores situados fuera del
intervalo.
Características del rendimiento2, 4
Los datos del Reflotron CK fueron establecidos en exámenes de ensayo. La mayoría
de los datos del test se encontraron dentro de los valores indicados.
Repetibilidad (imprecisión en la serie): Cv (coeficiente de variación) el 3,5 %, material
de muestra: sangre heparinizada, plasma heparinizado, suero.
Reproducibilidad (imprecisión de día a día): Cv en el ámbito normal el 3,7 %, en el
ámbito patológico el 4,2%; material de muestra: sueros de control.
Exactitud (comparaciones del método; U/l; ecuaciones de rectas de compensación,
n muestras, coeficiente de correlación r): y = 1,001 x -5,157 ó y = 1,005 x +4,609
(n = 107 ó 99; r = 0,992 ó 0,997; Material de muestra: plasma heparinizado y
suero; método de comparación x: creatincinasa líquida según IFCC, Roche Diagnostics).
La explicación de los símbolos y las referencias bibliográficas se encuentran al
final del prospecto.
Fecha de la última revisión: 06/2010
PT
Utilização pretendida
Teste para determinação quantitativa de CK (EC 2.7.3.2) no
sangue, soro ou plasma com o aparelho Reflotron.
(b)
(a)
µε την παραγόµενη τριφωσφορική αδενοσίνη και παράγει 3-φωσφορική γλυκερόλη.
Παρουσία οξειδάσης της φωσφορικής γλυκερόλης, αυτή αντιδρά µε οξυγόνο και
σχηµατίζει φωσφορική διυδροξυακετόνη και υπεροξείδιο του υδρογόνου. Παρουσία
υπεροξειδάσης, το υπεροξείδιο του υδρογόνου οξειδώνει την άχρωµη ανηγµένη
µορφή του δείκτη στην οξειδωµένη µορφή, η οποία έχει µπλε χρώµα.
CK
φωσφορική κρεατίνη + ADP õõõú κρεατίνη + ATP
(c)
Apresentação
Embalagem de 15 tiras, 5() 1 1126695
Aspectos clínicos
A creatina cinase (CK) é uma enzima dimérica. A actividade total medida no soro
é feita das actividades das izoenzimas citoplásmicas diméricas CK-MM (tipo
músculo), CK-BB (tipo cérebro) e CK-MB (tipo miocárdio) assim como as suas
formas modificadas pós-sinteticamente e as actividades das macro-creatina cinases
(macro CK).
A determinação de CK e das actividades da isoenzima CK é usada para o diagnóstico
e monitorização do enfarte do miocárdio e de lesões musculares, como por exemplo
a distrofia muscular progressiva do tipo Duchenne. Na doença miocárdica, como
por exemplo no enfarte agudo do miocárdio, a CK é liberta das células miocárdicas
destruídas. Em casos anteriores, o aumento da actividade da CK no sangue foi
detectada 4 horas depois do enfarte. A actividade da CK atinge o pico depois de
12-24 horas e regressa ao intervalo de referência depois de 3-4 dias.
Princípio do Teste1
Depois de aplicada na tira teste, a amostra entra na zona reactiva, no caso de
sangue depois da separação dos eritrócitos do plasma. Na presença da CK, a
creatina-fosfato e a adenosina-difosfato reagem para formar creatinina e trifosfato
de adenosina. Num segundo passo da reacção catalisado pela glicerocinase, o
glicerol reage com o trifosfato de adenosina resultante para produzir glicerol-3fosfato. Na presença da glicerolfosfato oxidase, este reage com o oxigénio para
dar fosfato de dihidroxiacetona e peróxido de hidrogénio. Na presença da POD,
o peróxido de hidrogénio oxida a forma reduzida incolor do indicador na forma
oxidada azul:
CK
creatina-fosfato + ADP õõõú creatina + ATP
GK
glicerol + ATP õõõú glicerol-3-P + ADP
GPO
glicerol-3-P + O2 õõõú fosfato de dihidroxiacetona + H2O2
POD
H2O2 + indicador (incolor) õõõú indicador (oxi.) + H2O
A uma temperatura de 37°C é formado o corante e medido cineticamente a 642 nm
como uma medida da actividade enzimática da CK e o resultado é indicado depois
de cerca de 190 segundos para 37°C, 30°C ou 25°C e em U/l ou µkat/l, dependendo
de como foi seleccionado o aparelho.
Composição de cada tira teste: creatina-fosfato: 116 µg; glicerol cinase (Bacillus
stearothermophilus) ≥ 1,0 U; glicerol: 4,4 µg; glicerofosfato oxidase (microorganismos
rec.) ≥ 0,09 U; POD (rábano silvestre) ≥ 1,7 U; ascorbato oxidase (Cucurbita
species) ≥ 0,41 U; ADP: 4,0 µg; diadenosina pentafosfato : 1,0 µg; 2-(3,5-de-tertbutil-4-hidroxifenil)-4-(5)-(9-julolidino)-5-(4)-metil-(1H)-imidazol (indicador): 9,4 µg;
N-acetilcisteína: 11,3 µg; EGTA: 16 µg; tampão.
Precauções e avisos
Para utilização de diagnóstico in vitro. Tenha em consideração as precauções
habituais para o tratamento de reagentes laboratoriais.
Armazenamento e validade
Armazene entre +2°C e +8°C. Nestas condições os testes podem ser usados até
à data de validade impressa na embalagem ou no tubo. Depois de retirar uma tira
teste, certifique-se que fechou imediatamente o tubo, pois caso contrário, as tiras
testes ficam danificadas devido à exposição ao pó, humidade, etc.
Colheita da amostra e tratamento2,3,6
Sangue capilar; sangue total colhido em tubos de colheita normais, assim como soro
preparado a partir daqui; sangue heparinizado ou plasma heparinizado.
Utilize sangue capilar ou sangue venoso frescos imediatamente depois da
colheita de sangue.
Utilize apenas heparina (de preferência heparinato de lítio) como anticoagulante.
Não utilize outros anticoagulantes ou aditivos.
Sangue heparinizado conservado em recipientes fechados deverá ser usado num
prazo de 8 horas. Depois da precipitação dos componentes celulares, o plasma
excedente pode ser usado desde que a amostra e não tenha sido agitada.
No caso de utilizar pipetas capilares ou recipientes de utilização única, observe o
prazo de conservação do material de amostra dado pelo fabricante.
Soro e plasma heparinizado armazenado em recipientes fechados permanece
estável durante 24 horas a temperaturas entre +20°C e +25°C, e durante 7 dias a
temperaturas entre +4°C e +8°C.
Observações – limitações do procedimento –interferências2,4
Concentrações tóxicas de ácido ascórbico, dobesilato e sulfametoxazole podem
originar medições de actividade de CK reduzidas. Não foi encontrada qualquer
influência nos resultados nos intervalos de concentração testados (critério:
recuperação ± 10% da linha basal): valores de hematócrito até 55%, hemólise
até 600 mg Hb/dl (0,37 mmol Hb/l), concentrações de bilirrubina até 20 mg/dl
(342 µmol/l), lipémia e outras 25 drogas testadas.
