título do resumo - EAIC

BIOMARCADORES BIOQUÍMICOS EM BIVALVES Corbicula fluminea
APÓS A COLETA EM UM LAGO URBANO E DURANTE ACLIMATAÇÃO
Luciana Fernandes de Oliveira (PIBIC/CNPq-UEL), Cláudia Bueno dos Reis
Martinez (Orientador), e-mail: [email protected].
Universidade Estadual de Londrina/Centro de Ciências Biológicas
Londrina - Paraná
Palavras-chave: biomonitoramento, biomarcadores bioquímicos, bivalves,
ribeirão urbano.
Resumo:
Para monitorar a qualidade de ecossistemas aquáticos pode-se fazer uso de
biomarcadores. No presente trabalho, os biomarcadores bioquímicos GST,
GSH, peroxidação lipídica, capacidade antioxidante total e mecanismo de
resistência à multixenobióticos foram estudados em brânquias e glândulas
digestivas de uma espécie de bivalve dulcícola, Corbicula fluminea. Animais
foram coletados em um lago urbano e posteriormente mantidos em
laboratório por até 28 dias. Os resultados mostram que os animais
residentes do lago apresentam alterações e ainda não é possível afirmar que
o período testado é suficiente para obtenção dos valores basais dos
parâmetros avaliados.
Introdução
Os biomarcadores constituem importantes ferramentas para monitorar o
equilíbrio do ecossistema aquático e têm sido empregados em programas de
monitoramento (WALKER et al., 1996).
Quando um animal é exposto à contaminação, dá-se um processo de
biotransformação do xenobiótico, que tem a participação da enzima
Glutationa S Transferase (GST). Esse processo pode acarretar na formação
de espécies reativas de oxigênio (EROS). Para prevenir danos celulares os
organismos aeróbicos apresentam mecanismos de defesa antioxidante. A
Glutationa Reduzida (GSH) é o principal antioxidante não-enzimático. O
sistema de defesa antioxidante trabalha de forma cooperativa e determinar a
capacidade antioxidante total de um tecido pode promover um entendimento
melhor da toxicidade causada pelas EROS (AMADO et al., 2008). Quando a
defesa antioxidante não é estabelece-se o estresse oxidativo, podendo
ocorrer danos celulares e teciduais. A ação das EROS mais estudada é a
lipoperoxidação.
O mecanismo de resistência à multixenobióticos (MXR) é comumente
usado como biomarcador. Esta resistência é dada pela presença de
proteínas, como as glicoproteínas-P que transportam uma variedade de
compostos através da membrana celular.
Para fazer uso destes parâmetros bioquímicos como biomarcadores,
é importante que se conheça o nível basal de concentração ou atividade dos
mesmos, quando os animais se encontram em um meio em condições ideais
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e sem fontes de contaminação. Estas informações podem ser utilizadas de
forma comparativa.
O molusco bivalve Corbicula fluminea é considerado um organismo
adequado para o monitoramento ecotoxicológico (NARBONNE et al., 1999).
Esta espécie é encontrada no Lago Igapó III, local estudo no presente
trabalho. YABE E OLIVEIRA (1998) identificaram diversos metais pesados
em águas superficiais do Ribeirão Cambe e mais recentemente, o IAP
determinou qualidade de regular a boa das águas dos lagos deste ribeirão.
Este trabalho teve por objetivo caracterizar atividade da enzima GST,
a concentração de GSH, a ocorrência de lesões oxidativas, a produção de
EROS e o MXR em brânquia e glândula digestiva do bivalve C. fluminea,
recém coletados no Lago Igapó III. Além disso, acompanhar a variação
destes parâmetros durante período de vinte e oito dias no laboratório, sob
condições controladas, para avaliar a possível recuperação dos animais e
observar os níveis basais dos parâmetros.
Materiais e Métodos
Foram coletados sessenta espécimes do bivalve dulcícola C. fluminea no
Lago Igapó III, em Londrina - PR. Depois de coletados, foram transportados
para o Laboratório de Bioensaios da UEL.
Foram amostrados, de imediato, doze animais. O restante foi
transferido para aquários contendo água limpa e aerada. A cada sete dias,
mais doze animais foram amostrados até o vigésimo oitavo dia.
Dos animais amostrados foram retiradas as brânquias e glândulas
digestivas. Com esses tecidos foram determinados os parâmetros
bioquímicos GST, GSH, lipoperoxidação pela determinação de malonaldeído
(MDA), capacidade antioxidante total por radicais peroxil e MXR pela medida
de acumulação de Rodamina B. A concentração de proteínas foi
determinada pelo Método de Bradford e os dados de concentração de
proteínas nas amostras foram utilizados para normalização dos dados,
exceto para MXR.
