Anexo 5 - Telelab

Anexo 5
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Baciloscopia após concentração da amostra de escarro
Atenção
Os procedimentos de manipulação da amostra só podem ser realizados em cabine de segurança biológica e a centrífuga utilizada
deve ter rotores e adaptadores de tubos (caçapas) com tampas
de proteção contra a dispersão de aerossóis.
Procedimentos:
1. transfira a amostra, para um tubo de centrífuga de polipropileno, capacidade de 15ml, graduado e com
fundo cônico, devidamente identificado;
2. adicione com uma pipeta Pasteur, a solução de NaOH 4%, na quantidade correspondente ao mesmo volume da amostra;
3. feche bem e agite o tubo em vórtex, por 10 a 20 segundos, para formar uma mistura homogênea;
4. deixe o tubo em repouso, à temperatura ambiente, por 15 minutos, para que ocorra a mucólise ou fluidificação da amostra;
5. abra o tubo com a amostra e acrescente água destilada estéril até completar 10 ml. Feche o tubo e agite,
novamente, em vortex;
6. centrifugue a 3000 g por 15 minutos; retire o tubo da centrífuga, coloque-o numa estante e leve-o para a
bancada da cabine;
7. abra o tubo e despreze o sobrenadante em recipiente à prova de respingos, contendo aproximadamente
10 ml de fenol a 5%. Caso seja necessário, limpe a boca do tubo com uma gaze embebida em álcool a 70% ;
8. adicione com uma pipeta Pasteur 3 gotas de água destilada estéril sobre o sedimento. Feche o tubo e agite
em vortex para ressuspender o sedimento;
9. coloque 2 gotas do sedimento no centro de uma lâmina, previamente identificada. Em amostras de outros materiais (que não o escarro) adicione mais duas gotas de soro sangüíneo humano ou animal estéril
e misture com o sedimento para facilitar a fixação. Prepare, com a ponta da pipeta um esfregaço na forma
de um retângulo com dimensões de 1 x 2 cm;
10.faça a fixação e a coloração seguindo os procedimentos do método Ziehl Neelsen;
11.pingue uma gota de óleo de imersão sobre o esfregaço, faça a leitura de 300 campos microscópicos e
interprete os resultados de acordo com as seguintes possibilidades:
• foram encontrados nos 100 primeiros campos uma média de mais de 10 BAAR por campo. Está
encerrada a leitura e a amostra é positiva +++. Se a média for inferior ou não contiver BAAR, continue
a leitura até completar 200 campos;
• foram encontrados em 200 campos uma média de 1 a 10 BAAR por campo. Está encerrada a leitura e a amostra
é positiva ++. Se a média for inferior ou não contiver BAAR, continue a leitura até completar 300 campos;
• foram encontrados nos 300 campos um total de 10 a 99 BAAR, essa amostra é positiva +;
• foram encontrados de 1 a 9 BAAR - o resultado é inconclusivo para tuberculose. Deve-se solicitar uma
nova amostra e repetir o exame;
• não forem encontrados BAAR nos 300 campos observados - a amostra é negativa para BAAR.
Atenção
Se o diagnóstico da TB for feito pela baciloscopia após concentração da amostra de escarro, as baciloscopias de controle do
tratamento deverão ser realizadas da mesma forma, para que se
possa comparar os resultados.
Tuberculose - Diagnóstico laboratorial - Baciloscopia
Anexo 5