Cholesterol CP ABX Pentra Cholesterol CP

ABX Pentra
Cholesterol CP
Cholesterol CP
Reagente de diagnóstico para a determinação
quantitativa in-vitro de Colesterol no soro ou
no plasma.
2004/05/19
A93A00146 D
A11A01634
99 ml
Interesse clínico
O colesterol é um componente das membranas celulares e um precursor
das hormonas esteróides e dos ácidos biliares sintetizados pelas células do corpo e absorvido com a comida (1). O colesterol é transportado
no plasma através das lipoproteínas, nomeadamente complexos entre
os lípidos e as apolipoproteínas (1). Há quatro classes de lipoproteínas:
lipoproteínas de alta densidade (HDL), lipoproteínas de baixa densidade (LDL), lipoproteínas de densidade muito baixa (VLDL) e os quilomícrons. Enquanto que o LDL está envolvido no transporte do
colesterol para as células periféricas, o HDL é responsável pela absorção do colesterol pelas células. As quatro classes diferentes de lipoproteínas demonstram uma nítida relação com a arteriosclerose coronária
(1). O LDL-colesterol (LDL-C) contribui para a formação de placa aterosclerótica no interior da íntima das artérias e está fortemente associado à doença cardíaca coronária (CHD) e à mortalidade a ela
associada. Mesmo se o colesterol total estiver dentro dos valores normais, uma concentração aumentada de LDL-C indica alto risco. O HDLC tem um efeito protector impedindo a formação de placas e apresenta
uma relação inversa à prevalência de CHD. De facto, valores baixos de
HDL-C constituem um factor de risco independente. A determinação do
nível de colesterol total (TC) do indivíduo é utilizada para fins de despistagem enquanto que para uma melhor avaliação do risco é necessário medir também o HDL-C e o LDL-C.
Nos últimos anos, vários ensaios clínicos controlados pela dieta,
alteração do estilo de vida e/ou diferentes medicamentos (em especial
inibidores da HMG CoA reductase [estatinas]) demonstraram que
baixando o colesterol total e os níveis de LDL-C, o risco de CHD diminui
drasticamente (2).
ABX Diagnostics
BP 7290 - 34184 Montpellier
cedex 4 - France
Reagentes
O ABX Pentra Cholesterol CP está pronto a utilizar.
Reagente: Tampão de Good
Fenol
4-Aminoantipirina
Colesterol esterase
Colesterol oxidase
Peroxidase
Azida sódica
pH 6,7
50 mmol/l
5 mmol/l
0,3 mmol/l
(CHE)
³ 200 U/l
(CHO)
³ 50 U/l
(POD)
³ 3 kU/l
0,95 g/l
O ABX Pentra Cholesterol CP deve ser utilizado de acordo com esta
nota de reagente. A ABX Diagnostics não se responsabiliza pelo seu
desempenho caso seja utilizado de outro modo.
Preparação
Método
’’CHOD-PAP’’: teste enzimático fotométrico.
Determinação do colesterol após a oxidação e a hidrólise enzimática
(3,4). O indicador colorimétrico é a quinoneimina que é formada a
partir de 4-aminoantipirina e fenol pelo peróxido de hidrogénio sob a
acção catalítica da peroxidase (Reacção de Trinder) (3).
Colesterol éster + H2O
CHE
Colesterol + Ácido gordo
Retire a tampa da cassete e coloque-a no compartimento de refrigeração de reagentes do ABX Pentra 400.
Caso seja necessário, retire a espuma com uma pipeta de plástico.
Calibrador
Para calibrar, utilize:
ABX Pentra MultiCal, Refª A11A01652 (não incluído)
10 x 3 ml (produto liofilizado)
Controlo
Colesterol + O2
CHO
2H2O2 + 4-Aminoantipirina + Fenol
Colesterol-3-ona + H2O2
POD
Quinoneimina + 4H2O
(CHE = Colesterol Esterase, CHO = Colesterol Oxidase, POD = Peroxidase)
S.A. au capital de 44.000.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
Para controlo de qualidade interno, utilize:
ABX Pentra N Control, Refª A11A01653 (não incluído)
10 x 5 ml (produto liofilizado)
ABX Pentra P Control, Refª A11A01654 (não incluído)
10 x 5 ml (produto liofilizado)
Cada controlo deve ser testado diariamente e/ou após cada calibração.
