padrão de bilirrubina - Gold Analisa Diagnóstica

PADRÃO DE BILIRRUBINA
Padrão de Bilirrubina para ser empregado na calibração das dosagens de Bilirrubina Total de Direta.
Cat. 332
MS 80022230156
MÉTODO
Colorimétrico (Sims-Horn).
FINALIDADE
Reagente empregado na calibração da dosagem de bilirrubinas no soro e
outros líquidos biológicos.
Somente para uso diagnóstico in vitro.
Técnica de Análise
Dosar o Padrão de Uso em triplicata, da seguinte maneira:
Branco
Padrão
Acelerador (1 do Kit de Bilirrubinas)
Tubos
1000 L
1000 L
Sulfanílico (2 do Kit de Bilirrubinas)
100 L
——–
Diazo Reagente
——–
100 L
Padrão de Uso
50 L
50 L
FUNDAMENTO
A bilirrubina contida no Padrão reage com o ácido sulfanílico diazotado
(Diazo Reagente), formando azobilirrubina de coloração vermelha cuja
absorbância, medida em 525 nm, é diretamente proporcional à
concentração de bilirrubina na amostra.
Homogeneizar. Esperar 5 minutos na temperatura ambiente.
Determinar as absorbâncias do tubo Padrão em 525 nm ou filtro verde (500
a 540 nm), acertando o Zero com o Branco.
QUALIFICAÇÕES DO PRODUTO
 O kit Padrão de Bilirrubina Cat. 332 é empregado juntamente com o kit
de Bilirrubinas Cat. 331 na padronização da dosagem das Bilirrubinas
Direta e Total.
Cálculos
Calcular a média das absorções do Padrão e o Fator de Calibração (FC)
CP = Concentração do Padrão = 10,0 mg/dL
FC = CP ÷ AP = 10,0 ÷ AP
IDENTIFICAÇÃO DOS REAGENTES
1- Diluente - Conservar em temperatura ambiente.
Contém dimetilsulfóxido (DMSO). O Diluente se solidifica em baixas
temperaturas. Neste caso, aquecer a 37 ºC e homogeneizar até a completa
liquefação.
2- Padrão de Bilirrubina - Conservar entre 2-8 ºC. Contém 0,3 mg de
bilirrubina que fica aderida de forma homogênea na parede do frasco.
A concentração do padrão é de 10,0 mg/dL quando dissolvido no Diluente (1).
O Padrão de Bilirrubina (2) é rastreável ao Standard Reference Material
(SRM) 916 do National Institute of Standards and Technology (NIST).
Exemplo
Se AP = 0,342
FC = 10,0 ÷ 0,342 = 29,2
ESTABILIDADE
Os reagentes são estáveis até o vencimento da data de validade impressa
no rótulo do produto e na caixa quando conservados na temperatura
recomendada, bem vedados e se evite a contaminação durante o uso.
A bilirrubina é muito sensível à luz direta ou indireta.
Manter o frasco de Padrão bem vedado e ao abrigo da luz.
REAGENTE NÃO FORNECIDO
Kit de Bilirrubinas (Gold Analisa Cat. 331). Contém os reagentes
necessários para a dosagem da bilirrubina.
Deverá ser adquirido separadamente.
MATERIAIS NECESSÁRIOS E NÃO FORNECIDOS
 Reagentes do kit Bilirrubinas - Cat. 331;
 Espectrofotômetro (leitura entre 500 e 540 nm);
 Tubos e pipetas;
 Cronômetro.
PRECAUÇÕES E CUIDADOS ESPECIAIS
 Aplicar os cuidados habituais de segurança na manipulação dos
reagentes e amostra biológica.
 Recomendamos o uso das Boas Práticas de Laboratórios Clínicos para a
execução do teste.
 O Diluente (1) contém dimetilsulfóxido (irritante). Não ingerir ou aspirar.
Evitar contato com a pele e mucosa.
 Descartar os reagentes e as amostras de acordo com as resoluções
normativas locais, estaduais e federais de preservação do meio ambiente.
CALIBRAÇÃO - DETERMINAÇÃO DO FATOR DE CALIBRAÇÃO
Preparo dos Reagentes
1- Padrão de Uso de 10,0 mg/dL
Transferir o Diluente (1) contido na ampola para um tubo de ensaio limpo e
seco. Medir 3,0 mL e adicionar ao frasco do Padrão (2), que contém 0,3 mg
de bilirrubina aderida às paredes do frasco.
Homogeneizar e deixar 5 minutos na temperatura ambiente para completa
solubilização. Homogeneizar novamente antes de usar.
A concentração do Padrão de Uso, assim preparado, é de 10,0 mg/dL.
Protegido da ação da luz, o Padrão dissolvido é estável por 12 horas entre
2-8 ºC e 1 mês a 20 ºC negativos.
Congelar e descongelar somente uma vez.
2- Diazo Reagente
Preparar o Diazo Reagente de acordo com o consumo da seguinte
maneira: Adicionar 10 µL do Nitrito (3) a 0,3 mL do Sulfanílico (2).
Misturar e usar no dia da preparação.
Os volumes dos reativos podem ser modificados proporcionalmente.
Notas
1- Manter o Padrão ao abrigo da luz durante a sua preparação e manuseio
porque a bilirrubina é degradada sob ação da luz direta ou indireta.
2- Os reativos Nitrito e Sulfanílico são componentes do kit de Bilirrubinas
(Gold Analisa Cat. 331).
3- Nova calibração deverá ser feita quando houver troca de lote dos
reagentes ou quando o Controle de Qualidade indicar.
OBSERVAÇÕES
1-A observação minuciosa da limpeza e secagem da vidraria, da
estabilidade dos reagentes, da pipetagem, da temperatura e do tempo de
reação é de extrema importância para se obter resultados precisos e
exatos.
2- Na limpeza da vidraria pode-se empregar um detergente neutro ou uma
solução ácida. A última lavagem deve ser feita com água destilada ou
deionizada.
3- A água utilizada nos laboratórios clínicos deve ser purificada utilizandose métodos adequados para as finalidades de uso. Colunas deionizadoras
saturadas liberam diversos íons, aminas e agentes oxidantes que
deterioram os reativos.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Doumas BT, Perry BW, Sasse EA, Straumfjord Jr JV. Clin Chem
1973:19:984.
2. Jendrassik, L. Biochem. Zentr., 297:81, 1938.
3. Malloy HT, Evelyn KA. J Biol Chem 1937;119:481.
4. Martineck RG Clin Chim Acta 1966;13:161.
5. Recommendations on a uniform Bilirrubin Standard. Clin Chem 1962:
8:405.
6. Sims FH, Horn C. Am J Clin Path. 1958;29:412.
7. GOLD ANALISA: Informe Técnico do Produto.
APRESENTAÇÃO
Cat.
332
Embalagem
Reagentes
Volume
Normal
Diluente
Padrão
1 x 3,5 mL
1 x 0,3 mg
TERMOS E CONDIÇÕES DE GARANTIA DA QUALIDADE DO PRODUTO
Lei n° 8.078 de 11-9-90 - Código de Defesa do Consumidor
A Gold Analisa garante a substituição, sem ônus para o consumidor, de
todos os produtos que comprovadamente apresentarem problemas
técnicos, desde que o usuário utilize equipamentos e materiais em boas
condições técnicas, siga rigorosamente o procedimento técnico e as
recomendações estabelecidas nas Instruções de Uso.
Nº do lote e data de validade: Vide Rótulos do Produto
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Edição: 04/13