Nome do exame: Angelman, Síndrome – Pré-natal

Nome do exame: Angelman, Síndrome – Pré-natal - Análise de Microdeleções por FISH, Teste
Citogenético
Código:
• SAP
Sinonímias:
• Síndrome de Angelman (SA)
Prazo para resultado:
• 25 a 40 dias.
Coleta, processamento, estocagem e envio do material biológico:
• Material: Vilosidades Coriônicas - Através da data da última menstruação ou ecografia recente,
verificar se a gestante está na 12ª semana de gestação, período ideal para a coleta de vilosidades
coriônicas, apesar desta poder ser coletada entre a 11ª e 13ª semana da gestação. Coletar 25 mg
de vilosidade coriônica numa seringa estéril, com meio de cultura de células (o meio de cultura de
células poderá ser fornecido pelo Genetika, mediante solicitação. Remeter o material refrigerado,
em gelo reciclável, sem que a amostra entre em contato direto com o gelo, via SEDEX. Sugerimos
que o material seja enviado IMEDIATAMENTE ao Genetika, devendo chegar em 24 horas, não
podendo ultrapassar o prazo de 48 horas após a coleta. APÓS este prazo as chances de
realização do exame são mínimas, devido a degradação do material.
• Material: Líquido Amniótico - Através da data da última menstruação ou ecografia recente,
verificar se a gestante está na 16ª semana de gestação, período ideal para a coleta do líquido
amniótico, apesar deste poder ser coletado da 15ª semana até o final da gravidez. Coletar 20 ml
de líquido amniótico, (descartar o primeiro ml coletado), colocando em 2 seringas plásticas
estéreis com 10 ml cada, numerando a 1ª e a 2ª. Vedar bem a seringa com agulha descartável e
estéril. Remeter o material na própria seringa prendendo a agulha com esparadrapo, refrigerado,
em gelo reciclável, sem que a amostra entre em contato direto com o gelo, via SEDEX. Sugerimos
que o material seja enviado IMEDIATAMENTE após a coleta, sendo ideal a chegada no Genetika
em 24 horas, não podendo ultrapassar o prazo de 48 horas após a coleta. APÓS este prazo as
chances de realização do exame são mínimas, pela degradação do material.
• Material: Sangue fetal - Através da data da última menstruação ou ecografia recente, verificar se a
gestante está entre a 18ª e 22ª semana de gestação, período ideal para a coleta de sangue fetal.
Colher 5ml de sangue fetal em seringa heparinizada (heparina sódica = Liquemine da Roche) o
suficiente para molhar as paredes da seringa. Deixar o sangue na própria seringa, tomando o
cuidado de trocar a agulha e mantê-la coberta com a capa plástica. Importante: o excesso de
heparina compromete a cultura, inviabilizando o estudo citogenético. Sugerimos que o
material seja enviado imediatamente ao Genetika, devendo chegar em 24 horas, não podendo
ultrapassar o prazo de 48 horas após a coleta (de 2ª a 5ª feira). Após este prazo as chances de
realização do exame são mínimas. Remeter o sangue fetal, assim que for possível, a temperatura
ambiente, ou em gelo reciclável, evitando o contato direto, via SEDEX. Evitar enviar exame Prénatal na 6ª feira, preferindo sempre enviar na 2ª feira.
Informações necessárias para envio deste exame:
• Dados da gestante: Nome, idade, sexo, endereço, telefone, dados clínicos, idade gestacional.
• Dados do Médico: Nome, endereço e telefone.
• Termo de Consentimento informado livre e esclarecido.
• Tipo de material coletado.
• Dados específicos para este exame.
Causas de rejeição de amostras:
• Coleta e/ou estocagem e/ou envio impróprio do material.
• Falta de documentos exigidos pelo Genetika.
• Falta de dados do médico e/ou do paciente.