Resultados e Discussão
Durante o estudo foram coletados sessenta animais cujo peso médio foi de
6,84 ± 1,34 g (Média ± Desvio padrão). Não houve mortalidade no período
de vinte e oito dias.
Na Tabela 1 estão representados os dados referentes aos cinco
parâmetros avaliados. A semana 0 refere-se à amostragem imediata dos
animais, e as demais semanas estão representadas de 1 a 4.
Observa-se que nas brânquias a atividade da GST (mU / mg ptn)
estava reduzida nos animais residentes no lago, em relação àqueles já
aclimatados. O molusco dulcícola Elliptio complanata quando exposto a um
efluente de esgoto sanitário primariamente tratado, com adição de
surfactantes, apresentou uma redução da atividade da GST. Esta redução
sugere que o efluente contém substâncias inibidoras da enzima (GAGNÉ et
al., 2007).
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Tabela 1 – Resultados dos parâmetros avaliados em C.fluminea coletados
no Lago Igapó III e aclimatados por 28 dias. Letras diferentes representam
presença de diferença significativa entre as semanas, sendo P ≤ 0,05.
BRÂNQUIAS
Semanas
Parâmetros
0
1
2
3
4
GST
50,41 a
31,62 b
72,06 c
54,94 ac
60,67 ac
GSH
0,82 a
0,41 b
0,84 a
0,83 a
0,05 c
Lipoperoxidação
2,76 a
0,73 b
2,23 a
2,32 a
1,88 a
a
a
a
a
C.A. total
0,19
0,20
0,14
0,24
0,23 a
MXR
13,41 a
11,03 ab
11,44 ab
6,58 b
GLÂNDULAS DIGESTIVAS
GST
350,28 a
262,78 b 192,97 bc 188,68 bc 156,07 c
GSH
1,76 a
2,35 b
1,71 a
1,21 c
0,24 d
a
ab
b
ab
Lipoperoxidação
2,70
2,26
0,77
1,69
1,27 ab
C.A. total
3,10 a
3,66 ab
2,45 ab
5,90 b
4,24 ab
a
b
ab
MXR
2,07
3,76
2,86
3,00 ab
Na glândula digestiva a enzima estava com sua atividade elevada e
esta foi reduzindo conforme se corriam os dias de aclimatação. Porém, com
28 dias não é possível afirmar se a atividade da enzima encontra-se a nível
basal em glândula digestiva. A atividade desta enzima é pelo menos 3 vezes
maior na glândula digestiva que na brânquia.
Na glândula pode-se observar um aumento da concentração de GSH
(nMol / mg ptn) na semana 1 que, apresentou uma redução progressiva nas
semanas seguintes. A diminuição da GSH deve estar relacionada com uma
menor produção de ERO.
A lipoperoxidação ([MDA] uMol / mg ptn) tendeu à diminuição nos dois
tecidos, sem significância. Uma diminuição era esperada já que a
lipoperoxidação pode ocorrer devido à presença de xenobióticos e EROS.
Com esses dados, ainda não é possível afirmar se os níveis de
lipoperoxidação encontrados são normais para C.fluminea, ou se os animais
ainda não se recuperaram em 28 dias.
Os dados obtidos mostram que na glândula digestiva a capacidade
antioxidante total, representada através da área relativa (relação inversa),
diminuiu significativamente na semana 3. Esta estava elevada nos animais
coletados no Lago Igapó III. Esta elevação é considerada uma resposta
adaptativa destes animais (MONSERRAT et al., 2007). Com a aclimatação
foi diminuída a capacidade antioxidante total, possivelmente, pela menor
exigência.
Nas glândulas digestivas houve aumento de Rodamina B (uM / g
tecido úmido) na semana 2 em relação a 0, indicando uma diminuição das
proteínas P-gp. Em organismos aquáticos essas proteínas estão
relacionadas com o combate à acumulação de xenobióticos dentro das
células e em condições adversas o MXR deve ser ativado para proteção
(PAIN; PARANT, 2005). Portanto, nos C.fluminea coletados no Lago Igapó o
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MXR nas glândulas digestivas parece estar ativado e diminui durante o
período de aclimatação.
Conclusões
Este estudo mostrou que os C.fluminea coletados no Lago Igapó III
apresentam alterações em alguns dos parâmetros avaliados e o tecido que
parece estar mais envolvido com os processos adaptativos destes animais é
a glândula digestiva.
Não é possível afirmar que os vinte e oito dias de aclimatação são
suficientes para obtenção dos valores basais de todos os parâmetros
avaliados.
Agradecimentos
Os autores agradecem ao programa de Iniciação Científica e ao CNPq pelo
apoio financeiro.
Referências
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