Avaliação dos Resultados dos Testes da Tira

Artigo
Avaliação dos Resultados dos Testes da Tira Reativa na Detecção
de Glicosúria em Pacientes com Glicemia Alterada
Víctor Castelo Branco Pereira1, José Nilson Ferreira Gomes Neto2
1 – Acadêmico do curso de Farmácia. Universidade de Fortaleza, Centro de Ciências da Saúde, Fortaleza, CE
2 – Professor Mestre em Ciências Farmacêuticas. Universidade de Fortaleza, Centro de Ciências da Saúde, Fortaleza, CE
Summary
Resumo
Avaliação dos resultados dos testes da tira reativa na
Evaluation of test results of urine test strip for detec-
detecção de glicosúria em pacientes com glicemia alterada
tion of glycosuria in patients with altered blood levels
Quando os níveis sanguíneos de glicose ficam elevados, ela
When blood glucose levels are high it appears in the
aparece na urina, sendo denominada de glicosúria. O objetivo do
urine. The aim of this study is to evaluate the test results of
estudo é avaliar os resultados dos testes da tira reativa de urina na
urine test strip for detection of glycosuria in patients with
detecção de glicosúria em pacientes com glicemia alterada, com-
altered glucose levels, comparing the results of three different
parando os resultados de três marcas de tiras diferentes entre si e
brands of strips among themselves and with Benedict’s test.
com o teste de Benedict. O método utilizado foi a imersão rápida
The method used was the rapid immersion of the strips in
das tiras na amostra de urina, avaliando-as conforme a escala de
the urine sample, evaluating them according to color scale
cores fornecida pelo fabricante, sendo todos os testes confirmados
provided by the manufacturer, all tests being confirmed
pelo teste de Benedict e analisados. Verificou-se que 58% dos
by Benedict test and analyzed. It was found that 58% of
pacientes são do sexo feminino, 60% estão entre 41 a 60 anos,
patients are female, 60% are between 41 to 60 years, 58%
58% não apresentaram glicosúria e, dos 42% que apresentaram,
had glucose in the urine, and 42% of that presented in six
em seis destes a glicemia era abaixo de 150 mg/dL. Em todos
of glucose was below 150mg/dL. In all negative, glucose
os resultados negativos, a glicemia era abaixo do limiar renal e
was below the renal threshold and 15% of negative results
15% dos resultados negativos para as tiras foram positivos para o
for the strips were positive Benedict’s test, demonstrating the
teste de Benedict, demonstrando uma maior sensibilidade do teste
importance of implementing the confirmatory test and the
confirmatório e a necessidade de uma padronização do exame de
need for standardization of urinalysis in determining the
urina na determinação da glicosúria através das tiras reagentes,
glycosuria through the test strips in order to increase the
de modo que aumente o grau de precisão dos resultados obtidos,
accuracy of the results, making them more reliable when it
tornando-os mais confiáveis quando não for possível a realização
is not possible to perform the confirmatory test.
do teste confirmatório.
Palavras-Chaves: Urina, urinálise, glicose, Diabetes mellitus
Introdução
Keywords: Urine, urinalysis, glucose, Diabetes mellitus
forma-se o ultrafiltrado glomerular,
No que se refere à glicose, os rins,
que passa pelos túbulos cujas células
através do córtex renal, têm uma
s rins exercem uma impor-
reabsorvem as substâncias neces-
capacidade de produção maior que o
tante função na eliminação
sárias e eliminam as supérfluas. Ao
fígado por grama de tecido, além de
de substâncias indesejáveis,
chegar ao ureter, já é a urina pro-
a medula renal mostrar uma elevada
presentes no sangue. Para desem-
priamente dita. A quantidade total de
capacidade glicolítica relacionada com
penhar essa função, todo o volume
uma determinada substância presente
o seu mecanismo de concentração.
sanguíneo passa pelos rins para ser
na urina é o resultado conjunto da
Evidenciamos, portanto, que os rins
filtrado. À medida que o sangue é fil-
filtração glomerular e da secreção e
participam também na produção, uti-
trado, ao nível dos glomérulos renais,
reabsorção tubulares.
lização e conservação da glicose (1).
