REF 35 092 Mac Conkey

REF 35 092
Mac Conkey
3662054 B - BR
IVD
Isolamento seletivo das enterobactérias e de Escherichia coli
O meio Mac Conkey com cristal violeta permite evidenciar
a fermentação da lactose pela mudança de coloração do
vermelho neutro (2).
Os microrganismos que fermentam a lactose originam
colônias rosas ou vermelhas, por vezes contornadas por
um halo de sais biliares (4).
Os microrganismos que não fermentam a lactose,
originam colônias incolores ou ligeiramente bege.
A seletividade em relação às bactérias Gram (+) é
proporcionada pelos sais biliares e o cristal violeta (10).
• As amostras, culturas bacterianas e produtos semeados
devem ser considerados potencialmente infecciosos e
manipulados de maneira apropriada. As técnicas
assépticas e as precauções habituais de manipulação
para o grupo bacteriano estudado devem ser
respeitadas durante toda a manipulação; consultar o
"CLSI M29-A, Protection of Laboratory Workers from
Occupationally Acquired Infections; Approved Guideline
– Revisão em vigor". Para informações complementares
sobre as precauções de manipulação, consultar o
"Biosafety
in
Microbiological
and
Biomedical
Laboratories – CDC/NIH – Última edição", ou a
regulamentação em vigor no país de utilização.
• Os meios de cultura não devem ser utilizados como
materiais ou componentes de fabricação.
• Não utilizar os reagentes após a data de validade.
• Não utilizar os reagentes se a embalagem estiver
danificada.
• Não utilizar placas contaminadas ou desidratadas.
• O comportamento funcional apresentado foi obtido com
o procedimento indicado neste folheto informativo.
Qualquer desvio de procedimento pode alterar os
resultados.
• A interpretação dos resultados do teste deve ser
efetuada tendo em conta o contexto clínico, a origem da
amostra, os aspectos macro e microscópicos, e
eventualmente, os resultados de outros testes.
APRESENTAÇÃO
CONDIÇÕES DE ARMAZENAMENTO
INTRODUÇÃO E OBJETIVO DO TESTE
O Agar Mac Conkey com cristal violeta é um meio de
isolamento seletivo e de diferenciação para a pesquisa
de enterobactérias, a partir de amostras de origens
diversas (clínica, alimentar, farmacêutica…..) (1, 2, 3, 4).
Está descrita na A.P.H.A. (Standard Methods para as
análises da água e dos produtos lácteos) (5).
Na indústria farmacêutica, este meio é utilizado para a
pesquisa das E. coli no controle microbiológico dos
produtos não estéreis. Este agar está em conformidade
com as exigências de comportamento funcional dos
capítulos harmonizados das farmacopéias europeia,
americana e japonesa (6, 7, 8).
PRINCÍPIO
* impresso em cada placa
• As placas devem ser conservadas entre 2°C e 8°C
dentro da embalagem até à data de validade.
• As placas podem ser conservadas durante 4
semanas de 15º - 25ºC dentro das embalagens.
● O tempo de conservação das placas fora da embalagem
é de 2 semanas a 2º-8ºC.
COMPOSIÇÃO
AMOSTRAS
Meio pronto para uso
REF
35 092 Embalagem de 10 placas (90 mm)
MAC CONKEY *
Fórmula teórica
Este meio pode ser ajustado e/ou suplementado em função dos
critérios de qualidade impostos:
Peptona de gelatina (bovina ou porcina).....................................
Peptona de carne (bovina ou porcina) ........................................
Lactose (bovina) ..........................................................................
Sais biliares (ovino ou bovino).....................................................
Cloreto de sódio...........................................................................
Agar..............................................................................................
Vermelho neutro ..........................................................................
Cristal violeta ...............................................................................
Agua destilada............................................................................
17 g
3g
10 g
1,5 g
5g
13,5 g
0,03 g
0,001 g
1L
pH 7,1
MATERIAL NECESSÁRIO MAS NÃO FORNECIDO
Utilização em bacteriologia clínica:
O meio é semeado diretamente a partir de coletas de
qualquer natureza podendo conter enterobactérias.
É conveniente respeitar as boas práticas em termos de
coletas e de transporte, adaptadas a cada tipo de coleta.
Utilização em bacteriologia industrial:
• Este meio é particularmente aconselhado para o
controle microbiológico dos produtos farmacêuticos não
obrigatoriamente estéreis. É descrito nas diversas
farmacopéias.
• Pode também ser utilizado para a pesquisa de
enterobactérias nas águas e produtos lácteos.
• Estufa bacteriológica.
PRECAUÇÕES DE UTILIZAÇÃO
• Para diagnóstico in vitro e para controle
microbiológico
• Unicamente para uso profissional
• Este dispositivo contém componentes de origem animal.
O controle da origem e/ou do estado sanitário dos
animais não pode garantir de maneira absoluta que
estes produtos não contenham nenhum agente
patogénico transmissível, é recomendado manipulá-los
com as precauções de utilização relativas aos produtos
potencialmente infecciosos (não ingerir; não inalar).
bioMérieux Brasil S.A.
Português Brasil- 1
Mac Conkey
3662054 B - BR
PROCEDIMENTO
LIMITES DO TESTE
Utilização em bacteriologia clínica:
1. Deixar as placas atingir a temperatura ambiente.
2. Semear a amostra.
• O desenvolvimento depende das exigências específicas
de cada microrganismo. Portanto, é possível que
algumas cepas que tenham exigências específicas não
se desenvolvam.
3. Incubar na estufa, com a tampa para baixo, a 37°C. A
escolha da temperatura de incubação é da
responsabilidade do utilizador em função da aplicação
e das normas em vigor.