Metodologia:
• Coleta de vilosidade coriônica ou amniócitos ou sangue fetal, seguida de Hibridização in situ por
Fluorescência (FISH). Análise de cromossomos metafásicos e núcleos em interfase para a
detecção de anormalidades e alterações cromossômicas, como microdeleções e
microduplicações, em 17p13.3. (Masuno M, et al. Am J Hum Genet. 59:441-443. 1995).
Estratégia da análise genética:
• teste pré-natal por FISH somente deve ser realizado após estabelecido que o mecanismo genético
que levou a SA em algum membro da família foi uma translocação em 15q11 e depois que o casal
já tenha passado pelo aconselhamento genético e compreendido o risco do feto vir a ser afetado.
Para a gestação de baixo risco onde não existe história familiar de SA, mas no qual se suspeita da
deleção 15q em estudos citogenéticos pré-natais de rotina, FISH também é indicado. Se a deleção
é corfirmada, estudos da origem dos cromossomos dos pais devem ser realizadas para determinar
se a deleção é de origem materna (feto com SA) ou paterna (feto com Síndrome de Prader-Willi).
Valores de referência:
• Normal: sem deleção
• Alterado: com deleção em um cromossomo 15q11.
Interpretação dos resultados:
• O diagnóstico é confirmado pela identificação de deleção 15q11. Um resultado alterado indica que
o feto possui mutação no(s) gene(s) para a Síndrome de Angelman.
• Um resultado normal não exclui totalmente a possibilidade deste diagnóstico.
Sensibilidade/especificidade/taxa de detecção da análise:
• Taxa de detecção de 99% dos casos de Síndrome de Angelman, causados por translocação ou
deleção.
Indicações do exame:
• Em gestações cujo feto apresentar no cariótipo, suspeita de deleção em 15q11.
• Em casos onde a SA na família é causada por translocações.
Exames relacionados e oferecidos pelo Genetika:
• Prader-Willi – Teste de Metilação, Código PRW, Setor de genética molecular.
• Prader-Willi – Análise de dissomia uniparental – pré-natal, Código A29, Setor de genética
molecular.
• Prader-Willi - FISH para microdeleção em 15q11-q13, Código SPW, Setor de citogenética.
• Prade-Willi - Análise de mutação no centro de "imprinting", Código DCI, Setor de genética
molecular.
• Angelman – Análise de dissomia uniparental, Código A01, Setor de genética molecular.
• Angelman - Análise do Padrão de metilação, Código ANG, Setor de genética molecular.
• Angelman - Sequenciamento do gene UBE3A, Código AGU, Setor de genética molecular.
• Cariótipo de Sangue Fetal, Código CFL, Setor de citogenética.
Resumo da doença:
• A Síndrome de Angelman (SA) é uma desordem que se caracteriza por deficiência mental
moderado a severo. Os pacientes com SA podem ter convulsões, ausência de fala, ataxia,
dificuldade no movimento das mãos (bater palmas), risadas impróprias, língua protusa e
prognatismo.
• A Síndrome ocorre em 1 em 12.000 a 1 em 20.000 nascimentos.
• A base genética da SA é heterogênea, tornando difícil o diagnóstico molecular desta desordem.
Cerca de 70% dos casos são o resultado de uma deleção no cromossomo 15q11-q13 materno.
Aproximadamente 7% dos casos receberam duas cópias do cromossomo 15 paterno e não de
suas mães, etiologia esta denominada de Dissomia uniparental paterna (DUP). Cerca de 3% dos
casos tem uma anormalidade no processo de impressão genética (“imprinting”), o qual causa não
expressão dos genes maternos na região específica do(s) gene(s) da SA. Outros 11% dos
pacientes SA tem uma mutação no gene UBE3A. Cerca de 14% tem rearranjos cromossômicos
•
envolvendo a região 15q11. E cerca de 10% dos casos de SA tem uma etiologia molecular que
não é determinada. Não há diferenças fenotípicas consistentes entre os pacientes com as
diferentes formas moleculares desta doença.
Detecção Pré-natal da maioria das alterações genéticas moleculares conhecidas na região 15q11q13 que causa SA é possível utilizando análise de DNA e/ou cromossômica/FISH das células
obtidas de amniocentese ou vilosidade coriônica.