O
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Quase toda quantidade de glico-
Uma das patologias que mais evi-
A glicosúria para o teste da tira
se filtrada pelos glomérulos é reab-
denciam o quadro de glicosúria é a
reativa pode ser classificada como:
sorvida nos túbulos renais, havendo
diabetes mellitus, sendo relatado por
traços, 1+, 2+, 3+, 4+ e 5+, de acordo
na urina quantidades mínimas,
Gross et al. (2002) como uma frequen-
com a tabela de cores fornecida pelo
considerando-se normal o achado
te situação clínica que acomete cerca
fabricante.
de até um grama por litro 1g/l em
de 7,6% da população adulta entre
O teste de Benedict baseia-se em
24horas. A reabsorção tubular é fei-
30 e 69 anos e 0,3% das gestantes.
um reagente químico de cor azulada
ta por transporte ativo em resposta
É caracterizada por hiperglicemia,
que contém sulfato de cobre, citrato
às necessidades do organismo para
resultante de defeitos na secreção de
de sódio e carbonato de sódio. Foi
manter uma concentração adequada
insulina ou em sua ação. Trata-se de
desenvolvido pelo químico Norte-
de glicose.
um distúrbio metabólico causado pela
-Americano Stanley Rossiter Benedict
Se os níveis sanguíneos de glicose
completa ou parcial deficiência de in-
e é usado para detectar a presença
ficarem elevados, o transporte tubular
sulina pelo pâncreas e/ou diminuição
dos açúcares e açúcares redutores,
desta substância cessa e ela aparece
de sua ação nos tecidos, prejudicando
que são glicose, lactose, galactose,
na urina (glicosúria). O nível san-
o metabolismo dos lipídios, glicídios,
manose e maltose.
guíneo no qual a reabsorção tubular
proteínas, água, vitaminas e minerais
Quando aquecida a solução de
cessa é chamado “limiar renal” e é
(5). Essa hiperglicemia se manifesta
Benedict em uma proporção de dez
de 160 a 180 mg/dL. A detecção de
por sintomas clássicos como poliúria,
partes da solução para uma parte de
glicosúria faz parte da rotina do exame
polidipsia, perda de peso, polifagia e vi-
urina contendo glicose, o carbonato
de urina por esta surgir em casos de
são turva ou por complicações agudas
de sódio converte a glicose em uma
diabetes mellitus, em lesões cerebrais
que podem levar a risco de vida (6).
redução da substância ativa que reduz
e em algumas disfunções dos rins que
Existem dois testes que são co-
diminuem a capacidade dos túbulos
mumente utilizados na detecção da
renais na reabsorção da glicose (2).
glicosúria: o teste da tira reativa e o
o sulfato de cobre para cobre suboxidado hidratado amarelo (7).
O estudo e análise da urina foi o
teste confirmatório de Benedict. O tes-
Reação:
precursor da medicina laboratorial e,
te da tira reativa é feito pelo método
Sulfato de cobre + Subst. Redutoras
apesar de, na antiguidade, os pesqui-
específico para glicose, o glicose-oxi-
Δ meio alcalino Dióxido de cobre
sadores não contarem com nenhum
dase, impregnando-se a área do teste
+ Subst. Oxidada tipo de método sofisticado de exame,
“tira de papel” com uma mistura de
eles obtinham informações diagnósti-
glicose-oxidase, peroxidase, cromóge-
De acordo com a coloração obtida,
cas básicas como cor, turvação, odor,
no e tampão para produzir uma reação
pode-se ter uma ideia aproximada
volume, viscosidade e até presença de
enzimática sequencial dupla. Em um
da quantidade de glicose presente
açúcares em algumas amostras, por
primeiro momento, a glicose-oxidase
na urina: azul límpida – 0 de glico-
relatarem a aproximação de formigas
catalisa a reação entre a glicose e o ar
se; precipitado esverdeado – 100 a
e outros insetos (3).
