Mamíferos Aquáticos da Costa Amazônica e Delta - PPGEAP
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Mamíferos Aquáticos da Costa Amazônica e Delta - PPGEAP
UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARÁ INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM ECOLOGIA AQUÁTICA E PESCA MAMÍFEROS AQUÁTICOS DA COSTA AMAZÔNICA E DELTA DO PARNAÍBA: DIVERSIDADE E RELAÇÕES TRÓFICAS ALEXANDRA FERNANDES COSTA Orientador: Dr. Tommaso Giarrizzo Co-orientador: Dr. Salvatore Siciliano Belém – Pará 2015 2 UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARÁ INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM ECOLOGIA AQUÁTICA E PESCA ALEXANDRA FERNANDES COSTA MAMÍFEROS AQUÁTICOS DA COSTA AMAZÔNICA E DELTA DO PARNAÍBA: DIVERSIDADE E RELAÇÕES TRÓFICAS Tese apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Ecologia Aquática e Pesca da Universidade Federal do Pará como requisito parcial para obtenção do título de Doutor em Ciências Biológicas na área de Ecologia Aquática e Pesca. Orientador: Dr. Tommaso Giarrizzo Co-orientador: Dr. Salvatore Siciliano Belém – Pará 2015 3 4 5 AGRADECIMENTOS Em primeiro lugar agradeço à minha família, sempre ao meu lado me apoiando e acreditando neste caminho profissional tortuoso que escolhi. À minha mãe Eunice por ter ajudado sempre em todos os sentidos me deixando carregar boto morto dentro do seu carro. A minha irmã, Ninha toda sua ajuda nas formatações, consultorias diversas e coleta de material. Ao Mike por ajudar nas revisões de inglês. A minha filha Catarina por ter entendido minhas ausências por conta do trabalho em todos esses anos. Ao meu pai por ter sempre dito que o mais importante da vida é o nosso estudo. A minha Tchuchu por estar sempre ao meu lado, minha companheira. Ao Salvatore Siciliano por ter sido sempre meu mentor e minha inspiração no trabalho com os mamíferos aquáticos. Obrigada Sal por ter sempre acreditado em mim, e ser além de orientador um grande amigo. Ao meu orientador Tommaso Giarrizzo, obrigada por ter aceitado entrar no mundo dos mamíferos aquáticos, por todo apoio ao meu grupo de pesquisa abrindo as portas do GEA a mim e a todos que carreguei para executar seus trabalhos. A todos os companheiros que passaram pelo GEMAM ao longo desses anos por terem ajudado em todos os campos, encalhes difíceis e tudo o mais. Nosso trabalho não é fácil, mas vamos continuar acreditando. Ao Cazuza por ter acreditado no GEMAM e aberto as portas do Museu Emílio Goeldi ao nosso grupo. Sem o seu apoio não teríamos chegado até aqui. Agradeço in memoriam aos naturalistas e pesquisadores do MPEG que coletaram os exemplares de peixes-boi e botos de rio na bacia Amazônica. Agradeço especialmente a você Rê por ter sempre me apoiado, incentivando a seguir em frente mesmo em meio a todas as dificuldades. Se não fosse seu incentivo não teria entrado no doutorado. Obrigada pela nossa caminhada profissional no GEMAM. Tantas conquistas, vamos continuar acreditando que vale a pena. À tia Neusa e tio Jorge por terem me recebido por mais de um ano em sua casa e serem minha família paraense. À Maura por todos os seus porquês, por ter me feito acreditar que valia a pena nos momentos difíceis. Agradeço a você e a toda a sua família por tudo que fizeram e fazem por mim. Obrigada a você e ao Renan pela confecção dos mapas ao longo do caminho, e por serem meus filhotes crescidos. Ao Victor Carvalho pelos anos de companheirismo e por me proporcionar um lar até o fim dessa jornada. À Jacqueline Vieira por ter acreditado no nosso trabalho, ajudando nas coletas dos exemplares do Delta e do Pará e fornecendo com teu estudo informações tão importantes para a discussão do meu trabalho. Vamos seguir em frente. Obrigada Jac pela amizade e por ter quebrado tantos galhos pessoais. 6 Aos amigos que me permitiram entrar na família GEA. Rory obrigada por todo empenho no processo das amostras e Allan por me apresentar o mundo “R”, sem você não teria rodado as análises. Fabiola obrigada por todos os cafezinhos, por liberar material do laboratório sempre que precisei e por ser uma ótima companheira de campo. À Pri Miorando por ter me dado apoio profissional nas discussões ecológicas e isotópicas sobre os “chupa leite”, ajudado na revisão dos textos finais e ter sido tão boa amiga nos momentos mais difíceis do final dessa caminhada. Ao Alejo por ter mostrado que o mundo isotópico podia ser belo. Todas as nossas conversas e discussões foram importantes na construção desse trabalho. À Malu Claudino por ter repassado tantas dicas sobre os isótopos mostrando que a ferramenta não era um bicho de sete cabeças. À Ingrid Clark por ter acreditado no meu trabalho, dividindo as responsabilidades junto ao Instituto Ilha do Caju (PROCEMA). Obrigada por todas as concessões feitas a mim e por além de chefe ter se transformado em uma grande amiga. Às minhas amigas de Parnaíba de quem sinto tanta falta por sempre torcerem por mim, mesmo não entendendo nada do que faço. Ana, Dri, Pat vocês me deram tanto apoio mesmo sem saber. À minha querida Aline Cerqueira. Amiga, tuas palavras de apoio e ordem foram sempre um estímulo a mais. Começamos juntas nessa caminhada ainda nadando com os botos em Fortaleza. Obrigada por todo apoio, mesmo estando do outro lado do Atlântico. Depois disso tudo vamos comemorar juntas. Ao querido Maíca por me carregar para cima e para baixo no Delta do Parnaíba. Ninguém conhece como você essa região. Obrigada por ser do seu jeito um grande defensor desse ambiente. Ao Quadrado por toda dedicação nas coletas de tantos exemplares de botos. Meu amigo, sem você eu não teria tanta diversidade de espécies do Delta. Obrigada por ter sido sempre “meus olhos” monitorando a Pedral mesmo eu estando longe. Valeu!!! À Silvina Botta por ter me inspirado neste trabalho, e por ter me acolhido no Laboratório de Ecologia e Conservação da Megafauna Marinha/FURG me repassando tantos conhecimentos, tanto em relação aos isótopos quanto à determinação de idade. Obrigada Sil por ter sido informalmente minha orientadora, ajudando em todos os passos do processo. Ao Dr. Seth Newsome por ter acreditado em nossa pesquisa analisando todas as amostras no Centro de Isótopos da University of New Mexico. Thank you very much for all logistical support to the study and to show the best way to analyze our data. Ao Programa de Pós-Graduação em Ecologia Aquática e Pesca (PGEAP) por proporcionar suporte nesses anos de curso, especialmente à nossa coordenadora Jussara Martinelli por sempre quebrar os galhos dos alunos e pelo empréstimo da balança analítica. A CAPES pela concessão da bolsa de estudo. Amar-se é respeitar-se, É ensejar-se as conquistas superiores da vida”. Joana de Angelis Foto Rodrigo Baleia 7 8 RESUMO A costa Amazônica e parte do Nordeste são as áreas menos pesquisadas em relação aos mamíferos aquáticos na costa brasileira. A formação de grupos de pesquisa e o incremento na coleta de informações advindas dos eventos de encalhes são aspectos recentes para a Região Norte e vem contribuindo para diminuir as lacunas do conhecimento sobre este grupo animal. Informações sobre a biologia das espécies, uso do habitat e as relações tróficas devem ser coletadas. Espécies como o peixe-boi-da-Amazônia (Trichechus inunguis), o boto-cinza (Sotalia guianensis) e os botos de rio (Inia geoffrensis e I. araguaiaensis) sofrem sérias ameaças à sua sobrevivência e necessitam que sejam desenvolvidas estratégias de manejo e conservação para as espécies e seu habitats. O estudo reporta eventos incomuns de encalhes de mamíferos aquáticos, registrados no período de 2003 a 2014 na zona costeira dos estados do Pará, Maranhão e Piauí. Desde a publicação em 2008 da lista mais recente de mamíferos aquáticos, registramos a ocorrência de outras quatro espécies na área de estudo: a baleia-Sei (Balaenoptera borealis), a baleia-Fin (Balaenoptera physalus), o golfinho-cabeça-de-melão (Peponocephala electra) e a falsa-orca (Pseudorca crassidens) ampliando a riqueza de espécies para a costa Amazônica para vinte e seis, englobando desde golfinhos oceânicos até as maiores baleias existentes. O presente estudo comparou trabalhos pretéritos que registraram comunidades de cetáceos do Norte e Nordeste do Brasil com registros realizados na região sul do Caribe. Os resultados mostraram que existe uma alta similaridade entre as composições destas regiões, comprovando a conexão da costa Amazônica com a fauna de cetáceos do Caribe. Outra ferramenta utilizada neste estudo foi a análise de isótopos estáveis realizada com o material ósseo coletado durante os eventos de encalhe mencionados anteriormente. A análise de isótopos de carbono e nitrogênio foi utilizada a fim de: 1) investigar o uso do habitat e as relações tróficas entre espécies marinhas e de água doce; 2) avaliar a partição de nicho isotópico entre as espécies mais abundantes na costa Amazônica (S. guianensis, Inia spp. e T. inunguis) e 3) estimar as diferenças de nicho isotópico entre estoques ecológicos do boto-cinza na costa Amazônica e no Delta rio Parnaíba. Na costa brasileira ainda são poucos os estudos que utilizam os isótopos estáveis como ferramenta para elucidar as relações tróficas entre as comunidades de mamíferos aquáticos. Neste estudo, foram analisadas amostras de 14 espécies entre cetáceos e sirênios (N=267). Foi observado um padrão espacial costa-oceano para as espécies marinhas, apresentando valores de 13C mais enriquecidos nas costeiras, enquanto as oceânicas mostraram valores mais empobrecidos de carbono. Os estoques de boto-cinza do Delta do Parnaíba (NC) e costa Amazônica (AE) apresentaram valores similares de 15N. Contudo, o grupo NC apresentou valores mais enriquecidos de 13C. Os nichos isotópicos foram altamente diferenciados entre as espécies mais abundantes (T. inunguis, S. guianensis e Inia spp.) não apresentando sobreposição de nicho indicando forte segregação de nicho isotópico pelo menos na baía do Marajó. Este estudo fornece a primeira avaliação da composição isotópica de mamíferos aquáticos do norte do Brasil. Palavras-chave: Amazônia. Delta do Parnaíba. Encalhes. Ecologia trófica. Cetacea. Sirenia. 9 ABSTRACT The Amazon and most of the Northeastern coast of Brazil are some of the least researched areas in the country with regards to aquatic mammals. The organization of new specialized research groups and the increase in data sampling frequency from stranding events in these regions, help to fill in the knowledge gaps about this group of animals. It is therefore of paramount importance that information focusing on species biology, habitat use and trophic relationships are gathered. The Amazonian manatee (Trichechus inunguis), Guiana dolphin (Sotalia guianensis) and river dolphins (Inia geoffrensis e I. araguaiaensis) face serious threats to their survival and require the development of effective management and conservation strategies both at species and habitat level. This study reports on rare stranding events of aquatic mammals recorded between the years of 2003 and 2014, in the coasts of the states of Pará, Maranhão and Piauí. Since the publication of the latest list of aquatic mammals in 2008, we have recorded the occurrence of other four new species for these regions: Sei whale (Balaenoptera borealis), Fin whale (Balaenoptera physalus), Melon-headed whale (Peponocephala electra) and False killer whale (Pseudorca crassidens), expanding the number of species in the Amazon coast to 26 species, that range from oceanic dolphins to some of the largest existing whales. This study also compared cetacean communities’ records between the North and the Northeastern coasts of Brazil with the Southern Caribbean. The results from this comparison show a high similarity between the communities’ compositions of these regions, indicating a connection between the cetacean fauna of the Amazon region and the Southern Caribbean. Another tool used in this study was the analysis of stable isotopes using bone material collected during the stranding events mentioned above. The analysis of carbon and nitrogen isotopes was used in order to: 1) investigate the habitat use and trophic relationships among marine and freshwater species; 2) evaluate the isotopic niche partitioning among the most abundant species in the Amazon coast (S. guianensis, Inia spp. and T. inunguis), and 3) estimate the isotopic differences between ecological niche of the estuarine dolphin stocks in the Amazon coast and in the Parnaíba River Delta. There are still few studies using stable isotopes as a tool to elucidate the trophic relationships between aquatic mammal communities in the Brazilian coast. In this study, samples from 14 species of cetaceans and sirenians (N= 267) were analyzed. A coastal-oceanic spatial pattern was observed in the marine species, showing more 13 C enriched values in the coastal species, while oceanic species showed depleted carbon values. Guiana dolphin stocks from the Parnaíba River Delta (NC) and the Amazon coast (AE) showed similar values of 15N. The NC group however, showed enriched values of 13C. The isotopic niches were highly differentiated among the most abundant species (T. inunguis, S. guianensis and Inia spp.), showing no niche overlap and indicating strong niche segregation isotopic at least in Marajó bay. This study provides the first assessment of the isotopic composition of aquatic mammals in North of Brazil. Keywords: Amazon. Parnaíba Delta. Strandings. Trophic ecology. Cetacea. Sirenia. 10 APOIO FINANCEIRO E LOGÍSTICO 11 LISTA DE FIGURAS INTRODUÇÃO GERAL Figura 1. Área de estudo representando os três setores amostrados ao longo da costa Amazônica englobando o litoral do Pará e parte do Maranhão e o Delta do Parnaíba no nordeste do Brasil (1). Detalhe dos setores: (2) Amazônia oriental, áreas de várzea (AL), (3) estuário amazônico (indicação do Canal Norte e Sul) e áreas costeiras adjacentes (AE) e (4) costa nordeste, evidenciando o litoral dos estados do Maranhão e Piauí (NC). ................... 31 Figura 2. Setor 1 – Mapa do setor 1 evidenciando grandes rios da bacia do rio Amazonas (Trombetas, Tapajós e Xingu). Círculos pretos são locais de coleta dos exemplares de mamíferos aquáticos. Ambientes de várzea mostrando vegetação típica deste habitat na baía dos Botos, município de Portel (PA). ...................................... 32 Figura 3. Setor 2 – Mapa do setor 2 evidenciando a costa nordeste do Pará e oeste do Maranhão. As baías mais representativas deste setor para este estudo estão nomeadas, Marajó, Marapanim e Maracanã. Praia da costa leste da ilha de Marajó (Barra Velha), município de Soure (PA). .......................................................................... 32 Figure 4. Setor 3 – Mapa do setor 3 mostrando algumas das baías que formam o Delta do Parnaíba no extremo leste do Maranhão e oeste do Piauí. Campos de dunas e manguezal na baía do Caju, município de Araioses (MA). .............................................................................................................................................................................. 32 Figura 5. Cetáceos encalhados no Norte e Nordeste do Brasil. (a) baleia-fin, Balaenoptera physalus, (b) baleia-sei, B. borealis, (c) baleia-de-Bryde, B. brydei; (d) Cachalote, Physeter macrocephalus, (e) baleia-jubarte (Megaptera novaeangliae) (f) golfinho-nariz-de-garrafa, Tursiops truncatus, (g) boto-cinza, Sotalia guianensis, (h) falsa-orca, Pseudorca crassidens e (i) golfinho-de-Fraser, Lagenodelphis hosei. Destaque para registro do encalhe em massa de botos-cinza, na foto (g) um dos indivíduos é carregado de áreas rasas da praia para porção mais funda dos canais de maré e (i) espécime de golfinho-de-Fraser tem carne retirada para consumo humano. ........................ 35 Figura 6. Coleta e preparação das amostras para análises de isótopos estáveis. (a e b). Coleta de amostras nos cetáceos encalhados, (c) dente após limpeza em laboratório, (d) coleta de amostras em crânios na coleção de Mamíferos do MPEG, (e) maceração das amostras, (f) pesagem e encapsulamento, (g) cápsulas de estanho e (h) bandeja com cápsulas para envio para análises. .................................................................................................. 36 CAPÍTULO I - Stranding survey as a framework to investigate rare cetacean records of the North and Northeastern Brazilian coasts Fig. 1. Study sites representing the three surveyed sectors on North and North-eastern Brazilian coast: (1) Marajó Bay; (2) Eastern Pará state and (3) Maranhão and Piauí coastlines encompass part of Parnaíba Delta. Dots representing stranding locations of marine mammals, Physeter macrocephalus (Pma), Balaenoptera brydei (Bbr), Balaenoptera physalus (Bph), Megaptera novaeangliae (Mno), Steno bredanensis (Sbr), Balaenoptera borealis (Bbo), Tursiops truncatus (Ttr), Globicephala macrorhynchus (Gma), Pseudorca crassidens (Pcr), Sotalia guianensis (Sgu), Peponocephala electra (Pel), Stenella attenuata (Sat), Lagenodelphis hosei (Lho), Delphinus sp. (Dsp) and Grampus griseus (Ggr). ......................................................................................................................... 69 o o Fig. 2. Sei whale Balaenoptera borealis stranded at Fernandes Belo (01 10’59.16”S, 46 5’48.52”W), Viseu municipality, near the border between the Pará and Maranhão states. The particular coloration of the baleen plates and slightly arched head are diagnostic characters to identify the species (photos by DEMA/PA and Jairo Moura). ................................................................................................................................................................ 71 12 o Fig. 3. Fin whale Balaenoptera physalus stranded at the São João de Pirabas municipality (00 45’31.29”S, o 47 4’26.41’W), Eastern coast of the Pará state. Note the good condition of the carcass and a strange swelling on the top of the head (photo by GEMAM/MPEG). ................................................................................................... 72 Fig. 4. Diagram of cetaceans reported from the North-eastern (inverted triangle) and North coast of Brazil (triangle) and southern Caribbean (square), resulting from a cluster analysis of cetacean stranding and sighting records reported in seven articles and the present study. Arrows indicate the two distinct groups formed (Group 1 and 2). A similarity profile (SIMPROF) permutation test highlights dashed clusters that show significant internal structure. Shaded cells indicate occurrence of species. ........................................................................................ 73 CAPÍTULO II - Stable Isotopes of Carbon and Nitrogen Reveal Resource Partitioning Among Aquatic Mammals from Amazon and Northeastern Coast of Brazil. Figure 1. Maps of the study sites representing the three sampling sectors along the Northern and Northeastern Brazil (1). Detailed maps of regions: (2) Northeastern coast, at the coast of the Maranhão (MA) and Piauí (PI) states (NC), (3) Amazon Lowland (AL), showing collection rivers and (4) Amazon Estuary and adjacent coastal zone (AE). AP (Amapá state), PA (Pará state), MA (Maranhão state), PI (Piauí state) and CE (Ceará state). Sector AE only includes the collecting area of the study and not the Northern region as a whole. Dots are collection locations. .............................................................................................................................................................. 82 Figure 2. Mean (±SD) C and N values of bone-collagen for aquatic mammals collected from the Amazon Estuary and adjacent coastal zone (AE) and Northeastern coast of Brazil (NC). Trichechus inunguis (T_inunguis), Inia spp. (Inia_spp), Sotalia guianensis, AE (Sgui_AE), S. guianensis, NC (Sgui_NC), Grampus griseus (Ggr), Physeter macrocephalus (Pma), Steno bredanensis (Sbr), Delphinus sp.(Dsp), Tursiops truncatus (Ttr), Pseudorca crassidens (Pcr), Peponocephala electra (Pel), Globicephala macrorhynchus (Gma), Lagenodelphis hosei (Lho) and Stenella attenuata (Sat). ...................................................................................................................................... 87 13 15 Figure 3. Bone-collagen C and N values for Inia genus: Inia geoffrensis (n=8), I. araguaiaensis (n=3) and Inia spp. not identified (n=9). Samples were collected along the Amazon Lowland (AL) and Amazon Estuary and adjacent coastal zone (AE), Northern and Northeastern Brazil, respectively. ....................................................... 88 13 15 Figure 4. Stable isotope bi-plot ( C versus N) showing the isotope niche area of Inia_spp. (n= 20, red line), T_inunguis (n= 11, ligth blue line), Sgui_AE (n=175, dark blue line), Sgui_NC (n= 32, green line) and Delphinids (n= 26, black line). Solid lines represent SEAc (standard ellipses areas) adjusted for small sample sizes, containing c. 40% of data (Jackson et al., 2011) within each group. There is no overlap among the most representative species of the study area (Sotalia guianensis, Inia spp. and Trichechus inunguis). The overlap expressed the significant isotope niche partitioning among Delphinids and populations of S. guianensis. .................................................. 89 13 15 Figure 5. Plots showing the variation in C and N values for Delphinids (n= 26), Inia_sp. (n=20), Sgui_NC (n= 32), Sgui_AE (n= 175) and T_inunguis (n=11) from Northern and Northeastern Brazil. Black circles (mode) represent the SEA, boxes indicate 50%, 75% and 95% credible intervals from dark grey to light grey, respectively. Red square indicate the SEAc (SEA corrected for small samples sizes) of Bayesian standard ellipse areas. .......... 90 13 15 Figure 6. Zoom of the plots showing the variation in C and N values for Guiana dolphin Sotalia guianensis from Northeastern coast (NC) and Amazon Estuary and adjacent coastal zone (AE), respectively (Sgui_NC and Sgui_AE). Black circles represent mode of SEA. Boxes indicate 50%, 75% and 95% credible intervals from dark grey to light grey, respectively. Red square indicate the SEAc (SEA corrected for small samples sizes) of Bayesian standard ellipse areas. ......................................................................................................................................... 90 13 15 13 LISTA DE TABELAS CAPÍTULO I - Stranding survey as a framework to investigate rare cetacean records of the North and North-eastern Brazilian coasts. Table 1. Records of cetaceans stranded from 2003 to 2014 on the North and Northeastern Brazilian coast. TL (total length in meters), NI (not identified). The study area was divided in three sectors: Eastern Pará state (EP), Marajó bay (MB) and Maranhão/Piauí coastline (MA/PI). ................................................................................... 70 CAPÍTULO II - Stable Isotopes of Carbon and Nitrogen Reveal Resource Partitioning Among Aquatic Mammals from Amazon and Northeastern Coast of Brazil. Table 1. Isotope values of C and N (in ‰) for aquatic mammal bone samples. Specimens were collected from Northern (Amazon Lowland, AL and Amazon Estuary and adjacent coastal zone, AE) and Northeastern Brazil (coastline of Maranhão and Piauí states, NC). ...................................................................................................... 86 13 15 Table 2. Isotope niche width of five groups of aquatic mammals: Trichechus inunguis (T_inunguis), Inia spp. (Inia geoffrensis, I. araguaiaensis), Delphinids and Sotalia guianensis (Sgui_NC and Sgui_AE). SEA represents standard ellipses area and SEAc standard ellipses adjusted for small sample sizes. ................................................ 