Calibração
A curva de função do Reflotron CK, para converter os valores de reflectância em
actividades, é definida para cada lote, usando o método Creatina Cinase líquida,
IFCC da Roche Diagnostics a 37°C. Os dados são automaticamente programados
no aparelho durante o teste.
Procedimento do teste
Materiais adicionais necessários (não fornecidos): aparelho Reflotron; Reflotron
Pipette e pontas para a pipeta ou pipeta capilar, controlos, equipamento laboratorial
habitual para efectuar a colheita de sangue.
Antes de efectuar o teste, leia atentamente o manual de instruções do Reflotron
para se familiarizar com o aparelho.
Ligue o aparelho.
Quando aparecer “PRONTO” no visor, retire uma tira reactiva do tubo.
Feche imediatamente o tubo com a tampa contendo exsicante.
Retire a banda protectora da zona reactiva (a) tendo atenção para não dobrar a
tira.
Utilizando a pipeta Reflotron, recolha o material de amostra evitando a inclusão de
ar, e aplique uma gota no centro da zona vermelha (xx), sem que a ponta da pipeta
toque na zona de aplicação (b). Volume de amostra necessário para aplicação
30 µl (veja a figura).
Após 15 segundos aproximadamente, abra a tampa (se não estiver já aberta),
coloque a tira na guia e introduza-a horizontalmente no aparelho até ouvir um clic
(c). Feche a tampa.
O aparecimento de “CK” no visor confirma que a leitura do código magnético
específico do teste foi correctamente lido pelo aparelho.
O tempo é indicado em segundos, até surgir o resultado. A actividade é calculada
automaticamente através das leituras efectuadas usando factores de função ou
conversão que são introduzidos no aparelho através da tira magnética, existente
no verso de cada tira reactiva. A actividade da CK é indicada em U/l ou µkat/l para
25°C, 30°C ou 37°C dependendo de como foi definido o aparelho.
Retire do Reflotron a tira reactiva usada e deite fora de acordo com o procedimento
do seu laboratório.
Intervalos de referência5,6
Sangue, soro, plasma
Homem
Mulher
37°C
30°C
25°C
24–195 U/l
0,4–3,25 µkat/l
24–170 U/l
0,4–2,83 µkat/l
15–130 U/l
0,25–2,17 µkat/l
15–110 U/l
0,25–1,83 µkat/l
10–80 U/l
0,17–1,33 µkat/l
10–70 U/l
0,17–1,17 µkat/l
Factores de conversão da temperatura usados:
U/l (25°C) = 0,41 U/l · (37°C) ou µkat/l (25°C) = 0,41 µkat/l · (37°C)
U/l (30°C) = 0,63 U/l · (37°C) ou µkat/l (30°C) = 0,63 µkat/l · (37°C)
Cada laboratório deverá verificar se os intervalos de referência são apropriados
aos seus grupos de doentes, e deverá estabelecer os seus próprios intervalos de
referência se for necessário. Para fins de diagnóstico, os resultados de CK deverão
ser sempre avaliados juntamente com o histórico, exame clínico e resultados de
outros exames e testes efectuados.
Intervalo de medição e diluição2
Intervalo de medição: 37°C: 24,4–aprox. 1400 U/l ou 0,407–23, 33 µkat/l
30°C: 15,4–aprox. 900 U/l ou 0,256–15 µkat/l
25°C: 10,0–aprox. 600 U/l ou 0,167–10 µkat/l
As curvas de reacção não-lineares são indicadas no visor por um asterisco em
frente do resultado.
Se a actividade de CK medida for superior ao intervalo de medição do Reflotron
CK (indicado no visor pela mensagem DILUA CK), o soro ou plasma podem ser
diluídos numa medida de 1+1 com soro ou plasma, tendo uma actividade conhecida
de Ao. A verdadeira actividade CK A pode ser calculada a partir da actividade de
CK medida Adil usando a seguinte fórmula: A = 2 Adil - A0.
Controlo de Qualidade
Para o controlo de qualidade, utilize o Reflotron Precinorm U ou o Reflotron Check
para obedecer os requisitos de cada laboratório ou para obedecer aos regulamentos.
Os resultados devem estar dentro dos intervalos prescritos. Cada laboratório deve
especificar as medidas correctivas a serem aplicadas no caso de os valores se
encontrarem fora do intervalo.
Características do funcionamento2, 4
Os dados do Reflotron CK foram determinados numa série de testes. A maioria dos
dados do teste encontraram-se dentro dos intervalos indicados.
Repetitividade (imprecisão entre-séries):
CV (coeficiente de variação) 3,5%; materiais de amostra: sangue heparinizado,
plasma heparinizado, soro.
Reprodutividade (imprecisão entre-dias):
CV 3,7% no intervalo normal, 4,2% no intervalo patológico; material de amostra:
soro de controlo.
Exactidão (métodos de comparação; U/l; equações de regressão, amostras n,
coeficiente de correlação r): y = 1,001 x -5,157 e y = 1,005 x +4,609, respectivamente
(n = 107 ou 99; r = 0,992 ou 0,997; material de amostra: soro e plasma heparinizado;
método de referência x: creatina cinase liquida, IFCC., da Roche Diagnostics).
Para obter uma explicação dos símbolos utilizados e uma lista de referências,
consulte a parte final deste folheto informativo.
Última actualização: 06/2010
ΕΛ
Χρήση
Δοκιµασία για τον ποσοτικό προσδιορισµό της CK
(EC 2.7.3.2) στο αίµα, στον ορό ή στο πλάσµα µε τον
αναλυτή Reflotron.
Συσκευασία
Συσκευασία των 15 δοκιµαστικών ταινιών,
5() 11126695
Κλινικά στοιχεία
Η κρεατινική κινάση (CK) είναι ένα διµερές ένζυµο. Η συνολική ενεργότητα που
µετράται στον ορό, συνίσταται από τις ενεργότητες των κυτταροπλασµατικών
διµερών ισοενζύµων CK-MM (τύπος των µυών), CK-BB (τύπος του εγκεφάλου)
και CK-MB (τύπος του µυοκαρδίου), καθώς και των τροποποιηµένων µετά τη
σύνθεση µορφών τους, και από τις ενεργότητες των µακρο-κρεατινικών κινασών
(macro-CK).
Ο προσδιορισµός της ενεργότητας της CK και των ισοενζύµων της CK
χρησιµοποιείται στη διάγνωση και την παρακολούθηση του εµφράγµατος του
µυοκαρδίου και µυϊκών παθήσεων, όπως η προοδευτική µυϊκή δυστροφία
Duchenne. Σε περίπτωση µυοκαρδιακών βλαβών, όπως π.χ. σε οξύ έµφραγµα του
µυοκαρδίου, η CK απελευθερώνεται από τα κατεστραµµένα µυοκαρδιακά κύτταρα.
Η ανίχνευση αυξηµένης ενεργότητας της CK στο αίµα είναι δυνατή 4 ώρες µετά το
έµφραγµα. Η ενεργότητα της CK κορυφώνεται µετά από 12-24 ώρες και επανέρχεται
στο εύρος των τιµών αναφοράς µετά από 3-4 ηµέρες.