do meio ambiente para produzir ácido
500mg/100ml; precipitado verde tur-
A busca pelo aprofundamento do
glicônico e peróxido. Em seguida, a
vo – 500 a 1.400mg/100ml; precipita-
conhecimento a respeito da compo-
peroxidase catalisa a reação entre o
do marrom – 1.400 a 2.000mg/100ml
sição da urina é uma das origens do
peróxido e o cromógeno para formar
e precipitado vermelho tijolo – mais
laboratório clínico, da química clínica
um complexo oxidado colorido, reve-
de 2.000mg/100ml (7).
e da microbiologia. Depois de mais
lando a presença de glicose (3).
de um século da introdução de testes
Atualmente existem diversas marcas de tiras reativas de urina no mer-
químicos qualitativos e da análise mi-
Reação:
cado, com as mais distintas variações
croscópica de sais urinários, cristais e
Glicose + Oxigênio glicose-oxidase
de preços, o que ocasiona dúvidas so-
outros constituintes, a análise da urina
Ácido glicônico + Peróxido de hidrogênio bre quais tiras podem ser usadas com
é desafiada por novas necessidades
confiabilidade e qualidade satisfatória
médicas, bem como na produção e de-
Peróxido de hidrogênio + cromógeno senvolvimento de técnicas e avanços
peroxidase cromógeno (colorido
no conhecimento científico (4).
oxidado) + Água
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para a rotina de um laboratório.
Tendo em vista a importância desses testes no auxílio do diagnóstico
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de algumas patologias importantes,
xos, que realizaram o exame sumário
adicionar quatro gotas da urina em
como a diabetes mellitus, viu-se a
de urina, e foram excluídos pacientes
teste e ferver com o auxílio de um
necessidade da execução deste estu-
com glicemia sanguínea normal que
bico de gás ou lamparina, ou colocar
do para a produção do conhecimento
realizaram o referido exame.
em banho-maria fervente por apro-
sobre o nível de confiabilidade dos
Os ensaios foram executados por
resultados obtidos através dos testes
um universitário do curso de Farmácia
ximadamente 5 minutos
Ÿ Fazer uma prova em branco con-
da tira reativa.
da Universidade de Fortaleza, devida-
tendo apenas 2,5 ml do reativo em
Dessa forma, o presente estudo
mente instruído e capacitado, através
tubo de ensaio
tem como objetivos avaliar os resulta-
dos testes da tira reativa e o teste
Ÿ Observar se houve alguma mu-
dos dos testes da tira reativa de urina
confirmatório de Benedict, nos quais
dança de coloração no branco, o que
na detecção da glicosúria em pacien-
foram utilizadas três marcas de tiras
indicaria deterioração ou contamina-
tes com glicemia sanguínea alterada,
reativas diferentes, sendo as mesmas
ção do reativo por substâncias redu-
comparando entre si os resultados en-
testadas simultaneamente para a
toras. Caso isto ocorra, despreza-se
contrados em três marcas de tiras dife-
verificação de glicosúria, seguidas do
o produto
rentes e com o teste confirmatório de
teste confirmatório.
Ÿ Observar se houve alguma mu-
Benedict e correlacionar os resultados
As tiras reativas se constituem
dança de coloração na solução teste,
positivos e negativos para glicosúria
em pequenos quadriculados de pa-
que pode variar de verde límpido a
com a faixa glicêmica dos pacientes.
pel absorventes, impregnados com
vermelho tijolo, conforme a concen-
substâncias químicas, presos a uma
tração de glicose presente na amostra
Material e Métodos
tira de plástico. A reação química
Foi utilizado o método de imersão
que produz determinada coloração
rápida das tiras reativas na amostra
se dá quando o papel absorvente
de urina, avaliando-as visualmente
Este estudo representa uma pes-
entra em contato com a urina. As
após alguns segundos e comparando-
quisa comparativa descritiva, que
cores resultantes são interpretadas,
-as com a escala de cores conforme
visa avaliar de forma quantitativa os
comparando-as com uma tabela de
instruções do fabricante, realizado
resultados de glicosúria obtidos por
cores fornecidas pelo fabricante.
sempre pela mesma pessoa, de modo
testes de tira reativa de três marcas
diferentes e fazendo uma compara-
A sua realização é feita através da
seguinte técnica:
que se otimize a leitura das mudanças
de cor, contribuindo para uma maior
ção com o teste confirmatório (teste
Ÿ Homogeneizar bem a amostra
de Benedict).