89 14 SUMÁRIO RESUMO .................................................................................................................................8 ABSTRACT...............................................................................................................................9 LISTA DE FIGURAS. ................................................................................................................ 12 LISTA DE TABELAS ................................................................................................................. 13 Apresentação da Tese ........................................................................................................... 16 1.INTRODUÇÃO GERAL.......................................................................................................... 17 1.1.Diversidade de mamíferos aquáticos no estuário amazônico e Delta do Parnaíba (CAPÍTULO I) .................................................................................................. 18 1.2.Uso do Habitat (CAPÍTULO II) .............................................................................................. 18 1.3. Relações tróficas............................................................................................................. 20 Sotalia guianensis, Inia spp. e Trichechus inunguis .............................................................. 22 2. OBJETIVOS ........................................................................................................................ 27 2.1.Geral ..................................................................................................................................... 27 2.2.Específicos ............................................................................................................................ 27 3. MATERIAL E MÉTODOS ..................................................................................................... 28 3.1. Área de Estudo .................................................................................................................... 28 3.2. Coleta de amostras ............................................................................................................. 31 3.2.1. Registros de encalhes ................................................................................................... 31 3.2.2. Isótopos estáveis........................................................................................................... 33 3.3. Preparação das amostras ................................................................................................... 34 3.4. Análise dos Dados ............................................................................................................... 35 Análise de Similaridade (CAPÍTULO I) ..................................................................................... 35 Análises de Isótopos estáveis (CAPÍTULO II) ........................................................................... 35 Caracterização do nicho isotópico .......................................................................................... 36 4. SÍNTESE DOS RESULTADOS ................................................................................................ 37 4.1. Riqueza de mamíferos aquáticos (CAPÍTULO I) ................................................................. 37 4.2. Uso do habitat e Relações tróficas (CAPÍTULO II).............................................................. 38 4.3. Caracterização de Nicho isotópico (CAPÍTULO II) .............................................................. 40 5. CONCLUSÕES GERAIS ........................................................................................................ 43 6. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ......................................................................................... 44 CAPÍTULO I - STRANDING SURVEY AS A FRAMEWORK TO INVESTIGATE RARE CETACEAN RECORDS OF THE NORTH AND NORTH-EASTERN BRAZILIAN COASTS ..................................... 53 ABSTRACT ............................................................................................................................. 54 INTRODUCTION ..................................................................................................................... 55 MATERIALS AND METHODS ................................................................................................... 56 Study sites ............................................................................................................................ 56 Data source and analysis ....................................................................................................... 57 15 RESULTS AND DISCUSSION ..................................................................................................... 57 Species richness and diversity ............................................................................................... 57 SPATIAL DISTRIBUTION ................................................................................................................ 59 CETACEAN COMPOSITION ............................................................................................................. 59 Cluster Analysis .................................................................................................................... 61 ACKNOWLEDGMENTS............................................................................................................ 62 FINANCIAL SUPPORT ............................................................................................................. 62 REFERENCES.......................................................................................................................... 63 FIGURE LEGENDS .................................................................................................................. 66 FIGURES ............................................................................................................................... 67 CAPÍTULO II - STRANDING SURVEY AS A FRAMEWORK TO INVESTIGATE RARE CETACEAN RECORDS OF THE NORTH AND NORTH-EASTERN BRAZILIAN COASTS ..................................... 72 ABSTRACT....................................................................................................................................... 73 1. INTRODUCTION.......................................................................................................................... 74 2. MATERIAL AND METHODS ........................................................................................................ 78 Study sites .................................................................................................................................. 78 Sampling material ..................................................................................................................... 81 Stable isotope analysis .............................................................................................................. 81 Data analysis ............................................................................................................................. 82 3. RESULTS...................................................................................................................................... 83 4. DISCUSSION ............................................................................................................................... 89 5. CONCLUSIONS .......................................................................................................................... 101 6. ACKNOWLEDGEMENTS............................................................................................................ 102 7. REFERENCES ............................................................................................................................. 103 16 Apresentação da Tese A presente tese é apresentada de acordo com as secções previstas no regimento interno do Programa de Pós-Graduação em Ecologia Aquática e Pesca (PPGEAP). A primeira parte contém uma introdução agregadora, redigida em português, que inclui uma base teórica sobre as espécies analisadas, bem como as ferramentas de estudo utilizadas, além de lista das referências bibliográficas. A segunda parte contém o ‘Objetivo geral’, os ‘Objetivos específicos’, ‘Material e Métodos’ e as ‘Conclusões Gerais’, tópicos relacionados aos dois artigos apresentados como capítulos ao final da ‘Introdução Geral’. Os capítulos da tese constam de dois artigos científicos redigidos em língua Inglesa. Capítulo I – “Stranding survey as a framework to investigate rare cetacean records of the North and North-eastern Brazilian coasts”, foi submetido ao periódico Qualis B1 “Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom”. O estudo fez uma compilação dos eventos de encalhes de mamíferos aquáticos mais incomuns que ocorreram na costa dos estados do Pará, Maranhão e Piauí entre 2003 e 2014. Avaliou-se a similaridade da fauna de cetáceos de três regiões distintas ao longo do Norte e Nordeste do Brasil, comparando estas regiões com o sul do Caribe. O Capítulo II “Resource Partitioning among Aquatic Mammals From Amazon and Northeastern Coast of Brazil Reveal Through the Analysis of Stable Isotopes of Carbonand Nitrogen” não se encontra na formatação do periódico, pois está em fase de revisão pelos coautores. Este capítulo investigou as relações tróficas e o uso de habitat de cetáceos e sirênios utilizando a análise de isótopos estáveis. Após considerações da banca de defesa, este artigo deverá ser submetido ao periódico Qualis A2 Marine Mammal Science. 17 1. INTRODUÇÃO GERAL Os mamíferos aquáticos, um grupo constituído por espécies com grande diversidade de formas e tamanhos, possui representantes distribuídos em todos os mares, oceanos, rios e estuários. (JEFFERSON et al., 1993). Dentre os odontocetos, hoje existem 74 espécies descritas, separadas em 10 famílias (FORDYCE, 2009). Destas, 36 espécies ocorrem no Brasil (LODI; BOROBIA, 2013). Aspectos básicos da biologia das espécies como fisiologia, morfologia e comportamento foram adaptados ao longo de processos evolutivos relativo às interações entre predadores e presas (TRITES, 2001). Devido à peculiaridade do ambiente em que vivem, o acesso às informações básicas sobre este grupo é realizado pela observação direta no ambiente ou através de carcaças que chegam a terra em eventos denominados encalhes. As causas desses eventos ainda são pouco conhecidas, mas muitas hipóteses são levantadas. Fatores abióticos como topografia, condições oceanográficas e meteorológicas (ex. correntes e ventos) podem determinar onde e quando uma carcaça irá encalhar (NORMAN et al., 2004). Aspectos biológicos como comportamentos de escape e perseguição de presas, grupos com forte estrutura social que levam a encalhes em massa, doenças e debilidade física, além daqueles relacionados a atividades humanas como a interação com artefatos de pesca e colisão com embarcações também são reportados como possíveis causas dos encalhes (DI BENEDITTO et al., , 2010). Estes eventos fornecem dados importantes sobre a ocorrência, distribuição, movimentos sazonais e eventos incomuns de mortalidade. Para alguns cetáceos (ex. Lissodelphis borealis, Mesoplodon carlhubbsi), o pouco que se sabe sobre a biologia destas espécies foi coletado através de exemplares encalhados (NORMAN et al., 2004). No Brasil, os primeiros registros de encalhes datam das décadas de 1970 e 1980 (CARVALHO, 1975; GEISE; BOROBIA, 1987), limitados unicamente ao Sul e Sudeste do país. Para a região norte, registros esporádicos de encalhes e mortalidades incidentais em atividades de pesca foram reportados a partir dos anos 1990 (BOROBIA et al., 1991; SICILIANO, 1994). Monitoramentos regulares para coleta e compilação de dados de encalhes no Norte do Brasil foram iniciados em 2005, com a formação do Grupo de Estudos de Mamíferos Aquáticos da Amazônia (GEMAM) do Museu Paraense Emílio Goeldi (MPEG). 18 1.1. Diversidade de mamíferos aquáticos no estuário amazônico e Delta do Parnaíba (CAPÍTULO I) O capítulo I desta tese representa o trabalho mais recente sobre registro dos encalhes de mamíferos aquáticos registrados no período de 2003 a 2014 na zona costeira dos estados do Pará, Maranhão e Piauí. Os registros foram validados pela coleta e depósito de material biológico na Coleção de Mamíferos do MPEG, além de registro fotográfico e outros. Foram registrados representantes de 15 táxons dentro de três famílias: Balaenopteridae, Physeteridae e Delphinidae. A compilação feita por Siciliano et al. (2008) reuniu informações tanto da região costeiro-estuarina do Pará, quanto do litoral dos estados do Maranhão e Piauí e poucos registros para o Amapá. Os autores reportaram 22 espécies de mamíferos aquáticos, incluindo desde grandes baleias a pequenos golfinhos costeiros e oceânicos, bem como mustelídeos (ariranhas e lontras) e sirênios (peixes-bois marinho e da Amazônia). A família Delphinidae, considerada a mais diversificada da ordem Cetacea (FORDYCE, 2009) foi a mais representativa na frequência de encalhes no Norte e Nordeste. Foram registrados encalhes de diversas espécies de pequenos delfinídeos (ex. Delphinus sp., Lagenodelphis hosei, Stenella attenuata) (Tabela 1) considerados incomuns na região. Os dados compilados através dos registros de encalhes para a região foram submetidos a uma análise de similaridade (i.e. cluster) para detectar diferentes grupos. Os dados foram comparados aos registros de cetáceos da região Nordeste (ALVES-JUNIOR et al., 1996; MOTTA et al., 2008; MEIRELLES et al., 2009) e Norte do Brasil (SICILIANO et al., 2008; este estudo) com a fauna do sul do Caribe (ROMERO; CRESWELL, 2005; LUKSENBURG, 2014a, 2014b). 1.2. Uso do Habitat (CAPÍTULO II) Os mamíferos aquáticos geralmente consomem uma grande variedade de presas desde zonas entre marés ou áreas bentônicas até habitats neríticos, pelágicos e abissais nos oceanos. A variedade de itens alimentares vai desde o microscópico zooplâncton a organismos do nécton, como lulas, tubarões e peixes ósseos (WERTH, 2000). Seus representantes vão desde carnívoros de topo de cadeia alimentar, como a orca, até herbívoros como peixes-boi e dugongos que se encontram na base das cadeias. 19 A dieta e os comportamentos de forrageio entre os mamíferos aquáticos são afetados por fatores como idade, sexo, período reprodutivo, limitações anatômicas e fisiológicas, risco de predação, interações competitivas e a distribuição e abundância de presas potenciais. Os padrões espaciais e temporais da produtividade primária marinha afeta diretamente a abundância das presas e pode ser considerado fator limitante na distribuição das espécies (sensu, BERTA et al., 2006). Se a disponibilidade de recursos alimentares é limitada em um determinado local, os indivíduos irão competir entre si por estes recursos, provocando as competições intra e interespecíficas. A competição intraespecífica poderá ter um efeito profundo no número de indivíduos de uma população (BEGON et al., 2007). O crescimento individual também pode influenciar nas relações tróficas de uma população. As preferências alimentares podem mudar nas diferentes fases de vida do indivíduo, levando a variações alimentares intraespecíficas. Apesar de existir uma grande riqueza de espécies de cetáceos de plataforma e oceânicos, pouco se conhece sobre os padrões de uso do habitat, pelo menos no Atlântico sul ocidental (ZERBINI et al., 2004). Boa parte do conhecimento sobre o uso do habitat destes cetáceos foi adquirido por meio de avistagens direcionadas (RAMOS; SICILIANO; RIBEIRO, 2010) ou por plataforma de oportunidade, quando um registro de avistagem é realizado fora de um esforço, por exemplo, por barcos de pesca (PINEDO et al., 2002; SICILIANO et al., 2012). Contudo, a ferramenta mais utilizada tem sido a análise de conteúdos estomacais advindos de exemplares encalhados ou capturados acidentalmente em petrechos de pesca (ANDRADE et al., 2001; SANTOS et al., 2002; BELTRÁN-PEDREROS; DE ARAÚJO PANTOJA, 2006). Pequenos cetáceos nerítico-pelágicos, como Tursiops truncatus e Steno bredanensis são mais bem estudados em outros locais de ocorrência, como no Sul e Sudeste do Brasil. Apesar de S. bredanensis ser considerada uma espécie oceânica (JEFFERSON et al., 1993), no Sudeste avistagens em baías rasas e águas costeiras são comuns (SICILIANO; FLACH, 2007). No Sul do Brasil, o golfinho-nariz-de-garrafa é residente em desembocaduras e estuários de rios, este fato fez com que as populações fossem mais estudadas e conhecidas (BARRETO, 2000; FRUET et al., 2011, 2014; COSTA et al., 2015b). Na região Norte, pouco se sabe sobre os padrões de distribuição destas espécies, mas o incremento no número de encalhes nos últimos anos e o relato de pescadores artesanais sobre avistagens reforçam que as espécies possuem hábito 20 nerítico na região (SICILIANO et al., 2008; COSTA et al., 2015 dados não publicados). Praticamente nada se sabe sobre a distribuição e uso do habitat do gênero Delphinus no Norte e Nordeste. Exemplares deste gênero são mais comumente avistados e possuem maior número de registros de encalhes e de capturas acidentais no Sudeste (TAVARES et al., 2010). A falsa-orca (Pseudorca crassidens) é considerada uma espécie oceânica que se alimenta de peixes e cefalópodes em águas profundas (BAIRD, 2009). Contudo, alguns estudos na costa brasileira evidenciaram que a espécie também possui hábitos costeiros (BOTTA et al., 2012). O boto-cinza possui hábitos estuarinos, frequentando baías e desembocaduras de rios em áreas associadas aos manguezais, demonstrando clara preferência por ambientes costeiros rasos (FLORES; DA SILVA, 2009). Possui pequena área de vida, considerada uma das menores entre os delfinídeos, alcançando em torno de 15 km2 no sudeste, com alta fidelidade aos sítios (SANTOS; ROSSO, 2007; FLORES; DA SILVA, 2009). Por conta destes fatores, esta é uma das espécies que mais se conhece em relação ao uso do habitat em baías e estuários ao longo de sua distribuição na costa brasileira (EMIN-LIMA et al., 2010; OSHIMA et al., 2010). Diversos estudos reportam que a espécie é piscívora, com dieta composta principalmente por espécies pelágicas e demersais de peixes. Em algumas áreas de ocorrência crustáceos e cefalópodes fazem parte de sua dieta (SANTOS et al., 2002; BELTRÁN-PEDREROS; DE ARAÚJO PANTOJA, 2006; PANSARD et al., 2011; CREMER; PINHEIRO; SIMÕES-LOPES, 2012; LOPES et al., 2012). Considerado um predador oportunista, apresenta hábitos alimentares associados a presas que vivem em áreas estuarinas e costeiras. Por este motivo, a disponibilidade das presas mais abundantes deve influenciar diretamente no uso do habitat em diferentes regiões. (DI BENEDITTO; RAMOS, 2004; DAURA-JORGE et al., 2011). 1.3. Relações tróficas Aliar o conhecimento sobre aspectos ecológicos e biológicos fornece informações acerca da estrutura populacional em diferentes escalas temporais, tanto em nível individual quanto em nível de comunidade (NEWSOME et al., 2007, 2012). Entender as relações tróficas entre as espécies é um importante fator para se compreender a estrutura e o funcionamento de um ecossistema. A diversidade de espécies que coexistem em uma comunidade é determinada de acordo com o compartilhamento de recursos disponíveis. Normalmente as espécies possuem 21 diferenciações suficientes em seus nichos ecológicos (ex. dieta, habitats preferenciais) que permitem a sua coexistência, ou a partição do nicho. Quando estes nichos não são suficientemente distintos, espera-se que a competição entre as espécies resulte em exclusão competitiva (HUTCHINSON, 1957). Como forma de evitar a exclusão competitiva, as espécies precisam diferir em alguns aspectos ecológicos, seja em escala espacial ou temporal, segregando recursos alimentares e habitats (HUTCHINSON, 1957; PIANKA, 1974). Em outras palavras, para que as espécies possam coexistir por longos períodos, precisam possuir diferenças em relação às dimensões do nicho ecológico. Essas dimensões do nicho são classificadas de acordo com o tipo de alimento, habitat e escala temporal, sendo o habitat considerado a forma mais comum de segregação no uso de recursos (SCHOENER, 1974). Hutchinson (1957) considera o nicho como um hipervolume n-dimensional, onde o n seria o número de dimensões que constituiriam o nicho. O nicho determina como um organismo vive a interação entre as necessidades e tolerâncias que são necessárias para que a espécie possa viver, crescer e se reproduzir (BEGON et al., 2007). A caracterização do nicho isotópico que segundo Newsome et al. (2007) é um espaço bi dimensional (-espaço) representado pelos valores isotópicos em um eixo bi-plot de 13C versus 15N, permite o acesso a informações sobre o habitat e os recursos, respectivamente. A variação inter e intraespecífica na composição isotópica dos organismos permite estimar o nicho isotópico provendo uma resposta integrada no tempo e que pode ser diretamente relacionada às regiões geográficas (RUBENSTEIN; HOBSON, 2004; MICHENER & KAUFMAN, 2007), além de ser apropriado para o cálculo da amplitude de nicho (BEARHOP et al., 2004; NEWSOME et al., 2007). Avaliar o nicho isotópico de uma espécie fornece importantes informações sobre os habitats de forrageio e fontes de produtividade primária, que são fornecidos pelos resultados de 13C. O nível trófico dos consumidores analisado a partir dos valores de 15N. O nicho isotópico, contudo, é apenas uma aproximação do nicho ecológico, já que representa apenas duas dimensões do nicho ecológico (habitat vs. nível trófico, valores de C e N, respectivamente). O método possui limitações ao método como a não identificação dos itens alimentares, valores semelhantes entre espécies distintas ou mesmo quando habitats similares apresentam assinaturas isotópicas distintas. Desta forma, dois organismos que possuem o mesmo nicho 22 isotópico podem ter diferentes nichos ecológicos, ou seja, similaridade isotópica não é sinônimo de similaridade ecológica (LAYMAN et al., 2011). Portanto, o uso do nicho isotópico se torna viável se aliarmos o conhecimento prévio sobre a ecologia das espécies, por exemplo, unindo informações sobre distribuição, área de vida, além de dados sobre hábitos alimentares por meio da análise tradicional de conteúdo estomacal. Contudo, apenas a análise de conteúdos estomacais não permite inferências ao longo do tempo e em diferentes locais de ocorrência das espécies. Nas últimas décadas, a análise de isótopos estáveis tornou-se uma poderosa ferramenta no entendimento de aspectos da ecologia dos mamíferos aquáticos (NEWSOME; CLEMENTZ; KOCH, 2010). É um método útil para elucidar aspectos da ecologia de forrageamento, do uso de habitat, dos padrões de migração, da conexão entre populações, além de investigar parâmetros do nicho isotópico e as relações tróficas entre as espécies (BEARHOP et al., 2004; NEWSOME; CLEMENTZ; KOCH, 2010). Recentemente, diversos estudos utilizaram os isótopos estáveis como forma de caracterizar a ecologia trófica de espécies de mamíferos marinhos. Esta ferramenta foi utilizada principalmente no Sul e Sudeste do Brasil (BOTTA et al., 2012; BISI et al., 2013; VIGHI et al., 2014; DI BENEDITTO; MONTEIRO, 2015). Sotalia guianensis, Inia spp. e Trichechus inunguis Este estudo abordou aspectos da ecologia de espécies de cetáceos e sirênios que sofrem sérias ameaças à sua sobrevivência no Norte e Nordeste do Brasil. O entendimento sobre as relações tróficas é considerado um dos pré-requisitos para que sejam traçadas estratégias de manejo e conservação das espécies (PAULY et al., 2002). O boto-cinza, Sotalia guianensis (Van Benédén, 1864), é um pequeno golfinho da família Delphinidae (JEFFERSON et al., 1993). A espécie apresenta ampla distribuição em águas do Oceano Atlântico desde a