κινάση της γλυκερόλης
γλυκερόλη + ATP õõõõõõõõõõõõõú 3-P-γλυκερόλη + ADP
οξειδάση της
φωσφορικής γλυκερόλης
3-Ρ-γλυκερόλη + O2 õõõõõõõõõõõõõõú φωσφορική διυδροξυακετόνη
+ H 2O 2
υπεροξειδάση
H2O2 + δείκτης (ανηγµένος) õõõõõõõõú δείκτης (οξειδωµένος) + H2O
Η παραγοµένη ποσότητα της χρωστικής, που είναι µέτρο της ενζυµικής ενεργότητας
της CK, µετράται κινητικά στα 642 nm σε θερµοκρασία 37°C και το αποτέλεσµα της
µέτρησης προβάλλεται στην οθόνη µετά από 190 δευτερόλεπτα περίπου. Αναλόγως
µε τη ρύθµιση του αναλυτή, προβάλλεται το αποτέλεσµα για τους 37°C, τους 30°C
ή τους 25°C και σε U/l ή µkat/l.
Συστατικά ανά ταινία: φωσφορική κρεατίνη 116 µg, κινάση της γλυκερόλης (Bacillus
stearothermophilus) ≥ 1,0 U, γλυκερόλη 4,4 µg, οξειδάση φωσφορικής γλυκερόλης
(µικροοργανισµοί ανασυνδ) ≥ 0,09 U, υπεροξειδάση (horseradish) ≥ 1,7 U, οξειδάση
του ασκορβικού (Cucurbita sp.) ≥ 0,41 U, ADP 4 µg, πενταφωσφορική διαδενοσίνη
1 µg, 2-(3,5-δι-τριτοταγές-βουτυλ-4-υδροξυφαινυλο)-4-(5)-(9-ιουλολιδινο)-5-(4)µεθυλο-(1H)-ιµιδαζόλη (δείκτης) 9,4 µg, N-ακετυλοκυστεΐνη 11,3 µg, EGTA 16 µg,
ρυθµιστικό διάλυµα.
Προειδοποιήσεις και προφυλάξεις
Για in vitro διαγνωστική χρήση. Τηρείτε τις συνήθεις προφυλάξεις που πρέπει να
λαµβάνονται κατά το χειρισµό των αντιδραστηρίων στο εργαστήριο.
Διατήρηση και διάρκεια ζωής
Οι ταινίες διατηρούνται σε θερµοκρασία από +2°C έως +8°C. Υπό τις συνθήκες
αυτές οι δοκιµαστικές ταινίες µπορούν να χρησιµοποιηθούν µέχρι την ηµεροµηνία
λήξης που αναγράφεται στη συσκευασία ή στο σωληνάριο. Κάθε φορά που αφαιρείτε
µια δοκιµαστική ταινία, θα πρέπει αµέσως µετά να κλείνετε καλά µε το πώµα το
σωληνάριο, διότι η έκθεση στη σκόνη, την υγρασία κ.λπ. µπορεί να αχρηστεύσει
τις δοκιµαστικές ταινίες.
Λήψη και χειρισµός του δείγµατος 2,3,6
Mπορούν να χρησιµοποιηθούν: Τριχοειδικό αίµα, πλήρες αίµα ληφθέν σε
δοκιµαστικό σωληνάριο χωρίς αντιπηκτικό ή ορός αυτού, ηπαρινισµένο αίµα ή
πλάσµα.
Το πρόσφατο τριχοειδικό ή φλεβικό αίµα θα πρέπει να χρησιµοποιείται αµέσως
µετά τη λήψη του.
Ως αντιπηκτικό θα πρέπει να χρησιµοποιείται αποκλειστικά η ηπαρίνη (κατά
προτίµηση σε άλας µε λίθιο). Mην χρησιµοποιείτε άλλα αντιπηκτικά ή άλλες
πρόσθετες ουσίες.
Το ηπαρινισµένο αίµα που διατηρείται σε κλειστό σωληνάριο θα πρέπει να
χρησιµοποιηθεί µέσα σε 8 ώρες. Mετά την καθίζηση των κυτταρικών στοιχείων
µπορεί να χρησιµοποιηθεί το υπερκείµενο πλάσµα, εφόσον δεν έχει ανακινηθεί
το δείγµα.
Αν χρησιµοποιηθούν επικαλυµµένα µε ηπαρίνη σωληνάρια µιας χρήσης ή
τριχοειδικές πιπέτες, πρέπει να τηρηθούν οι πληροφορίες σταθερότητας που
δίνει ο κατασκευαστής.
Ο ορός και το ηπαρινισµένο πλάσµα που διατηρούνται σε κλειστά σωληνάρια
παραµένουν σταθερά για 24 ώρες στους +20°C έως +25°C και για 7 hmäρες στους
+4°C έως +8°C.
Παρατηρήσεις:
Περιορισµοί της µεθόδου - αλληλεπιδράσεις 2,4
Το ασκορβικό οξύ, το dobesilate και η σουλφαµεθοξαζόλη, σε τοξικές συγκεντρώσεις,
µπορούν να οδηγήσουν σε ψευδώς χαµηλά αποτελέσµατα των µετρήσεων της
ενεργότητας της CK.
Δεν διαπιστώθηκε επίδραση των παρακάτω παραγόντων στα αποτελέσµατα, εντός
του εύρους συγκεντρώσεων που ελέγχθηκεαν (κριτήριο: η νέα τιµή να µην αποκλίνει
περισσότερο από ± 10 % της αρχικής τιµής): αιµατοκρίτης έως και 50%, αιµόλυση
έως και 600 mg Hb/dl (0,37 mmol Hb/l), συγκεντρώσεις χολερυθρίνης έως και
20 mg/dl (342 µmol/l), λιπαιµία και άλλα 25 φάρµακα που δοκιµάστηκαν.
Βαθµονόµηση
Η καµπύλη της συνάρτησης του Reflotron CK για τη µετατροπή των τιµών ανάκλασης
σε ενεργότητες καθορίζεται για κάθε παρτίδα ταινιών µε τη βοήθεια της Μεθόδου
υγρού αντιδραστηρίου κρεατινικής κινάσης IFCC της Roche Diagnostics, στους
37°C. Τα δεδοµένα µεταφέρονται αυτόµατα στον αναλυτή κατά την εκτέλεση της
δοκιµασίας.
Εκτέλεση της δοκιµασίας
Εκτός από τις ταινίες, είναι αναγκαία και τα εξής υλικά (δεν παρέχονται): Αναλυτής
Reflotron, πιπέτες Reflotron και tips πιπετών ή τριχοειδικές πιπέτες, υλικά για
µετρήσεις ελέγχου σωστής λειτουργίας και ο συνήθης εργαστηριακός εξοπλισµός
που απαιτείται για τη λήψη αίµατος.
Πριν από την εκτέλεση της µέτρησης, διαβάστε τις οδηγίες χρήσης του αναλυτή
Reflotron και εξοικειωθείτε µε τη λειτουργία του µηχανήµατος.
Θέστε τον αναλυτή σε λειτουργία.
Όταν στην οθόνη του αναλυτή εµφανισθεί η ένδειξη “READY”, βγάλτε µια
δοκιµαστική ταινία από το σωληνάριο.
Αµέσως µετά κλείστε και πάλι το σωληνάριο µε το πώµα, το οποίο περιέχει
µια αποξηραντική ουσία.
Αφαιρέστε το προστατευτικό έλασµα από τη δοκιµαστική ταινία (a), προσέχοντας
να µην τη λυγίσετε.