A frequência dos controlos e os intervalos de confiança devem corresponder às directrizes do laboratório e às directivas específicas de cada
país. Os resultados devem ficar dentro dos limites do intervalo de confiança definido. Cada laboratório deve estabelecer um procedimento a
seguir se os resultados excederem estes limites de confiança.
ABX Pentra
Cholesterol CP
Materiais necessários mas não fornecidos
Desempenho do ABX Pentra 400
• Analisador de química clínica
• Equipamento standard de laboratório.
Os dados de desempenho enumerados em seguida foram obtidos a partir do analisador ABX Pentra 400.
Amostra
Número de testes: 388 testes
• Soro.
• Plasma de heparina ou Plasma de EDTA.
Estabilidade dos reagentes no equipamento:
Depois de aberta, a cassete de reagente colocada no compartimento de
refrigeração do ABX Pentra 400 mantém-se estável durante 48 dias.
Estabilidade: 7 dias
a 20 -25°C
7 dias
a
4 -8°C
3 meses a
-20°C
Valores de referência (5)
Desejáveis:
< 200 mg/dl (5,2 mmol/l)
Risco elevado “borderline”: 200 -240 mg/dl (5,2 -6,2 mmol/l)
Alto risco:
> 240 mg/dl (> 6,2 mmol/l)
A European Task Force on Coronary Prevention recomenda reduzir a
concentração de TC para menos de 190 mg/dl (5,0 mmol/l) e o LDLcolesterol para menos de 115 mg/dl (3,0 mmol/l) (2).(
Armazenamento e Estabilidade
Os reagentes, nas cassetes por abrir, mantêm-se estáveis até à data de
validade indicada no rótulo, se armazenados entre 2 e 8 °C, ao abrigo
da luz e evitando-se contaminação.
Estabilidade após a abertura: consulte o parágrafo “Desempenho do
ABX Pentra 400”.
Não congelar os reagentes.
Nota: Deve mencionar-se que a medição não é influenciada por
alterações de cor ocasionais desde que a absorvância do reagente seja
< 0,3 a 546 nm.
Procedimento do ensaio
Encontram-se disponíveis a pedido, instruções de teste para outros
sistemas automáticos diferentes do ABX Pentra 400.
Gestão de resíduos
1. É favor consultar os requisitos da legislação local.
2. Este reagente contém azida sódica (0,95 g/l) como conservante.
Uma vez que a azida sódica pode reagir com o chumbo ou com o
cobre formando azidas de metal explosivas, deve eliminar-se este
reagente lavando com grandes quantidades de água.
Precauções gerais
1. Este reagente destina-se apenas a diagnóstico in-vitro profissional.
2. Não engolir. Evitar o contacto com a pele e com as membranas
mucosas.
3. Tome as precauções necessárias relativamente à utilização de
reagentes laboratoriais.
4. As cassetes de reagente são descartáveis e devem ser eliminadas
de acordo com os requisitos da legislação local.
5. Consulte as MSDS (folhas de dados de segurança do material)
relacionadas com o reagente.
S.A. au capital de 44.000.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 000 42 - APE 332 B
Volume de amostra: 3 ml/teste
Limite de detecção:
O limite de detecção é determinado de acordo com o protocolo Valtec
(6) e é igual a 0,09 mmol/l.
Exactidão e Precisão:
• Repetibilidade (precisão no mesmo ciclo)
3 amostras de concentrações baixa, média e alta e 2 controlos são
testados 20 vezes de acordo com as recomendações especificadas no
protocolo Valtec (6).