Benefícios advindos da realização do exame:
• A Síndrome de Angelman não tem cura. Mas, se diagnosticada cedo, intervenções precoces
podem previnir complicações. Terapia física, acompanhamento neurológico e tratamento
ortopédico nos primeiros anos de vida podem ajudar na recuperação. Acompanhamento
fonoaudiológico e escolas especiais podem ser úteis no desenvolvimento da comunicação.
• Confirmar a hipótese diagnóstica de fetos com suspeita de SA.
• Prevenção de complicações futuras.
• Melhora na capacidade de prognosticar, baseada na comparação com outros casos da doença
descritos na literatura. Pacientes com grandes deleções, detectadas por FISH parecem ter quadro
mais graves.
• Permite o aconselhamento genético adequado.
• Em muitos casos o teste de FISH pode fornecer informação diagnóstica à um custo menor e com
menos risco do que outros procedimentos clínicos-laboratoriais.
• O teste diagnóstico pode ser realizado em indivíduos sintomáticos de qualquer idade.
Limitações do exame:
• Nem todos os fetos com SA são diagnosticados pelo método de FISH. Portanto um resultado
negativo não exclui definitivamente o diagnóstico.
• Somente a microdeleção 15q11 serão analisadas. Alterações em outros genes não serão
detectadas.
• Teste diagnóstico de um indivíduo pode ter implicações reprodutivas ou psicossociais negativas
para outros membros da família.
• Para estabelecer um diagnóstico definitivo pode ser necessário mais que um tipo de teste
genético.
• Teste de FISH nem sempre é a melhor maneira de confirmar um diagnóstico clínico da SA.
• Transfusões sangüíneas realizadas até 60 dias antes do teste podem gerar interpretação
inconclusiva.
• Todo procedimento de diagnóstico Pré-natal tem um risco à gravidez, portanto, o consentimento
informado é exigido em conjunto com o aconselhamento genético.
Vantagens competitivas do Genetika:
• Genetika é o primeiro laboratório brasileiro de apoio especializado em genética a obter o
Certificado de Qualidade ISO 9001/00 e possui mais de uma década de experiência na área
de genética, já tendo realizado milhares de exames laboratoriais de genética.
• Aconselhamento genético pré e pós exame, feito por Médico especialista em Genética Clínica.
• Dedica toda a sua infra-estrutura para realizar exclusivamente exames da área de genética médica
e Biologia Molecular.
• O resultado dos exames são facilmente compreendidos, e no laudo constam a metodologia
utilizada, interpretação e conclusão. O diretor do laboratório revisa todos os resultados e assina o
laudo final. Os resultados são imediatamente transmitidos por telefone ou enviados via fax, e-mail
e/ou correio para o médico solicitante, sempre respeitando a privacidade e o sigilo das partes
envolvidas no teste.
• Possui profissionais qualificados para a realização do exame, com Bioquímicos e Biológos com
Mestrado e Doutorado que realizam o processamento das amostras e analisam os resultados
obtidos.
• Laboratório oferece uma tabela de exames com indicação dos testes mais adequados para cada
tipo de caso (por exemplo: um teste para múltiplos agentes infecciosos, teste para uma mutação
específica do gene, um painel de mutações ou o seqüenciamento completo do gene).
• As informações sobre os exames são facilmente obtidas via fax, telefone, Serviço de Atendimento
ao Cliente-SAC (ligação gratuita) ou pela Internet (web site ou e-mail).
•
Possui laboratórios conveniados nas mais diversas localidades do País, que estão treinados para
realizar a coleta e envio das amostras biológicas à sede do Genetika.