Πάρτε το δείγµα, π.χ. µε την πιπέτα Reflotron, προσέχοντας να µη σχηµατισθούν
φυσαλίδες αέρα, και τοποθετήστε το σταγόνα – σταγόνα στο κέντρο της κόκκινης
περιοχής τοποθέτησης του αίµατος (xx), φροντίζοντας να µην την ακουµπήσετε
µε την πιπέτα (b). Ο όγκος του αίµατος που χρειάζεται να τοποθετηθεί είναι 30 µl
(δείτε την εικόνα).
Mέσα σε 15 δευτερόλεπτα, και ενώ το καπάκι του µηχανήµατος είναι ανοικτό,
τοποθετήστε τη δοκιµαστική ταινία στον οδηγό της και ωθήστε την οριζόντια µέχρι
να ασφαλίσει στη θέση της (c). Κλείστε το καπάκι του αναλυτή.
(a)
(b)
(c)
Αρχή της δοκιµασίας1
Mετά την τοποθέτησή του στη δοκιµαστική ταινία, το δείγµα ρέει µέσα στη ζώνη
αντίδρασης (εάν χρησιµοποιείται αίµα, αρχικά αποχωρίζονται τα ερυθρά αιµοσφαίρια
από το πλάσµα). Παρουσία CK, η φωσφορική κρεατίνη και η διφωσφορική αδενοσίνη
αντιδρούν και σχηµατίζουν κρεατίνη και τριφωσφορική αδενοσίνη. Σε µια δεύτερη
αντίδραση, που καταλύεται από την κινάση της γλυκερόλης, η γλυκερόλη αντιδρά
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# 672 (2010) - DXO-LI - Frau Veselovski
Ο αναλυτής επιβεβαιώνει τη σωστή ανάγνωση του µαγνητικού κώδικα (στην κάτω
επιφάνεια της ταινίας) που αντιστοιχεί στη συγκεκριµένη δοκιµασία εµφανίζοντας
στην οθόνη την ένδειξη CK. Στην οθόνη προβάλλονται τα δευτερόλεπτα που
αποµένουν µέχρι την εµφάνιση του αποτελέσµατος. Η ενεργότητα της CK
υπολογίζεται από τις ληφθείσες µετρήσεις αυτόµατα, µε τη βοήθεια µιας συνάρτησης
και ορισµένων συντελεστών µετατροπής, οι οποίοι µεταφέρονται στον αναλυτή
µέσω της µαγνητικής ταινίας που βρίσκεται στο κάτω µέρος κάθε δοκιµαστικής
ταινίας. Η ενεργότητα της CK προβάλλεται για τους 25°C, τους 30°C ή τους 37°C
και σε U/l or µkat/l, ανάλογα µε το εάν ο αναλυτής έχει ρυθµιστεί να εµφανίζει
συµβατικές µονάδες ή µονάδες του διεθνούς συστήµατος.
Αφαιρέστε τη χρησιµοποιηµένη δοκιµαστική ταινία από τον αναλυτή Reflotron
και αποµακρύνετέ τη, ακολουθώντας τη διαδικασία που προβλέπεται από το
εργαστήριό σας.
Τιµές αναφοράς5,6
Αίµα, ορός, πλάσµα
Άνδρες
Γυναίκες
37°C
30°C
25°C
24–195 U/l
0,4–3,25 µkat/l
24–170 U/l
0,4–2,83 µkat/l
15–130 U/l
0,25–2,17 µkat/l
15–110 U/l
0,25–1,83 µkat/l
10–80 U/l
0,17–1,33 µkat/l
10–70 U/l
0,17–1,17 µkat/l
Χρησιµοποιούνται οι εξής συντελεστές µετατροπής θερµοκρασίας:
U/l (25°C) = 0,41 U/l · (37°C) ή µkat/l (25°C) = 0,41 µkat/l · (37°C)
U/l (30°C) = 0,63 U/l · (37°C) ή µkat/l (30°C) = 0,63 µkat/l · (37°C)
Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να ελέγχει κατά πόσον οι τιµές αναφοράς ισχύουν και
για τις οµάδες των δικών του ασθενών και, αν δεν ισχύουν, να ορίσει τις δικές του
τιµές αναφοράς. Για διαγνωστικούς σκοπούς τα αποτελέσµατα της CK θα πρέπει
πάντα να αξιολογούνται σε συνάρτηση µε το ιστορικό, την κλινική εξέταση και τα
αποτελέσµατα άλλων εργαστηριακών εξετάσεων του ασθενούς.
Εύρος µέτρησης - αραιώσεις 2
Εύρος µέτρησης: 37°C: 24,4 έως περίπου 1400 U/l ή 0,407 έως 23,33 µkat/l
30°C: 15,4 έως περίπου 900 U/l ή 0,256 έως 15 µkat/l
25°C: 10,0 έως περίπου 600 U/l ή 0,167 έως 10 µkat/l
Αν η καµπύλη της αντίδρασης δεν είναι γραµµική, αυτό υποδεικνύεται µε την
εµφάνιση ενός αστερίσκου εµπρός από το αποτέλεσµα.
Εάν η µετρηθείσα ενεργότητα της CK υπερβαίνει το εύρος µέτρησης του Reflotron
CK (όπως υποδεικνύεται µε το µήνυµα DILUTE CK στην οθόνη), τότε ο ορός
ή το πλάσµα µπορεί να αραιωθεί σε αναλογία 1:1 µε ορό ή πλάσµα γνωστής
ενεργότητας CK, A0. Η πραγµατική ενεργότητα Α της CK µπορεί να υπολογιστεί από
τη µετρηθείσα ενεργότητα Adil της CK µε εφαρµογή του τύπου: A = 2 Adil - A0.
Έλεγχος ποιότητας
Ανάλογα µε τις απαιτήσεις του κάθε εργαστηρίου ή τους ισχύοντες κανονισµούς,
για τον έλεγχο ποιότητας (σωστής λειτουργίας), χρησιµοποιήστε το Reflotron
Precinorm U ή το Reflotron Check. Τα αποτελέσµατα πρέπει να βρίσκονται µέσα στο
καθορισµένο εύρος τιµών. Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να καθορίζει τα διορθωτικά
µέτρα που θα πρέπει να ληφθούν στην περίπτωση που οι τιµές βρίσκονται εκτός
του καθορισµένου εύρους.
Χαρακτηριστικά λειτουργίας 2, 4
Τα δεδοµένα για το Reflotron CK καθορίστηκαν σε σειρά πολλαπλών µετρήσεων.
Τα περισσότερα δεδοµένα για της δοκιµασία βρέθηκαν στις εξής τιµές:
Επαναληψιµότητα (Repeatability - «ανακρίβεια εντός σειράς», within-series
imprecision):
ΣM (συντελεστής µεταβλητότητας) 3,5 %. Υλικά δείγµατος: ηπαρινισµένο αίµα,
ηπαρινισµένο πλάσµα, ορός.
Αναπαραγωγιµότητα (Reproducibility - «ανακρίβεια από µέρα σε µέρα», day-today imprecision:
ΣM στην περιοχή φυσιολογικών τιµών 3,7%, στην περιοχή παθολογικών τιµών
4,2%. Υλικό δείγµατος: οροί ελέγχου.