As culturas são examinadas geralmente após 24 ou
48 horas de incubação.
COMPORTAMENTO FUNCIONAL
Utilização em bacteriologia industrial:
Todas as enterobactérias tiveram um desenvolvimento a
partir das 24 horas.
7 cepas que fermentam a lactose apresentaram às 24
horas colônias rosa escuro ou vermelhas associadas a
um precipitado de sais biliares para algumas colónias de
E. coli.
Os outros Gram (-) não enterobactérias apresentaram um
fraco crescimento.
Deixar as placas atingir a temperatura ambiente.
Para as águas e produtos lácteos:
As amostras de água a analisar são semeadas
diretamente nas placas. Para o isolamento e a
numeração das enterobactérias nas águas e no leite,
consultar a A.P.H.A Standard Methods for the
Examination of Dairy Products, 11th Ed. e o Standard
Methods for the Examination of Water and Wastewater.
Consultar o procedimento descrito nos capítulos
harmonizados das farmacopéias.
A temperatura de incubação ótima é de 35º C.
LEITURA E INTERPRETAÇÃO
• Após incubação, observar o crescimento bacteriano e o
aspecto das colónias :
- colônias lactose (+): rosas ou vermelhas, por vezes
contornadas por um halo de sais biliares precipitados.
- colônias lactose (-): incolores ou ligeiramente bege.
• A identificação do ou dos microrganismos isolados deve
ser seguida de testes bioquímicos e mesmo
imunológicos.
CONTROLE DE QUALIDADE
Utilização em bacteriologia clínica
A fertilidade do meio pode ser testada em relação às
cepas seguintes:
• Escherichia coli
ATCC 25922
• Salmonella typhimurium
ATCC 14028
Resultados esperados:
Salmonella typhimurium
ATCC 14028
Selectividade :
As 8 cepas Gram (+) testadas foram inibidas em 48
horas.
Eliminar os reagentes utilizados e não utilizados assim
como os materiais de utilização única contaminados
seguindo os procedimentos relativos aos produtos
infecciosos ou potencialmente infecciosos.
É da responsabilidade de cada laboratório gerir os
resíduos e os efluentes que este produz consoante a sua
natureza e o seu perigo, e assegurar (ou fazer assegurar)
o tratamento e a eliminação em conformidade com as
regulamentações aplicáveis.
GARANTIA DE QUALIDADE DO PRODUTO
“ A bioMérieux garante que o desempenho do produto é
obtido desde que sejam seguidas as Instruções
indicadas, referentes aos cuidados de utilização,
armazenamento, procedimento e prazo de validade dos
reagentes.”
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Protocolo:
Escherichia coli
ATCC 25922
Fertilidade:
ELIMINAÇÃO DE RESÍDUOS
Para os produtos farmacêuticos :
Cepa
O comportamento funcional foi avaliado, a 37°C, em 34
cepas bacterianas (enterobactérias, outras bactérias
Gram (-) e Gram (+)).
Resultados a 33º - 37ºC
Crescimento
após 24
horas
Colônias
rosas
Colônias
incolores
Nota:
É da responsabilidade do utilizador ter em conta a
natureza da aplicação e a legislação local em vigor para a
execução do controle de qualidade (frequência, número
de cepas, temperatura de incubação... ).
bioMérieux Brasil S.A.
1. BERGOGNE-BEREZIN E. – Actualisation de l'examen
cytobactériologique des urines – Rev. Fr. Lab., Fév. 1988,
vol. 169, p. 49-55.
2. EWING W.H. – Identification of Enterobacteriaceae ;
Edwards and Ewings – 4th ed. Elsevier, 1986, ISBN 0-44400981-7.
3. MURRAY P.R., BARON E.J., PFALLER M.A. et al. - 1995 –
Manual of clinical microbiology, 6th ed. - American Society
for Microbiology, Wahington, D.C. – ISBN 1-55581-086-1.
4. POMPEI R., BERLUTTI F., THLLER M.C. et al. – A modified
MacConkey Medium which allows the recognition of
Enterobacteriaceae from other Gram-negative bacteria on
primary cultures plates. – J Microbiol. Methods, 1996, vol. 25,
p.271-278.
5. Standard Methods for the Examination of Water and
Wastewater - 11th Ed. A.P.H.A., Inc. New-York, 1960.
6. Farmacopéia europeia EP 5.
7. Farmacopéia americana USP 29.
8. Farmacopéia japonesa JP 15.
9. Mac CONKEY A. – Lactose fermenting bacteria in faeces. –
J. Hyg., 1905, vol. 5, p. 333-379.
10. BARRY A.L., SMITH P.B., TURCK M. - Cumitech 2:
Laboratory Diagnosis of Urinary Tract Infections - Ed
American Society for Microbiology , Apr. 1975.
Português Brasil - 2
Mac Conkey
3662054 B - BR
QUADRO DE SÍMBOLOS
Significado
Símbolo
REF
Número de referência
IVD
Produto para diagnóstico “in vitro”
Fabricante
Limite de temperatura
Validade
LOT
i
Σ
Número de lote
Consultar as instruções para utilização
Conteúdo suficiente para ‘n’ ensaios
®
bioMérieux Brasil SA
Estrada do Mapuá, 491 e 591
Jacarepaguá – R.J. Brasil
CNPJ 33.040.635/0001-71
Atendimento ao consumidor.
Tel 0800-0264848
Prazo de Validade, N° de Lote, N°
de Registro de Ministério da Saúde
Impresso no Brasil
e Responsável Técnico:
VIDE EMBALAGEM
http://www.biomerieux.com
O logotipo é uma marca registrada e protegida, propriedade exclusiva da bioMérieux sa ou de uma das suas filiais.