Ÿ Mergulhar a tira por completo por
Todos os testes foram confirmados
um breve período de tempo em um
e os resultados de cada amostra fo-
tubo de ensaio contendo a amostra
ram anotados em tabela comparativa
Realizou-se em um laboratório de
análises clínicas privado, localizado no
precisão na interpretação dos dados.
município de Eusébio-CE, pertencente
Ÿ Remover o excesso de urina,
entre as marcas em estudo e entre o
à região metropolitana de Fortaleza-
encostando a borda da tira em um
teste de Benedict. Os pacientes foram
-CE, no período de agosto a novembro
papel absorvente
identificados por ordem numérica e
de 2011. Foram utilizadas amostras de
Ÿ Comparar as cores da reação com
pela inicial de seus nomes. A coleta
urina de pacientes com glicemia san-
a tabela do fabricante em local de boa
de dados feita a partir dos resultados
guínea alterada, colhidas no mesmo
iluminação e no tempo determinado
obtidos com os testes já mencionados
dia, que realizaram o exame sumário
A realização do teste de Benedict é
e coletados através de um formulário
de urina no referido laboratório, sendo
baseada na redução dos sais cúpricos
específico, no qual todas as infor-
feito a análise de 50 amostras selecio-
pelos açúcares encontrados na urina
mações de relevância e as principais
nadas aleatoriamente. Todas as urinas
que, quando aquecidos, reagem e
variáveis do presente estudo foram
foram coletadas (jato médio), acon-
mudam sua coloração de acordo com
registradas e analisadas.
dicionadas em frascos de poliestireno
a concentração de açúcar na amostra.
Os resultados foram analisados
estéril e processadas em menos de
Esse teste segue o seguinte pro-
através de tabelas e gráficos produ-
duas horas após a coleta. A pesquisa
cedimento técnico:
inclui pacientes portadores de glicemia
Ÿ Colocar 2,5 ml do reativo de
sanguínea alterada, de ambos os se-
Benedict em um tubo de ensaio,
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zidos pelo programa Microsoft Excel
2010 (Microsoft Windows®).
O projeto de pesquisa recebeu a
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aprovação do Comitê de Ética em Pes-
dL por “++++” e > 2.000mg/dL foi
a 80 anos, revelando uma minoria
quisa em Seres Humanos da UNIFOR,
representado por “+++++”.
de 12% na faixa etária abaixo dos
Ceará em 05/10/2011, sob o parecer
304/2011.
Resultados e Discussão
Através da análise dos dados,
41 anos. Essa maior frequência na
verificou-se que 58% dos pacientes
faixa etária de 41 a 60 anos revela
que apresentaram glicose plasmá-
um achado que aponta para pacientes
tica de jejum elevada, são do sexo
que sofrem de diabetes tipo 2, a qual
feminino, mostrando uma frequência
acomete, em sua maioria, pessoas na
maior de usuários femininos para os
fase adulta, já que sua incidência e
O exame de urina tem uma signifi-
serviços de saúde. De acordo com
prevalência aumenta acentuadamente
cativa importância clínica, pois fornece
Ortiz & Zanetti (2001), essa tendência
com o progredir da idade, principal-
preciosas informações sobre patologias
também pode ser observada para a
mente após os quarenta anos (10).
renais e do trato urinário, bem como
diabetes mellitus, no qual a incidência
Apesar de todos os pacientes apre-
extrarrenais, tais como alterações
e a prevalência do diabetes tipo 2 é em
sentarem glicemia sanguínea alterada,
hepáticas, favorecendo também no
média 1,8 vezes mais frequente nas
58% não apresentaram glicosúria, o
auxilio do diagnóstico precoce/controle
mulheres do que nos homens (10).
que demonstra uma boa reabsorção
da diabetes mellitus. É considerado
Pode-se observar que 60% dos
de glicose pelos túbulos renais através
um exame de rotina, fazendo parte da
pacientes com glicemia alterada estão
de transporte ativo nestes pacientes.
realidade laboratorial, por sua simples
entre 41 a 60 anos e 28% entre 61
Dentre os pacientes que apresen-
realização, baixo custo e facilidade na
obtenção da amostra para análise de
seus componentes bioquímicos (8).