Nicarágua, na América Central (EDWARDS; SCHNELL, 2001), até Santa Catarina, no sul do Brasil (SIMÕES-LOPES, 1988). O gênero era considerado monoespecífico, com Sotalia fluviatilis contendo dois ecótipos, um marinho e um fluvial (DA SILVA; BEST, 1996). Monteiro-Filho et al. (2002), por meio da morfometria geométrica, separaram os ecótipos em duas espécies, a marinha Sotalia 23 guianensis e S. fluviatilis, o ecótipo fluvial. Posteriormente, Cunha et al. (2005), por meio de análises moleculares, avaliaram a variação genética entre populações marinhas e fluviais da costa brasileira, reforçando que se tratavam de duas espécies distintas. Estes autores alegaram a existência de, pelo menos, seis unidades de manejo (MUs) para a espécie marinha (ex. Pará, Ceará, Rio Grande do Norte, Bahia, Espírito Santo e sul/sudeste), evidenciando uma forte divisão populacional com pouco fluxo genético ao longo da costa brasileira (CUNHA et al., 2005; CUNHA et al., 2010). Estudos de morfometria craniana descreveram variações morfológicas geográficas para o boto-cinza. Ramos (2001) descreveu características para exemplares do sudeste (Espírito Santo, norte e sul do Rio de Janeiro e São Paulo), enquanto Fettuccia et al. (2009) evidenciaram que indivíduos do estuário amazônico são menores que os do Ceará e Santa Catarina. EminLima (2012) analisou crânios do norte, nordeste e sudeste e demonstrou que existe uma completa separação entre as populações do Pará e Rio de Janeiro, e uma parcial separação entre Pará, Maranhão e Piauí. A morfometria craniana mostrou que existe uma variação clinal no tamanho do crânio, ou seja, crânios de exemplares do Norte são menores que os do Sul. O mesmo padrão foi observado por Arcoverde et al. (2013) analisando ossos da bula timpânica (periótico e timpânico) de cinco populações ao longo da costa brasileira. Os resultados de Emin-Lima (2012) e Arcoverde et al. (2013) claramente identificam uma forma menor de S. guianensis no Norte, quando comparada ao restante das populações do nordeste, sudeste e sul do Brasil. Essa forma, típica dos estuários da Costa Norte, por assim dizer, sugere fortemente uma adaptação local aos ambientes estuarinos de alta complexidade estrutural. Os regimes de macromarés da Costa Norte, oferta de presas potenciais e outros fatores bióticos e abióticos podem estar agindo conjuntamente para explicar essa forma ‘anã’ de Sotalia, tal qual o descrito para Tursiops truncatus no Mar Mediterrâneo (SHARIR et al., 2011). Apesar de existir um grande esforço dos grupos de pesquisa ao longo da costa brasileira para elucidar aspectos da biologia e ecologia do boto-cinza, muitos aspectos permanecem inconclusivos principalmente na região norte do país. Ainda hoje, a espécie é considerada pela IUCN na categoria de “Dados insuficientes” (SECCHI, 2012). Contudo, recentemente o Ministério 24 do Meio Ambiente (BRASIL, 2014) lançou a Lista de Espécies Ameaçadas de extinção no Brasil, onde S. guianensis consta como espécie “Vulnerável”. Devido à sua ampla distribuição geográfica, o boto-cinza sofre diversas ameaças como a degradação de habitats, o tráfego de embarcações, a exploração de mangues e estuários, o consumo de carne e o uso de partes anatômicas como amuletos, adornos e como isca para pesca (SICILIANO, 1994; TOSI et al., 2007; MONTEIRO-FILHO & MONTEIRO, 2008; SHOLL et al., 2008; FLORES; DA SILVA, 2009). Uma das ameaças mais deletérias a esta espécie são as interações negativas com artefatos de pesca que levam às capturas acidentais (SICILIANO, 1994; ROSAS, 2000; RAMOS, 2001). Na costa Norte o primeiro estudo a reportar tais eventos foi realizado por BeltránPedreros (1998), que indicou um elevado número de exemplares de S. guianensis capturados pela frota pesqueira no Pará e Amapá. Em estudo de curto prazo, entre 2006 e 2007, Emin-Lima et al. (2008) monitoraram embarcações de um porto no nordeste do Pará, confirmando a captura de 166 espécimes, indicando o alto índice de capturas na região norte do país. Boa parte do que se conhece sobre a biologia da espécie advem de dados coletados de exemplares capturados na pesca, principalmente no sudeste (RAMOS et al., 2000; ROSAS; MONTEIROFILHO, 2002) e nordeste (SICILIANO, 1994; MONTEIRO-NETO et al., 2000). O estudo do impacto da pesca sobre as populações de S. guianensis no Norte do país é mais recente e os esforços desde 2005 produziram importantes informações (EMIN-LIMA et al., 2010b; MARTINS, 2015). O boto-da-Amazônia, Inia geoffrensis (Gervais, 1855), pertence à família Iniidae, com representantes distribuídos na América do Sul, nas bacias dos rios Orinoco, Amazonas, Madeira e sistema Araguaia-Tocantins (DA SILVA, 1994). Recentemente, uma nova espécie, I. araguaiaensis foi descrita baseada em exemplares coletados na bacia do rio Araguaia (HRBEK et al., 2014). Contudo, a Comissão de Taxonomia da Society for Marine Mammalogy (2015) reconhece apenas uma espécie dividida em 3 subespécies I. g. geoffrensis, Inia g. boliviensis e I. g. humboldtiana. O boto-da-Amazônia é uma espécie com ampla representatividade na Amazônia, podendo ser observada em todos os tipos de água (branca, preta e clara) e em todos os tributários do rio Amazonas (DA SILVA; MARTIN, 2010). Sua distribuição e abundância estão diretamente relacionadas à sazonalidade das cheias e secas dos rios, que ditam os movimentos dos grupos de acordo com a disponibilidade das presas. Durante a seca, os botos concentram-se 25 em lagos e no leito principal dos rios por não poderem adentrar as várzeas e igapós (MARTIN; DA SILVA, 2004). Avistagens realizadas na baía do Marajó mostraram que, nesta região, os botos preferem a confluência e margem dos rios, mas possuem flexibilidade de movimentos dentro da baía (COSTA et al., 2013). I. geoffrensis, o boto-vermelho, como é mais conhecido localmente, é considerado um predador de topo de cadeia alimentar com dieta baseada principalmente em peixes. Um dos únicos estudos sobre a dieta da espécie reportou mais de 45 espécies de peixes (DA SILVA, 1983). Contudo, não existem até o momento estudos que descrevam a dieta da espécie para áreas alagadas da Amazônia oriental, nem no estuário amazônico e áreas adjacentes. Os botos de rio sofrem ameaças tanto relacionadas à degradação dos ambientes onde habitam, como às atividades de exploração de óleo e gás, à implantação de hidrelétricas, à contaminação química das águas, quanto à captura direcionada para uso como isca na pesca da piracatinga (CUNHA et al., 2015). I. geoffrensis encontra-se listada na categoria “Dados insuficientes” pela IUCN, ou seja, não existem dados para uma avaliação precisa. Contudo, em recente portaria publicada pelo MMA (BRASIL, 2014), a espécie encontra-se na categoria “Em Perigo”. Por não ser reconhecida como uma espécie formal, I. araguaiaensis ainda não possui categoria de ameaça determinada. Apesar de ser foco de estudos direcionados nas últimas décadas (ARAÚJO et al., 2007; DA SILVA; MARTIN, 2010; ARAÚJO; WANG, 2014), muitos aspectos sobre a distribuição e ecologia das espécies permanecem desconhecidos, principalmente no estuário amazônico. Como forma de reverter a carência de informações nesta região, Costa et al. (2013) e Siciliano et al. dados não publicados) confirmaram por meio do registro de encalhes e análises moleculares a presença de ambas as espécies, I. geoffrensis e I. araguaiaensis, na porção norte da ilha de Marajó (Contra Costa) e nordeste da costa do Pará. Os peixes-boi pertencem à ordem Sirenia e compõem, junto com os dugongos, a família Trichechidae. São os únicos mamíferos aquáticos exclusivamente herbívoros. Habitam rios, estuários e águas costeiras rasas de regiões tropicais e subtropicais (BEST, 1981). Das três espécies viventes, duas ocorrem no Brasil, o peixe-boi-marinho Trichechus manatus (Linnaeus, 1758), encontrado na costa atlântica das Américas e o peixe-boi-da-Amazônia Trichechus inunguis (Natterer, 1883), endêmico do rio Amazonas e seus tributários (REYNOLDS et al., 2009). 26 As primeiras observações sobre a possível simpatria das espécies marinha e fluvial foram reportadas por Domning (1981). Mais recentemente, os esforços de monitoramento na ilha de Marajó confirmaram a presença das duas espécies nessa região (SICILIANO et al., 2007, 2008). O peixe-boi-da-Amazônia alimenta-se principalmente de macrófitas aquáticas e semiaquáticas (BEST, 1981; COLARES; COLARES, 2002). No Marajó, diversas espécies de macrófitas são descritas como potencial recurso alimentar (ex. Blutaparon portulacoides, Eleocharis sp., Crenea maritima, Spartina sp.) (GUTERRES et al., 2008; SOUSA, 2011; SOUSA et al., 2014), além das espécies de manguezal já descritas na dieta da espécie marinha (BEST, 1981; BORGES; EMMANUEL; MIRANDA, 2008). Os espécimes que vivem na baía do Marajó não sofrem com os efeitos das alterações dos níveis de cheias e secas como acontece com espécimes que vivem na Amazônia central, que realizam migrações para lagos onde encontram maior oferta de alimento (ARRAUT, 2008). O peixe-boi-da-Amazônia é considerado uma espécie vulnerável que exerce um importante papel ecológico no complexo bioma da Amazônia (BRASIL, 2014). A principal ameaça, desde tempos históricos, continua sendo a captura intencional para alimentação da população ribeirinha. Outras ameaças diretas à espécie são relativas à degradação do ambiente com o intenso tráfego hidroviário, ocupação humana, contaminação ambiental, e projetos agropecuários (ANDRADE; LUNA; REIS, 2011). Em resposta a estas intensas ameaças, a espécie está categorizada como “Vulnerável” tanto pela IUCN (SECCHI, 2012) quanto pelo documento nacional (BRASIL, 2014). Neste estudo, utilizamos a análise de isótopos estáveis para caracterizar as relações tróficas inter e intraespecíficas das espécies que coexistem em simpatria na baía do Marajó, Sotalia guianensis, Inia spp. e Trichechus inunguis, visando compreender o uso do habitat por estas espécies, avaliar a partição de nicho isotópico como forma de incrementar o conhecimento sobre os mamíferos aquáticos na costa Amazônica. 27 2. OBJETIVOS 2.1. Geral Produzir conhecimento sobre a diversidade e relações tróficas dos mamíferos aquáticos na costa Amazônica, região Norte e no Delta do Parnaíba, Nordeste do Brasil. 2.2. Específicos Descrever os novos registros de cetáceos para a costa dos estados do Pará, Maranhão e Piauí e a similaridade dessa fauna com aquela da região do sul do Caribe; Investigar o uso do habitat e as relações tróficas entre espécies de mamíferos aquáticos de água doce e marinha na costa norte e nordeste do Brasil; Avaliar a partição de nicho isotópico entre as espécies mais representativas (Sotalia guianensis, Inia spp. e Trichechus inunguis) da fauna de mamíferos aquáticos do estuário amazônico; Caracterizar os nichos isotópicos para dois estoques populacionais do boto-cinza (Sotalia guianensis) no estuário amazônico e Delta do rio Parnaíba. 28 3. MATERIAL E MÉTODOS 3.1. Área de Estudo As amostras analisadas neste estudo foram obtidas de exemplares de mamíferos aquáticos encalhados em três setores: 1) ambientes de várzea da Amazônia Oriental; 2) estuário amazônico e zona costeira adjacente no litoral do Pará, na região Norte; e 3) litoral dos estados do Maranhão e Piauí, na região que compreende o Delta do Parnaíba, nordeste do Brasil (Fig. 1). O setor denominado de “Amazon lowland” (AL) compreende áreas de planície alagada denominadas de várzea. O rio Amazonas é caracterizado por águas de aspecto turvo, ricas em nutrientes devido às grandes quantidades de sedimentos que são carreados desde os Andes, fazendo com que sejam conhecidas como água branca (SIOLI, 1991). As várzeas sustentam abundantes florestas nas partes altas e extensos bancos de gramíneas nas partes mais baixas, enquanto nos cursos d’água prevalecem bancos de vegetação flutuante e macrófitas (JUNK et al., 2011). O estuário do rio Amazonas (AE) é formado principalmente pela descarga do rio Amazonas no Oceano Atlântico através de dois grandes canais, Canal Norte e Canal Sul (GEYER et al., 1996) (ver Fig. 1). Este é um estuário extremamente dinâmico influenciado por macromarés semidiurnas, ventos alísios vindos do leste, além da enorme descarga de água doce oriunda do rio Amazonas (NITTROUER; DEMASTER, 1996). A região é permanentemente afetada pela interface rio-mar e por fatores como uma marcada estação chuvosa. Além do desague do Amazonas, nesta região também desagua o sistema AraguaiaTocantins e rios menores (GOULDING; BARTHEM; FERREIRA, 2003; SOUZA-FILHO et al., 2009). O setor AE abrangeu o estuário do Amazonas e zonas costeiras como o norte e leste da Ilha de Marajó e a costa nordeste do Estado do Pará. Na costa leste da ilha encontra-se a baía do Marajó formada pelas descargas dos rios Pará e Tocantins, e pela baía de Guajará. Esta baía recebe intrusão salina superficial no período de baixa descarga dos rios (BEZERRA; ROLLNIC, 2011), e é submetida a regimes de macromarés. Nesta baía, coexistem em simpatria as duas espécies de peixes-boi, T. inunguis e T. manatus, além de quatro cetáceos, Inia spp. (I. geoffrensis e I. araguaiaensis), S. guianensis e S. fluviatilis (DOMNING, 1981; CUNHA et al., 2010; SICILIANO et al., 2007, 2008, 2015 dados não publicados), esta última 29 não incluída no presente estudo. No nordeste do Pará, as baías de Marapanim e Maracanã foram as regiões mais monitoradas. No estuário do rio Marapanim ocorre a maior concentração de S. guianensis registrada para a costa do Pará (EMIN-LIMA et al., 2010a). O terceiro setor, na costa Nordeste (NC), compreendeu principalmente o extremo leste do Maranhão e o litoral do Piauí. A mais importante descarga de água doce nesta região vem do rio Parnaíba, segundo maior sistema fluvial brasileiro, atrás apenas do rio Amazonas (SZCZYGIELSKI et al., 2014). O Parnaíba, ao encontrar o Oceano Atlântico, forma um delta com cinco baías que sofrem grande influência das marés, quais sejam: Tutóia, Caju, Melancieiras, Canárias e Igaraçu, que unidas formam o Delta do Parnaíba (MOREIRA; MAVIGNER, 2007). Este ambiente, que é submetido a um regime de mesomarés semidiurnas, contém campos de dunas costeiras e vegetadas, largas praias e uma vasta área de florestas de mangue. De agosto a dezembro existe uma diminuição na descarga do rio que faz com que prevaleçam condições de regiões semiáridas, além de uma restrita estação chuvosa que vai de dezembro a abril. Figura 1. Área de estudo representando os três setores amostrados ao longo da costa Amazônica englobando o litoral do Pará e parte do Maranhão e o Delta do Parnaíba no nordeste do Brasil (1). Detalhe dos setores: (2) Amazônia oriental, áreas de várzea (AL), (3) estuário amazônico (indicação do Canal Norte e Sul) e áreas costeiras adjacentes (AE) e (4) costa nordeste, evidenciando o litoral dos estados do Maranhão e Piauí (NC). 30 (b) Figura 1. Setor 1 – Mapa do setor 1 evidenciando grandes rios da bacia do rio Amazonas (Trombetas, Tapajós e Xingu). Círculos pretos são locais de coleta dos exemplares de mamíferos aquáticos. Ambientes de várzea mostrando vegetação típica deste habitat na baía dos Botos, município de Portel (PA). Figura 2. Setor 2 – Mapa do setor 2 evidenciando a costa nordeste do Pará e oeste do Maranhão. As baías mais representativas deste setor para este estudo estão nomeadas, Marajó, Marapanim e Maracanã. Praia da costa leste da ilha de Marajó (Barra Velha), município de Soure (PA). Figure 4. Setor 3 – Mapa do setor 3 mostrando algumas das baías que formam o Delta do Parnaíba no extremo leste do Maranhão e oeste do Piauí. Campos de dunas e manguezal na baía do Caju, município de Araioses (MA). 31 3.2. Coleta de amostras 3.2.1. Registros de encalhes As amostras foram obtidas por meio de monitoramentos sistemáticos das praias dos setores de estudo, por meio do atendimento a chamados de encalhe ou esporadicamente de exemplares obtidos de capturas acidentais em artefatos de pesca, no caso de S. guianensis (Fig. 5). As carcaças foram recolhidas em qualquer estágio de decomposição, seguindo os protocolos de Geraci & Lounsbury (1993). Quando possível foi realizada biometria e sexagem, informações como local, data e material coletado foram anotadas em caderno de campo. Ao término das campanhas, todo o material foi transportado para o Museu Paraense Emílio Goeldi (MPEG), onde o material ósseo foi preparado para tombamento a seco na Coleção de Mamíferos. A biometria externa foi tomada sempre que possível, seguindo os padrões estabelecidos por Norris (1961). Dependendo do estado de decomposição da carcaça foram coletadas amostras de pele, músculo, gordura e órgãos internos, inclusive estômagos, além de todo o material ósseo disponível. As carcaças foram identificadas em campo de acordo com características específicas como coloração, formato da cabeça, número de dentes. Para o caso específico do gênero Inia, análises moleculares foram necessárias para identificação de alguns exemplares a nível molecular. Na costa do Pará, a costa leste da ilha de Marajó foi monitorada regularmente desde 2005 até 2014, englobando aproximadamente 60 km de praias percorridas nos municípios de Soure e Salvaterra (0o37'10.0"S, 48°28'54.6"W/ 0o56’26.19”S, 48o34’17.25”W). Expedições pontuais à porção norte da ilha, conhecida como contra costa, foram realizadas em 2012 e 2013 (00o15’9.97”S, 48o43’5.09”W). No nordeste do estado, praias dos municípios de Maracanã (0o35’48.29”S, 47o32’50.50”W) e Marapanim (0o35’47.83”S, 47o38’11.66”W) foram monitoradas regularmente, enquanto praias do município de Bragança (0°49'41''S, 46°36'16''W), por exemplo, foram atendidas de acordo com os chamados aos atendimentos de encalhe. Na região do Delta do Parnaíba, os eventos de encalhe foram regularmente monitorados entre 2008 e 2011, com coletas esporádicas após este período. As praias foram percorridas por veículos tracionados ou, alternativamente, a pé, perfazendo em torno de 100 km percorridos nos municípios de Paulino Neves (2°40'28.15"S, 42°34'42.71"W), Tutóia 32 (2°45'10.97"S, 42°18'29.96"W) e Araioses (2°42'54.53"S, 42°0'49.27"W), no Maranhão e Luís Correia (2°54'10.44"S, 41°33'57.53"W) e Parnaíba (2°47'57.58"S, 41°44'55.11"W), no Piauí. Para elaboração do Capítulo II desta tese foram utilizadas adicionalmente amostras de exemplares de T. inunguis e I. geoffrensis coletados no rio Amazonas e em alguns de seus tributários (rio Ayaya, 2°34'30"S, 54°21'50"W; rio Trombetas, 1°38'44"S, 55°58'38"W; baixo rio Xingu, 2o41’16”S, 52o00’45”W) e próximo à capital, Belém, na baía de Guajará (1°17'19"S, 48°29'5"W). Este material foi coletado por técnicos e pesquisadores do MPEG entre as décadas de 1910 e 1980, reforçando a importância do tombamento histórico de vertebrados na coleção do MPEG. O recolhimento das carcaças foi autorizado por meio de licenças do Sistema de Autorização e Informação em Biodiversidade – SISBIO. Licenças sob Nos 26520-1, 19605, 24431,30327-1 para região norte e Nos 38653, 25523 para o nordeste. 33 Figura 5. Cetáceos encalhados no Norte e Nordeste do Brasil. (a) baleia-fin, Balaenoptera physalus, (b) baleia-sei, B. borealis, (c) baleia-de-Bryde, B. brydei; (d) Cachalote, Physeter macrocephalus, (e) baleiajubarte (Megaptera novaeangliae) (f) golfinho-nariz-de-garrafa, Tursiops truncatus, (g) boto-cinza, Sotalia guianensis, (h) falsa-orca, Pseudorca crassidens e (i) golfinho-de-Fraser, Lagenodelphis hosei. Destaque para registro do encalhe em massa de botos-cinza, na foto (g) um dos indivíduos é carregado de áreas rasas da praia para porção mais funda dos canais de maré e (i) espécime de golfinho-de-Fraser tem carne retirada para consumo humano. 3.2.2. Isótopos estáveis Foram coletadas amostras de mamíferos aquáticos (N= 267) de 15 táxons representativos de quatro famílias. Physeteridae (cachalote, Physeter macrocephalus), Delphinidae (golfinho-comum, Delphinus sp.; baleia-piloto-de-peitorais-curtas, Globicephala macrorhynchus; golfinho-de-Risso, Grampus griseus; golfinho-de-Fraser, Lagenodelphis hosei; golfinho-cabeça-de-melão, Peponocephala electra; falsa-orca, Pseudorca crassidens; boto-cinza, Sotalia guianensis; golfinho-pintado-pantropical, Stenella attenuata; golfinho-dedentes-rugosos, Steno bredanensis; golfinho-nariz-de-garrafa, Tursiops truncatus), Iniidae (boto-da-Amazônia, I. geoffrensis; boto-do-Araguaia, I. araguaiaensis) e Trichechidae (peixeboi-da-Amazônia, T. inunguis) (ver Tabela 1, Anexo II). Do total, 200 amostras analisadas foram fragmentos de ossos coletados da porção interna do crânio. Na ausência destes, outros ossos disponíveis foram selecionados nesta ordem de prioridade: vértebras caudais, chevrons, dentes ou outros ossos (escápula, mandíbula, nadadeira peitoral) coletados durante os eventos de encalhes, contabilizando 67 amostras (Fig. 6). Pelo fato de estudos anteriores reportarem uma diferença de apenas 0.2‰ a 0.3‰ entre valores de 13C e 15N, respectivamente, entre dentes e ossos analisados de um mesmo indivíduo (FOOTE et al., 2013), consideramos estes tecidos como comparáveis entre si. 34 Figura 6. Coleta e preparação das amostras para análises de isótopos estáveis. (a e b). Coleta de amostras nos cetáceos encalhados, (c) dente após limpeza em laboratório, (d) coleta de amostras em crânios na coleção de Mamíferos do MPEG, (e) maceração das amostras, (f) pesagem e encapsulamento, (g) cápsulas de estanho e (h) bandeja com cápsulas para envio para análises. 