INFLUENZA Ag TEST BIOEASY Cód.

INFLUENZA Ag TEST BIOEASY
MÉTODO
Teste imunocromatográfico.
FINALIDADE
O Influenza Ag Test Bioeasy é um ensaio imunocromatográfico de fase sólida, para
detecção diferencial e qualitativa dos antígenos tipo A e tipo B do vírus influenza em
amostras de swab nasal, swab de garganta, swab nasofaringeal, aspirado nasal e
aspirado nasofaringeal. Esse teste é indicado apenas para uso profissional e é uma
ferramenta adicional no diagnóstico clínico laboratorial de pacientes com sintomas clínicos
consistentes com o quadro de infecções pelo vírus influenza.
O Influenza Ag Test Bioeasy não é capaz de detectar o tipo C do vírus influenza.
Somente para diagnóstico de uso in vitro.
FUNDAMENTO
O Influenza Ag Test Bioeasy possui anticorpos monoclonais anti-influenza A e antiinfluenza B imobilizados na tira de teste. Estes anticorpos especialmente selecionados são
utilizados como material de captura e detecção. O Influenza Ag Test Bioeasy possui 3
linhas pré-revestidas, linha controle “C”, linha teste “A” para detecção do vírus influenza
tipo A e linha teste “B” para detecção do vírus influenza tipo B. Essas linhas não são
visíveis na janela de resultados antes da aplicação de qualquer amostra. A linha controle
“C” é utilizada para controle do procedimento. Esta linha deverá sempre aparecer quando
o procedimento do teste for realizado adequadamente. A linha teste “A” e a linha teste “B”
estarão visíveis na janela de resultado quando houver quantidade suficiente de antígenos
do tipo A e do tipo B respectivamente na amostra testada.
SIGNIFICADO CLÍNICO
A influenza, comumente conhecida como "gripe" é uma infecção viral altamente
contagiosa do trato respiratório. Afeta ambos os sexos e todos os grupos de idade, mas
possui maior incidência em crianças. Surtos tendem a ocorrer no inverno e no início da
primavera quando não menos que 40 % de crianças podem ficar infectadas.
A febre é o sintoma mais importante e dura em torno de três dias. Os sintomas
respiratórios como a tosse e outros, tornam-se mais evidentes com a progressão da
doença e mantêm-se em geral por três a quatro dias após o desaparecimento da febre. É
uma doença muito comum em todo o mundo, sendo possível uma pessoa adquirir
influenza várias vezes ao longo de sua vida. Há três tipos de vírus influenza. O tipo A
normalmente é responsável pelas grandes epidemias de influenza. O tipo A modifica-se
constantemente o que resulta em uma nova epidemia a cada poucos anos. Os tipos B e C
não são comuns. O tipo B pode causar surtos menores e mais localizados. O tipo C é
menos comum e usualmente causa doença branda. A influenza é freqüentemente
confundida com outras viroses respiratórias, por isso o seu diagnóstico de certeza só é
feito mediante exame laboratorial específico.
PROPRIEDADES
Teste simples
Detecção precisa
Interpretação fácil
Resultados instantâneos
IDENTIFICAÇÃO E CONSERVAÇÃO
Tira teste selada em uma embalagem de alumínio com dessecante. O teste é sensível a
umidade e ao calor. Conservar sob temperatura entre 15 a 30°C. Não se recomenda
armazenar em refrigerador.
A data de validade encontra-se impressa na embalagem e no rótulo do produto.
CUIDADOS ESPECIAIS
Somente para o diagnóstico in vitro.
Não fumar, comer ou beber nas áreas onde as amostras são manuseadas.
Utilizar luvas descartáveis quando manusear as amostras e lavar as mãos após o teste.
Evitar respingos ou a formação de aerossol.
Todos os derramamentos devem ser completamente limpos com hipoclorito de sódio
(10%), álcool 70% ou um desinfetante iodofórmio.