A urinálise é usualmente feita
com tiras reagentes, o que torna
mais simples e econômica a determinação do exame e mais rápida a
interpretação do laudo laboratorial
pelo médico. Tais tiras constituem o
modo mais simples e rápido de realizar 10 ou mais análises bioquímicas
clinicamente importantes (9), sendo
capazes de avaliar alguns aspectos
físicos, todos os químicos e, ainda,
de verificar presença de sangue (8).
Visto a enorme diversidade de tiras
Figura 1. Distribuição dos pacientes com glicemia de jejum alterada, quanto à faixa etária
reativas de urina disponíveis atualmente no mercado, observa-se uma
disparidade nos intervalos de leitura
na determinação da glicosúria em cruzes entre as diferentes marcas de tiras. De modo a facilitar a comparação
dos resultados obtidos com as marcas
das tiras utilizadas no estudo, foram
adotados os seguintes parâmetros:
100mg de glicose por decilitro de urina
até 249mg/dL foi representado por
“+”, 250mg/dL a 499mg/dL por “++”,
500mg/dL a 999mg/dL representado
por “+++”, 1.000mg/dL a 1.999mg/
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Figura 2. Perfil dos resultados de glicosúria em pacientes com glicemia de jejum alterada
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taram glicosúria (42%), observa-se
que em seis destes (12%) a glicemia
sanguínea era abaixo de 150 mg/dL,
contrapondo-se à faixa do limiar renal
(160mg/dL a 180mg/dL), o que pode
ser ocasionado por diversos fatores
que implicam na diminuição da taxa
de reabsorção tubular da glicose, tais
como síndrome de Cushing, desordens
tubulares renais, uso de corticoesteroides, infecção grave, hipertireoidismo, feocromocitoma, doenças hepáticas e do sistema nervoso central (11).
Os resultados de glicosúria com
glicemia abaixo do limiar renal podem
acontecer também por conta da urina
Figura 3. Faixa glicêmica dos pacientes com teste de glicosúria positivo
ser um fluido corporal que se forma
gradativamente, levando algum tempo
para sua formação, o que irá refletir
o estado fisiológico do paciente de
algumas horas antes da coleta da urina, diferente da glicemia, que mostra
a taxa de glicose sanguínea na hora
da coleta; logo estes resultados de
glicosúria podem estar relacionados
com uma glicemia sanguínea mais
elevada de horas atrás.
Verifica-se que, em todos os resultados negativos, a glicemia sanguínea
dos pacientes está abaixo do limiar
renal (160mg/dL a 180mg/dL). Dessa
forma, evidencia-se de fato a correlação
e concordância com o limiar renal para a
Figura 4. Faixa glicêmica dos pacientes com teste de glicosúria negativo
glicose, já que nenhum resultado negativo representa pacientes com glicemia
sanguínea acima de 160mg/dL.
Todos os resultados que evidenciaram positividade nas tiras reagentes foram confirmados pelo teste de Benedict,
revelando uma ótima especificidade,
padrão também verificado no estudo de
Colombeli & Falkenberg, 2006.
Observa-se que, dos 34 (100%)
resultados negativos para os testes
da tira reativa, cinco testes (15%)
mostraram positividade para o teste
confirmatório de Benedict, demonstrando uma maior sensibilidade deste
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Figura 5. Correlação entre os resultados de glicosúria negativos evidenciados pelas tiras
reativas, com o teste de Benedict
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tiras reativas de urina utilizadas,
além da ausência de padronização da
expressão em cruzes no parâmetro
glicose, o que pode levar a erros de
interpretação do laudo laboratorial
por parte dos médicos como também
a diferenças de laudos entre laboratórios, visto a enorme diversidade de
tiras existentes no mercado.