3.3. Preparação das amostras Com o intuito de isolar o colágeno, as amostras foram desmineralizadas através de repetidos banhos em ácido clorídrico (HCl, 0,5 N) entre 72 a 96 horas. Os fragmentos de ossos ou dentes foram colocados em frascos de vidro com reagente suficiente para cobrir cada amostra e então colocados sob refrigeração por pelo menos 12 h a 4oC. O reagente foi trocado a cada 24 h por cerca de três dias. As amostras foram conferidas até sua textura estar flexível como uma borracha, quando então foram sujeitas a sucessivos banhos em água destilada até atingir pH neutro. Após este processo, foi considerado que apenas a porção orgânica do colágeno permaneceu na amostra. A extração de lipídios for realizada pela submissão das amostras a três banhos, com duração de 24 h cada, em uma solução de clorofórmio e metanol a 2:1. A cada banho, a solução antiga foi descartada e substituída por uma nova. Ao final dos três banhos, as amostras foram lavadas em água destilada até a completa remoção do reagente, e levadas à estufa para secagem por 24 h a 60oC. As amostras secas foram então maceradas ou quebradas em um gral até obtenção de um fino pó ou pequenos fragmentos. Estes foram pesados em balança analítica com precisão de cinco casas decimais (Shimadzu AUY 220) e encapsulados em cápsulas de estanho (tin caps, Costech Analytical) (Fig. 6). As composições isotópicas de carbono e nitrogênio foram analisadas no Centro de Isótopos Estáveis da 35 Universidade do Novo México utilizando um Analisador Elementar Costech ECS 4010 acoplado a um espectrômetro de massa ThermoFisher Scientific Delta V Advantage via interface CONFLO IV. Os resultados foram expressos em valores de , 13C ou 15N= 1.000 × [(Ramostra− Rpadrão/Rpadrão) − 1], onde Ramostra e Rpadrão são as razões de 13C/12C ou 15N/14N da amostra e do padrão internacional, respectivamente. Os padrões internacionalmente considerados são Vienna Peedee Belemnite limestone (V-PDB) para carbono e N2 atmosférico para nitrogênio. As unidades são expressas em partes por mil, ou per mil (‰). A precisão analítica média baseada nos padrões da rotina do laboratório foi melhor que 0.1‰ (1 s) para ambos os elementos 15N e 13C. 3.4. Análise dos Dados Análise de Similaridade (CAPÍTULO I) Com o intuito de caracterizar a similaridade da composição de espécies de cetáceos reportada em sete artigos (ALVES-JUNIOR et al., 1996; CRESWELL, 2005; MOTTA et al., 2008; ROMERO; SICILIANO et al., 2008; MEIRELLES et al., 2009; LUKSENBURG, 2014a, 2014b) e no presente estudo, foi executada uma análise de similaridade pelo índice de Jaccard baseado na presença e ausência das espécies. O teste SIMPROF foi executado a fim de detectar diferenças significativas entre os artigos usando o padrão de 1.000 permutações para a média de similaridade e 999 permutações para o perfil simulado, com nível de significância de 0,05. A análise multivariada foi desenvolvida usando o PRIMER 6.0 (CLARKE; GORLEY, 2006). Análises de Isótopos estáveis (CAPÍTULO II) Para investigar a composição isotópica, as espécies de pequenos cetáceos da família Delphinidae foram agrupadas devido ao pequeno n amostral para boa parte das espécies e pela similaridade dos valores de carbono e nitrogênio obtidos. Em relação à espécie S. guianensis, foram considerados dois estoques populacionais, um do estuário amazônico e zona costeira adjacente (Sgui_AE) e outro do litoral leste do Maranhão e Piauí (Sgui_NC). Apesar de no momento do encalhe todas as informações disponíveis serem anotadas (local, data, espécie, sexo, material coletado) para muitos exemplares devido ao avançado estágio 36 de decomposição não foi possível obter dados morfológicos essenciais, como comprimento total e sexo. Variáveis como idade e estado de maturidade não foram considerados nas análises dos delfinídeos. No caso de S. guianensis, o maior número de amostras permitiu testar as diferenças na composição isotópica entre classes de maturidade. Os espécimes, neste caso, foram classificados em maduros e imaturos com base no grau de ossificação das suturas craniais e vertebrais. (PERRIN, 1975; FETTUCCIA; SIMÕES-LOPES, 2004; EMIN-LIMA, 2012) ou de sua maturidade sexual em relação ao comprimento total do corpo de acordo com Ramos et al. (2000). Os demais grupos analisados representaram espécies de água doce, sendo eles: Inia spp. (I. geoffrensis e I. araguaiaensis) e T inunguis. Para estas espécies, foram analisados exemplares da Amazônia Central em áreas de várzea, bem como indivíduos do estuário amazônico, tanto da baía do Marajó, quanto de estuários de áreas costeiras adjacentes, no caso de Inia spp. Os pressupostos de normalidade e homocedasticidade dos dados de 13C e 15N foram analisados pelos testes de Shapiro-Wilks e Levene, respectivamente. O teste t de Student foi usado para comparar os valores isotópicos entre as espécies, entre as marinhas e de água doce, bem como entre os valores de S. guianensis entre os setores AE e NC. O efeito da maturidade nos valores de S. guianensis coletados em AE e NC foi testado comparando-se os valores de 13C e 15N entre indivíduos maduros e imaturos por meio do teste não paramétrico U de Mann-Whitney, devido ao fato dos dados não apresentarem uma distribuição normal. Para todos os testes descritos, o nível de significância adotado foi de 0,05. Os bi-plot representando os valores médios (± DP) dos valores de 13C e 15N foram executados no programa Past 3.0 (HAMMER et al. 2001), enquanto os outros testes foram realizados no programa Statistica 7.0. Caracterização do nicho isotópico O nicho isotópico das espécies mais abundantes da área de estudo (S. guianensis, Inia spp. e T. inunguis) foi explorado pelo cálculo da área das elipses. A correção foi feita para pequeno número de amostras (SEAc, standard elipses area corrected) por meio da análise “Stable Isotope Bayesian Ellipses in R” - SIBER (Rotina SIBER incluída no pacote SIAR, JACKSON et al., 2011). Devido à pequena amostra e similaridade nos valores de 13C e 15N 37 entre as espécies de delfinídeos neríticos e oceânicos, as elipses foram analisadas como um único grupo (Delphinideos). A sobreposição de nicho isotópico foi indicada pelo cálculo do valor da área das elipses para os quatro grupos analisados, além do cálculo do percentual de sobreposição entre os grupos. A opção pelo uso das elipses para caracterizar o nicho isotópico, deve-se ao fato das elipses não serem enviesadas em relação ao tamanho das amostras. A estimativa feita pela inferência Bayesiana permite uma comparação robusta entre os conjuntos de dados mesmo que estes possuam tamanhos de amostras diferentes (JACKSON et al., 2011). 4. SÍNTESE DOS RESULTADOS 4.1. Riqueza de mamíferos aquáticos (CAPÍTULO I) A riqueza geral registrada neste estudo foi de 15 espécies representadas desde pequenos golfinhos até grandes baleias. A família Delphinidae foi representada pelas seguintes espécies: Delphinus sp., Globicephala macrorhynchus, Grampus griseus, Lagenodelphis hosei, Peponocephala electra, Pseudorca crassidens, Sotalia guianensis, Stenella attenuata, Steno bredanensis e Tursiops truncatus. As famílias Balaenopteridae, Balaenoptera physalus, B. brydei, B. borealis e Megaptera novaeangliae e Physeteridae (Physeter macrocephalus) foram também reportadas (ver Tabela 1, Anexo I). Neste estudo, foram obtidos os primeiros registros de quatro espécies na área de estudo B. physalus (baleia-Fin), B. borealis (baleia-Sei), P. electra (golfinho-cabeça-de-melão) e P. crassidens (falsa-orca) não reportadas na compilação prévia realizada por Siciliano et al. (2008). Dentre os balaenopterídeos, os registros das baleias Fin e Sei merecem destaque, pois ambas encalharam vivas no nordeste do Pará, o que sugere que estas espécies devem utilizar as águas desta região para deslocamento nos períodos de migração. O registro de um filhote de baleia-de-Bryde, B. brydei, na baía do Marajó é uma importante contribuição para o conhecimento sobre os períodos reprodutivos desta espécie na costa brasileira. Do total de quatro registros de P. macrocephalus, o mais incomum foi o de uma fêmea que chegou ainda com vida à praia do Crispim (0°35'18.37"S, 47°38'45.65"W), nordeste do Pará. O exame da carcaça evidenciou, além de inúmeros bicos de lula no conteúdo estomacal, a presença de marcas de mordidas de tubarão-charuto, Isistius brasiliensis, já reportadas para outros locais (SOUTO et al., 2007). Esta espécie possui grande 38 número de encalhes no nordeste do Brasil (MEIRELLES et al., 2009). Os registros feitos entre o Piauí e o Pará podem indicar a regular presença deste grande cetáceo na região. Apesar do hábito costeiro e de ser sabidamente uma espécie gregária com fortes laços sociais, ainda não havia sido registrado até o presente nenhum encalhe em massa de S. guianensis na costa brasileira. A união de características da zona costeira como rasa plataforma continental, regime de macromarés que provocam um acelerado movimento dos bancos de areia, aliada à formação de rasos canais de maré, podem influenciar nestes eventos pelo menos no nordeste do Estado do Pará, esclarecendo novos aspectos sobre o comportamento natural de S. guianensis. Foram reportadas tanto espécies associadas às águas oligotróficas tropicais quanto aquelas que vivem em ambientes com alta produtividade (B. brydei). Os resultados das análises de similaridade (cluster) indicaram que a composição de cetáceos do sul do Caribe e litoral dos estados do Pará, Maranhão e Piauí considerados como costa norte do Brasil, formam o Grupo 1, que difere significativamente do grupo formado para o nordeste do Brasil (Grupo 2) (ver Fig. 4, Capítulo 1). A conexão com a fauna de cetáceos do Caribe mostrou-se aceitável. Contudo, investigações futuras ainda são necessárias. 4.2. Uso do habitat e Relações tróficas (CAPÍTULO II) Como esperado, dentre as espécies marinhas e de água doce foi observada uma variação significante nos valores dos isótopos de carbono que podem derivar de diferentes fontes de carbono característico de produtores primários marinhos enriquecidos em 13C (ex. plantas C4) e de água doce empobrecidos em 13 C (ex. plantas C3) (MICHENER; KAUFMAN, 2007). Os valores de nitrogênio não apresentaram diferenças entre espécies marinhas e de água doce. Foram detectadas variações interespecíficas entre as espécies de água doce (Inia spp. e T. inunguis). Os valores médios variaram de (-27.6 a -12.5‰) para carbono e (6.0 a 15.3‰) para nitrogênio. Para as espécies marinhas os valores apresentaram menor variação 13C (16.6 a -10.6‰) e 15N (6.6 a 16.0‰). A espécie T. inunguis ocupou a posição trófica mais baixa com valores de 15N (7.6 ± 1.2‰) com variação de 6.0 a 10.3‰ indicando o hábito estritamente herbívoro da espécie. As espécies de água doce (T. inunguis e Inia spp.) que habitam os diferentes habitats AL e AE não diferiram nos valores de 13C (t-test, t= 1.58, p= 0.12), mas apresentaram diferenças significativas nos valores de 15N (t-test, t = 14.2, p < 39 0.0001). Os exemplares de T. inunguis com origem em AL mostraram grande dispersão nos valores de 13C (-25.5 a -15.8‰) apresentando diferença significativa (t-test, t = 3.38, p < 0.008) nos valores de 13C. Ao contrário, exemplares do estuário amazônico, mais precisamente da baía do Marajó mostraram menor variação nos valores de 13C (-16.2 a 12.9‰) sem apresentar diferença significativa (t-test, t = 1.87, p < 0.09). Os valores médios de carbono e nitrogênio não apresentaram diferenças significativas entre I. geoffrensis e I. araguaiaensis (t-tests, t = 1.02, p = 0.33 e t =- 0.13, p = 0.90, para 13C e 15N), respectivamente. As variações das composições isotópicas detectaram que existe um padrão espacial costa-oceano evidenciado entre todos os delfinídeos com exceção de S. guianensis. Este gradiente refletiu o padrão de declínio nos valores de carbono de regiões costeiras mais enriquecidas para ambientes oceânicos mais empobrecidos. Este padrão já foi reportado para espécies de mamíferos aquáticos em diferentes regiões, sudoeste do Atlântico Sul (RICCIALDELLI et al., 2010); costa noroeste da África (PINELA et al., 2010); sul e sudeste do Brasil (BOTTA et al., 2012; BISI et al., 2013). Analisando os valores isotópicos enriquecidos tanto em carbono quanto em nitrogênio encontrados para T. truncatus, pode-se inferir que nos setores amostrados esta espécie possui hábito costeiro. Os resultados deste estudo concordam com outros trabalhos que também evidenciaram o hábito costeiro da espécie, bem como a divisão em ecótipos ou estoques populacionais (BASTIDA et al., 2007; PERRIN et al., 2011). Apesar de ser considerada oceânica, P. crassidens apresentou valores enriquecidos tanto em 13C quanto 15N, indicando hábito costeiro para esta região. Em outros locais de ocorrência desta espécie no sudeste do Brasil, os resultados obtidos indicaram a existência de dois grupos isotopicamente diferenciados (BOTTA et al., 2012). Em se tratando de G. griseus, outra espécie teutófaga, foram obtidos valores diferenciados para os dois exemplares analisados de AE e NC, o que pode sugerir diferenciação no uso do habitat. Semelhante informação foi obtida para G. griseus na Terra do Fogo, Argentina (RICCIALDELLI et al., 2010), onde foi possível diferenciar ecótipos ou estoques populacionais por meio dos isótopos de carbono e nitrogênio em dentes e ossos, respectivamente. O cachalote, P. macrocephalus, apresentou os valores mais empobrecidos em 13C entre todas as espécies analisadas (-14.4 ± 1.9‰, variação de -16.6 a -12.9) sugestivo do uso de habitats oceânicos. A espécie também apresentou os valores mais enriquecidos de 15 N 40 (15.4 ± 0.6, variação de 14.7 a 16.0) indicando que o cachalote encontra-se em níveis tróficos mais elevados quando comparado às outras espécies marinhas analisadas. Estudos realizados com espécimes encalhados no nordeste identificaram pelo menos 15 espécies de cefalópodes pelágicos nos conteúdos estomacais dos exemplares (GURJÃO et al., 2003). Os valores de 15N dos espécimes de S. guianensis do setor NC foram similares aos do setor AE (t-test, t = 0.80, p = 0.43), mas apresentaram diferenças significativas nos valores de 13C (t-test, t = -3.39, p < 0.001). Os valores mais empobrecidos em carbono para Sgui_AE pode ser reflexo de diferentes áreas de forrageamento dentro dos estuários ou diferenças no comportamento individual. Alguns indivíduos devem passar a maior parte do tempo no estuário superior, onde existem menores variações de salinidade e maior influência de ambientes de água doce mais empobrecidos em carbono, enquanto outros permanecem no estuário inferior sob a influência de uma cadeia mais enriquecida em 13 C fazendo com que suas assinaturas isotópicas sejam semelhantes aos exemplares de NC. 4.3. Caracterização de Nicho isotópico (CAPÍTULO II) Para caracterizar o nicho isotópico dos grupos selecionados (Delphinids, T_inunguis, Inia_spp., Sgui_AE e Sgui_NC) foram calculadas as amplitudes, bem como os percentuais de sobreposição entre os nichos. Os nichos isotópicos foram altamente diferenciados entre as espécies coexistem no na baía do Marajó, costa Amazônica (T. inunguis, S. guianensis e Inia spp.) não apresentando sobreposição na área das elipses corrigida (SEAc) (Fig. 4, Capítulo II). Este resultado indica uma forte segregação entre estas espécies, pelo menos na baía do Marajó. As amplitudes de nicho para as duas espécies de água doce foram maiores quando comparadas aos outros grupos indicando ampla plasticidade trófica. Em relação às duas espécies simpátricas e mais representativas de cetáceos do estuário amazônico, S. guianensis e Inia spp., a segregação de nicho isotópico pode indicar que existe pouca competição por recursos ou grande abundância de recursos diferenciados, pelo menos neste setor. Os delfinídeos apresentaram sobreposição de nicho com S. guianensis dos setores AE e NC, com 39,2% e 32,5%, respectivamente (Fig. 4, Capítulo II). As populações partilharam posições tróficas semelhantes. Contudo, Sgui_NC apresentou nicho trófico mais restrito, com menores variações nos valores de carbono. 41 As maiores sobreposições de nicho isotópico ocorreram entre as populações de S. guianensis do AE e NC, apresentando 63.1% de sobreposição entre os estoques populacionais considerados. Sgui_NC ocupou o menor nicho isotópico dentre os grupos analisados, podendo ser reflexo do habitat com forte influência marinha, que provavelmente possui diferentes produtores primários como fonte de carbono. A maior amplitude de nicho isotópico para Sgui_AE possivelmente se deve à maior diversidade de recursos alimentares no estuário amazônico. Outros aspectos podem influir conjuntamente nestes resultados como o reflexo de diferentes fontes de carbono que sustentam as cadeias tróficas no vasto setor AE. A diversidade de presas identificadas na dieta para estas populações pode refletir em diferenças isotópicas das presas e, por conseguinte, em seus predadores. Vieira (2014) evidenciou a preferência alimentar por peixes de hábito demersal para população do AE, além de espécies associadas aos ambientes pelágicos e de água doce (ex. Lycengraulis grossidens e Gobioides brousonetti), enquanto a população do Delta do Parnaíba mostrou preferência por espécies de hábito demersal, como Macrodon ancylodon. A escala geográfica é outro fator a ser considerado como atuante na diferenciação isotópica. No setor AE foram englobados desde espécimes capturados acidentalmente na costa do Amapá e aqueles encalhados na baía do Marajó, até exemplares coletados no nordeste do Pará. A primeira área sofre influência direta da descarga do rio Amazonas, enquanto no nordeste do estado a influência vai sendo amenizada por fatores como a ação da Corrente Norte do Brasil com direção Leste-Oeste. O conjunto de exemplares que formou o estoque Sgui_AE foi comparado a uma população restrita ao Delta do Parnaíba, que geograficamente é uma área bem menor e que sofre o reflexo de componentes marinhos (ex. macroalgas e fanerógamas) na produtividade primária. As variações na composição isotópica de 13C e 15N para os estoques AE e NC estão concordando com diferenças moleculares (CUNHA et al., 2005; CUNHA et al., 2010) e morfométricas (FETTUCCIA, 2006) que analisaram populações de regiões semelhantes ao presente estudo. De fato, os estudos realizados por Emin-Lima (2012), Arcoverde et al. (2013) e Vieira (2014) utilizaram os mesmos exemplares de S. guianensis, tanto do setor AE quanto NC, fazendo com que estes estudos possam ser comparáveis entre si. A conjunção destes resultados sugere que existe uma forma menor de S. guianensis no estuário amazônico com uma forte adaptação local aos complexos ambientes estuarinos 42 deste setor. O presente estudo veio aliar a análise de isótopos estáveis na elucidação de questões básicas da biologia e ecologia de Sotalia guianensis na costa do Brasil. 43 5. CONCLUSÕES GERAIS A fauna de cetáceos do Norte e Nordeste do Brasil é mais rica e diversificada do que se pensava anteriormente, agregando diferentes elementos de ecossistemas marinhos com a influência do rio Amazonas. Os registros de encalhes mostraram que existe uma grande similaridade entre os cetáceos desta vasta região com o sul do Caribe, comprovando a conexão entre as regiões. As composições isotópicas detectaram que existe um padrão espacial costa-oceano evidenciado em todos os delfinídeos com exceção de Sotalia guianensis. Espécies neríticas como Steno bredanensis e Tursiops truncatus, e oceânicas (G. macrorhynchus, Delphinus sp., Grampus griseus, Lagenodelphis hosei, Peponocephala electra, Stenella attenuata) exibiram enriquecimento nos valores de 13C que refletem o padrão de decrescimento deste elemento para ambientes oceânicos. Os valores de 13C mais empobrecidos e mais enriquecidos em 15N evidenciam que Physeter macrocephalus se posiciona em um nível trófico mais elevado comparado a todas as espécies marinhas analisadas. Em relação ao nicho isotópico, os delfinídeos apresentaram valores similares de 13C e 15N, exibindo certa sobreposição de nicho com S. guianensis do estuário amazônico e nordeste do Brasil, indicando partição de nicho. Os nichos isotópicos para Sotalia guianensis, Inia spp. e Trichechus inunguis foram altamente diferenciados, indicando forte segregação entre estas espécies simpátricas, pelo menos na baía do Marajó. T. inunguis, Inia geoffrensis e I. araguaiaensis apresentaram as maiores amplitudes de nicho isotópico, o que demonstra que estas espécies assimilam fontes alimentares isotopicamente distintas, refletindo em uma ampla plasticidade trófica. Os estoques populacionais de S. guianensis apresentaram as menores áreas de nicho isotópico. Os valores de 15N foram similares entre os estoques, mas 13C apresentou maiores valores para a população do NC comparado ao estuário amazônico. Apesar das populações apresentarem alta sobreposição de nicho, Sgui_AE apresentou maior amplitude de nicho isotópico indicando diferenças no uso do habitat. 44 6. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ALVES-JUNIOR, T.T.A., ÁVILA, F.J.C., OLIVEIRA, J.A., FURTADO-NETO, M.A.A., MONTEIRO-NETO, C. Registros de Cetáceos para o litoral do estado do Ceará, Brasil. Arquivos de Ciências do Mar, v. 30, n. 1, p. 79–92, 1996. ANDRADE, L.; PINEDO, M. C.; BARRETO, A. S. Gastrointestinal parasites and prey items from a mass stranding of false killer whales, Pseudorca crassidens, in Rio Grande do Sul, Southern Brazil. Revista Braslieira de Biologia, v. 61, n. 1, p. 55–61, 2001. ANDRADE, M.C. M.; LUNA, F.O.; REIS, M.L. Plano de Ação Nacional para a Conservação dos Sirênios. Série Espécies Ameaçadas No 12. Brasília. Instituto Chico Mendes de Conservação da Biodiversidade, 2011. ARAÚJO, C.C.; WANG, J.Y. The dammed river dolphins of Brazil: impacts and conservation. Oryx, p. 1– 8, 2014. ARAÚJO, J. P. et al. The influence of seasonality, tide and time of activities on the behavior of Sotalia guianensis (Van Bénéden) (Cetacea, Delphinidae) in Pernambuco, Brazil. Revista Brasileira de Zoologia, v. 24, n. 4, p. 1122–1130, 2007. ARCOVERDE, D. L. et al. Evaluation of periotic–timpanic bone complex of Sotalia guianensis (Cetacea: Delphinidae) as tool in identification of geographic variations. Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom, v. 94, n. 06, p. 1127–1132, 2013. ARRAUT, E. M. Migração do Peixe-boi Amazônico: uma abordagem por sensoriamento remoto, radiotelemetria e geoprocessamento. 2008. 139p. Tese (Doutorado em Sensoriamento Remoto) Instituto Nacional de Pesquisas Espaciais, São José dos Campos, 2008. BAIRD, R. W. False Killer Whale. In: Encyclopedia of Marine Mammals, United Kingdom: Elsevier p. 405–406, 2009. BARRETO, A. S. Variação craniana e genética de Tursiops truncatus (Delphinidae, Cetacea) na costa Atlântica da América do Sul. 2000. 111p. Tese (Doutorado em Oceanografia Biológica) - Universidade do Rio Grande, Rio Grande, 2000. BASTIDA, R., RODRÍGUEZ, D., SECCHI, E., & SILVA, V. DA. Mamíferos acuáticos de Sudamérica y Antártida. 1a. ed. Buenos Aires: Vázquez Manzini Editores, 2007. BEARHOP, S. et al. Determining trophic niche width : a novel approach using stable isotope analysis. Journal of Animal Ecology, v. 73, n. 5, p. 1007–1012, 2004. BEGON, M., TOWSEND, C.R., HARPER, J. L. Ecologia de Indivíduos a Ecossistemas. 4ª Ed. ed. Porto Alegre: Artmed, 2007, 752p. BELTRÁN-PEDREROS, S. Captura acidental de Sotalia fluviatilis (Gervais, 1853) na pescaria artesanal do estuário amazônico. 1998. 100p. Dissertação (Mestrado) - Universidade do Amazonas, Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia, Manaus, 1998. 45 BELTRÁN-PEDREROS, S.; DE ARAÚJO PANTOJA, T. M. Feeding habits of Sotalia fluviatilis in the Amazonian Estuary. Acta Scientiarum - Biological Sciences, v. 28, n. 4, p. 389–393, 2006. BERTA, A.; SUMICH, J. L.; KOVACS, K. M. Marine Mammals: Evolutionary Biology. 2a. ed. Elsevier, 2006. BEST, R. C. Foods and feeding habitats of wild and captive Sirenia. Mammal, v. 11, n. 1, p. 3–29, 1981. BEZERRA, M. O.; ROLLNIC, M. Physical oceanographic behavior at the Guama/Acara-Moju and the Paracauari river mouths, Amazon Coast (Brazil). Journal of Coastal Research. Anais...Proceedings of the 11th International Coastal Symposium, 2011 BISI, T. L. et al. Trophic Relationships and Habitat Preferences of Delphinids from the Southeastern Brazilian Coast Determined by Carbon and Nitrogen Stable Isotope Composition. PlosOne, v. 8, n. 12, p. e82205, 2013. BORGES, J. C. G.; EMMANUEL, G.; MIRANDA, C. DE. Identificação de itens alimentares constituintes da dieta dos peixes-boi marinhos (Trichechus manatus) na região Nordeste do Brasil. Biotemas, v. 21, n. 2, p. 77–81, 2008. BOROBIA, M. et al. Distribution of the South American dolphin Sotalia fluviatilis. Canadian Journal of Zoology, v. 69, p. 1025–1039, 1991. BOTTA, S. et al. Isotopic variation in delphinids from the subtropical western South Atlantic. Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom, p. 1–10, 2012. BRASIL. Portaria No 444. Brasil. Ministério do Meio Ambiente, 2014. Disponível em: <www.in.gov.br/autenticidade.html> CARVALHO, C. T. Ocorrência de mamíferos marinhos no litoral do Brasil. São Paulo. Boletim Técnico do Instituto Florestal de São Paulo, 1975. CLARKE, K.; GORLEY, R. PRIMER User Manual/Tutorial. PRIMER-E. Plymouth, 2006. COLARES, I. G.; COLARES, E. P. Food plants eaten by Amazonian manatees (Trichechus inunguis, Mammalia: Sirenia). Brazilian Archives of Biology and Technology, v. 45, n. 1, p. 67–72, 2002. Committee on Taxonomy, 2015. List of marine mammal species and subspecies. In: Society for Marine Mammalogy. Disponível em: < www.marinemammalscience.org> COSTA, A. F. et al. How far does it go along the coast? Distribution and first genetic analyses of the boto (Inia geoffrensis) along the coast of Pará, Amazon, Brazil. IWC Scientific Commitee, 2013a. COSTA, A. P. B. et al. Bottlenose dolphin communities from the southern Brazilian coast: do they exchange genes or are they just neighbours? Marine and Freshwater Research, p. A–J, 2015b. CUNHA, H. A. et al. Riverine and marine ecotypes of Sotalia dolphins are different species. Marine Biology, v. 148, n. 2, p. 449–457, 2005. 