Identificação do gene da longevidade de Geochelone gigantea

Identificação do gene da longevidade de
Geochelone gigantea
Drago, M.1; Mateus,C.2; Monteiro,H.3
Introdução
A tartaruga-gigante-de-aldabra (Geochelone gigantea), originária das ilhas de Aldabra, tem uma
longevidade média de 150 anos e a tartaruga-estrelada-de-Madagáscar (Geochelone radiata),
originária de Madagáscar, sobrevive em média 80 anos. Comparando genéticamente estas duas
espécies é possível determinar qual o gene responsável pela maior longevidade de uma em
relação à outra.
Fig.1 - Geochelone gigantea
Objectivos
Com este projecto pretendemos isolar o(s) gene(s) da longevidade, os quais se expressam
apenas na espécie Geochelone gigantea. As espécies escolhidas são do mesmo género, o
que nos permite obter o mínimo de genes diferentes, os quais são potenciais responsáveis
pela longevidade.
Fig.2 - Geochelone radiata
Metodologia
Isolar e sequenciar o(s) gene(s)
Extracção de células da medula
óssea de Geochelone gigantea e
Geochelone radiata
Extracção de mRNA de
cada célula
Identificar os genes que se
expressam unicamente na
espécie Geochelone gigantea
Síntese de cDNA
Microarrays
Sonda molecular específica
dos genes
Amplificação de cDNA por PCR
Hibridação da sonda com
o banco genómico
Sequenciação dos genes
Testar o(s) gene(s)
cDNA sintetizado anteriormente
Transfecção de tecidos
Amplificação de cDNA por PCR
Fig.3 - Microarrays
Cronograma
1º mês
2º mês
Recolha de dados
3º mês
4º mês
5º mês
6º mês
Isolamento e sequenciação de genes
7º mês
8º mês
9º mês
10º mês
11º mês
12º mês
Teste de genes
Financiamento
Recursos Humanos
Deslocamento
36.000 €
4.500 €
Aluguer de Laboratório
14.400 €
Total
54.900 €
Resultados esperados
Pretende-se isolar e identificar o(s) gene(s) responsáveis pela longevidade da Geochelone gigantea, ausente(s) na Geochelone radiata. A técnica de
microarrays permite-nos obter os genes que estão a ser expressos apenas na espécie de maior longevidade, os quais são potenciais responsáveis por esta
característica. Após a transfecção de tecidos com os mesmos obteremos tecidos com maior duração, os quais contêm os genes que procuramos.
Os genes seleccionados podem servir como referências futuras, podendo vir a ser utilizados noutras células, tecidos ou organismos, com o objectivo de
aumentar a sua longevidade.
Bibliografia
Kent, G., Carr, R.; 2001; Comparative Anatomy of the Vertebrates; 9ª edição; Mcgraw-Hill; New York.
Glick, B., Pasternak, J.; 2003; Molecular Biotechnology Principles and Applications of Recombinant DNA; 3ª edição; ASM Press; Washington.
Purves, W., Sadava, D., Orians, G., Heller, H.; Life The Science of Biology; 6ª edição; Sinauer Associates, Inc.; Massachussetts.
Hartl, D., Jones, E.; 2001; Genetics Analysis of Genes and Genomes; 5ª edição; Jones and Bartlett Publishers, Inc; London.
Keeton, W., Gould, J.; 1993; Biological Science; 5ª edição; W. W. Norton & Company; New York.
1 Aluno
nº 17427 do curso de Biologia da Universidade de Évora; 2 Aluno nº 17674 do curso de Biologia da Universidade de Évora; 3 Aluno nº 17586 do curso de Biologia da Universidade de Évora