Este estudo demonstra, então,
Figura 6. Comparação da equivalência dos resultados positivos entre as três marcas de
tiras reativas
que o teste de Benedict, quando
comparado com os resultados positivos da tira reativa, apresenta uma
boa especificidade e se mostra mais
teste na detecção de glicosúria em
em relação à avaliação semiquantita-
sensível quando comparado com os
relação aos testes realizados com as
tiva da intensidade da reação e sua
resultados negativos da tira reativa.
tiras reativas. Deve-se levar em con-
expressão em cruzes pode dificultar
Conclui-se também a necessidade
sideração que o teste de Benedict não
e levar a equívocos na interpretação
de uma padronização do exame de
é especifico somente para glicose, po-
do laudo por parte dos médicos, uma
urina na determinação da glicosúria
dendo detectar a presença de outros
vez que o resultado em cruzes pode
através das tiras reagentes, de modo
açúcares como a lactose, galactose,
corresponder, para diferentes marcas
que aumente o grau de precisão dos
manose e maltose (7).
de tiras, concentrações diferentes (3).
resultados obtidos, tornando-os mais
Pode ser observado que, dos 16
(100%) resultados positivos para os
testes das tiras reagentes, apenas
confiáveis quando não for possível a
Conclusão
realização do teste confirmatório.
cinco foram equivalentes para as três
marcas de tiras, identificando uma
Através deste estudo, nota-se
frequência de 69% que não apresen-
uma diferença quanto à avaliação
José Nilson Ferreira Gomes Neto
tam concordância sobre o grau de
semiquantitativa da intensidade da
[email protected]
positividade. Essa diferença observada
reação entre as diversas marcas de
Correspondências para:
Referências Bibliográficas
1. Malnic G, Marcondes M. Fisiologia renal. 3. ed. São Paulo: Editora Pedagógica e Universitária Ltda; 1986.
2. Henry JB. Diagnósticos Clínicos & Tratamentos por Métodos Laboratoriais. 19. ed. São Paulo: Manole; 1999.
3. Colombeli ASS, Falkenberg M. Comparação de bulas de duas marcas de tiras reagentes utilizadas no exame químico de urina. J. Bras.
Patol. Med. Lab. 42(2): 85-93, 2006.
4. Guder WG, Kutter D, Bonini P. From uroscopy to molecular analysis – improving diagnostic information from urine analysis. Clinica
Chimical Acta. 297: 1-3, 2000.
5. Torres RM, Fernandes JD, Cruz EA. Adesão do Portador de Diabetes ao Tratamento: Revisão Bibliográfica. Revista Baiana de Enfermagem. 21(2/3): 61-70, 2007.
6. Gross JL, Silveiro SP, Camargo JL, Reichelt AJ, Azevedo MJ. Diabetes Melito: Diagnóstico, Classificação e Avaliação do Controle Glicêmico.
Arq. Bras. Endocrinol. Metab. 21(2): 16-26, 2002.
7. Eden MBJ, Durham BS,Vancouver BC.A Comparative Study of Benedict’s Method and New Enzyme Tests for the Detection of Glycosuria.
Canad. M. A. J. 75: 677-679, 1956.
8. Suzuki LE, Consolaro MEL, Avaliação de tiras reativas de urina utilizadas na rotina laboratorial. Arq. Ciênc. Saúde Unipa. 1(1): 123128, 1997.
9. Ravel R. Lab. Clinic. Aplicações clínicas dos dados laboratoriais. 6 ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan; 1997.
10. Ortiz MCA, Zanetti ML. Levantamento dos Fatores de Risco para Diabetes Mellitus Tipo 2 em uma Instituição de Ensino Superior.
Revista Latino-americana de Enfermagem. 9(3), 2001.
Discussão
11. Joviliano RD. Uroanálise: Abordagens Gerais. Ribeirão Preto: Centro de Estudo e Pesquisa do Desenvolvimento Regional Das Faculdades
Integradas Fafibe, 2006.
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