46 CUNHA, H. A. et al. When You Get What You Haven’t Paid for: Molecular Identification of “Douradinha” Fish Fillets Can Help End the Illegal Use of River Dolphins as Bait in Brazil. The Journal of Heredity, v. 106 Suppl , n. S1, p. 565–72, 1 jan. 2015. CUNHA, H. A.; DA SILVA, V. M. F.; SOLÉ-CAVA, A. M. Molecular Ecology and Systematics of Sotalia Dolphins. In: RUIZ-GARCIA, M.; SHOSTELL, J. (Eds.). Biology, Evolution and Conservation of Rivers Dolphins within South America and Asia. New York: Nova Science Publishers, Inc., 2010. p. 261–283. DA SILVA, V. M. F. Ecologia Alimentar dos golfinhos da Amazônia. 1983. 183p. Dissertação (Mestrado em Biologia de Água Doce e Pesca Interior) - Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia, Manaus, 1983. DA SILVA, V. M. F. Aspects of the biology of the Amazon dolphins genus Inia and Sotalia fluviatilis. 1994. 327p. Thesis - University of Cambridge, St Johns College, 1994. DA SILVA, V. M. F.; BEST, R. C. Mammalian Species - Sotalia fluviatilis. The American Society of Mammalogist, n. 527, p. 1–7, 1996. DA SILVA, V. M. F.; MARTIN, A. R. Status, threats, conservation initiatives and possible solutions for Inia geoffrensis and Sotalia fluviatilis in Brazil. In: TRUJILLO, F. et al. (Eds.). The Action Plan for South American River Dolphins 2010-2020. Bogotá, Colombia: WWF, Fundación Omacha, WDS, WDCS, Solamac, 2010. p. 249. DI BENEDITTO, A. P. M.; MONTEIRO, L. R. Isotopic niche of two coastal dolphins in a tropical marine area: specific and age class comparisons. Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom, p. 1–6, 2015. DI BENEDITTO, A., SICILIANO, S., RAMOS, R. Cetáceos: introdução à biologia e metodologia básica para o desenvolvimento de estudos. Rio de Janeiro: Fundação Oswaldo Cruz, Escola Nacional de Saúde Pública, 2010. DI BENEDITTO, A. P. M.; RAMOS, R. M. A. Biology of the marine tucuxi dolphin (Sotalia fluviatilis) in south-eastern Brazil. Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom, v. 84, n. 6, p. 1245–1250, 2004. DOMNING, D. P. Distribution and Status of manatees Trichechus spp. near the mouth of the Amazon River, Brazil. Biological Conservation, v. 19, n. 9, p. 85–97, 1981. EDWARDS, H. H.; SCHNELL, G. D. Status and ecology of Sotalia fluviatilis in the Cayos Miskito Reserve, Nicaragua. Marine Mammal Science, v. 17, n. 3, p. 445–472, 2001. EMIN-LIMA, N. R. et al. Capturas acidentais de Sotalia guianensis na costa norte do Brasil: Análises preliminares. Reunión de Trabajo de Especialistas en Mamíferos Acuáticos de América del Sur. Anais...Resumos del XIII RT y 7 Congreso SOLAMAC, 2008 EMIN-LIMA, R. et al. Os mamíferos aquáticos associados aos manguezais da costa norte brasileira. In: Mamíferos de Restingas e Manguezais do Brasil. Rio de Janeiro: Sociedade Brasileira de Mastozoologia, 2010a. p. 45–57. 47 EMIN-LIMA, R. et al. Note on the group size and behavior of Guiana dolphins (Sotalia guianensis) (Cetacea: Delphinidae) in Marapanim Bay, Pará, Brazil. Latin American Journal of Aquatic Mammals, v. 8, n. 1-2, p. 167–170, 2010b. EMIN-LIMA, R. Preenchendo Lacunas em Saúde de Ecossistemas: Estudo Morfológico e de Contaminantes nos Botos-cinza (Sotalia guianensis) da Costa Norte do Brasil. 2012. 147p. Tese (Doutorado em Saúde Pública e Meio Ambiente) – FIOCRUZ, Escola Nacional e Saúde Pública, Rio de Janeiro, 2012. FETTUCCIA, D. C. Comparação osteológica nas espécies do gênero Sotalia Gray, 1866 no Brasil (Cetacea, Delphinidae). 2006. 107p. Dissertação (Mestrado), Universidade Federal do Amazonas, Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia, Manaus, 2006. FETTUCCIA, D. C.; DA SILVA, V. M. F.; SIMÕES-LOPES, P. C. Non-metric characters in two species of species of Sotalia (Gray, 1866) (Cetacea, Delphinidae). Brazilian Journal of Biology, v. 69, n. 3, p. 907–917, 2009. FETTUCCIA, D. C.; SIMÕES-LOPES, P. C. Morfologia da coluna vertebral do boto-cinza, Sotalia guianensis (Cetacea, Delphinidae). Biotemas, v. 17, n. 2, p. 125–148, 2004. FLORES, P. A. C.; DA SILVA, V. M. F. Tucuxi and Guiana Dolphin. In: PERRIN, W. (Ed.). Encyclopedia of Marine Mammals. Second ed. United Kingdom: Elsevier, 2009. p. 1188–1192. FOOTE, A. D. et al. Tracking niche variation over millennial timescales in sympatric killer whale lineages. Proceedings. Biological sciences / The Royal Society, v. 280, p. 2–9, 2013. FORDYCE, R. E. Cetacean Evolution. In: PERRIN, W.; WURSIG, B.; THEWISSEN, J. G. (Eds.). Encyclopedia of Marine Mammals. Second ed. United Kingdom: Elsevier, 2009. p. 201–207. FRUET, P. F. et al. Abundance of bottlenose dolphins, Tursiops truncatus (Cetacea: Delphinidae), inhabiting the Patos Lagoon estuary, southern Brazil: implications for conservation. Zoologia (Curitiba, Impresso), v. 28, n. 1, p. 23–30, 2011. FRUET, P. F. et al. Remarkably low genetic diversity and strong population structure in common bottlenose dolphins (Tursiops truncatus) from coastal waters of the Southwestern Atlantic Ocean. Conservation Genetics, v. 15, n. 4, p. 879–895, 2014. GEISE, L.; BOROBIA, M. American Society of Mammalogists. Journal of Mammalogy, v. 68, n. 4, p. 873–875, 1987. GERACI, J. R.; LOUNSBURY, V. J. Marine Mammals Ashore - A field guide for strandings. Texas A&M University Sea Grant College Program and the U.S, 1993. GEYER, W. R. et al. Physical oceanography of the Amazon shelf. Continental Shelf Research, v. 16, n. 5-6, p. 575–616, 1996. GOULDING, M.; BARTHEM, R.; FERREIRA, E. The Smithsonian Atlas of the Amazon. Princeton ed. Smithsonian Books, 2003. 48 GURJÃO, L. M. DE et al. Notas sobre a dieta de cachalotes (Cetacea: Physeteroidea), encalhados no Ceará, Nordeste do Brasil. Arquivos de Ciências do Mar, v. 36, p. 67–75, 2003. GUTERRES, M. G. et al. Anatomia e morfologia de plantas aquáticas da Amazônia utilizadas como potencial alimento por Peixe-Boi amazônico. Instituto de Desenvolvimento Sustentável Mamirauá, Belém-PA: 2008. HAMMER., Ø.; HARPER, D. A. T.; RYAN, P. D. Paleontological Statistics Software Package for Education and Data Analysis, 2001. HRBEK, T. et al. A new species of river dolphin from Brazil or: How little do we know our biodiversity. PLosOne, v. 9, n. 1, 2014. HUTCHINSON, G. E. Concluding Remarks. Cold Spring Harbor Symposia on Quantitative Biology, v. 22, p. 415–427, 1957. JACKSON, A. L. et al. Comparing isotopic niche widths among and within communities: SIBER - Stable Isotope Bayesian Ellipses in R. Journal of Animal Ecology, v. 80, n. 3, p. 595–602, 2011. JEFFERSON, T.; LEATHERWOOD, S.; WEBBER, M. Marine mammals of the world. Rome: FAO species identification guide, 1993. JUNK, W. J. et al. A classification of major naturally-occurring amazonian lowland wetlands. Wetlands, v. 31, n. 4, p. 623–640, 2011. LAYMAN, C. A. et al. Applying stable isotopes to examine food-web structure: An overview of analytical tools. Biological Reviews, v. 87, n. 3, p. 545–562, 2011. LODI, L.; BOROBIA, M. Baleias, Botos e Golfinhos do Brasil. 1a. ed. Rio de Janeiro: Technical Books Editora, 479p., 2013. LUKSENBURG, J. The cetaceans of Aruba, southern Caribbean. Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom, v. 94, n. 6, p. 1161–1174, 2014a. LUKSENBURG, J. Prevalence of external injuries in small cetaceans in aruban waters, Southern Caribbean. PLosOne, v. 9, n. 2, p. 1–10, 2014b. MARTIN, A. R. R.; DA SILVA, V. M. F. M. F. River dolphins and flooded forest: seasonal habitat use and sexual segregation of botos (Inia geoffrensis) in an extreme cetacean environment. J. Zool., Lond., v. 263, p. 295–305, 2004. MARTINS, B. M. L. A pesca e os botos: Análise das capturas acidentais de pequenos cetáceos no estuário Amazônico. 2015. 72p. Dissertação (Mestrado em Ecologia e Conservação da Biodiversidade) - Universidade Estadual de Santa Cruz, Ilhéus, 2015. MEIRELLES, A. C. O. et al. Cetacean strandings on the coast of Ceará, north-eastern Brazil (1992– 2005). Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom, v. 89, n. 05, p. 1083, 2009. 49 MICHENER, R.; KAUFMAN, L. Stable isotope ratios as tracers in marine food webs: An update. In: MICHENER, R.; LAJTHA, A. K. (Eds.). Stable Isotopes in Ecology and Environmental Science. Blackwell, 2007. v. 28p. 238–270. MONTEIRO-FILHO, E. L. A. D. A.; MONTEIRO, L. R.; REIS, S. F. DOS. Skull shape and size divergence in dolphins of the genus Sotalia: a tridimensional morphometric analysis. Journal of Mammalogy, v. 83, n. 1, p. 125–134, 2002. MONTEIRO-FILHO, E.L.A., MONTEIRO, K. D. K. A. Biologia, Ecologia e Conservação do Boto-cinza. São Paulo: Páginas & Letras Editora e Gráfica, 2008. MONTEIRO-NETO, C. et al. Impact of Fisheries on the tucuxi.pdf. Aquatic Mammals, v. 26, n. 1, p. 49– 56, 2000. MOREIRA, A. M.; MAVIGNER, D. S. Conhecendo história e geografia do Piauí. Parnaíba Gráfica Ferraz, 2007. MOTTA, M. R. A. et al. Gastric lesions associated with the presence of Anisakis spp. Dujardin, 1845 (Nematoda: Anisakidae) in Cetaceans stranded on the coast of Ceará, Brazil. Biota Neotropica, v. 8, n. 2, p. 0–0, 2008. NEWSOME, S. D. et al. A niche for isotopic ecology. Front Ecol Environ, v. 5, n. 8, p. 429–436, 2007. NEWSOME, S. D. et al. Tools for quantifying isotopic niche space and dietary variation at the individual and population level. Journal of Mammalogy, v. 93, n. 2, p. 329–341, 2012. NEWSOME, S. D.; CLEMENTZ, M. T.; KOCH, P. L. Using stable isotope biogeochemistry to study marine mammal ecology. Marine Mammal Science, v. 26, n. 3, p. 509–572, 2010. NITTROUER, C. A.; DEMASTER, D. J. The Amazon shelf setting: tropical, energetic, and influenced by a large river. Continental Shelf Research, v. 16, n. 5-6, p. 553–573, 1996. NORMAN, S. A et al. Cetacean strandings in Oregon and Washington between 1930 and 2002. Journal of Cetacean Research Management, v. 6, n. 1, p. 87–99, 2004. NORRIS, K. S. Standardized methods for measuring and recording data on the smaller cetaceans. Journal of Mammalogy, v. 42, p. 471–476, 1961. PAULY, D. et al. Towards sustainability in world fisheries. Nature, v. 418, n. August, p. 689–695, 2002. PERRIN, W. F. Variation of spotted and spinner porpoise (genus Stenella) in the Eastern Pacific and Hawaii. v. 21, 212p., 1975. PERRIN, W. F. et al. Common bottlenose dolphins (Tursiops truncatus) in California waters: Cranial differentiation of coastal and offshore ecotypes. Marine Mammal Science, v. 27, n. 4, p. 769–792, 2011. PIANKA, E. R. Niche overlap and diffuse competition. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, v. 71, n. 5, p. 2141– 2145, 1974. 50 PINEDO, M. C. C. et al. A note on vessel of opportunity sighting surveys for cetaceans in the shelf edge region off the southern coast of Brazil. The Journal of Cetacean Research and Management, v. 4, n. 3, p. 323–329, 2002. PINELA, A. M. et al. Stable isotope analysis reveals habitat partitioning among marine mammals off the NW African coast and unique trophic niches for two globally threatened species. Marine Ecology Progress Series, v. 416, p. 295–306, 2010. RAMOS, R. M. A.; SICILIANO, S.; RIBEIRO, R. Monitoramento da biota marinha em navios de sísmica: seis anos de pesquisa (2001-2007). First ed. Vitória: Everest Tecnologia em Serviços, 2010. RAMOS, R. M. A. Variação morfológica em Pontoporia blainvillei e Sotalia fluviatilis (Cetacea) na costa sudeste do Brasil. 2001. 181p. Tese (Doutorado em Biociências e Biotecnologia) - Universidade Estadual do Norte Fluminense, Campos dos Goytacazes, 2001. RAMOS, R. M.; DI BENEDITTO, A. P. M.; LIMA, N. R. W. Relationship between dental morphology, sex, body length and age in Pontoporia blainvillei and Sotalia fluviatilis (Cetacea) in Northern Rio de Janeiro, Brazil. Revista Brasileira de Biologia, v. 60, n. 2, p. 283–290, 2000. REYNOLDS, J. E.; POWELL, J. A.; TAYLOR, C. R. Manatees. In: Encyclopedia of Marine Mammals. Second ed. United Kingdom: Elsevier, p. 682–691, 2009. RICCIALDELLI, L. et al. Isotopic assessment of prey and habitat preferences of a cetacean community in the southwestern South Atlantic Ocean. Marine Ecology Progress Series, v. 418, p. 235–248, 2010. ROMERO, A.; CRESWELL, J. In: ROMERO, A.; WEST, S. (Eds.). Environmental Issues in Latin America and the Caribbean. Springer New York, 2005. p. 3–30. ROSAS, F. C.; MONTEIRO-FILHO, E. L. A. Reproduction of the estuarine dolphin (Sotalia guianensis) on the coastal of Paraná, Southern Brazil. Journal of Mammalogy, v. 83, n. 2, p. 507–515, 2002. ROSAS, F. C. W. Interações com a pesca, mortalidade, idade, reprodução e crescimento de Sotalia guianensis e Pontoporia blainvillei (Cetacea, Delphinidae e Pontoporiidae) no litoral sul do Estado de São Paulo e litoral do Estado do Paraná, Brasil. 2000. 145p. Tese (Doutorado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal do Paraná, Curitiba, 2000. RUBENSTEIN, D. R.; HOBSON, K. A. From birds to butterflies: Animal movement patterns and stable isotopes. Trends in Ecology and Evolution, v. 19, n. 5, p. 256–263, 2004. SANTOS, M. C. O. et al. Insights on small cetacean feeding habitats in southeastern Brazil. Aquatic Mammals, v. 28, n. 1, p. 38–45, 2002. SCHOENER T.W. Resource partitioning in ecological communities. Science, v. 185, p. 27–39, 1974. SECCHI, E. R. The IUCN Red List of Threatened Species, 2012. Disponível em: <www.iucnredlist.org>. Acesso em: 1 ago. 2015. SHARIR, Y. et al. Small size in the common bottlenose dolphin Tursiops truncatus in the eastern Mediterranean: A possible case of Levantine nanism. Marine Ecology Progress Series, v. 438, p. 241– 251, 2011. 51 SHOLL, T. G. C. et al. Taxonomic identification of dolphin love charms commercialized in the Amazonian region through the analysis of cytochrome b DNA. Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom, v. 88, n. 06, p. 1207 – 1210, 2008. SICILIANO, S. Review of small cetaceans and Fishery Interactions in Coastal Waters of Brazil. Rep. Int. Whal. Commn (Special Issue 15). Report of the International Whalling Commission, v. 15, p. 241250, 1994. SICILIANO, S. et al. Confirmed sightings of the Antillean manatee (Trichechus manatus) on the coast of Ilha de Marajó, northern Brazilian coast. JMBA Global Marine Environment, p. 34–35, 2007. SICILIANO, S. et al. Revisão do Conhecimento. Arquivos do Museu Nacional, v. 66, n. 2, p. 381–401, 2008. SICILIANO, S. et al. Sightings of humpback whales on the Vitória-Trindade chain and around Trindade Island, Brazil. Brazilian Journal of Oceanography, v. 60, n. 3, p. 455–459, 2012. SICILIANO, S.; FLACH, L. What is so funny about rough-toothed dolphins? MBA Global Marine Environment, v. 5, p. 5, 2007. SIMÕES-LOPES, P. C. Ocorrência de uma população de Sotalia fluviatilis. Biotemas, v. 1, n. 1, p. 57– 62, 1988. SIOLI, H. Amazônia: fundamentos da ecologia da maior região de florestas tropicais. Petrópolis: Vozes, 1991. SOUSA, M. et al. Learning with Omar: lessons from a semi-captive orphaned manatee and its environment on the east coast of Pará, Brazil. Sirenews. Number 62, n. October 2014, p. 9, 2014. SOUSA, M. E. M. Análise da ocorrência de peixes-boi com base no Conhecimento Ecológico Local e nos parâmetros ambientais na costa leste da Ilha de Marajó, Pará. 2011. 174p. Dissertação (Mestrado em Biologia Ambiental) - Universidade Federal do Pará, Bragança, 2011. SOUTO, L. R. A. et al. Análise das mordidas de tubarões-charuto, Isistius spp. (Squaliformes: Dalatiidae) em cetáceos (Mammalia: Cetacea) no litoral da Bahia, Nordeste do Brasil. Biotemas, v. 20, n. 1, p. 19–25, 2007. SOUZA-FILHO, P. W. M. et al. Environmental sensitivity index (ESI) mapping of oil spill in the amazon coastal zone: The PIATAM Mar project. Revista Brasileira de Geofisica, v. 27, n. SUPPL. 1, p. 7–22, 2009. SZCZYGIELSKI, A. et al. Evolution of the Parnaíba Delta (NE Brazil) during the late Holocene. GeoMarine Letters, v.35, n. 2, p. 105-117, 2014. TAVARES, M. et al. Biogeography of common dolphins (genus Delphinus) in the southwestern Atlantic Ocean. Mammal Review, v. 40, n. 1, p. 40–64, 2010. TOSI, B. C.; MAGALHÃES, F.; GARRI, R. Can the estuarine dolphin (Sotalia guianensis) be classified as Vulnerable Species in Maranhão coast, Northeastern Brazil? Cetacean Society International, v. XVI, n. 2, p. 2–4, 2007. 52 TRITES, A. W. W. Marine mammal trophic levels and interactions. In: STEELE, JOHN H., THORPE, STEVE A. AND TUREKIAN, K. K. (Ed.). Encyclopedia of Ocean Sciences. San Diego: Academic Press, p. 1628–1633, 2001. VIEIRA, J. O. Diferenças alimentares em populações de boto-cinza Sotalia guianensis (Van Benédén, 1864) (Cetacea, Delphinidae) nas costas Norte e Nordeste brasileira. 2014. 50p. Dissertação (Mestrado em Zoologia) - Universidade Federal do Pará, Museu Paraense Emílio Goeldi, Belém, 2014. VIGHI, M. et al. Stable isotopes indicate population structuring in the Southwest Atlantic population of right whales (Eubalaena australis). PLosOne, v. 9, n. 3, 2014. WERTH, A. Feeding in marine mammals. In: Feeding: Form, function, and evolution in tetrapod vertebrates. Kurt Schwenk (Ed.). Academic Press, San Diego. p.487-526. 2000., p. 40, 2000. ZERBINI, A. N. et al. Distribuição e Abundância Relativa de Cetáceos na Plataforma Continental Externa e Talude da Zona Econômica Exclusiva no Sul e Sudeste do Brasil: Resultados Preliminares e Perspectivas Futuras. São Paulo, Editora da Universidade de São Paulo, 2004. 53 CAPÍTULO I STRANDING SURVEY AS A FRAMEWORK TO INVESTIGATE RARE CETACEAN RECORDS OF THE NORTH AND NORTH-EASTERN BRAZILIAN COASTS Artigo elaborado e formatado para publicação no periódico Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom para o Special Issue Cetaceans. O artigo foi resubmetido em 01/12/2015 após revisão pelos autores e aguarda parecer final para publicação. 54 RUNNING HEAD – Cetacean records from Northern and North-eastern Brazilian coast Stranding survey as a framework to investigate rare cetacean records of the North and Northeastern Brazilian coasts ALEXANDRA F. COSTA1,3, SALVATORE SICILIANO1,2, RENATA EMIN-LIMA1, BRUNA M.L. MARTINS1,4, MAURA E.M. SOUSA1,5, TOMMASO GIARRIZZO3,6 AND JOSÉ DE SOUSA E SILVA JÚNIOR1 1 Museu Paraense Emílio Goeldi, Coordenação de Zoologia, Setor de Mastozoologia, Grupo de Estudos de Mamíferos Aquáticos da Amazônia (GEMAM), Av. Perimetral, 1901, Terra Firme, 66077530 Belém, PA, Brazil Instituto Oswaldo Cruz/FIOCRUZ, Pavilhão Mourisco – sala 122, Av. Brasil, 4365 - Manguinhos, 21040-360, Rio de Janeiro, RJ Brazil 2 3 PPG em Ecologia Aquática e Pesca, Universidade Federal do Pará-UFPA, Instituto de Ciências Biológicas, Cidade Universitária José da Silveira Netto, Av. Augusto Corrêa n° 1, Guamá, 66075-110, Belém, PA, Brazil 4 PPG em Ecologia e Conservação da Biodiversidade, Universidade Estadual de Santa Cruz–UESC. Rodovia Jorge Amado, km 16–Pav. Maz de Menezes, 1º andar, sala 1DA, Salobrinho, 45662-900 Ilhéus, BA, Brazil 5 PPG em Biologia Ambiental, Universidade Federal do Pará–UFPA, Campus de Bragança. Alameda Leandro Ribeiro s/n, Aldeia, 68600-000 Bragança, PA, Brazil 6 Laboratório de Biologia Pesqueira e Manejo dos Recursos Aquáticos, Universidade Federal do ParáUFPA, Av. Perimetral, 2651 Terra Firme, 66077-830 Belém, PA, Brazil ABSTRACT Marine mammal stranding events are used as an important tool for understanding cetacean biology worldwide. Nonetheless, there are vast gaps of knowledge to be filled in for a wide range of species. Reputable information is required regarding species from large baleen whales to sperm and beaked whales, as well as pelagic dolphins. This paper describes new cetacean records from North and North-eastern Brazil, which are both the least surveyed areas regarding aquatic mammals. Regular beach surveys were conducted to recover cetacean carcasses along the coast of Pará beginning November 2005, covering approximately 88 km of the state’s coast. At the coasts of the Maranhão and Piauí states, the surveys were conducted between 2008 and 2013. From 2003 to 2014, 34 strandings of cetaceans were registered. The study provides four additional species records’ in the area based on strandings (Balaenoptera borealis, Balaenoptera physalus, Peponocephala electra and Pseudorca crassidens). A mass stranding of Guiana dolphins (Sotalia guianensis, N= 12), the most common species for the region, was reported for the first time. The records presented herein are of special concern, since they expand the knowledge on cetaceans from the Brazilian coast. In addition, this study conducted an analysis to verify the similarity between cetacean compositions described for 55 North and North-eastern Brazil and the southern Caribbean region. The results showed a high similarity between these regions, proving the connection with the Caribbean cetacean fauna. Keywords: Cetaceans, Brazilian coast, strandings, cluster analysis, Delphinidae, Balaenopteridae, Physeteridae, Amazon. INTRODUCTION The Northern Brazilian coast extends from French Guiana border to western Maranhão state coast (Souza-Filho et al., 2009). In this vast coastal area cetacean records have been documented only in the last decade. The North and North-eastern Brazil have been one of the least surveyed areas regarding aquatic mammals. Only one report made a compilation of cetacean records from this area (Siciliano et al., 2008) bringing the number of recorded species to 22, including large whales and dolphins. This study is an effort to increase this information after abovementioned study. Stranding events is one of the best ways to access data on biology and ecology of marine mammals (Norman et al., 2004; Evans et al., 2005; Santos et al., 2010; Peltier et al., 2012; Covelo et al. 2015). The cetacean fauna of Brazil has been subject to an extensive number of groups dedicated to conservation and research issues since the 1980’s. Because of this, a considerable amount of new information on cetacean distribution, biology and ecology has arisen (e.g. Pinedo et al., 2001; Zerbini et al., 2004). In 2005, with the establishment of the ‘Grupo de Estudos de Mamíferos Aquáticos da Amazônia (GEMAM)’ at the Museu Paraense Emílio Goeldi, the first systematic studies on aquatic mammals were initiated in the region. Nevertheless, there are vast gaps of knowledge to be filled in for a wide range of species. From large baleen whales to sperm and beaked whales, as well as pelagic dolphins, reputable information is required. This is due, in part, to the lack of inventories over large areas of the Brazilian coast. Studies on the occurrence of cetaceans around the world are made using different methodologies such as: strandings, historical records, opportunistic sightings and dedicated surveys (see Maldini et al., 2005). In other words, cetacean composition in a specific area could be assessed through strandings when other sources of information are not available (Maldini et al., 2005; Byrd et al., 2014). In this sense, Pyenson (2001) validated that cetacean death assemblages is a faithfully way to document taxonomic richness and relative abundance of living cetaceans. The main goals of this report is to: (1) present a variety of new cetacean records along the Northern Brazilian coast, (2) increase baseline information on cetacean occurrence over 11 years (2003-2014); and (3) compare the cetacean composition in distinct areas along the North and North-eastern Brazilian coasts with southern Caribbean region, investigating the similarity between these sectors. The results of this study could open a promising new window for understanding the cetacean community structure in this vast stretch of coast. 