azul de cresil brilhante

AZUL DE CRESIL BRILHANTE
1. FINALIDADE
Solução corante para contagem de reticulócitos.
2. INTRODUÇÃO
Os eritrócitos são células que após passarem pelo processo de maturação,
perdem o núcleo. Algumas células conservam vestígios de material nuclear,
em especial o RNA, são os chamados reticulócitos.
3. IMPORTÂNCIA CLÍNICA
A presença de reticulócitos no sangue periférico é um sinal inequívoco de
produção de células vermelhas. Assim a contagem de reticulócitos é usada
para se avaliar a capacidade da medula óssea em produzir novas células
vermelhas, em casos de anemias hemolíticas e hemorragias.
4. AMOSTRA
- Tipo de amostra
A amostra usada consiste sangue total coletado com EDTA ou com citrato
de sódio, isento de hemólise.
- Armazenamento e estabilidade da amostra
A amostra deve ser processada o mais rapidamente possível após coletada,
do contrário, manter em geladeira (2-8oC) por até 24h.
- Critérios de rejeição
Rejeitar amostras que se apresentem hemolisadas, coaguladas (mesmo com
micro-coágulos).
- Precauções e cuidados especiais
Todas as amostras devem ser manipuladas com extrema cautela, pois
podem veicular diversas doenças infecto-contagiosas (hepatite, SIDA etc.).
Seu descarte deve ser feito preferencialmente após sua autoclavação
devendo-se evitar seu descarte diretamente no meio ambiente. Igual cuidado
se recomenda no descarte de outros materiais como ponteiras plásticas,
agulhas e seringas.
5. INFORMAÇÕES GERAIS SOBRE O PRODUTO
a- Princípio
O sangue total é diluído em azul de cresil brilhante, e a diluição é usada para
fazer esfregaços hematológicos aonde serão contados os reticulócitos.
b- Reagentes
- Solução a 1% de azul cresil brilhante em solução fisiológica (NaCl a 0,85%)
com 0,4% de citrato de sódio.
c- Armazenamento e estabilidade
O material deve ser mantido em temperatura ambiente, em local fresco, seco
e isento da incidência direta de luz solar, permanecendo assim estável até a
data de validade expressa em rótulo, desde que isento de contaminação
química ou biológica.
e- Precauções e cuidados especiais
- Manter os frascos sempre bem fechados;
- O reagente destina-se ao uso diagnóstico in vitro, não devendo ser ingerido
ou entrar em contato com a pele, olhos e mucosas.
6. MATERIAL NECESSÁRIO (porém não fornecido)
- Lâminas para microscopia;
- Pipetas sorológicas e micropipetadores;
- Banho-maria 37oC;
- Microscópio.
8. CÁLCULOS
- Dividindo-se por 10 o número de reticulócitos contados em 1000 eritrócitos
obtém-se o percentual de reticulócitos;
Ex. contaram-se 50 reticulócitos para cada 1000 eritrócitos indicando,
portanto 5% de reticulócitos. Supondo a contagem absoluta de 4,5 milhões
de eritrócitos por µL, 5% de reticulócitos representam 225.000
reticulócitos/µL.
9. RESULTADOS
- Expressar os resultados em percentual ou em reticulócitos por µL.
- Valores de referência: 0,56 - 2,72% (24.000-84.000/µL).
10. LIMITAÇÕES DO MÉTODO
Normalmente há interferências fisiológicas em pacientes submetidos a
grandes transfusões. A dificuldade em se visualizar os reticulócitos pode ser
contornada realizando-se uma coloração de fundo (panótico, Giensa etc.).
Uma causa de erro comum é não se obedecer os critérios de diluição pelo
hematócrito da amostra.
8. CONTROLE DA QUALIDADE
Recomenda-se a aferição constante do material com amostras clínicas. A
periodicidade do controle fica a ser estabelecida conforme a rotina do
laboratório. Resultados anormais devem ser criteriosamente estudados, e
até que sejam esclarecidas as causas, os resultados não devem ser
liberados.
9. GARANTIA DA QUALIDADE
A Laborclin obedece ao disposto na Lei 8.078/90 - Código de Defesa do
Consumidor. Para que o produto apresente seu melhor desempenho, é
necessário:
- que o usuário conheça e siga rigorosamente o presente procedimento
técnico;
- que os materiais estejam sendo armazenados em condições adequadas;
- que os equipamentos e demais acessórios necessários estejam em boas
condições de uso, manutenção e limpeza.
Antes de ser liberado para venda, cada lote do produto é submetido a testes
específicos, que são repetidos periodicamente até a data de vencimento
expressa em rótulo. Os certificados de análise de cada lote podem ser
obtidos junto ao site www.laborclin.com.br. Em caso de dúvidas ou outras
informações, contatar o SAC - Serviço de Assessoria ao Cliente através do
telefone 0800-410027 ou pelo e-mail [email protected]. Quaisquer
problemas que inviabilizem uma boa resposta do produto, que tenham
ocorrido comprovadamente por falha da Laborclin serão resolvidos sem ônus
ao cliente, conforme o disposto em lei.
10. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Oliveira Lima, Antonio et al.: Métodos de laboratório aplicados à clínica,
6ª edição. Rio de Janeiro, Guanabara Koogan, 1985.
2. Moura, Roberto A. et al: Técnicas de laboratório, 3ª edição.S. Paulo,
Livraria Atheneu, 1992.
11. REGISTRO NA ANVISA: 100.970.10.105
12. APRESENTAÇÃO
620477 - AZUL CRESIL BRILHANTE-RETICULOC.-FR100mL
7. PROCEDIMENTO TÉCNICO
a- Preparar a diluição do sangue total homogeneizado em azul cresil
brilhante, usando o seguinte critério baseado no hematócrito:
- para hematócrito até 30%: 12 gotas de sangue para 3 gotas de corante;
- para hematócrito entre 30-45%: 9 gotas de sangue para 3 gotas de corante;
- para hematócrito superior a 45%: 6 gotas de sangue para 3 gotas de
corante;
b- Colocar em Banho-Maria a 37°C por 20 minutos;
c- Homogeneizar e preparar um esfregaço hematológico com a diluição;
d- Deixar secar e a lâmina estará pronta para a leitura (para uma melhor
visualização, recomenda-se contra-corar por um método hematológico como
panótico, Giensa etc.).
e- Observar ao microscópio e contar o número de reticulócitos (eritrócitos
com um filamento escuro de RNA em se interior) relativos a 1000 eritrócitos.
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