Descartar todas as amostras e materiais utilizados como se possuíssem agentes
infecciosos. Os métodos de esterilização preferenciais são autoclavagem por 60 minutos a
121ºC ou incineração.
Não misturar amostras diferentes.
Cód.: 19FK12/19FK12 N/P
COLETA DA AMOSTRA BIOLÓGICA
Seguir corretamente os procedimentos padrões clínicos para a coleta de amostra de swab
nasal, swab de garganta, swab nasofaringeal, aspirado nasal e aspirado nasofaringeal.
Swab Nasal
1) Inserir um swab estéril na narina que tiver maior quantidade de secreção detectada
através de inspeção visual.
2) Rotacionar e empurrar gentilmente o swab no interior da narina até sentir uma
resistência (aproximadamente 2,5 cm) (veja ilustração abaixo).
3) Rotacionar por mais algumas vezes o swab na parede interna da narina.
4) Retirar o swab.
Swab de Garganta
1) Inserir um swab na cavidade oral e esfregá-lo vigorosamente nas tonsilas e na faringe
superior (veja ilustração abaixo).
2) Retirar o swab da cavidade oral.
Swab Nasofaringeal
1) Inserir um swab na cavidade nasal paralelamente ao palato até sentir uma resistência
(veja ilustração abaixo).
2) Manter o swab por alguns segundos para absorver a secreção.
3) Retirar o swab.
Aspirado nasal/nasofaringeal
1) Utilizar o meio de transporte viral (VPT).
2) Para começar a sucção, passar o tubo ao longo da base de uma das narinas até a
nasofaringe.
3) Coletar um volume de 2 a 2,5ml de aspirado ou lavado.
4) Transferir a amostra para um coletor de amostra limpo e seco.
Transportar as amostras frescas o mais rápido possível para o Laboratório, em meios
líquidos de transporte. É conveniente que as amostras sejam transportadas em gelo ou
refrigeradas (2 a 8°C) por até 3 dias.
As amostras devem ser testadas o mais rapidamente possível.
No caso de não utilizar meios líquidos de transporte, as amostras podem ser
transportadas e estocadas em coletores de amostras secos e limpos a 2 a 8°C ou
temperatura ambiente 15 a 30°C por até 8 horas.
Amostras que serão analisadas mais tarde devem ser colocadas em 1 a 2 ml de meios de
transporte ou salina.
Meios de transporte testados e compatíveis com o Influenza Ag Test Bioeasy.
Salina; PBS; PBS + 0,5% BSA; PBS + 0,5% Gelatina; EMEM + 1% BSA; EMEM + 0,5%
BSA; Trypticase soy Broth + 0,5% BSA; Trypticase soy Broth + 0,5% Gelatina.
PROCEDIMENTO
Ler o procedimento por inteiro e cuidadosamente antes de iniciar o teste.
Manter a amostra à temperatura ambiente entre 15 a 30°C antes do teste.
AMOSTRA DE ASPIRADO NASAL, NASOFARINGEAL OU SWAB TRANSPORTADOS
EM MEIO DE TRANSPORTE LÍQUIDO APÓS A EXTRAÇÃO DIRETA
1) Adicionar 100 µl de tampão diluente no tubo teste.
2) Pipetar 100µl da amostra extraída ou aspirada, transferir para o mesmo tubo teste e
homogeneizar bem.
3) Introduzir a tira teste no tubo teste com as setas indicativas voltadas para baixo. Tomar
o cuidado para a amostra não ultrapassar a marca indicada pela seta. Caso isto aconteça
transferir a amostra para um tubo maior ou retirar um pouco da amostra do tubo teste.
4) Interpretar o resultado de teste entre 15 e 20 minutos. Não interpretar após 20
minutos.
PRECAUÇÕES
Para obter resultados seguros seguir atentamente as instruções de uso.
Todas as amostras devem ser manuseadas como se fossem material potencialmente
infeccioso.
Realizar o teste imediatamente após a retirada do dispositivo teste da embalagem de
alumínio.