56 MATERIALS AND METHODS Study sites The Brazilian Amazon coast has Cabo Orange as its limits to the west, bordering French Guiana (04oN, 51oW) to the Ponta do Tubarão (02oS, 43oW) as the westernmost of São José Bay, Maranhão state (Souza-Filho et al., 2009). This vast coastal area extends for approximately 2250 km excluding many inlets, islands and small estuaries (Souza-Filho et al., 2005). The freshwater input along this coastline is different. In the Northern the influence of the enormous discharge of the Amazon River dominates, while in the western Maranhão coast and in the coastline of Piauí, the principal effect comes from the discharge of Parnaíba River (Szczygielski et al., 2014). The study site of this report divided the area into three sampling sectors: (1) Marajó Bay (MB), (2) Eastern Pará (EP) state and (3) Maranhão/Piauí coastline (MA/PI), encompass part of Parnaíba Delta (Figure 1). Marajó Bay is located on the eastern side of Marajó Island. This bay is formed mainly by the discharges of Pará and Tocantins rivers and Guajará Bay. In the eastern coast of Pará and northwest coast of Maranhão the coastline is designated as Amazon macrotidal coastal zone. This region encompass almost 70% of Brazilian mangrove forests, possess low relief (0 to 80m), broad coastal plain (with up to 70 km wide) and large continental shelf (200 km approximately). This coastline is extremely irregular and forms numerous bays and small estuaries, the area is influenced for a macrotidal regime (Souza-Filho, 2005). Maranhão and Piauí coastlines, encompassing the Parnaíba Delta, are considered a semiarid region. Parnaíba River discharge into the Atlantic Ocean forming a delta with five bays: Tutóia, Caju, Melancieiras, Canárias and Igaraçu (Moreira & Mavigner, 2007). Parnaíba Delta comprises a mesotidal coast with beaches with up to 200 m wide and large areas of mangrove forests (Szczygielski et al., 2014) (Figure 1, frame 3). Stranding events in these areas were regularly monitored between 2008 and 2011, after that period, the attendance to the events was sporadic. Every two-week period, the vast stretch of coastline is reached by boat and four-wheel vehicle or, alternatively, monitored by foot. At least three field monitors take part in the field and on dedicated surveys the same routes were covered (Figure 1, see frame1 and 2). Fig. 1 On occasion, the team was called to respond to live strandings or carcasses washed ashore. These events, as they are exclusive in their nature and circumstances, are validated with voucher, pictures and other sources of original information. The carcasses were identified in the field following specific features (e.g. colouration, shape of the head, and number of teeth). In such specific cases as Delphinus sp. and Megaptera novaeangliae dating 2005 at Luís Correia municipality, the identification was made posteriorly through cranial measures and scapular features. 57 Complete and incomplete carcasses were recovered and their skeletons and soft tissues, after preparation, are deposited at the Mammal Collection from Museu Paraense Emílio Goeldi (MPEG), located in Belém, Pará, Brazil. Table 1 lists the records of cetaceans stranded from 2003 to 2014 on the Northern and North-eastern Brazilian coast according to the three sampling sectors. Table 1 Data source and analysis The similarity between the cetacean composition described in this study and the most representative surveys conducted in the North (Siciliano et al., 2008) and part of the North-eastern Brazilian coasts (Alves et al., 1996; Motta et al., 2008; Meirelles et al., 2009), in addition to the Caribbean region (Romero & Creswell, 2005; Luksenburg, 2014a, b), was analyzed. Similarities between the stranding and sighting records of cetaceans reported in seven articles and the present study was accomplished through an analysis of similarity by the Jaccard index based on the presence or absence of species. A similarity profile (SIMPROF) test was performed to detect the significantly different groups using the default of 1.000 permutations for the mean similarity profile and 999 permutations for the simulated profile, with a significance level of 0.05. Multivariate analyses were performed using PRIMER 6.0 (Clarke & Gorley, 2006). RESULTS AND DISCUSSION Species richness and diversity This study is pioneer as it clarifies the composition and richness of the cetacean community in a vast stretch of the Brazilian coast. Indeed, the records presented herein are of particular importance, as they expand the richness on cetaceans of the North and part of the North-eastern Brazilian coast. Current data, with the addition of four species to the previous list (Siciliano et al., 2008), expanded this number to 26 aquatic mammal species. Therefore, the present study recorded rare strandings of some cetacean species (e.g. mass stranding of Sotalia guianensis), and the first occurrence of these cetaceans in Northern coast: 1. Sei whale, Balaenoptera borealis Lesson, 1828, 2. Fin whale, Balaenoptera physalus (Linnaeus, 1958), 3. Melon-headed whale, Peponocephala electra (Gray, 1846) and 4. False killer whale, Pseudorca crassidens (Owen, 1846). Species richness was represented for 15 taxa, within three distinct families: Balaenopteridae (B. borealis, B. physalus, B. brydei, Megaptera novaeangliae), Physeteridae (Physeter macrocephalus) and Delphinidae (Delphinus sp., Globicephala macrorhynchus, Grampus griseus, Lagenodelphis hosei, P. electra, P. crassidens, S. guianensis, Stenella attenuata, Steno bredanensis, Tursiops truncatus) (Table 1). Stranding data are an important source to understanding the biology and ecology of marine mammals (Geraci & Lounsbury, 1993). This study is in accordance to Pyenson (2011) which suggests that 58 stranding records at extensive latitude gradients (>1000 km) and for long time periods, provide a useful and faithfully method to understand richness and cetacean community in a particular area than the sighting surveys (e.g. line-transect method). Maldini et al. (2005) analyzing the composition of cetaceans of the Hawaiian Islands suggested that the stranding data reflects the species composition found in living animals surveys and defends the usefulness use of stranding data as an important source of information in the absence of other data. Spatial Distribution Marine mammalogists assumed that stranding events could be affected by oceanographical features such as bottom topography, tides, currents, winds and weather patterns (Mignucci-Giannoni et al., 1999; Norman et al., 2004). Carcasses can be moved by currents and winds along the coast and the oceanographic differences observed in this vast area of the Brazilian coast should be considered important factors on strandings’ distribution. In these sampling sectors (Marajó bay-MB, Eastern Pará-EP and Maranhão/Piauí coastline-MA/PI) stranding events were distributed unequally. The spatial distribution among sectors showed that the majority of strandings occurred at the Maranhão/Piauí coastline 54.5% (N= 18), on the North-eastern coast of Brazil. The EP occupies the second place, with 39.4% (N= 13) and MB with only 6.1% (N= 2) of rare cetacean records. Despite the surveys be more dedicated in the latter sector, the frequency of uncommon strandings (e.g. oceanic species) were lower. However, in MB, single strandings of Sotalia guianensis occur at regular intervals, and therefore they were not included in this report as they are commonplace. Differences in stranding by family and sector were analyzed in order to evaluate patterns along the distinct sectors of this coastline. Members of the Delphinidae family were the most representative in the frequency of strandings, comprising 66.7% (N= 22), followed by Balaenopteridae 21.2% (N= 7) and Physeteridae 12.1% (N= 4). The spatial distribution of species in the three sectors provides relevant information on the occurrence of species through stranding records. Although the dedicated monitoring effort was lower at the MA/PI, this region presented some exclusive cetacean records, followed by EP and MB. Small pelagic and neritic-pelagic cetaceans have been recorded in higher numbers along the Eastern coast of the Pará and Maranhão/Piauí sectors. In contrast, the MB area and adjacent coastline are influenced by the Amazon and Pará/Tocantins Rivers discharges, thus presumably limiting the occurrence and subsequent stranding of pelagic species. It should be considered that areas of difficult access and sparsely populated in the Amazon coastal zone, as the eastern Pará state and the western Maranhão state, could represent potential circumstances for the low strandings notifications in these sectors. This coastline is singular and considered the largest continuous belt of mangroves in the world (SouzaFilho, 2005) which complicates access and, consequently, the rescue and reports of stranded marine 59 mammals. The macrotidal characteristic observed in the sectors MB and EP is another factor that should explain the low frequency of strandings especially small and medium-sized cetaceans. The broad tidal ranging 4 to 7.5 meters (Souza-Filho, 2005) may in a few hours carry the carcass of a small cetacean without this be seen in these vast uninhabited areas. Cetacean Composition BALAENOPTERIDAE This report includes the very first large baleen whale records on the Northern coast. Previous revised information on stranding and sighting records of baleen whales along the Brazilian coast post-1997 (Siciliano et al., 2011) emphasizes the relevance of the current records. On 13 September 2008 a large whale stranded alive on the Eastern Pará state (EP). The specimen had features characteristically attributed to sei whales: a dark body with patches of lighter gray, both sides of head evenly dark, head slightly arched, throat grooves ending just behind the flippers, grey-black baleen plates with a metallic sheen, lighter plates near the front of the mouth and a sickle-shaped dorsal fin (Figure 2). The sei whale was stranded in September, during the peak migration period of southward migration (August– October) (sensu Best & Lockyer, 2002). In accordance to these authors, the Viseu specimen (MPEG 39691), TL= 10.32 m in length, is acceptable as the size of immature females caught off South Africa (range 10.7–13.7 m). The necropsy revealed a large amount of mud in the stomach, probably originated from the mangrove sediments nearby the stranding site. On January 2010, a male fin whale Balaenoptera physalus was reported stranded on the Eastern Pará state (EP). Curiously the fresh specimen had a large callosity on the top of the head (Figure 3). The fin whale stranding demands a more complex interpretation, since the specimen became stranded in January, by the time most large whales have already reached Antarctic and sub-Antarctic waters. Siciliano et al. (2011) reported on a fin whale sighted in January 2004 off the Santos Basin (21°17’S). Our present record poses an intriguing question, whether this whale was of a Southern Hemisphere origin or truly representative of a Northern Hemisphere stock. They are the very first evidence of the fin and sei whales occurrence along the Northern Brazilian coast. The new-born Bryde’s whale recorded in Joanes village (MB) on 15 September 2012 is a remarkable record. Very limited information exists on the pregnancy and time of birth of this tropical balaenopterid and, in Brazil, information on the calving season is almost non-existent (Santos et al., 2010). Moura & Siciliano (2012) report on two new-borns stranded only a few months apart in southeastern Brazil (August and September). Our record was in September, agreeing with these authors’ previous observations and, thus, suggesting the same period of the year as a calving season for Bryde’s whales off the Northern Brazilian coast. FIG. 2 FIG. 3. 60 PHYSETERIDAE In relation to odontocetes, four additional sperm whales records are included from the Pará state and Maranhão/Piauí coastlines. A very young specimen (TL= 4.22 m) stranded at east coast of the Marajó Island. This record strongly suggests the existence of calving off the Northern Brazilian coast. A livestranded sperm whale was recorded for the first time along the Pará coastline. The specimen was a female with TL= 10.50 m (MPEG 42166) that came ashore at Crispim beach, had a large amount of squid beaks in its stomach and intestines. Sperm whales are a regular component of cetaceans found stranded on the North-eastern coast of Brazil. For example, Meirelles et al. (2009) provided 26 records for the Ceará state alone over the period from 1993 to 2005. The sample includes specimens of all sizes, from a 3.53 m new-born to a 18.10 m bull male. It was assumed that the strandings took part mostly in spring, summer and winter months, influenced by strong north-western winds, when carcasses have more chance of coming ashore. Magalhães et al. (2008) have contributed with two records of sperm whales for the Maranhão coastline, during their short-term surveys from 2004 to 2006. Other records for the North-eastern coast include a new-born stranded near Capim bay (01º28’47.24”S, 44º50’33.38”W), Maranhão coast (Ristau, 2012), and four other specimens reported by Tosi et al. (2006). In a broader perspective, it is highly recommended to conduct future surveys in order to estimate sperm whale density and abundance off the North and North-eastern Brazilian coasts. The structure of this sperm whale population in relation to more southerly aggregations in Brazil deserves further studies. DELPHINIDAE The records of bottlenose, rough-toothed, and common dolphins indicate their regular presence in neritic waters off Northern Brazil, where they are referred to by fishermen as ‘tuninas’. The common dolphin specimen recorded at Pedra do Sal beach is certainly of special interest as so little is known of this population inhabiting the North-eastern coast (see Tavares et al., 2010 for more details). The evidence of consumption of a fresh Fraser’s dolphin denotes further investigation on the use of marine bush meat along small fishing communities of North-eastern Brazil. Tosi et al. (2008) have reported a similar episode involving Fraser’s dolphin consumption in the coast of Maranhão. Even if these represent fortuity events, dolphin and whale meat consumption should be more deeply investigated in such villages in future surveys. Blackfish records were represented by the false-killer whale, melon-headed whale and Risso’s dolphin recovered in distinct areas. These specimens improve the knowledge on blackfish occurrence off the Northern Brazilian coast. The false-killer listed in this study is noteworthy; this is the first record of this species in the region. The specimen (MPEG 42132) had marks of human interaction; the peduncle was cut-off and most of the teeth were removed. This strongly suggests interactions with the pelagic fishery activity. Such marks were also observed in a rough-toothed dolphin stranded in Eastern Pará 61 (MPEG 42131) and on a pantropical spotted dolphin found on Piauí (MPEG 42085), suggesting that this kind of negative interaction may be more common than previously thought. Luksenburg (2014b) has informed on injuries found in live small cetaceans off Aruba, in the southern Caribbean. The author reported that of the 18 false killer whales individuals presenting injuries, six (33.3%) showed wounds that were probably caused by human activities. Two of these injuries were most likely caused by fishing gear and two others were most likely the result of a propeller hit. Further investigation on the impact of such fishing operations off Northern and North-eastern Brazil on false-killer whales and other smaller pelagic delphinids is highly needed. Regarding coastal species, a mass stranding of Guiana dolphins was reported for the first time, based on an incident recorded in Salinópolis eastern Pará, in January 2013. The coastline of Pará possesses certain unique features, such as very strong tides that cause accelerated movement of the sand banks and tidal channels. It seems plausible to believe in a natural condition characterized by this muddy beach and fast lowering tide acting as a trap. Although Guiana dolphins are familiar with flat waters and tide dynamism, the particular location of the Corvina beach could have acted as a natural trap. Nonetheless, the singularity of this event is worth mentioning and adds a new feature to the natural behaviour of Guiana dolphins. Cluster Analysis The cluster analysis indicated that the cetacean composition from the Caribbean and North Brazilian coast form a single group (Group 1) that differs significantly from the group formed at North-eastern Brazil (Group 2) (Figure 4). The cluster analysis using the reports from the Caribbean (Romero & Creswell, 2005; Luksenburg, 2014a, b) and the present study formed a single group (Group 1). The richness of species varied from 13 to 24, with 29 species in totality. Group 2 was defined by adding stranding information from Northeastern Brazil (Alves et al., 1996; Motta et al., 2008; Meirelles et al., 2009). Species richness ranged from 5 to 10, with 15 species in total. Our similarity analysis revealed some degree of connection between the cetacean fauna of North Brazil and Caribbean, while the North-eastern coastline resulted important to biodiversity maintenance at the regional scale. Although the systematic monitoring effort was lower at Maranhão/Piauí coastline, this area resulted to be singular due to the exclusive cetacean records of pelagic and neriticpelagic species (e.g. Lagenodelphis hosei, Peponocephala electra). In contrast, the Marajó Bay area and adjacent areas are influenced by the Amazon and Pará/Tocantins rivers discharges, which presumably impose a barrier to the occurrence and then stranding of pelagic species. The cetacean fauna off the North and North-eastern Brazilian coast is much richer and diverse that previously thought, including both residents of tropical oligotrophic waters and highly-migrating baleen whales. Species associated to productive environments are also included, such as Bryde’s whales and the common dolphin. As pointed out by the present survey, the connection with the 62 southern Caribbean cetacean fauna seems plausible and deserves further investigation. This is particularly relevant for understanding the affinity of North Brazilian Bryde’s whale and common dolphin populations with the adjacent Venezuela regional aggregations of these species (AcevedoGalindo, 2007). Such a relationship is highly expected and could potentially connect the North Brazilian cetacean fauna with the fauna from the southern Caribbean. In conclusion, the cetacean fauna of North and North-eastern Brazil combines different elements from tropical marine ecosystems under the influence of the most powerful river of the world. Such dynamism requires a proportional research effort to better evaluate and understand its own complexity. Fig. 4. ACKNOWLEDGMENTS We would like to thank the GEMAM members who helped with field surveys, and carcass collection and processing. A.F. Costa would like to thank Herbert Freitas (Quadrado) for his support and the collections made at the Piauí coast, without your help we would not have obtained the diversity of cetaceans in that sector. We are grateful to veterinarians Dra. Valíria Cerqueira and Dr. Pedro Bezerra and their staff from the UFPA/Instituto de Medicina Veterinária-Campus Castanhal for their assistance in strandings and necropsies. We are thankful to IBAMA/DIFAP-PA for all the logistic and technical support for the stranding callings. Thanks to the staff of the MPEG, especially to the Mastozoology Sector for the support given to our research group along all these years. This article is part of Alexandra Costa’s PhD thesis and is one of the requirements for the achievement of a PhD title in Aquatic Ecology and Fishery from the Universidade Federal do Pará. FINANCIAL SUPPORT This study was supported by VALE/FAPESPA/FAPEMIG (Grants no. 038/2011) and Petrobras (Projeto Bicho D’água: Conservação Socioambiental and Projeto Cetáceos do Maranhão). A.F. Costa and M.E.M. Sousa are PhD students at the Universidade Federal do Pará and supported by Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES). B.M.L. Martins is an MSc student at the Universidade Estadual de Santa Cruz and supported by CAPES. R. Emin-Lima is supported by Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) (Process no. 314545/2014-0). T. Giarrizzo is funded by CAPES (PNPD), and receives a productivity grant from CNPq (Process no. 308278/2012-7). 63 REFERENCES Acevedo Galindo R. (2007) Potential geographical distribution of seven species of marine cetaceans reported in Venezuela, Southeast Caribbean. Acta Zoologica Sinica 53(5), 853–864. Alves-Junior T.T., Ávila F.J.C., Oliveira J.A., Furtado-Neto M.A.A. and Monteiro-Neto C. (1996) Registros de cetáceos para o litoral do estado do Ceará, Brasil. Arquivos de Ciências do Mar, 3(1-2), 79-92. Best P.B. and Lockyer C.H. (2002) Reproduction, growth and migrations of Sei whales Balaenoptera borealis off the west coast of South Africa in the 1960s. South African Journal of Marine Science, 24, 111-133. Byrd B.L., Hohn A.A., Lovewell G.N., Altman K.M., Barco S.G., Friedlaender A., Harms C.A., McLellan W.A., Moore K.T., Rosel P.E. and Thayer V.G. (2014) Strandings as indicators of marine mammal biodiversity and human interactions off the coast of North Carolina, Fishery Bulletin 112(1), 1–23. Clarke, K.R. and Gorley, R.N. (2006) “PRIMER v6: User Manual/Tutorial”, PRIMER-E, Plymouth, UK. Covelo P., Martínez-Cedeira J.A., Llavona Á., Díaz J.I. and López A. (2015) Strandings of beaked whales (Ziphiidae) in Galicia (NW Spain) between 1990 and 2013. Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom, 2001, 1–7. Evans K., Thresher R., Warneke R.M., Bradshaw C.J.A., Pook M., Thiele D. and Hindell M.A. (2005) Periodic variability in cetacean strandings: links to large-scale climate events. Biology Letters, 1, 147-150. Geraci J.R. and Lounsbury V.J. (1993) Marine Mammals Ashore - A field guide for strandings Texas A&M University Sea Grant College Program and the U.S. Luksenburg J.A. (2014a) The cetaceans of Aruba, southern Caribbean. Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom, 94(06), 1161-1174. Luksenburg J.A. (2014b) Prevalence of External Injuries in Small Cetaceans in Aruban Waters, Southern Caribbean. Plos ONE, 9(2), e88988. Maldini D., Mazzuca L. and Atkinson S. (2005) Odontocete Stranding Patterns in the Main Hawaiian Islands (1937-2002): How Do They Compare with Live Animal Surveys? Pacific Science 59(1), 55–67. Magalhães F.A., Tosi C.H., Garri R.G., Chellappa S. and Silva F.L. (2008) Cetacean diversity on the Parnaíba Delta, Maranhão state, northeastern Brazil. Brazilian Journal of Biology, 68(3), 545551. Meirelles A.C.O., Monteiro-Neto C., Martins A.M.A., Costa A.F., Barros H.M.R. and Alves D.M. (2009) Cetacean Strandings on the coast of Ceará, Northeastern Brazil (1992-2005). Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom, 89, 1083-1090. Moreira A.M. and Mavigner D.S. (2007) Conhecendo História e Geografia do Piauí. Parnaíba: Gráfica Ferraz. 