Discos MASTDISCS™ ID para detecção da beta
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Discos MASTDISCS™ ID para detecção da beta
Discos MASTDISCS™ ID para detecção da beta-lactamase AmpC e beta-lactamase de largo espectro (ESL) D68C. Para detecção da produção enzimática de betalactamase AmpC e/ou beta-lactamase de largo espectro. EXCLUSIVAMENTE PARA DIAGNÓSTICO IN VITRO Conteúdo e formulação*: 4 cartuchos (D68C), cada um com 50 discos. Cartucho A Discos de 10 g de cefpodoxima Cartucho B Discos de 10 g de cefpodoxima + inibidor da ESL Cartucho C Discos de 10 g de cefpodoxima + inibidor de AmpC Cartucho D Discos de 10 g de cefpodoxima + inibidor da ESL + inibidor de AmpC Conservação e tempo de armazenamento Conservar a 2 a 8°C nos recipientes fornecidos até ao prazo de validade mostrado no rótulo da embalagem. Deixar que atinja a temperatura ambiente antes de abrir. Precauções Exclusivamente para diagnóstico in vitro. Cumpra as precauções aprovadas relativas a perigos biológicos e as técnicas assépticas. Só deve ser utilizado por técnicos laboratoriais devidamente treinados e qualificados. Esterilize todo os resíduos com risco biológico antes da eliminação. Consulte a folha de dados da segurança do produto. Materiais necessários mas não fornecidos Acessórios e equipamento microbiológico padrão, como ansas, meios de cultura MAST, zaragatoas, varetas aplicadoras, incineradores e incubadoras, etc., assim como reagentes serológicos e bioquímicos e aditivos como, por exemplo, sangue. Procedimento 1. Utilizando uma cultura pura, fresca do organismo de ensaio, preparar uma suspensão equivalente em densidade de um padrão 0,5 McFarland opacidade ou em água desionizada ou solução salina fisiológica, dependendo do método seguido. 2. Com uma zaragatoa estéril, espalhe a suspensão uniformemente em toda a superfície de uma placa de ágar de teste de susceptibilidade (ex., Mueller Hinton Agar acordo com Standards Institute clínicos e laboratoriais (CLSI). Em alternativa, pode usar uma diluição de 1:100 da suspensão McFarland 0,5 no ágar isotónico para teste de sensibilidade, que corresponde às recomendações da British Society for Antimicrobial Chemotherapy (BSAC Sociedade Britânica para Quimioterapia Antimicrobiana). 3. Com uma agulha, pinça ou distribuidor MAST DiscMaster (MDD62) estéreis, ponha um disco de cada tipo do conjunto de detecção MAST ID AmpC e ESL no meio inoculado, garantindo um espaço suficiente entre os discos para permitir a formação de zonas de inibição claramente definidas. 4. Incube a 35 a 37°C durante 18 a 24 horas. 5. Meça e registe o diâmetro em mm de quaisquer zonas de inibição que sejam observadas. Os discos que não mostrem nenhuma zona de inibição devem ser registados como 6mm. Interpretação dos resultados Interprete os resultados por comparação do diâmetro das zonas de inibição na sequencia descrita seguidamente : Passo 1 - Compare a zona de inibição dos discos de cefpodoxima (A) com a zona de inibição de cada disco de Cefpodoxime plus inhibitor (B, C e D). Se todas as zonas estão entre 2 mm de cada um, registe o organismo como apresentando ausência de actividade ESBL e Amp C. Passo 2 – Subtraia A de B e C de D. Se cada um dos B – A e D – C 5mm E se quando comparadas as diferenças nos diâmetros das zonas entre os discos B e D e discos A e C são de 4mm ou menos então o organismo esta a demonstrar actividade ESBL. Passo 3 - Subtraia B de D e A de C. Se cada um dos D – B e C – A 5mm E se quando comparadas as diferenças nos diâmetros das zonas entre os discos A e B e discos C e D são de 4mm ou menos então o organismo esta a demonstrar actividade AmpC Passo 4 - Subtraia C de D. Se D –C 5mm E se quando comparadas as diferenças nos diâmetros das zonas entre os discos A e B é de 4mm ou menos então o organismo esta a demonstrar actividade combinada ESBL e AmpC. Alternativamente pode ser utilizado um programa de cálculo que está disponible em www.mastgrp.com Controlo de qualidade Verifique se existem sinais de deterioração. O controlo de qualidade tem de ser feito com pelo menos um organismo para demonstrar uma reacção positiva e pelo menos um organismo para demonstrar uma reacção negativa. As zonas de inibição obtidas com um disco combinado com qualquer um dos inibidores e o disco correspondente só de cefalosporina contra controlo negativo de E. coli (ex., ATCC 25922) deve ser igual ou demonstrar uma diferença inferior a 2 mm. Qualquer diferença maior indica uma falha ou deterioração. Não utilize o produto se as reacções com o controlo negativo forem incorrectas. A lista seguinte apresenta um conjunto de estirpes de controlo do desempenho, que podem ser facilmente adquiridas pelo utilizador final. Organismo de teste Escherichia coli NCTC 13351 Escherichia coli NCTC 13352 Escherichia coli NCTC 13353 Enterobacter cloacae NCTC 13406 Escherichia coli ATCC 25922 Resultado ESL positivo ESL positivo ESL positivo AmpC positivo Negativo Limitações Para evitar resultados potencialmente erróneos, utilize apenas um disco combinado com um inibidor com o disco correspondente só de cefalosporina proveniente da mesma embalagem/lote. Não teste cartuchos de diferentes lotes - os lotes nunca devem ser misturados. Referências Bibliografia disponível mediante pedido. IFU179 PT 12/14 V7 MAST é uma marca registada ATCC é uma marca comercial de American Type Culture Collection, Manassas, Virgínia, EUA *A formulação pode ser alterada para cumprir os critérios de desempenho
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indicada no rótulo da embalagem. Deixar atingir a temperatura ambiente antes de abrir e recolocar no congelador imediatamente após utilização.
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