Não usar o kit após a data de validade impressa na embalagem e no rótulo do produto.
Não utilizar o teste caso a embalagem esteja danificada.
Não reutilizar o teste.
Os componentes desse teste são submetidos ao controle de qualidade padronizado por
grupo. Não misturar componentes de lotes com numeração diferente.
ESTABILIDADE
O Influenza Ag Test Bioeasy deve ser conservado em temperaturas entre 15º a 30ºC.
Os reagentes são estáveis, quando conservados nas condições recomendadas, até a data
de validade impressa na embalagem e no rótulo do produto.
Não congelar o kit, pois pode ocasionar mau funcionamento.
O tampão diluente pode formar um precipitado branco leitoso quando armazenado em
baixas temperaturas. Para dissolver o precipitado, aquecê-lo entre as mãos.
O fabricante garante a qualidade do produto, se este for conservado nas condições
estabelecidas e na sua embalagem original.
MATERIAIS NECESSÁRIOS E NÃO FORNECIDOS
Recipiente para coleta e estocagem da amostra
Tubo nasofaringeal
Pipeta automática
Cronômetro
AMOSTRA DE SWAB SEM MEIO DE TRANSPORTE
1) Pipetar o tampão diluente até a área marcada na pipeta que acompanha o teste (aprox.
300µl).
2) Transferir o tampão para o tubo teste.
3) Inserir o swab com a amostra e homogeneizar bem.
4) Retirar o swab pressionando o mesmo contra a parede do tubo teste.
5) Introduzir a tira teste no tubo teste com as setas indicativas voltadas para baixo. Tomar
o cuidado para a amostra não ultrapassar a marca indicada pela seta. Caso isto aconteça
transferir a amostra para um tubo maior ou retirar um pouco da amostra do tubo teste.
6) Interpretar o resultado de teste entre 15 e 20 minutos. Não interpretar após 20
minutos.
SERVIÇO DE ATENDIMENTO AO CLIENTE
Para esclarecimentos de dúvidas do cliente quanto ao produto:
Telefax: (31) 3048-0008
E-mail: [email protected]
Data de fabricação, data de validade, nº. do lote, vide rótulo do produto.
INTERPRETAÇÃO DOS RESULTADOS
NÃO REAGENTE
Quando aparecer somente uma linha colorida na janela de resultados, a linha controle “C”
como indicado na ilustração. Esta linha deve aparecer em todos os testes.
TIPO A REAGENTE
Quando aparecer duas linhas coloridas na janela de resultados, linha controle “C” e linha
teste “A” como indicadas na ilustração.
NOTA: A intensidade da cor das linhas controle “C” e teste “A” pode ser diferente, ou seja,
a linha controle “C” poderá ser mais fraca que a linha teste “A” ou vice-versa. Considerar o
resultado REAGENTE em qualquer situação.
BIBLIOGRAFIA
1) Comparison of Lateral-Flow Immunoassay and Enzyme Immunoassay with Viral Culture
for Rapid Detection of Influenza Virus in Nasal Wash Specimens from Children. Journal of
Microbiology, Vol. 41, No. 5, May. 2003, p.2132-2134.
2) Comparison of Two Nested PCR, Cell Culture, and Antigen Detection for the Diagnosis
of Upper Respiratory Tract Infections due to Influenza Viruses. Journal of Medical
Virology 59:215-220(1999).
3) Simultaneous Detection and Typing of Influenza Viruses A and B by a Nested Reverse
transcription-PCR: Comparison to Virus Isolation and Antigen Detection by
Immunofluorescence and Optical Immunoassay(FLU OIA). Journal of Microbiology, Vol.
39, No. 1, Jan. 2001, p.134-138.
PRODUZIDO PARA
BIOEASY DIAGNOSTICA LTDA, situada à Rua João Ladeira de Sena, 28. Bairro Estoril,
Belo Horizonte, MG. CEP: 30.450-500 TELEFAX: (31) 3048-0008 - CNPJ
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Suwon-si, Kyonggi-do, Korea. Registro MS. Nº. 10374660120.