64 Motta M.R.A., Pinheiro D.C.S.N., Carvalho V.L., Viana D.A., Vicente A.C.P. and Iñiguez A.M. (2008) Gastric lesions associated with the presence of Anisakis spp. Dujardin, 1845 (Nematoda: Anisakidae) in Cetaceans stranded on the coast of Ceará, Brazil. Biota Neotropica, 8(2), 91-95. Moura J.F.M. and Siciliano S. (2012) Stranding pattern of Bryde's whales along the southeastern coast of Brazil. Marine Biodiversity Records, 5, e73. Norman S.A., Bowlby C.E., Brancato M.S., Calambokidis J., Duffield D., Gearin P.J., Gornall T.A., Gosho M.E., Hanson B., Hodder J., Jeffries S.J., Lagerquist B., Lambourn D.M., Mate B., Norberg B., Osborne R.W., Rash J.A., Riemer S. and Scordino J. (2004) Cetacean strandings in Oregon and Washington between 1930 and 2002. Journal of Cetacean Research and Management, 6(1), 87-99. Peltier H., Dabin W., Daniel P., Van Canneyt O., Dorémus G., Huon M. and Ridoux V. (2012) The significance of stranding data as indicators of cetacean populations at sea: Modelling the drift of cetacean carcasses. Ecological Indicators, 18, 278-290. Pinedo M.C., Lammardo M.P. and Barreto A.S. (2001) Review of Ziphius cavirostris, Mesoplodon grayi and Lagenodelphis hosei (Cetacea: Ziphiidae and Delphinidae) in Brazilian waters, with new records from southern Brazil. Atlântica, 23, 67-76. Pyenson N.D. (2010) Carcasses on the Coastline: Measuring the Ecological Fidelity of the Cetacean Stranding Record in the Eastern North Pacific Ocean. Paleobiology 36(3), 453–480. Ristau N.G. (2012) Identificação molecular de mamíferos aquáticos provenientes de encalhes e de interações antrópicas no Estado do Maranhão. Monografia (Graduação), Universidade Estadual do Maranhão, São Luis, MA. Romero A. and Creswell J. (2005) In the land of the mermaid: How culture, not ecology, influenced marine mammal exploitation in the southeastern Caribbean. In Romero A. and West S.E. (eds) Environmental Issues in Latin America and Caribbean. The Netherlands: Springer. Santos M.C.O., Siciliano S., Vicente A.F.C., Alvarenga F.S., Zampirolli E., Souza S.P. and Maranho A. (2010) Cetacean records along São Paulo state coast, southeastern Brazil. Brazilian Journal of Oceanography, 58(2), 123-142. Szczygielski A., Stattegger K., Schwarzer K., da Silva A.G.A., Vital H. and Koenig J. (2014). Evolution of the Parnaíba Delta (NE Brazil) during the late Holocene. Geo-Marine Letters, 35(2), 105-117. Siciliano, S. (1994) Review of small cetaceans and fishery interactions in coastal waters of Brazil. In: PERRIN, W.F.; DONOVAN, G.P.; BARLOW, J. (eds.). Gillnets and Cetaceans. Cambridge: Reports of the International Whaling Commission (Special Issue 15). p. 241-250. Siciliano S., Emin-Lima N.R., Costa A.F., Rodrigues A.L.F., Magalhães F.A., Tosi C.H., Garri R.G., Silva C.R. and Silva Júnior J.S. (2008) Revisão do conhecimento sobre os mamíferos aquáticos da costa norte do Brasil. Arquivos do Museu Nacional, 66, 381-401. Siciliano S., Moura J.F., Emin-Lima R., Arcoverde D.L., Sousa M.E.M., Martins B.M.L., Silva Jr. J.S., Tavares M., Santos M.C.O. and Ott P.H. (2011) Large baleen whales on the coast of Brazil: a review of post-1997 data on strandings and sightings. 63 Scientific Committee of the International Whaling Commission. Cambridge, pp. 12. 65 Souza-Filho P.W. (2005) Costa de manguezais de macromarés da Amazônia: cenários morfológicos, mapeamento e quantificação de áreas usando dados de sensores remotos. Revista Brasileira de Geofísica, 23(4), 427–435. Souza-Filho P.W., Prost M.T.S.C., Miranda F.P.D., Sales M.E.C., Miranda F.P., Sales M.E.S., Borges H.V., Costa F.R., Almeida E.F. and Marques W.J. (2009) Environmental sensitivity index (ESI) mapping of oil spill in the Amazon coastal zone: the PIATAM MAR Project. Revista Brasileira de Geofísica, 27(1), 7–22. Tavares M., Moreno I.B., Siciliano S., Rodríguez D., Santos M.C.O., Lailson-Brito J.J. and Fabián M.E. (2010) Biogeography of common dolphins (genus Delphinus) in the Southwestern Atlantic Ocean. Mammal Review, 40, 40-64. Tosi C.H., Garri R.G. and Magalhães F.A. (2006) Encalhes de cachalote (Physeter macrocephalus) (Linnaeus, 1758) no Estado do Maranhão-Brasil. Proceedings of the Reunión Internacional Sobre el Estudio de los Mamíferos Acuáticos Somemma-Solamac, Áreas Naturales Protegidas: Una Estrategia de Conservación, Mérida, Yucatán, México, 2006. SOMEMMA-SOLAMAC, pp. 101. Tosi C.H., Magalhães F.A. and Garri R.G. (2008) Meat consumption of a Fraser dolphin (Lagenodelphis hosei) stranded alive on the northern Brazilian coast. Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom, Cambridge, 5969. Zerbini A.N., Andriolo A., Rocha J., Simões-Lopes P.C., Siciliano S., Pizzorno J.L., Waite J.M., DeMaster D.P., Vanblaricom G.R. (2004) Winter distribution and abundance of humpback whales (Megaptera novaeangliae) in Northeastern Brazil. The Journal of Cetacean Research and Management, 6, 101-107. 66 Corresponding author: A.F. Costa Museu Paraense Emílio Goeldi Coordenação de Zoologia, Setor de Mastozoologia Grupo de Estudos de Mamíferos Aquáticos da Amazônia (GEMAM) Av. Perimetral, 1901, Terra Firme, 66077-530 Belém, PA, Brazil Email: [email protected] FIGURE LEGENDS Fig. 1. Study sites representing the three surveyed sectors on North and North-eastern Brazilian coast: (1) Marajó Bay; (2) Eastern Pará state and (3) Maranhão and Piauí coastlines encompass part of Parnaíba Delta. Dots representing stranding locations of marine mammals, Physeter macrocephalus (Pma), Balaenoptera brydei (Bbr), Balaenoptera physalus (Bph), Megaptera novaeangliae (Mno), Steno bredanensis (Sbr), Balaenoptera borealis (Bbo), Tursiops truncatus (Ttr), Globicephala macrorhynchus (Gma), Pseudorca crassidens (Pcr), Sotalia guianensis (Sgu), Peponocephala electra (Pel), Stenella attenuata (Sat), Lagenodelphis hosei (Lho), Delphinus sp. (Dsp) and Grampus griseus (Ggr). Fig. 2. Sei whale Balaenoptera borealis stranded at Fernandes Belo (01o10’59.16”S, 46o5’48.52”W), Viseu municipality, near the border between the Pará and Maranhão states. The particular coloration of the baleen plates and slightly arched head are diagnostic characters to identify the species (photos by DEMA/PA and Jairo Moura). Fig. 3. Fin whale Balaenoptera physalus stranded at the São João de Pirabas municipality (00 o45’31.29”S, 47o4’26.41’W), Eastern coast of the Pará state. Note the good condition of the carcass and a strange swelling on the top of the head (photo by GEMAM/MPEG). Fig. 4. Diagram of cetaceans reported from the North-eastern (inverted triangle) and North coast of Brazil (triangle) and southern Caribbean (square), resulting from a cluster analysis of cetacean stranding and sighting records reported in seven articles and the present study. Arrows indicate the two distinct groups formed (Group 1 and 2). A similarity profile (SIMPROF) permutation test highlights dashed clusters that show significant internal structure. Shaded cells indicate occurrence of species. Table 1. Records of cetaceans stranded from 2003 to 2014 on the Northern Brazilian coast (N= 34; 15 species). TL (total length in meters), NI (not identified). The study area was divided in three sampling sectors: (1) Marajó bay (MB), (2) Eastern Pará state (EP) and (3) Maranhão/Piauí coastline (MA/PI). Live stranding (LS) and Carcass (CA). 67 Fig. 1. Study sites representing the three surveyed sectors on North and North-eastern Brazilian coast: (1) Marajó Bay; (2) Eastern Pará state and (3) Maranhão and Piauí coastlines encompass part of Parnaíba Delta. Dots representing stranding locations of marine mammals, Physeter macrocephalus (Pma), Balaenoptera brydei (Bbr), Balaenoptera physalus (Bph), Megaptera novaeangliae (Mno), Steno bredanensis (Sbr), Balaenoptera borealis (Bbo), Tursiops truncatus (Ttr), Globicephala macrorhynchus (Gma), Pseudorca crassidens (Pcr), Sotalia guianensis (Sgu), Peponocephala electra (Pel), Stenella attenuata (Sat), Lagenodelphis hosei (Lho), Delphinus sp. (Dsp) and Grampus griseus (Ggr). 68 Table 1. Records of cetaceans stranded from 2003 to 2014 on the Northern Brazilian coast (N= 34; 15 species). TL (total length in meters), NI (not identified). The study area was divided in three sampling sectors: (1) Marajó bay (MB), (2) Eastern Pará state (EP) and (3) Maranhão/Piauí coastline (MA/PI). Live stranding (LS) and Carcass (CA). Species by Family Category TL (m) Sex Sector Location Date Voucher specimen Balaenopteridae Balaenoptera borealis LS 10.32 F EP (2) Viseu 13/09/2008 MPEG 39691 Balaenoptera brydei CA 4.20 NI MB (1) 15/09/2012 MPEG 42154 Balaenoptera physalus LS 14.90 M 21/01/2010 MPEG 39690 Megaptera novaeangliae CA 16.7 F Salvaterra São João de EP (2) Pirabas MA/PI (3) Pedra do Sal 15/01/2003 - - NI MA/PI (3) Luís Correia 2005 - ~10.00 M EP (2) 08/10/2008 MPEG 39692 13.00 NI MA/PI (3) Tutóia 22/05/2009 MPEG 42184 11.80 F MA/PI (3) Pedra do Sal 02/02/2010 MPEG 42088 14/05/2010 MPEG 42173 CA CA CA Quatipuru Physeteridae Physeter macrocephalus CA CA - F Paulino MA/PI (3) Neves LS 10.50 F EP (2) Marapanim 07/04/2014 MPEG 42166 CA 4.22 NI MB (1) Soure 07/08/2014 - CA 2.06 NI 12/08/2011 MPEG 42095 CA - NI 2009 - CA CA LS CA CA CA LS 3.30 - NI NI M NI NI NI NI MA/PI (3) Pedra do Sal Paulino MA/PI (3) Neves MA/PI (3) Pedra do Sal MA/PI (3) Pedra do Sal MA/PI (3) Araioses MA/PI (3) Araioses MA/PI (3) Araioses EP (2) Marapanim EP (2) Salinópolis 15/01/2009 13/04/2011 03/04/2009 2007 19/06/2008 20/04/2012 31/01/2013 MPEG 42128 MPEG 42130 MPEG 42080 MPEG 42067 MPEG 42069 MPEG 42132 - CA - NI MA/PI (3) Araioses 14/03/2009 MPEG 42077 CA CA CA CA CA CA CA 1.59 2.68 - M NI NI NI NI M NI MA/PI (3) EP (2) MA/PI (3) EP (2) EP (2) EP (2) MA/PI (3) 10/12/2009 19/04/2009 15/08/2011 20/11/2011 20/11/2011 04/04/2012 23/08/2013 MPEG 42085 MPEG 39635 MPEG 42096 MPEG 42066 MPEG 42102 MPEG 42131 MPEG 42176 CA - NI MA/PI (3) Araioses 24/04/2009 MPEG 42129 CA - NI MA/PI (3) 26/07/2009 MPEG 42081 CA - NI MA/PI (3) Apicum-Açu 05/03/2010 - CA - NI EP (2) Maracanã 12/03/2010 MPEG 39612 CA 3.17 M EP (2) Maracanã 13/02/2013 MPEG 42174 CA 2.87 F EP (2) Marapanim 04/03/2013 MPEG 42175 Delphinidae Delphinus sp. Globicephala macrorhynchus Grampus griseus Lagenodelphis hosei Peponocephala electra Pseudorca crassidens Sotalia guianensis Stenella attenuata Steno bredanensis Tursiops truncatus Pedra do Sal Maracanã Pedra do Sal Marapanim Marapanim Bragança Pedra do Sal 69 Fig. 2. Sei whale Balaenoptera borealis stranded at Fernandes Belo (01o10’59.16”S, 46o5’48.52”W), Viseu municipality, near the border between the Pará and Maranhão states. The particular coloration of the baleen plates and slightly arched head are diagnostic characters to identify the species (photos by DEMA/PA and Jairo Moura). 70 Fig. 3. Fin whale Balaenoptera physalus stranded at the São João de Pirabas municipality (00o45’31.29”S, 47o4’26.41’W), Eastern coast of the Pará state. Note the good condition of the carcass and a strange swelling on the top of the head (photo by GEMAM/MPEG). 71 Fig. 4. Diagram of cetaceans reported from the North-eastern (inverted triangle) and North coast of Brazil (triangle) and southern Caribbean (square), resulting from a cluster analysis of cetacean stranding and sighting records reported in seven articles and the present study. Arrows indicate the two distinct groups formed (Group 1 and 2). A similarity profile (SIMPROF) permutation test highlights dashed clusters that show significant internal structure. Shaded cells indicate occurrence of species. 72 CAPÍTULO II RESOURCE PARTITIONING AMONG AQUATIC MAMMALS FROM AMAZON AND NORTHEASTERN COAST OF BRAZIL REVEAL THROUGH THE ANALYSIS OF STABLE ISOTOPES OF CARBON AND NITROGEN ALEXANDRA F. COSTA1,2, SILVINA BOTTA3, SALVATORE SICILIANO1,4, SETH NEWSOME5, TOMMASO GIARRIZZO2,6 1 Museu Paraense Emílio Goeldi, Coordenação de Zoologia, Setor de Mastozoologia, Grupo de Estudos de Mamíferos Aquáticos da Amazônia (GEMAM), Av. Perimetral, 1901, Terra Firme, 66077-530 Belém, PA, Brazil. Programa de Capacitação Institucional, Museu Paraense Emílio Goeldi, Coordenação de Botânica. Av. Perimetral, Terra Firme, CEP 66077-830, Belém, PA, Brazil. 2 PPG em Ecologia Aquática e Pesca, Universidade Federal do Pará-UFPA, Instituto de Ciências Biológicas, Cidade Universitária José da Silveira Netto, Av. Augusto Corrêa n° 1, Guamá, 66075110, Belém, PA, Brazil 3 Laboratório de Ecologia e Conservação da Megafauna Marinha − EcoMega, Instituto de Oceanografia, Universidade Federal do Rio Grande, Rio Grande RS 96203-900, Brazil 4 Instituto Oswaldo Cruz/FIOCRUZ, Pavilhão Mourisco – sala 122, Av. Brasil, 4365 - Manguinhos, 21040-360, Rio de Janeiro, RJ Brazil 5 Department of Biology, University of New Mexico, Albuquerque, NM 87131, USA 6 Laboratório de Biologia Pesqueira e Manejo dos Recursos Aquáticos, Universidade Federal do Pará-UFPA, Av. Perimetral, 2651 Terra Firme, 66077-830 Belém, PA, Brazil Corresponding author: [email protected] Artigo elaborado para publicação no periódico MARINE MAMMAL SCIENCE. Esta versão está em processo de revisão pelo co-autor Seth Newsome aguardando para breve submissão. 73 ABSTRACT Different methodologies have been used to establish the ecological and biological parameters of marine mammals. In the last decades the use of stable isotope analysis (SIA) has become a powerful tool for understanding some aspects of aquatic mammals ecology and useful in studying ecology, habitat use, migration, population connectivity as well as for investigating niche parameters and trophic relationships. Variation in isotopic composition, particularly in hard tissues, helps to elucidated isotopic niche of species providing a long-term response that can be linked directly to geographical regions. Although trophic ecology of aquatic mammals using SIA were carried out in the Southeastern and Southern Brazilian coast, there are few studies in the Northeastern and none for Northern coast. This paper describes the habitat use and trophic relationships among freshwater and marine mammal species, evaluate isotopic niche partitioning among the most representative species (Sotalia guianensis, Inia spp. and Trichechus inunguis) within the Amazon Estuary and characterize differences in isotopic niches between ecological stocks of Guiana dolphin (S. guianensis). In this study, we analyzed stable isotopes of carbon and nitrogen in bone-collagen of 14 species of cetaceans and one of sirenia. Samples were obtained from stranded carcasses or from incidental catches collected from the Amazon coastal zone (AE), Amazon lowland (AL) and Parnaíba River Delta (NC). We detected interspecific variations for both isotopes. Among freshwater species a wide range, while marine species exhibited narrow-range values. Among marine species were observed a coastal-oceanic spatial pattern showing more 13 C enriched values in the coastal species, excepted for S. guianensis, while oceanic species showed depleted carbon values. Guiana dolphin stocks, Sgui_NC and Sgui_AE, showed similar values of 15N, however NC group, showed enriched values of 13C. There is no overlap among the most representative species of the study area, showing no niche overlap and indicating strong isotopic niche segregation at least in Marajó bay. The largest isotopic niche overlap (63.1%) occurred among populations of S. guianensis from AE and NC. Average values of carbon and nitrogen showed no significant differences between Amazon river dolphin and Araguaia boto, I. geoffrensis and I. araguaiaensis, respectively. Trophic relationships among aquatic mammals were not previously investigated in the study area. Furthermore, carbon and nitrogen stable isotope compositions in tissues of Northern Brazilian cetaceans are reported for the first time. 74 RESOURCE PARTITIONING AMONG AQUATIC MAMMALS FROM AMAZON AND NORTHEASTERN COAST OF BRAZIL REVEAL THROUGH THE ANALYSIS OF STABLE ISOTOPES OF CARBON AND NITROGEN 1. INTRODUCTION Multiple tools have been used to understand ecological and biological aspects and provide information of the population structure on distinct timescales. Worldwide, the conservation of marine mammals is focused on the knowledge of the population structure, whether on an individual level or at community level (NEWSOME et al., 2007, 2012). Aspects of foraging strategies, relative trophic positions and resource partitioning of top predators are prerequisite if the intention is to design strategies of management and conservation of species (PAULY et al., 2002; RYAN et al., 2013). Diversity of species that coexist in a community is determinate by the way they share the available resources. In order to avoid competitive exclusion between species, they must differ in some ecological aspects such as spatial and temporal segregation of resources and habitats (HUTCHINSON, 1957; PIANKA, 1974). Dealing with conspecifics, the competition could be strong and reflect in intrapopulation variance. This variation on resource use (i.e. diet, habitat and geographical location) must greatly change the ecology of populations and have ecological, evolutionary and conservational consequences (BOLNICK et al., 2003; VANDER ZANDEN et al., 2010). Intraspecific and interspecific competition will occur if the available resources have limited supplies, affecting directly on niche parameters (ROUGHGARDEN, 1972; BEARHOP et al., 2004). Definitions of niche has undergone changes over time, but even the most current, postulate that the niche is an n-dimensional space that can be represented by the bi-plot 13C versus 15N. These axis provide information about species niche showing data about diet consumption (13C) and species habitat (15N) (NEWSOME et al., 2007). Analysis of stomach contents was the most traditional method to understand feeding habits of aquatic mammals and is the most direct way to access diversity of diet resources (TRITES, 2001). Although, it presents many biases in their interpretation, since only provide a snapshot of diet consumed in a small timescale and not prey assimilation by organisms over time (HOBSON, 1999). 75 In the last decades the use of stable isotopes analysis has become the most common biochemical markers used to trace animal movements and to quantify what individuals assimilate (see NEWSOME et al., 2010). The isotopic variation in animal’s tissues may determine the isotopic niche of species (i.e. via consumption and tissue synthesis) and is appropriate to calculate niche width (BEARHOP et al., 2004; NEWSOME et al., 2007). Intra- and inter-individual variation in isotopic composition helps to elucidated isotopic niche of species providing a timeintegrated response that can be linked directly to geographical regions (RUBENSTEIN; HOBSON, 2004; MICHENER; KAUFMAN, 2007). The isotope signature (i.e. the isotopic composition) of an organism is determined by the diet (food resources) and habitat (local where it lives). Variations in isotopic signatures of habitats are due to biogeochemical processes and pass through higher levels of the food webs (DENIRO; EPSTEIN, 1978). In other words, isotopic values of consumers reflect their relative trophic position (nitrogen isotope, MINAGAWA; WADA, 1984; POST, 2002) and their foraging main habitats and baseline producers (carbon isotope, DE NIRO, 1978). Isotopic variation on carbon values of consumers reflect spatial and temporal shifts among food webs and this spatial variability is directly related to differences of habitat use, i.e. foraging habitats (neritic vs. oceanic, inshore vs. offshore, marine vs freshwater) (CLEMENTZ; KOCH, 2001). Stable isotope analysis (SIA) is a powerful tool to understand aspects of aquatic mammals ecology and useful in studies on foraging ecology, habitat use, migration, population connectivity as well as for investigating niche parameters and trophic relationships (BEARHOP et al., 2004; NEWSOME et al., 2010; LAYMAN et al., 2011). Main approaches clarify aspects of migration patterns (MENDES et al., 2007; WITTEVEEN et al., 2009), resource partitioning (RYAN et al., 2013; BROWNING et al., 2014; GAVRILCHUK et al., 2014), ontogenetic shifts in diet (NEWSOME et al., 2009), differences on foraging habitats (PINELA et al., 2010; RICCIALDELLI et al., 2010), ecological differences among populations (FOOTE et al., 2009; BISI et al., 2013; VIGHI et al., 2014) and trophic relationships with trace elements (DAS et al., 2003; CAPELLI et al., 2008). Marine mammals, considered the top predators in marine ecosystems, occur in sympatry along their habitat areas (e.g. Delphinids, Pinnipeds) and share common habitat use (TRITES, 2001; 76 HÜCKSTÄDT et al., 2012), many times having similar feeding habits and foraging strategies (BEARZI, 2005). Several species that occur off Northern and Northeastern Brazil undergo serious threats to their survival and require outlined strategies for their management and conservation (BARRETO et al., 2010). An important step to reverse the information gap is to understand the dynamics of the trophic relationships among these communities of aquatic mammals and their habitats. Four species of cetacean and two of sirenia probably coexist in sympatry in Pará River Estuary (DOMNING, 1981; SICILIANO et al., 2007 CUNHA et al., 2010), commonly referred to Marajó Bay. Cetaceans belong to distinct families Delphinidae (Sotalia guianensis, Guiana dolphin and Sotalia fluviatilis, tucuxi), Iniidae (Inia geoffrensis, Amazon river dolphin and Inia araguaiaensis, Araguaian boto) and the manatees belong to Trichechidae (Trichechus manatus, Antillean manatee and Trichechus inunguis, Amazonian manatee). Despite the surveys in this region, questions on habitat use and confirmation of sympatry between S. guianensis and S. fluviatilis remains unknown in this region. Recently, through stranding events, was confirmed the presence of two species of river dolphins in the northern portion of Marajo Island and Eastern Pará coast (COSTA et al., 2013; SICILIANO et al., 2015 unpub. data), I. geoffrensis and I. araguaiaensis, the later recently described (HRBEK et al., 2014). In this peculiar region, Sotalia and Trichechus comprise species with marine and fluvial habits. Previous studies, are trying to elucidate questions on feeding habits of Guiana dolphin (VIEIRA, 2014) and availability of potential food resources for manatees (SOUSA, 2011; SOUSA et al., 2014). However, it is still unknown the strong influence of large estuaries like the Amazon and Pará rivers and regions with lower freshwater input and strong marine influence such as Parnaíba Delta on the distribution and availability of preys. The influence of Amazon River discharge on Northern coast determine the establishment of fish assemblages (Camargo & Isaac, 2002), thus directly affecting the trophic ecology of aquatic mammal’s species. On the coast of Brazil, most studies used the traditional analysis of stomach contents to evaluate feeding ecology of marine mammals (ANDRADE et al., 2001; SANTOS et al., 2002; GURJÃO et al., 2003). The main studies about trophic ecology of aquatic mammals using SIA were carried out in the Southeastern and Southern (DI BENEDITTO et al., 2011, 2013; BOTTA et 77 al., 2012; ZENTENO et al., 2013; VIGHI et al., 2014; DRAGO et al., 2015), very few in the Northeastern (CIOTTI et al., 2014) and none for Northern coast. Different tissues are used in SIA according to the timescale and ecological questions that need to be answered (BEARHOP et al., 2004). Thus, tissues with quick turnover, such as blood, skin or muscle, are used to obtain information about recent diet, last weeks or months (HOBSON; et al., 1993), while hard tissues, due to the fact that incorporate the isotope signatures very slowly are used for feeding ecology over species lifetimes (HOBSON; CLARK, 1992; NEWSOME et al., 2007; NEWSOME et al., 2010). Inert tissues (e.g. tooth dentin and enamel, bones, baleen plates, vibrissae) has been widely used to clarify aspects of marine mammals trophic ecology (WALKER; MACKO, 1999; RICCIALDELLI et al., 2010; BENTALEB et al., 2011; VIGHI et al., 2014). In this study, we analyzed stable isotopes of carbon and nitrogen in bone-collagen of aquatic mammals comprise species strictly oceanic (e.g. Physeter macrocephalus), coastal/marine (e.g. Tursiops truncatus, Steno bredanensis), coastal/estuarine (S. guianensis) to exclusively freshwater (I. geoffrensis, I. araguaiaensis, T. inunguis). Based on a previous study, Guiana dolphin was separated in six Management Units (MUs, (CUNHA et al., 2010), so we assumed that: i) isotope composition could provide evidences of population structure between distinct ecological stocks of S. guianensis, ii) this species probably present isotopic niche variation comparing different ecological stocks; and iii) individuals inhabit the Amazon Estuary would present a wider trophic niche than their conspecific inhabiting the Northeastern coast of Brazil. Our main goals were to: (1) investigate the habitat use and trophic relationships among freshwater and marine aquatic mammal species, (2) evaluate isotopic niche partitioning among the most representative species (Sotalia guianensis, Inia spp. and Trichechus inunguis) within the Amazon Estuary and (3) characterize differences in isotopic niches between ecological stocks of Guiana dolphin (S. guianensis). 