Ακρίβεια (Σύγκριση µεθόδων. U/l. Εξισώσεις ευθειών εξαρτήσεως, n δείγµατα,
συντελεστής συσχέτισης r): y = 1,001 x -5,157 και y = 1,005 x +4,609 αντίστοιχα
(n = 107 ή 99, r = 0,992 ή 0,997. Υλικό δείγµατος: ορός και ηπαρινισµένο πλάσμα,
µέθοδος αναφοράς x: Υγρό αντιδραστήριο κρεατινικής κινάσης, IFCC. Roche
Diagnostics).
Στο τέ λος αυτού του έν θετου εν τύπου θ α βρείτε τις επεξηγήσεις των
χρησιµοποιουµένων συµβόλων και έναν κατάλογο βιβλιογραφικών αναφορών.
Τελευταία ενηµέρωση: 2010-06
PL
GK
glicerol + ATP õõõú glicerolo-3-P + ADP
GPO
glicerol-3-P + O2 õõõú osforan dihydroksyacetonu + H2O2
POD
H2O2 + wskaźnik (zred.) õõõú wskaźnik (utl.) + H2O
Szybkość powstawania barwnika określa się metodą kinetyczną w temperaturze
37°C przy długości fali 642 nm; jest ona miarą aktywności badanego enzymu. Wynik
jest wyświetlany po 190 sekundach. Wynik jest wyświetlany dla temperatury 37°C,
30°C albo 25°C, w U/l lub w µkat/l, w zależności od ustawień aparatu.
Jeden test paskowy zawiera: fosforan kreatyny 116 µg; kinazę glicerolową (Bacillus
stearothermophilus) ≥ 1,0 U; glicerol 4,4 µg; oksydazę glicerolo-fosforanową
(mikroorganizmy rec.) ≥ 0,09 U; POD (chrzan) ≥ 1,7 U; oksydazę askorbinianową
(Cucurbita species) ≥ 0,41 U; ADP 4 µg; pentafosforan diadenozyny 1 µg;
2-(3,5-di-tert-butylo-4-hydroksyfenylo)-4-(5)-(9-julolidyno)-5-(4)-metylo-(1H)imidazol (wskaźnik) 9,4 µg; N-acetylocysteinę 11,3 µg; EGTA 16 µg; roztwór
buforowy.
Uwagi i przestrogi
Diagnostyka in vitro. Należy stosować normalne środki ostrożności obowiązujące
podczas pracy z odczynnikami laboratoryjnymi.
Przechowywanie i okres trwałości
Temperatura przechowywania: od +2°C do +8°C. Testów przechowywanych w tych
warunkach można używać do daty ważności wydrukowanej na opakowaniu lub
pojemniku. Po wyjęciu testu paskowego należy bezzwłocznie zamknąć pojemnik,
w przeciwnym razie pozostałe testy paskowe mogą stać się niezdatne do użytku
wskutek zetknięcia z pyłem, wilgocią itp.
Pobieranie i przetwarzanie próbek 2,3,6
Krew kapilarna; krew pełna pobrana do standardowych probówek, jak również
surowica uzyskana z takiej krwi; krew heparynizowana lub heparynizowane osocze.
Świeżą krew kapilarną lub żylną należy zbadać natychmiast po pobraniu. Jako
antykoagulantu wolno używać jedynie heparyny (najlepiej heparyny litowej).
Nie wolno używać żadnych innych antykoagulantów ani modyfikatorów. Krew
heparynizowaną przechowywaną w zamkniętych pojemnikach należy zbadać w
ciągu 8 godzin. Po strąceniu składników komórkowych można do badania wykorzystać
sklarowane osocze, pod warunkiem, że próbka nie zostanie wstrząśnięta. W razie
stosowania jednorazowych pojemników lub pipet kapilarnych pokrytych środkiem
przeciwkrzepliwym należy przestrzegać podanych przez producenta instrukcji
dotyczących trwałości. Surowica i osocze heparynizowane przechowywane w
zamkniętych pojemnikach mają trwałość 24 godzin w temperaturze od +20°C do
+25°C, a 7 dni w temperaturze od +4°C do +8°C.
Uwagi; ograniczenia metody – interferencje2,4
Toksyczne stężenia kwasu askorbinowego, dobesylanu i sulfametoksazolu mogą
prowadzić do zaniżenia wyników pomiaru aktywności CK. Poniższe czynniki nie
mają żadnego wpływu na wyniki w następujących zakresach zmierzonego stężenia
(kryterium: odzysk w granicach ±10% wartości początkowej): hematokryt do 50%,
hemoliza do 600 mg Hb/dl (0,37 mmol Hb/l), bilirubina w stężeniach do 20 mg/dl
(342 µmol/l), lipemia oraz 25 innych przetestowanych leków.
Kalibracja
W przypadku testu Reflotron CK charakterystyka funkcji służącej do przeliczania
natężenia światła odbitego na aktywność określana jest oddzielnie dla każdej serii
produkcyjnej za pomocą metoda płynnej kinazy kreatynowej, IFCC firmy Roche
Diagnostics w 37°C. Dane są automatycznie programowane w aparacie podczas
testów.
Procedura pomiaru
Niezbędne materiały dodatkowe (niezawarte w opakowaniu): aparat Reflotron,
pipeta Reflotron Pipette z końcówkami lub pipeta kapilarna, paski kontrolne oraz
standardowe wyposażenie laboratoryjne do pobierania krwi. Przed wykonaniem
testu należy uważnie zapoznać się z instrukcją obsługi aparatu Reflotron. Włącz
aparat. Gdy na wyświetlaczu pojawi się komunikat „READY” („GOTOWY”), wyjmij
test paskowy z pojemnika. Pojemnik należy natychmiast zamknąć korkiem
suszącym. Rozpakuj pasek (a) uważając, aby go nie zgiąć. Unikając bąbelków
powietrza, wciągnij badaną próbkę do pipety, na przykład pipety Reflotron Pipette.
Następnie, nie dotykając paska końcówką pipety (b), nanieś na środek czerwonego
obszaru (xx) kroplę próbki o objętości 30 µl (patrz ilustracja). Otwórz pokrywę lub
klapkę, w ciągu 15 sekund umieść test paskowy w prowadnicy i wsuń go poziomo
na miejsce (c). Zamknij pokrywę lub klapkę.
.
(b)
(a)
(c)
Zakres pomiarowy i rozcieńczanie próbek 2
Zakres pomiarowy: 37°C: 24,4 – ok. 1400 U/l lub 0,407 – 23,33 µkat/l.
30°C: 15,4 – ok. 900 U/l lub 0,256 – 15 µkat/l.
25°C: 10,0 – ok. 600 U/l lub 0,167 – 10 µkat/l.
Gwiazdka przed wynikiem na wyświetlaczu aparatu wskazuje nieliniową
charakterystykę reakcji. Jeżeli uzyskany wynik przekracza zakres pomiarowy testu
Reflotron CK (co wskazuje komunikat DILUTE CK na wyświetlaczu), surowicę i
osocze można rozcieńczyć w stosunku 1 + 1 surowicą lub osoczem o znanej
aktywności CK A0. Rzeczywistą aktywność CK, A, można obliczyć na podstawie
zmierzonej aktywności CK, Adil, stosując następujący wzór: A = 2 Adil – A0.