Especialidades médicas com interesse no exame:
• Clínica Médica
• Dermatologia
• Dermatologia Pediátrica
• Fonoaudiologia
• Gastroenterologia
• Gastroenterologia Pediátrica
• Neurologia
• Neurologia Pediátrica
• Obstetrícia
• Odontologia
• Ofatalmologia Pediátrica
• Ortopedia
• Ortopedia Pediátrica
• Pediatria
• Psiquiatria
• Psiquiatria Pediátrica
Referências bibliográficas:
• Boyes L, Wallace AJ, Krajewska-Walasek M, Chrzanowska KH, Clayton-Smith J, Ramsden S.
Detection of a deletion of exons 8-16 of the UBE3A gene in familial Angelman syndrome using a
semi-quantitative dosage PCR based assay. Eur J Med Genet. May 19, 2006.
• Procter M, Chou LS, Tang W, Jama M, Mao R. Molecular diagnosis of Prader-Willi and Angelman
syndromes by methylation-specific melting analysis and methylation-specific multiplex ligationdependent probe amplification. Clin Chem. Jul;52(7):1276-83, 2006.
• Capkova CP, Vrtel R, Santava A, Zapletalova J, Krsiakova J, Hyjanek J, Santavy J. Molecular
genetic study of causes of the Prader-Willi and Angelman syndrome. Cas Lek Cesk. 144(2):113-8,
2005.
• Lucifero D, Chaillet JR, Trasler JM. Potential significance of genomic imprinting defects for
reproduction and assisted reproductive technology.Hum Reprod Update. Jan-Feb;10(1):3-18,2004.
• Flori E, Biancalana V, Girard-Lemaire F, Favre R, Flori J, Doray B, Louis Mandel J. Difficulties of
genetic counseling and prenatal diagnosis in a consanguineous couple segregating for the same
translocation (14;15) (q11;q13) and at risk for Prader-Willi and Angelman syndromes. Eur J Hum
Genet. Mar;12(3):181-6, 2004.
• Clayton-Smith J, Lann L. Angelman syndrome: a review of the clinical and gentics aspects. J Med
Genet. Feb;40(2):87-95, 2003.
• Constantinou M, Kaluzewski B, Helszer Z, Zajac E, Nowacka J. Prenatal detection of maternal
UPD15 in a new case with i(15p) by Timing Replication Test (TRT) and methylation analysis.
J Appl Genet. ;44(2):209-18, 2003.
• Dan B, Cheron G. Angelman syndrome: clinical and genetic model. Rev Neurol. May;159(5 Pt
1):499-510, 2003.
• Guerrini R, Carrozo R, Rinaldi R, Bonanni P. Angelman syndrome: etiology, clinical features,
diagnosis and management of symptoms. Paediatr Drugs. 5(10):647-61, 2003.
• Horsthemke B, et al. Problems in detecting mosaic DNA methylation in Angelman syndrome. Eur J
Hum Genet. Oct 1,11-21, 2003.
• Molfetta A, Silva-Jr WA, Pina-Neto JM. Clinical, cytogenetics and molecular analysis of Angelman
syndrome. Genet Coun. 14(1):45-46, 2003.
• Monzon FA, Kant J, Sanders E, Bay C. Gene symbol: UBE3A .Disease: Angelman syndrome. Hum
genet. Sep;113(4):367, 2003.
• Verma IC, Saxena R, Lall M, Bijarnia S, Sharma R. Genetic counseling and prenatal diagnosis in
India--experience at Sir Ganga Ram Hospital. Indian J Pediatr. Apr;70(4):293-7, 2003.
• Hall, B. D. : Adjunct diagnostic test for Angelman syndrome: the tuning fork response. Am. J. Med.
Genet. 109: 238-240, 2002.
•
•
•
Seemanova E. Microdeletion syndromes Cas Lek Cesk. Jun 21;141(12):363-70. Czech, 2002.
Smith A, Robson L, St Heaps L. Use of two FISH probes provides a cost effective, simple protocol
to exclude na imprinting centre defect in routine laboratory testing for suspected Prader-Willi and
Angelman syndrome. Ann Genet. Oct-Dec;45(4):189-91, 2002.
Vogels A, Fryns JP. The Prader-Willi syndrome and the Angelman syndrome. Genet Couns.
13(4):385-96, 2002.