TERMO DE GARANTIA
A Bioeasy Diagnóstica Ltda se responsabiliza por este kit de diagnóstico, desde que o
mesmo esteja com sua integridade física inabalada e dentro do prazo de validade, seguido
de comprovação pela assessoria técnica de que não houve falhas na execução, manuseio
ou conservação deste produto. A Bioeasy Diagnóstica Ltda e seus distribuidores não se
responsabilizam por falhas no desempenho do kit sob essas condições.
TIPO B REAGENTE
Quando aparecer duas linhas coloridas na janela de resultados, linha controle “C” e linha
teste “B” como indicadas na ilustração.
NOTA: A intensidade da cor das linhas controle “C” e teste “B” pode ser diferente, ou seja,
a linha controle “C” poderá ser mais fraca que a linha teste “B” ou vice-versa. Considerar o
resultado REAGENTE em qualquer situação.
INVÁLIDO
Quando a linha controle “C” não aparecer na janela de resultados dentro de 20 minutos. O
teste deve ser considerado INVÁLIDO. Repetir o teste com uma nova tira teste e com uma
nova amostra. As causas principais de resultados inválidos são o uso incorreto do kit e/ou
a utilização de teste vencido. Neste caso uma nova tira teste deve ser utilizado seguindo
corretamente as instruções de uso.
LIMITAÇÕES
O Influenza Ag Test Bioeasy detecta de forma qualitativa e diferencial antígenos do vírus
da influenza do tipo A e do tipo B e não é capaz de detectar o tipo C.
Como todos os testes de diagnósticos, os resultados devem ser considerados juntamente
com outras informações clínicas obtidas pelo médico.
Resultados NÃO REAGENTES podem ocorrer quando a quantidade de antígenos na
amostra testada for inferior ao limite de detecção do teste.
Se o resultado do teste for NÃO REAGENTE e os sintomas clínicos persistirem, testes
adicionais subseqüentes usando outros métodos clínicos são recomendados. Resultados
NÃO REAGENTES também não impedem a possibilidade de uma infecção por Influenza.
DESEMPENHO DO TESTE
Para determinar o desempenho do Influenza Ag Test Bioeasy foram utilizadas 134
amostras positivas e 287 amostras negativas para o antígeno da influenza confirmadas
por teste de isolamento viral ou RT-PCR. Estas amostras foram testadas com o Influenza
Ag Test Bioeasy e outro kit comercial (Quick Vue Influenza Test – Quidel Corporation).
Os resultados estão sumarizados na tabela abaixo.
Métodos utilizados para detecção do influenza e resultados
Influenza Ag Test Bioeasy
Kit comercial
Reagente
Não reagente
Reagente
Não reagente
Tipo A H3
81
77
4
73
8
Reagente Tipo A H5
12
10
2
7
5
Tipo B
41
36
5
38
3
Sub total
134
123
11
118
16
Não Reagente
287
3
284
5
282
Total
421
126
295
123
298
Sensibilidade
91,8% (123/134)
88,0% (118/134)
Especificidade
98,95% (284/287)
98,2% (282/287)
Cultura Viral e/ou RT-PCR
Sensibilidade Influenza Test Bioeasy = 123/134 = 91,8%
Especificidade Influenza Test Bioeasy = 284/287 = 98,95%
APRESENTAÇÃO DO KIT
1) Tira teste - 1 x 1
2) Tampão diluente - 1 x 5 ml
3) Pipeta descartável - 1 x1
4) Tubo teste descartável - 1 x 1
5) Suporte para tubos descartáveis - 1
6) Swab estéril para coleta de amostra - 1 x 1
7) Swab controle positivo (disponível nas apresentações código 19FK12N/P) - 1.
8) Swab controle negativo (disponível nas apresentações código 19FK12N/P) - 1.
9) Instrução de Uso - 1
Nº de testes: 1, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 40, 50 e 100 testes respectivamente.
Revisão: 29/06/2009.