180807 - Bio Optica

Transcrição

180807 - Bio Optica
PERLS
método para ferro férrico
04 - 180807
IVD Dispositivo médico-diagnóstico in vitro
|
Código CND: W01030799
número de testes executáveis .... 12 processamentos x 50 ml
tempo de realização .................... 35 minutos
validade do produto ..................... 2 anos
temperatura de armazenamento . 15-25°C
equipamento complementar ........ tina vertical para histologia de 50 ml, cilindro graduado
vareta de vidro
Fim previsto
Preparado para o processamento de amostras cito-histológicas a examinar em microscopia óptica.
Aplicação
Método indicado para a visualização de ferro férrico reactivo em secções de tecido (método 1) e em
esfregaços de sangue ou medula óssea (método 2).
Especificidades:
A reacção de Perls, embora sendo específica para o ferro, não demonstra todo o ferro presente no
tecido; o ferro ligado à hemoglobina, ao pigmento malárico, à ferritina e aos pigmentos devido ao uso de
formalina ácida não reage. Também não reage o ferro-ferroso (bivalente).
Princípio
O ferrocianeto de potássio, reagindo em ambiente ácido com os iões férricos da hemossiderina, forma
um sal colorido: o Azul da Prússia. A reacção, na forma iónica, ocorre do seguinte modo:
4 Fe+++ 3K4Fe(CN)6= Fe4Fe(CN6)3+ 12 K+
Azul da Prússia
Método
1)
2)
Método para secções histológicas:
Desparafine e hidrate a secção com água destilada.
Deite todo o conteúdo do frasco A numa tina de Coplin de 50 ml. Adicione, por ordem, 30 ml de
água destilada e 4 ml do reagente B. Agite durante alguns instantes. Mergulhe a secção durante 20
minutos.
Lave bem em água destilada.
Deite na secção 10 gotas do reagente C: deixe actuar durante 5 minutos.
Lave em água destilada.
Desidrate através da série ascendente dos alcoóis, xileno e bálsamo
Método para esfregaços hemáticos ou medula óssea
Fixe os esfregaços previamente secos em metanol durante 3 minutos. Retire a lâmina e deixe secar.
Deite todo o conteúdo do frasco A numa tina de Coplin de 50 ml. Adicione, por ordem, 30 ml de
água destilada e 4 ml do reagente B. Agite durante alguns instantes. Mergulhe a secção durante 20
minutos.
Lave bem em água destilada.
Deite nos esfregaços 10 gotas do reagente C: deixe actuar durante 5 minutos.
Lave em água destilada.
Seque ao ar.
Empresa fabricante: Bio-Optica Milano s.p.a.
Bio Optica Milano s.p.a.
via San Faustino 58 • I - 20134 Milano
tel. +39 02212713.1 • fax +39 022153000
www.bio-optica.it
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Resultados
Ferro férrico reactivo ............................................................................................................................ Azul
Núcleos celulares ........................................................................................................................Vermelho
Notas:
os falsos positivos podem dever-se a três factores facilmente identificáveis:
- solução não preparada de fresco (a solução de ferrocianeto-ácido clorídrico deve ser preparada no
momento da utilização);
- iões férricos que contaminam as lâminas e a água de estiramento das secções (ferrugem), uso de
instrumentos de metal em contacto com a solução (pinças, etc.)
- asbestose: o amianto, eventualmente presente nos tecidos patológicos, pode dar uma reacção positiva
por causa de depósitos de sais de ferro nas suas fibras
Reagentes
A)
B)
C)
Advertências e
precauções
O produto destina-se a ser utilizado por pessoal técnico especializado.
O produto é classificado como perigoso.
Leia atentamente as informações indicadas no rótulo (símbolos de perigo, frases de risco e de
segurança) e consulte sempre a ficha de segurança, onde é possível obter informações relativas aos
riscos apresentados pelo preparado, medidas de precaução a adoptar durante o uso e medidas de
primeiros socorros e em caso de derrame acidental. Não utilize caso a embalagem primária esteja
danificada.
Conservação
Conserve o preparado à temperatura ambiente. Mantenha as embalagens devidamente fechadas e num
local escuro.
Estabilidade
Após a primeira abertura, o reagente deve considerar-se válido até à data de validade indicada, desde
que seja correctamente conservado.
Eliminação
Resíduo perigoso; entregue-o a empresas especializadas e autorizadas, segundo a legislação vigente.
Bibliografia
•
•
•
Solução de ferrocianeto de potássio ...................................................................................12 x 10 ml
Tampão ácido de activação........................................................................................................ 50 ml
Carmallume segundo Mayer....................................................................................................... 30 ml
Gomori G. Microtechnical demonstration of iron, a criticism of its methods. Am J Path 1936; 12: 655663.
Laufberger V. Sur la cristallisation de la ferritine. Bull Soc chim Biol 1937; 19: 1575-1582
Perls M. Nachweis von eisenoxyd in gewissenen Pigmenten. Virchow’ s Arch Path und Physiol und
Klin Med 1867; 39: 42-48
Data de publicação: Junho 2013
Empresa fabricante: Bio-Optica Milano s.p.a.
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