Açıklamalar; prosedür sınırlamaları – olumsuz etkileşimler 2,4
Toksik düzeyde askorbik asit, dobesilat ve sülfametoksazol konsantrasyonları,
CK aktivitelerinin düşük ölçülmesine yol açabilir. Aşağıda belirtilenlerin, test edilen
konsantrasyon aralıklarındaki sonuçlar üzerinde herhangi bir etkisi yoktur (kriter:
okunan değer ± referans değerinin % 10’u): % 50’ye kadar hematokrit, 600 mg Hb/dl’e
(0.37 mmol Hb/l) kadar hemoliz, 20 mg/dl’e (342 µmol/l) kadar bilirubin konsantrasyonları,
lipemi ve test edilen diğer 25 ilaç.
Kontrola jakości
Do kontroli jakości stosuje się paski kontrolne Reflotron Precinorm U lub Reflotron
Check, stosownie do indywidualnych wymogów danego laboratorium lub regulacji
prawnych. Wyniki muszą się mieścić w podanych granicach. Każde laboratorium
musi określić środki zaradcze stosowane w sytuacji, gdy wyniki nie mieszczą się
w dopuszczonym zakresie.
Charakterystyka testu2, 4
Dane dotyczące testu Reflotron CK zostały ustalone w serii pomiarów. Większość
pomiarów mieściła się w podanych zakresach.
Powtarzalność (odchylenia w serii):
CV (współczynnik zmienności) 3,5 %; materiały próbek:
heparynizowana krew, heparynizowane osocze, surowica:
Odtwarzalność (odchylenia z dnia na dzień):
CV 3,7 % w zakresie normalnym, 4,2 % w zakresie patologicznym; materiał próbki:
surowica kontrolna.
Dokładność (porównanie metod; U/l; równanie regresji; n próbek, współczynnik
korelacji r): odpowiednio y = y = 1,001 x -5,157 wzg. y = 1,005 x +4,609 (n = 107
wzg. 99; r = 0,992 wzg. 0,997; materiał próbki: heparynizowana osocze i surowica;
metoda referencyjna x: płynna kinaza kreatynowa, zgodnie z IFCC firmy Roche
Diagnostics).
TR
Kullanım Alanı
Kan, serum ya da plazma içindeki üre miktarının Reflotron
ile belirlenmesine yönelik test.
Sunum Şekli
15’lik test çubukları paketi, 5() 1 1126695
Klinik özellikler
Kreatin kinaz (CK), dimer yapılı bir enzimdir. Serum içindeki ölçülebilir toplam aktivite,
sitoplazma içinde yer alan dimer yapılı CK-MM (kas tipi), CK-BB (beyin tipi) ve CK-MB
(miyokart tipi) izoenzimlerinin ve ayrıca bunların sentez sonrası değişikliğe uğramış
biçimlerinin aktivitelerini ve makro-kreatin kinazların (makro CK) aktivitelerini kapsar.
CK ve CK izoenzim aktivitelerinin belirlenmesi, miyokard enfarktüsü ve ilerleyici seyir
gösteren Duchenne kas distrofisi gibi hastalıkların tanılanmasında ve izlenmesinde
kullanılır. Akut miyokard enfarktüsünde görülen gibi bir miyokard harabiyetinde,
tahrip olan miyokard hücrelerinden CK salınır. Birçok durumda, enfarktüsten 4 saat
sonra kandaki CK aktivitesinde bir artış saptanabilir. CK aktivitesi 12-24 saat sonra
tepe değerine erişir ve 3-4 gün sonra referans aralığına geri döner.
Test prensibi1
Numune, test çubuğuna uygulanmasının ardından, kan eritrositlerin plazmadan
ayrılması ile tepkime bölgesine akar. Kreatin fosfat ve adenozin difosfat, kreatinin
ve adenozin trifosfat oluşturmak üzere CK eşliğinde tepkimeye girer. Gliserokinaz
tarafından katalizlenen ikinci bir tepkimede, gliserol birinci tepkimenin ürünü
adenozin trifosfat ile tepkimeye girerek gliserol-3-fosfat oluşturur. Oluşan bu son
ürün, gliserol fosfat oksidaz eşliğinde oksiyen ile tepkimeye girerek dihidroksiaseton
fosfat ve hidrojen peroksit verir. Hidrojen peroksit, indikatörden indirgenen renksiz
ürünü, POD eşliğinde sözkonusu ürünün mavi biçimine yükseltger:
gliserol-3-P + ADP
POD
H2O2 + indikatör (indirgen) õõõú indikatör (yükseltgen) + H2O
Zakresy referencyjne5,6
Krew, surowica, osocze
Mężczyźni
Kobiety
37°C
30°C
25°C
24–195 U/l
0,4–3,25 µkat/l
24–170 U/l
0,4–2,83 µkat/l
15–130 U/l
0,25–2,17 µkat/l
15–110 U/l
0,25–1,83 µkat/l
10–80 U/l
0,17–1,33 µkat/l
10–70 U/l
0,17–1,17 µkat/l
Stosowane mnożniki przeliczeniowe dla temperatur:
U/l (25°C) = 0,41 U/l · (37°C) lub µkat/l (25°C) = 0,41 µkat/l · (37°C)
U/l (30°C) = 0,63 U/l · (37°C) lub µkat/l (30°C) = 0,63 µkat/l · (37°C)
Test prosedürü
Gereken ek malzemeler (cihazla birlikte verilmemiştir): Reflotron cihaz; Reflotron
Pipette ve pipet uçları veya kılcal pipet, karşılaştırma standartları, kan örneği almaya
yönelik alışılagelmiş laboratuar ekipmanları. Bir testi yapmadan önce, lütfen Reflotron
el kitabını okuyun ve cihazın kullanımına aşina olduğunuzdan emin olun. Cihazı açın.
Ekranda “READY” (HAZIR) mesajı belirdiğinde, kutudan bir test çubuğunu çıkarın. Kutu
üzerindeki nem alıcı tapayı hemen yerine takınız Çubuğu (a) eğmemeye dikkat
ederek ambalajından çıkarın. Sözgelimi Reflotron Pipette kullanarak numuneyi pipet
içine çekin (hava kabarcıklarının oluşmamasına dikkat ederek) ve kırmızı uygulama
alanının (xx) ortasına, gereken miktarda, yani bir damla damlatın- bunu yaparken
pipetin ucunun (b) uygulama alanına değmemesine dikkat edin. 30 µl (resme bakın).
Sürgülü kapağı açarak 15 saniye içinde test çubuğunu kılavuzun üzerine koyun ve
kapak yerine oturuncaya kadar yatay olarak kaydırın (c). Sürgülü kapağı kapatın.
(b)
(a)
37°C’lik bir sıcaklıkta, CK’nın enzim etkinliğinin bir ölçüsü olarak boyanın oluşumu
642 nm’de kinetik olarak ölçülür ve sonuç yaklaşık 190 saniye sonra görüntülenir.
Sonuç 37°C, 30°C ya da 25°C’lik bir sıcaklık için ve aletin nasıl ayarlandığında bağlı
olarak U/I ya da µkat/l cinsinden görüntülenir.
