Vogal and Johnson Agar, Ágar Vogel Johnson, Product
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ÁGAR VOGEL JOHNSON – VOGEL AND JOHNSON AGAR (7207) Uso Previsto O Ágar Vogel Johnson é utilizado para o isolamento de Staphylococcus. Sumário e Explicação do Produto Staphylococcus coagulase-positivos, principalmente Staphylococcus aureus, estão entre os micro-organismos que causam a deterioração ou mudanças químicas em cosméticos.1 Para isolar Staphylococcus coagulase-positivos, fermentadores de manitol, Vogel e Johnson2 modificaram o Ágar Telurito-Glicina, desenvolvido por Zebovitz, Evans e Niven.3 A modificação incluiu o aumento de manitol e adição de um indicador de pH. O Ágar Vogel Johnson seleciona e diferencia Staphylococcus coagulase-positivos que fermentam manitol e reduzem Telurito.4 O Ágar Vogel Johnson (VJ) é indicado para testes padrões em cosméticos,1,5 artigos farmacêuticos6 e suplementos nutricionais.7 Princípios do Procedimento A Digestão Enzimática da Caseína fornece nitrogênio e minerais ao Ágar Vogel Johnson. O Extrato de Levedura é a fonte de vitamina para estimular o crescimento bacteriano. O Manitol é o carboidrato fermentável. Fosfato Dipotássico é o agente tamponante. Cloreto de Lítio, Glicina e Solução de Telurito de Potássio 1% inibem o crescimento da maioria dos micro-organismos, exceto Staphylococcus. O Vermelho de Fenol é o indicador de pH. O ágar é o agente solidificante. Fórmula / Litro Digestão Enzimática de Caseína ............................................... 10 Extrato de Levedura.................................................................. 5 g Manitol .................................................................................... 10 g Fosfato Dipotássico .................................................................. 5 g Cloreto de Lítio .......................................................................... 5 g Glicina ..................................................................................... 10 g Vermelho de Fenol............................................................. 0,025 g Ágar ........................................................................................ 15 g pH Final: 7,2 ± 0,2 a 25°C Suplemento # 7989 Solução de Telurito (1%) Chapman Telurito de Potássio, 100 mg 10 mL A fórmula pode ser ajustada e/ou suplementada conforme necessário para atender as especificações de desempenho. Precauções 1. Somente para o uso em laboratório. 2. PREJUDICIAL. Prejudicial se ingerido, inalado ou absorvido através da pele. Irritação da pele pode ser severa. Pode causar efeitos no sistema nervoso central. Modo de Preparo 1. Suspenda 60 g do meio em 1 L de água purificada. 2. Aqueça, agitando frequentemente e ferva por 1 minuto para dissolver completamente o meio. 3. Autoclave a 121°C por 15 minutos. 4. Resfrie a 45 - 50°C e adicione 2 frascos (20 mL) do Suplemento Solução de Telurito (1%) Chapman (7989) ou 20 mL da Solução estéril de Telurito de Potássio 1%. Nota: Não aqueça o meio após a adição da Solução de Telurito. 5. Misture completamente antes de dispensar. Especificações de Controle de Qualidade Aparência Desidratado: O pó é homogêneo, fluxo livre e esbranquiçado a bege a bege rosado. Aparência Preparado: O meio preparado apresenta traços a levemente turvo e laranja avermelhado. PI 7207, Rev 4, Março 2012 Resposta Esperada de Cultivo: Resposta de cultivo do Ágar Vogel e Johnson incubado aerobiamente a 35 ± 2°C e examinados para crescimento após 18 - 48 horas. Micro-organismo Enterococcus faecalis ATCC® 29212 Inóculo Aproximado (UFC) ~ 1000 Escherichia coli ATCC® 25922 Staphylococcus aureus ATCC® 25923 ~ 1000 10 - 300 Staphylococcus epidermidis ATCC® 12228 ~ 1000 Resultados Esperados Resposta Reação Inibição parcial a completa Inibição Crescimento Inibição parcial a completa Colônias pretas --Colônias pretas com halo amarelo Colônias pretas Os organismos listados são os mínimos que devem ser avaliados para o teste de controle de qualidade. Procedimento do Teste Refira-se às referências apropriadas para o isolamento e identificação de Staphylococcus. Resultados Cepas de S. aureus coagulase-positivo reduzem o Telurito e formam colônias pretas no meio. Essas cepas tipicamente fermentam o manitol e exibem halos amarelos ao redor das colônias pretas. A maioria dos micro-organismos além de Staphylococcus coagulase-positivo é inibida durante as primeiras 24 horas de incubação. Após 24 horas, outros organismos, especialmente Streptococcus fecal e S. epidermidis coagulase-negativo podem crescer. Armazenamento Armazene o frasco contendo o meio desidratado devidamente fechado entre 2 - 30°C. Uma vez aberto e fechado novamente, coloque o frasco em um ambiente de baixa umidade e na mesma temperatura de armazenamento. Proteja contra a umidade e luz mantendo o frasco firmemente fechado. Validade Refira-se à data de validade no frasco. O meio desidratado deve ser descartado se não fluir livremente ou se houver mudança na coloração original. A validade se aplica ao meio em sua embalagem intacta quando armazenado como indicado. Limitações do Procedimento 1. Algumas cepas podem apresentar um crescimento fraco ou ausência de crescimento neste meio. 2. É recomendado preparar o Ágar Vogel Johnson na noite anterior antes da inoculação. Embalagem Ágar Vogel Johnson N° Código Solução de Telurito (1%) Chapman 7207A 7207B 7207C 7989 500 g 2 kg 10 kg 10 mL PI 7207, Rev 4, Março 2012 Referências 1. 2. 3. 4. 5. 6. www.fda.gov/Food/ScienceResearch/LaboratoryMethods/BacteriologicalAnalyticalmanualBAM/default.htm. Vogel, T. A., and M. Johnson. 1960. A modification of the Tellurite-Glycine Medium for use in the identification of Staphylococcus aureus. Public Health Lab. 18:131. Zebovitz, E., J. B. Evans, and C. F. Niven, Jr. 1955. Tellurite-Glycine Agar; a selective plating medium for the quantitative detection of coagulase-positive staphylococci. J. Bacteriol. 70:686. MacFaddin, J. F. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-maintenance of medical bacteria, vol.1, p. 846-849. Williams & Wilkins, Baltimore, MD. Curry, A. S., J. G. Graf, and G. N. McEwen, Jr. (eds.). 1993. CTFA microbiology guidelines. The Cosmetic, Toiletry, and Fragrance Association, Washington, D.C. United States Pharmacopeial Convention. 1995. The United States pharmacopeia, 23rd ed. The United States Pharmacopeial Convention, Rockville, MD. Informação Técnica Contate a Neogen do Brasil para Serviços Técnicos ou questões envolvendo a preparação ou desempenho do meio de cultura desidratado no telefone 19.3935-3727. Contate a Acumedia Manufacturers, Inc. para Serviços Técnicos ou questões envolvendo a preparação ou desempenho do meio de cultura desidratado no telefone +1 (517)372-9200 ou fax +1 (517)372-2006. PI 7207, Rev 4, Março 2012
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