Controlo normal
Controlo patológico
Amostra 1
Amostra 2
Amostra 3
Valor médio mmol/l
2,92
4,81
3,03
4,93
10,04
% CV
0,82
0,74
1,21
0,53
0,62
• Reprodutibilidade (precisão ciclo a ciclo)
2 amostras de níveis baixo e alto e 2 controlos são testados em
duplicado durante 20 dias (2 séries por dia) de acordo com as
recomendações incluídas no protocolo NCCLS, EP5-A (7).
Controlo normal
Controlo patológico
Amostra 1
Amostra 2
Valor médio mmol/l
2,83
4,74
4,40
6,45
% CV
2,96
2,34
2,80
3,01
Linearidade e Gama de Medição:
A linearidade do reagente é determinada de acordo com as recomendações incluídas no protocolo NCCLS, EP6-P (8).
Linearidade baixa: 0,09 mmol/l
Linearidade elevada: 15 mmol/l
Correlação:
102 amostras de pacientes estão correlacionadas com um reagente já
comercializado tomado como referência de acordo com as
recomendações incluídas no protocolo NCCLS, EP9-A2 (9).
A equação da linha alométrica obtida é:
Y = 1,00 x - 0,4 com um coeficiente de correlação r2 = 0,97.
Interferências:
Hemoglobina:
Triglicéridos:
Bilirrubina total:
Bilirrubina directa:
Não se observa influência significativa até 195 mmol/l
Não se observa influência significativa até 7 mmol/l
Não se observa influência significativa até 350 mmol/l
Não se observa influência significativa até 117 mmol/l
ABX Pentra
Cholesterol CP
Estabilidade de calibração:
O reagente é calibrado no Dia 0. A estabilidade da calibração é verificada testando 2 amostras de controlo.
A estabilidade da calibração é de, pelo menos, 8 dias.
Nota: Recomenda-se uma recalibração quando os lotes de reagente
mudam e quando os resultados do controlo de qualidade ficam fora do
intervalo de valores estabelecido.
Factor de conversão:
mmol/l x 0,387 = g/l
mmol/l x 38,7 = mg/dl
Instruções do teste: 3.00
Aviso
É da responsabilidade do utilizador verificar se este documento se
aplica ao reagente utilizado.
Bibliografia
1. Rifai N., Bachorik P.S., Albers J.J. Lipids, lipoproteins and
apolipoproteins. In: Burtis C.A., Ashwood E.R., editors. Tietz
Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W.B. Saunders
Company; 1999. p. 809-861.
2. Recommendation of the Second Joint Task Force of European and
other Societies on Coronary Prevention. Prevention of coronary
heart disease in clinical practice. Eur. Heart J. 1998; 19, 14341503.
3. Artiss J.D., Zak B. Measurement of cholesterol concentration. In:
Rifai N., Warnick G.R., Dominiczak M.H., eds. Handbook of
lipoprotein testing. Washington: AACC Press, 1997, 99-114.
4. Deeg R., Ziegenhorn J. Kinetic enzymatic method for automated
determination of total cholesterol in serum. Clin. Chem. 1983; 29,
1798-1802.
5. Schaefer E.J., McNamara J. Overview of the diagnosis and
treatment of lipid disorders. In: Rifai N., Warnick G.R., Dominiczak
M.H., eds. Handbook of lipoprotein testing. Washington: AACC
press, 1997, 25-48.
6. Vassault A., Grafmeyer D. Naudin C. et al., Protocole de validation
de techniques (document B), Ann. Biol. Clin., 1986, 44, 686-745.
7. Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices,
Approved Guideline, NCCLS document EP5-A, Vol. 19, No. 2,
february 1999.
8. Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical Methods,
Proposed Guideline, NCCLS document EP6-P, Vol. 6, No. 18,
september 1986.
9. Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples,
Approved Guideline, 2nd ed., NCCLS document EP9-A2, Vol. 22, No.
19, 2002.
S.A. au capital de 44.000.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B