Testteki bileşenler: kreatin fosfat 116 µg; gliserol kinaz (Bacillus stearothermophilus)
≥ 1,0 U; gliserol 4,4 µg; gliserol fosfat oksidaz (microoorganisms rec.) ≥ 0,09 U;
POD (yaban turbu) ≥ 1,7 U; askorbat oksidaz (Cucurbita (kabak) türleri) ≥ 0,41 U;
ADP 4 µg; diadenozin pentafosfat 1 µg; 2-(3,5-di-tert-bütil-4-hidroksifenil)-4-(5)-(9julolidino)-5-(4)-metil-(1H)-imidazol (indikatör) 9,4 µg; N-asetilsistein 11,3 µg; EGTA
16 µg; tampon çözelti
Önlemler ve uyarılar
In vitro tanısal kullanım için. Laboratuvar reaktiflerini kullanırken, lütfen alışılagelmiş
önlemleri alın.
Saklama ve raf ömrü
+2°C ile +8°C arasındaki sıcaklıklarda saklayın. Bu koşullar altında test çubukları,
paket veya kutu üzerinde yazılı olan son kullanım tarihine kadar kullanılabilir. Bir test
çubuğunu çıkardıktan sonra, kutunun tapasını hemen takınız; aksi takdirde toz, nem
vb. gibi etmenler test çubuklarının kullanılmaz hale gelmelerine neden olabilir.
Numune alma ve işlem 2,3,6
Kapiler kan; standart örnek alma tüplerine alınmış tam kan ve bundan hazırlanan
serum; heparinli kan veya heparinli plazma. Taze kapiler kanı veya toplardamar
kanını, alındıktan hemen sonra kullanın. Antikoagülan olarak sadece heparin
(tercihen lityum heparinat) kullanın. Başka hiçbir tür antikoagülan veya katkı maddesi
kullanmayın. Kapalı tüplerin içinde tutulan heparinli kan 8 saat içinde kullanılmalıdır.
Código de lote / Código do lote / Αριθμός Παρτίδας /
Kod partii / Parti kodu
LOT
sanitario para diagnóstico in vitro / Dispositivo
Producto
médico para diagnóstico in vitro / In Vitro Διαγνωστικό
Ιατροτεχνολογικό προϊόν / Wyrób do diagnistyki In Vitro /
In vitro diagnostik tıbbi cihaz
l
El presente producto cumple con los requerimientos previstos
por la Directiva Europea 98/79 /CE de productos sanitarios
para el diagnóstico in vitro / Este produto preenche os
requisitos da Directiva Europeia 98/79/CE para dispositivos
médicos de diagnóstico in vitro / Το προϊόν αυτό πληροί τις απαιτήσεις της Ευρωπαϊκής Οδηγίας 98/79/ΕΚ για τα in
vitro διαγνωστικά ιατροτεχνολογικά βοηθήματα / Ten produkt
spełnia wymogi Dyrektywy Wspólnoty Europejskiej 98/79/EC
dotyczącej diagnostycznych urządzeń medycznych do
stosowania in vitro / Bu ürün, in vitro diagnostik tıbbi cihazlar
ile ilgili 98/79/ EC sayılı Avrupa Direktifinin gereklerini yerine
getirmektedir
5() Número de catálogo / Referência de catálogo / Αριθμός
καταλόγου / Numer katalogowy / Katalog numarası
"
Fabricante / Kαтασĸεuαστής / Producent / Üretici
0088
(c)
IVD
+2°C
Cihaz, teste özel manyetik kodu doğru okuduğunu onaylamak üzere CK mesajını
görüntüler. Sonucun görüntülenmesi için kalan süre, saniye olarak ekrana gelir.
CK aktivitesi, her test çubuğunun alt tarafında bulunan manyetik şerit aracılığıyla
cihaza girilen dönüştürme faktörleri ve bir fonksiyon kullanılarak alınan veri değerleri
sayesinde otomatik olarak hesaplanır. CK aktivitesi, 25°C, 30°C ya da 37°C için ve
cihazın konvansiyonel birimleri mi, yoksa SI birimlerini mi göstermeye ayarlanmış
olduğuna bağlı olarak U/l ya da µkat/l cinsinden görüntülenir. Kullanılmış test çubuğunu
Reflotron’dan çıkarın ve laboratuar prosedürünüzün gerektirdiği şekilde atın.
+30°C
Límite de temperatura (Conservar a) / Limites de temperatura
(Conservar a) / Περιορισμοί θερμοκρασίας (Αποθήκευση σε) /
Przestrzegać zakresu temperatury (Przechowywać w temp.) / Sıcaklık sınırlandırması (Saklama Sıcaklığı)
Referans aralıkları 5,6
Kan, serum, plazma.
Erkekler
Kadınlar
37°C
30°C
25°C
24–195 U/l
0,4–3,25 µkat/l
24–170 U/l
0,4–2,83 µkat/l
15–130 U/l
0,25–2,17 µkat/l
15–110 U/l
0,25–1,83 µkat/l
10–80 U/l
0,17–1,33 µkat/l
10–70 U/l
0,17–1,17 µkat/l
Kullanılan sıcaklık dönüştürme faktörleri:
U/l (25°C) = 0,41 U/l · (37°C) ya da µkat/l (25°C) = 0,41 µkat/l · (37°C)
U/l (30°C) = 0,63 U/l · (37°C) ya da µkat/l (30°C) = 0,63 µkat/l · (37°C)
Referans aralıklarının kendi hastalarına uygun olup olmadığını kontrol etmek ve gerekirse
kendi referans aralıklarını tespit etmek her laboratuvarın kendi sorumluluğundadır.
Tanısal amaçlı CK sonuçları daima hasta öyküsü, klinik muayene ve yapılmış olan
diğer muayenelerin ve testlerin sonuçlarıyla birlikte değerlendirilmelidir.
Ölçme aralığı ve seyreltme2
Ölçme aralığı: 37°C: 24,4 – yaklaşık 1400 U/l ya da 0,407 – 23,33 µkat/l
30°C: 15,4 – yaklaşık 900 U/l ya da 0,256 – 15 µkat/l
25°C: 10,0 – yaklaşık 600 U/l ya da 0,167 – 10 µkat/l
Doğrusal olmayan tepkime eğrileri ekranda, görüntülenen sonucun önündeki bir
asterisk işaretiyle belirtilir. Ölçülen CK aktivitesi Reflotron CK ölçüm aralığının üzerindeyse (ekranda DILUTE CK mesajıyla belirtilir), serum ya da plazma numunesi,
Ao gibi bilinen bir CK aktivitesine sahip serum ya da plazma ile 1+1 oranında seyreltilebilir. Gerçek CK aktivitesi A, aşağıdaki formül kullanılarak, ölçülen CK aktivitesi
Aseyr değerinden hesaplanabilir.
LOT
Kalite kontrol
Laboratuvarın kendi gerekliliklerini karşılamak veya yasal düzenlemelere uygunluk
sağlamak açısından, kalite kontrolde Reflotron Precinorm U ya da Reflotron Check
kullanın. Sonuçlar, önerilen aralıklar içinde yer almalıdır. Her laboratuvar, değerlerin
önerilen aralık dışında yer alması durumunda uygulanacak düzeltici önlemlerini
belirlemelidir.
Performans karakteristikleri 2, 4
Reflotron CK verileri bir dizi test ile saptanmıştır. Testlerde elde edilen verilerin büyük
bir bölümü verilen aralıklar içinde yer almıştır.
Tekrarlanabilirlik (test dizilerinin göz ardı edilebilir aralıkları içinde):
CV (varyasyon katsayısı) % 3,5; numuneler: heparinli kan, heparinli plazma, serum.
Çoğaltılabilirlik (test dizilerinin günden güne değişen göz ardı edilebilir aralıkları
içinde):
CV normal aralıkta % 3,7; patolojik aralıkta % 4,2; numune: karşılaştırma amaçlı
serumlar.
Doğruluk (metotların karşılaştırılması, U/l; regresyon denklemleri, n örnek, korelasyon
katsayısı r): sırasıyla y = 1,001 x -5,157 ve y = 1,005 x +4,609 (n = 107 veya 99;
r = 0,992 veya 0,997; numune: serum ve heparinli kan; referans metodu x: Kreatin
Kinaz sıvı metodu, IFCC Roche Diagnostics).
Kullanılan simgelerin açıklaması ve referans listesi için lütfen bu ekin sonuna bakın.
Son güncelleme: 2010-06
0088
Reflotron and Precinorm are trademarks of Roche.
© 2010, Roche Diagnostics
IVD
Roche Diagnostics GmbH
"
Sandhofer Strasse 116
D-68305 Mannheim
www.diavant.com
www.roche.com
+30°C
+2°C
pi_05960479001_01_INT_420x297_IFU.indd 2
Fecha de caducidad / Prazo de validade / Ημερομηνία λήξης /
Użyć przed / Son kullanma tarihi
}
Ostatnia aktualizacja ulotki: 2010-06
POD
gliserol-3-P + O2 õõõú dihidroksiaseton fosfat + H2O2
Na wyświetlaczu pojawi się komunikat UREA potwierdzający, że aparat Na wyświetlaczu
pojawi się komunikat CK potwierdzający, że aparat prawidłowo odczytał kod
magnetyczny testu paskowego. Na ekranie odliczana jest również liczba sekund
pozostała do wyświetlenia wyniku. Aktywność CK obliczana jest automatycznie
na podstawie odczytów oraz charakterystyki funkcji i mnożników przeliczeniowych
wprowadzonych do aparatu za pomocą paska magnetycznego umieszczonego
na spodniej stronie każdego testu paskowego. Aktywność CK podawana jest dla
temperatury 25°C, 30°C lub 37°C, w U/l lub w µkat/l, w zależności od tego, czy
w aparacie ustawiono wyświetlanie wyników w jednostkach konwencjonalnych,
czy w jednostkach układu SI. Po zakończeniu pomiaru test paskowy należy wyjąć
z aparatu Reflotron i utylizować go zgodnie z procedurą obowiązującą w danym
laboratorium.
Bibliografía / Referências / Bıβλıoγραфıĸά / Literatura / Referanslar
1
Braun HP et al. Cin Chem 1987; 33: 988
2
Daten der Erprobung; Roche Diagnostics GmbH
3
Guder WG et al. DG Klinische Chemie Mitt 1995; 26: 205
4
Hoerder M et al. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1991; 29: 691 – 696
5
Chemnitz G et al. Dtsch Med Wschr 1979; 104:257
6
Heil W et al. Reference Ranges for Adults and Children. Roche
Diagnostics 1999
Kalibrasyon
Yansıtma gücü değerlerini aktivitelere dönüştürmeye yönelik Reflotron CK fonksiyon
eğrisi, her ürün partisi için, 37°C’de, Roche Diagnostics’ten temin edilen Kreatin Kinaz
sıvı metodu, IFCC kullanılarak tanımlanır. Veriler test sırasında otomatik olarak cihaza
programlanır.
Objaśnienia symboli i spis literatury znajdują się na końcu niniejszej ulotki.
POD
gliserol + ATP õõõú
Postać handlowa
Opakowanie 15 testów paskowych, 5() 1 1126695
Zasada pomiaru
Próbka podana na test paskowy przepływa do strefy reakcji (w przypadku krwi
– po oddzieleniu erytrocytów od osocza). W obecności CK następuje reakcja
fosforanu kreatyny i dwufosforanu adenozyny (ADP), w wyniku której powstaje
kreatynina i trójfosforan adenozyny (ATP). W drugiej reakcji, katalizowanej przez
glicerokinazę, glicerol reaguje z powstałym ATP, a produktem reakcji jest glicerolo3-fosforan. W obecności oksydazy glicerolo-fosforanowej jest on utleniany do
fosforanu dihydroksyacetonu i nadtlenku wodoru. W obecności peroksydazy (POD)
nadtlenek wodoru przekształca bezbarwny wskaźnik redoks w formę utlenioną o
barwie niebieskiej:
CK
fosforan kreatyny + ADP õõõú kreatyna + ATP
Hücresel bileşenlerin çökelmesinden sonra, numunenin çalkalanmamasına özen
gösterilmişse, üstte yüzen plazma kullanılabilir. Kaplamalı tek kullanımlık tüpler veya
kılcal pipetler kullanılıyorsa, lütfen üretici firmanın vermiş olduğu stabilite verilerini
inceleyin. Kapalı kaplar içinde tutulan serum ya da heparinli plazma, +20°C ile +25°C
arasında 24 gün boyunca ve +4°C ile +8°C arasında 7 gün boyunca stabil kalır.
CK
kreatin fosfat + ADP õõõú kreatin + ATP
Zastosowanie
Test do oznaczania ilościowego CK (EC 2.7.3.2) we krwi,
surowicy lub osoczu przy użyciu aparatu Reflotron.
Aspekty kliniczne
Kinaza kreatynowa (CK) to enzym dimeryczny. Na całkowitą aktywność mierzoną
w surowicy składa się aktywność cytoplazmatycznych izoenzymów dimerycznych
CK-MM (typ mięśniowy), CK-BB (typ mózgowy) i CK-MB (typ sercowy) jak
również ich postsyntetycznie zmodyfikowanych postaci oraz aktywność kinazy
makrokreatynowej (makro CK). Oznaczanie ilościowe aktywności CK i izoenzymu
CK jest stosowane w diagnostyce i monitorowaniu zawału serca oraz chorób mięśni,
takich jak postępująca dystrofia mięśniowa Duchenne’a. W martwicy mięśnia
sercowego, występującej na przykład przy ostrym zawale serca, CK jest uwalniana
z uszkodzonych komórek mięśnia sercowego. We wczesnych przypadkach wzrost
aktywności CK we krwi można wykryć w 4 godziny od zawału. Aktywność CK osiąga
szczyt po 12–24 godzinach i powraca do zakresu referencyjnego po 3-4 dobach.
Każde laboratorium powinno sprawdzić, czy podane zakresy referencyjne są
właściwe dla badanej grupy pacjentów, a w razie konieczności wyznaczyć własne
zakresy referencyjne. Dla celów diagnostycznych wartości stężenia CK należy
zawsze interpretować z uwzględnieniem historii choroby, badań klinicznych oraz
wyników innych przeprowadzonych badań i testów.
05960479001(01)
R1 (black)
07.07.2010 12:31:56