78 2. MATERIAL AND METHODS Study sites Samples used in this study were obtained from beach surveys conducted along three main sectors: 1) Amazon lowland (AL); 2) Amazon Estuary and adjacent coastal zone (AE) and, 3) Northeastern coast of Brazil (NC) (Fig. 1). The Northern Brazilian coast extends from Cabo Orange, the most extremely point near French Guiana border (4oN, 51oW) up to Ponta do Tubarão (2oS, 43oW), the westernmost portion of São José Bay, Maranhão state. Its coastline is submitted to different freshwater inputs, principally the huge discharge of the Amazon River (GOULDING et al., 2003; SOUZA-FILHO et al., 2009). The sector designated as Amazon lowland (AL) comprises the floodplain habitat named várzea. In this region there are records of the tucuxi, Sotalia fluviatilis (FLORES; DA SILVA, 2009), the Amazonian manatee, Trichechus inunguis (see DOMNING, 1981), the Amazon river dolphin, Inia geoffrensis (BEST; DA SILVA, 1993). Stranded specimens were collected in rivers around Santarém municipality, Ayaya River (2°34'30"S, 54°21'50"W), a small Amazon River tributary; at Oriximiná, Trombetas River (1°38'44"S, 55°58'38"W); at Vitória do Xingu, lower Xingu river (2o41’16”S, 52o00’45”W); and near Belém, Guajará Bay (1°17'19"S, 48°29'5"W). Amazon rivers are classified according to its color water in physical and chemical characteristics. Amazon River is characterized by a rich-nutrient water with muddy aspect due to the high amounts of sediment that carry from Andes, known as white water (SIOLI, 1991). Whitewater floodplains support a luxurious forest on higher grounds and extensive grasslands at lower areas, whilst in the water extensive banks of free floating and floating-leaved macrophytes prevail (MCGRATH, 1993; JUNK et al., 2011). Clearwater rivers, such as Xingu and Trombetas, has nutrient-poor waters with high transparency and a characteristic greenish color. In this system aquatic macrophytes and herbaceous plants are less abundant. Tides affects low courses of rivers reaching more than 100 km upriver, and in part is due to the flat relief of the coastal zone (JUNK et al., 2011). The Amazon Estuary is formed mainly by the discharge of Amazon River into the Atlantic Ocean through the North and South channels (GEYER et al., 1996). This is a highly dynamic estuary affected by river-ocean interface, influenced by semidiurnal macro-tides, easterly trade winds, a marked rainfall season and the enormous discharge of freshwater come from the Amazon River, 79 the Araguaia-Tocantins system and smaller coastal rivers (NITTROUER; DEMASTER, 1996; GOULDING et al., 2003; ROSÁRIO et al., 2009; SOUZA-FILHO et al., 2009). In this study the sector designated as Amazon Estuary and adjacent coastal zone (AE) comprises the Northern and Eastern coast of Marajó Island (i.e. Marajó Bay), as well as the Eastern coast of Pará state. Marajó Bay is formed mainly by the discharges of Pará and Tocantins rivers and Guajará Bay. This bay receives a superficial saline intrusion during low discharge of rivers (BEZERRA; ROLLNIC, 2011) and undergoes a macrotidal regime, with maximum tides around 4 m on both sides of the bay (ROSÁRIO; SANTOS, 2014). In this sector, the manatees Trichechus inunguis and T. manatus, S. guianensis, S. fluviatilis, Inia geoffrensis and I. araguaiaensis occur in sympatry (DOMNING, 1981; DA SILVA, 1983; CUNHA et al., 2010; SICILIANO et al., 2007, 2015 unpub. data). At eastern Pará coast, Marapanim River Estuary is a very important ecosystem which is the most studied population of Guiana dolphin (S. guianensis) occur (EMIN-LIMA et al., 2010a). The NC region encompasses the coastline of Maranhão and Piauí states considered a semiarid region of Northeastern Brazil. The most important freshwater input in this region is the Parnaíba River considered the largest river system amongst São Francisco in the Northeastern and Amazonas River in the Northern (SZCZYGIELSKI et al., 2014). The discharge of Parnaíba River into the Atlantic Ocean forms a delta with five bays tidally influenced: Tutóia, Caju, Melancieiras, Canárias and Igaraçu that forms the Parnaíba Delta (MOREIRA; MAVIGNER, 2007). The region comprises a mesotidal coast, with tides range from 1.1 m to 3.3 m (SZCZYGIELSKI et al., 2014). The region contains coastal and vegetated dune fields, beaches with up to 200 m wide and vast areas of mangrove forests. From August to December there is a decrease in river discharge prevailing semiarid conditions and restricted rainfall seasonality goes from December to April. Surveys from 2008 to 2011 registered strandings of a large diversity of cetaceans since small dolphins to large whales. The most representative species in this sector is S. guianensis. Groups of this species have been regularly sighted in some of the Parnaíba Delta bays (pers. obs.). 80 Figure 1. Maps of the study sites representing the three sampling sectors along the Northern and Northeastern Brazil (1). Detailed maps of regions: (2) Northeastern coast, at the coast of the Maranhão (MA) and Piauí (PI) states (NC), (3) Amazon Lowland (AL), showing collection rivers and (4) Amazon Estuary and adjacent coastal zone (AE). AP (Amapá state), PA (Pará state), MA (Maranhão state), PI (Piauí state) and CE (Ceará state). Sector AE only includes the collecting area of the study and not the Northern region as a whole. Dots are collection locations. 81 Sampling material Aquatic mammal’s sampling material were obtained from floating or stranded carcasses during sampling surveys or from incidental catches in fishing gears (i.e. S. guianensis). Carcasses were recovered at any stage of decomposition (GERACI; LOUNSBURY, 1993) and taken to the Museu Paraense Emílio Goeldi (MPEG, Belém, Pará, Brazil) where their hard parts (i.e. bones and teeth) were cleaned from outer soft tissues and stored dry at MPEG’s Mammal Collection. Surveys to recover carcasses were conducted since 2005 to 2014 at the AE. Stranding events were regularly carried out at NC region between 2008 and 2011, and in the last years (2012 to 2015) are sporadic. The oldest specimens were collected by naturalists (i.e. Émil August Goeldi) and researchers from MPEG at the Pará state (AL) in the 1910’s, 1970’s and 1980’s (e.g. Inia spp. and T. inunguis). We obtained bone and teeth samples from 267 aquatic mammals, representing 14 taxa and four families: Physeteridae (Physeter macrocephalus); Delphinidae (Delphinus sp., Globicephala macrorhynchus, Grampus griseus, Lagenodelphis hosei, Peponocephala electra, Pseudorca crassidens, Sotalia guianensis, Stenella attenuata, Steno bredanensis, Tursiops truncatus), Iniidae (I. geoffrensis, I. araguaiaensis) and Trichechidae (T. inunguis) (Table 1). To investigate isotopic niche variation, groups were separated into Delphinids, comprise the whole delphinids except S. guianensis, Inia spp., aggregating I. geoffrensis and I. araguaiaensis, T. inunguis and Sgui_AE for individuals from AE and Sgui_NC, with specimens from NC. Due to small sample sizes for some species and lack of essential data (i.e. age, standard length, sex) neither sex nor maturity stage were considered for the analyses (i.e. all delphinids except S. guianensis). In the case of S. guianensis the large number of samples allowed for testing differences in isotopic compositions among maturity classes, thus specimens were classified as mature or immature based on either their skull degree of ossification, cranial and vertebrae sutures (PERRIN, 1975; FETTUCCIA; SIMÕES-LOPES, 2004; EMIN-LIMA, 2012) or their sexual maturity related to total length (RAMOS, 2001). Stable isotope analysis Of the total, around 200 samples analyzed were bone fragments collected from the internal portion of the skull. In the absence of skull, other bones (n= 67) available were used following the priority: 1st caudal vertebrae, 2rd chevrons, 3th teeth and other bones (e.g. scapula, 82 mandible, flipper). Previous work reported a difference of 0.2‰ in carbon and 0.3‰ in nitrogen between teeth and bones of the same individual (Orcinus orca, (FOOTE et al., 2013), thus we considered isotopic values of the sampled tissues as comparable. In order to isolate collagen, samples were demineralized with repeated baths in hydrochloric acid (HCl, 0.5 N) for approximately 72 to 96 h. Each bone fragment (or teeth) was put in a vial glass with enough acid to cover the sample and then put at 4oC overnight replacing the acid every 24 h. Samples were checked from time to time, and when it was flexible like a rubber, was subjected to successive baths with distilled water to achieve neutral pH. After this process, we considered that only the organic portion of collagen remained. Lipid extraction was performed by rinsing the samples three times with a 2:1 chloroform:methanol solution, each time discarding the old solution and replacing it with a new one. The samples were washed in distilled water until complete removal of the reagent. After that, samples were dried in an oven for at least 24 hours at 60 oC. Dried samples were ground to a fine powder or small pieces using a mortar and pestle. Samples of bone/teeth collagen were weighed (0.5 to 0.6 mg) into tin capsules (Costech Analytical). Nitrogen and carbon isotopic compositions were analyzed at the Center for Stable Isotopes, University of New Mexico using a Costech ECS 4010 Elemental Analyzer coupled to a ThermoFisher Scientific Delta V Advantage mass spectrometer via a CONFLO IV interface. Stable isotope results are expressed as values, 13C or 15N = 1,000 × [(Rsample− Rstandard/Rstandard) − 1], where Rsample and Rstandard are the 13 C/12C or 15 N/14N ratios of the sample and standard, respectively. The internationally accepted standards are Vienna Peedee Belemnite limestone (VPDB) for carbon and atmospheric N2 for nitrogen. The units are expressed as parts per thousand, or permil (‰). Average analytical precision based on routine analysis of laboratory standards was better than 0.1‰ (1 s) for both 15N and 13C. Data analysis Normality and homogeneity of 13C and 15N data were tested by Shapiro-Wilks and Levene’s test, respectively. Student’s t-test was used to compare isotopic values among species and between marine and freshwater species. The effect of maturity in isotopic values for S. guianensis collected in AE and NC area were accessed by comparing their 13C and 15N values 83 using Mann-Whitney-U tests. Mean isotopic values of S. guianensis between AE and NC areas were compared using Student’s t tests. Values of 13C and 15N were expressed as mean ± standard deviation (±SD). For all tests a significance level of 0.05 was assumed. All testes were run on Past 3.0 (HAMMER et al., 2001) and Statistic 7.0. Variation in values of 13C and 15N representing the isotopic niches among the most common species of the study area (S. guianensis, Inia spp. and T. inunguis) were explored by calculating standard ellipse areas corrected for small sample sizes (SEAc) using Stable Isotope Bayesian Ellipses (SIBER routine in SIAR package from R, JACKSON et al., 2011). Due to the small sample size of delphinid species (except S. guianensis) a standard ellipse was developed for them as a single group. Overlap among ellipses was also calculated in order to quantify the trophic overlap among groups. 3. RESULTS We analyzed bone samples from 267 aquatic mammals separated in five distinct groups: Delphinids, Inia_spp., T_inunguis, Sgui_AE and Sgui_NC. Interspecific variations were detected for freshwater species which showed a wide range of 13C (-27.6 to -12.5‰) and 15N (6.0 to 15.3‰). Isotope values of marine species exhibited narrow-range of 13C (-16.6 to -10.6‰) and 15N (6.6 to 16.0‰) (Table 1) and significantly higher 13C values (Student’s t-test, t = 16.0, p < 0.0001), but similar 15N values (t-test, t = 1.9, p = 0.06) compare to freshwater species. S. guianensis from NC were similar in 15N values (t-test, t = 0.80, p = 0.43) but had higher mean 13C values than individuals from AE (t-test, t = -3.39, p < 0.001) Comparing values of this coastal species with those of the remaining marine species, a spatial pattern (i.e. coastal-offshore) in 13C values could be evidenced among all delphinids except for the two S. guianensis populations. Sgui_AE stock presented depleted carbon isotopic values which resembled low 13C values from freshwater primary producers. Inshore (i.e. S. bredanensis and T. truncatus) and offshore (G. macrorhynchus, Delphinus sp., G. griseus, L. hosei, P. electra, S. attenuata) species exhibited carbon isotope values that reflect the expected pattern of decreasing 13C values towards more offshore habitats. P. macrocephalus presented the most depleted 13C values of all marine species (-14.4 ± 1.9‰, range -16.6 to -12.9) and was the most 15N-enriched. The only P. crassidens specimen analyzed presented high 13C and 15N values (Table 1; Fig. 2). 84 Table 1. Isotope values of C and N (in ‰) from bone samples of aquatic mammals. Specimens were collected from Northern (Amazon Lowland, AL and Amazon Estuary and adjacent coastal zone, AE) and Northeastern Brazil (coastline of Maranhão and Piauí states, NC). 13 Species Freshwater Trichechus inunguis Inia spp. Inia geoffrensis Inia araguaiaensis Marine Sotalia guianensis_AE Sotalia guianensis_NC Delphinus sp. Globicephala macrorhynchus Grampus griseus Lagenodelphis hosei Peponocephala electra Stenella attenuata Steno bredanensis Tursiops truncatus Pseudorca crassidens Physeter macrocephalus 15 n 31 11 9 8 3 236 175 32 2 1 Mean ± SD -18.0 ± 4.2 -19.6 ± 4.1 -15.0 ± 0.7 -19.8 ± 5.1 -16.4 ± 3.6 -12.7 ± 1.1 -12.9 ± 1.1 -12.2 ± 0.6 -12.0 ± 0.8 -13.1 13C Min -27.6 -25.5 -16.5 -27.6 -20.6 -16.6 -16.5 -13.7 -12.5 - 2 1 2 2 9 6 1 3 -12.4 ± 0.8 -13.0 -12.8 ± 0.3 -13.2 ± 0.1 -12.0 ± 0.8 -11.3 ± 0.7 -11.0 -14.4 ± 1.9 -13.0 -12.9 -13.3 -13.1 -12.6 -16.6 Max -12.5 -12.9 -14.0 -12.5 -13.8 -10.6 -11.1 -10.8 -11.4 - 15N Mean ± SD Min 11.2 ± 2.9 6.0 7.2 ± 0.6 6.0 13.6 ± 0.8 12.4 13.0 ± 1.3 11.6 12.9 ± 0.5 12.6 11.7 ± 1.0 6.6 11.6 ± 0.9 8.3 11.5 ± 1.0 9.9 12.3 ± 0.2 12.1 11.8 - Max 15.3 8.1 14.8 15.3 13.4 16.0 13.9 13.1 12.4 - -11.9 -12.6 -13.1 -10.8 -10.6 -12.9 12.9 ± 2.0 13.3 12.0 ± 0.2 11.0 ± 0.3 12.2 ± 1.0 13.0 ± 1.3 13.3 15.4 ± 0.6 14.4 12.1 11.2 14.0 14.0 16.0 11.5 11.8 10.7 10.8 10.5 14.7 85 Figure 2. Mean (±SD) C and N values from bone-collagen of aquatic mammals collected from the Amazon Estuary and adjacent coastal zone (AE) and Northeastern coast of Brazil (NC). Trichechus inunguis (T_inunguis), Inia spp. (Inia_spp), Sotalia guianensis, AE (Sgui_AE), S. guianensis, NC (Sgui_NC), Grampus griseus (Ggr), Physeter macrocephalus (Pma), Steno bredanensis (Sbr), Delphinus sp. (Dsp), Tursiops truncatus (Ttr), Pseudorca crassidens (Pcr), Peponocephala electra (Pel), Globicephala macrorhynchus (Gma), Lagenodelphis hosei (Lho) and Stenella attenuata (Sat). 13 15 Freshwater species inhabit both AL and AE regions and this could be reflected in the wide range of carbon isotope values exhibited. T. inunguis and Inia spp. did not differ in their 13C values (ttest, t = 1.58, p = 0.12) but presented significantly different 15N values (t-test, t = 14.2, p < 0.0001). Specimens of T. inunguis from AL, exhibited great range dispersion in 13C values (-25.5 to 15.8‰) and presented significantly differences (t-test, t = 3.38, p < 0.008), whilst those from AE showed narrow range (-16.2 to -12.9‰) with no significant differences in carbon values (t-test, t = 1.87, p < 0.09). T. inunguis occupied the lowest position in isospace with 15N values of 7.6 ± 1.2‰ (range 6.0 to 10.3‰). 86 Among Inia spp. sampled, non-significant differences in mean 13C and 15N values were found between I. geoffrensis and I. araguaiaensis, the last genetically identify (Table 1, Fig. 3, Student’s t-tests, t = 1.02, p = 0.33 and t =- 0.13, p = 0.90, for 13C and 15N, respectively). Figure 3. Bone-collagen C and N values for Inia genus: Inia geoffrensis (n=8), I. araguaiaensis (n=3) and Inia spp. not identified (n=9). Samples were collected along the Amazon Lowland (AL) and Amazon Estuary and adjacent coastal zone (AE), Northern and Northeastern Brazil, respectively. 13 15 Isotopic niche variation The isotopic niches were highly distinct among the four aquatic mammals that inhabit the AE region (T. inunguis, S. guianensis, and Inia spp.) with no overlaps in their standard ellipse areas (SEAc). Moreover, the SEAc of the two freshwater species, T. inunguis and Inia spp., were higher compared to S. guianensis collected from AE (Table 2, Figs. 4, 5). Species that comprised the Delphinid group presented similar 13C and 15N values, hence the analysis of niche space were carried out as a single group. Delphinids showed some overlap with 87 S. guianensis from both regions (AE and NC), a 39.2% overlap between the former and Sgui_AE and a 32.5% between that group and Sgui_NC (Table 2, Figs. 4, 5). The smallest isotopic niche area was occupied for Sgui_NC followed by Sgui_AE. Populations of S. guianensis showed an overlap of 63.1% between them (Table 2; Figs. 4, 6). Table 2. Isotope niche width of five groups of aquatic mammals: Trichechus inunguis (T_inunguis), Inia spp. (I. geoffrensis, I. araguaiaensis), Delphinids and Sotalia guianensis (Sgui_NC and Sgui_AE). SEA represents standard ellipses area and SEAc standard ellipses adjusted for small sample sizes. 2 2 Group Sample size (n) SEA (‰ ) SEAc (‰ ) T_inunguis 11 14.6 16.2 Inia_spp 20 12.7 13.4 Delphinids 26 2.9 3.0 Sgui_AE 175 2.8 2.8 Sgui_NC 32 1.6 1.7 Figure 4. Stable isotope bi-plot ( C versus N) showing the isotope niche area of Inia_spp (n= 20, red line), T_inunguis (n= 11, ligth blue line), Sgui_AE (n=175, dark blue line), Sgui_NC (n= 32, green line) and Delphinids (n= 26, black line). Solid lines represent SEAc (standard ellipses areas) adjusted for small sample sizes, containing c. 40% of data (Jackson et al., 2011) within each group. There is no overlap among the most representative species of the study area (Sotalia guianensis, Inia spp. and Trichechus inunguis). The overlap expressed the significant isotope niche partitioning among Delphinids and populations of S. guianensis. 13 15 88 Figure 5. Plots showing the variation in C and N values for Delphinids (n= 26), Inia_spp (n= 20), Sgui_NC (n= 32), Sgui_AE (n= 175) and T_inunguis (n= 11) from Northern and Northeastern Brazil. Black circles (mode) represent the SEA, boxes indicate 50%, 75% and 95% credible intervals from dark grey to light grey, respectively. Red square indicate the SEAc (SEA corrected for small samples sizes) of Bayesian standard ellipse areas. 13 15 Figure 6. Zoom of the plots showing the variation in C and N values for Guiana dolphin Sotalia guianensis from Northeastern coast (NC) and Amazon Estuary and adjacent coastal zone (AE), respectively (Sgui_NC and Sgui_AE). Black circles represent mode of SEA. Boxes indicate 50%, 75% and 95% credible intervals from dark grey to light grey, respectively. Red square indicate the SEAc (SEA corrected for small samples sizes) of Bayesian standard ellipse areas. 13 15 89 4. DISCUSSION Trophic relationships among aquatic mammals were not previously investigated in the study area. Furthermore, carbon and nitrogen stable isotope compositions in tissues of northern and northeastern Brazilian cetaceans are reported for the first time. We used the carbon and nitrogen isotopic composition in bone collagen to evaluate the feeding ecology and trophic niche width of the most representative species from the Amazon region. Data included species considered strictly freshwater to coastal/estuarine (e.g. Inia geoffrensis, I. araguaiaensis, Trichechus inunguis and Sotalia guianensis) providing a representative overview of ecological aspects of aquatic mammals from Northern and Northeastern Brazil. Aquatic mammals diversity previously reported from this region included residents and migrating cetaceans from tropical oligotrophic waters (SICILIANO et al., 2008). Marine and freshwater species showed the expected significant variation in carbon isotopes derived from distinct basal 13C values characteristic of freshwater vs. marine primary producers (MICHENER; KAUFMAN, 2007), although nitrogen isotope values, did not differ between them. Furthermore, carbon isotope values in delphinid species (except for S. guianensis) reflected the decrease trend toward more offshore 13C-depleted environments previously reported for several marine areas (southwestern South Atlantic, RICCIALDELLI et al., 2010; northwest coast of Africa, PINELA et al., 2010; Southern Brazil, BOTTA et al., 2012; Southeastern Brazil, BISI et al., 2013). Tursiops truncatus showed 13 C and 15 N-enriched isotopic values consistent with a coastal distribution and a high trophic level. Indeed, the species is considered to have a coastal habit in other areas of occurrence as well as offshore ecotypes were described in some regions (BASTIDA et al., 2007; PERRIN et al., 2011). Along the Southern Brazilian coast, the species is usually associated to estuaries with resident populations inhabiting those areas (FRUET et al., 2011, 2014). Recently, Costa et al. (2015) reveals a new population structure of three distinct groups determined by genetic analysis for T. truncatus in Southern Brazil. Group 1 consists of individuals living with high fidelity site, group 2 was composed for one individual previously photo-identified and group 3 formed for dolphins stranded near the Tramandaí Lagoon but without origin that forms part of an offshore community. In Northern, however, the diet and habitat use of this species is poorly known, with some stranding events in Northern/Northeastern, at the coast of Maranhão state (COSTA; EMIN-LIMA, 2010) and 90 Northern (SICILIANO et al., 2008). In Northeastern, Alves-Junior et al. (1996) reported the presence of T. truncatus in coastal waters of Ceará state. The only specimen of P. crassidens analyzed also presented high isotopic values of carbon and nitrogen, which could reflect a mainly coastal foraging area for this species. However, this cetacean is considered primarily oceanic, foraging cephalopods and fish from deep waters (ALONSO et al., 1999; BAIRD, 2009; RICCIALDELLI; GOODALL, 2015). Nevertheless, in Southern Brazil high carbon and nitrogen values were reported dividing specimens in isotopic groups of P. crassidens indicating a coastal habitat and a high trophic position (BOTTA et al., 2012; PARO, 2013). Further data on stable isotopes or sighting records are needed to confirm the most probable foraging habit for the species in Northern Brazil. Although S. bredanensis is considered an offshore species (BASTIDA et al., 2007) in Southeastern Brazil it is regularly sighted in shallow bays and other coastal areas (OTT; DANILEWICZ, 1996; SICILIANO; FLACH, 2007). On Northern and Northeastern Brazil little is known about S. bredanensis distribution patterns, but the increase in strandings and fishermen reports about this species reinforces its regular presence in neritic waters, principally off Northern Brazil (SICILIANO et al., 2008; MARTINS, 2015). Almost nothing is known about the distribution and habitat use of Delphinus sp. in Northern and Northeastern Brazil (TAVARES et al., 2010). Carbon and nitrogen isotope values for the species found in this study were similar to those in D. delphis specimens from Southern Brazil (BOTTA et al., 2012), probably resulting from foraging along the continental shelf (i.e. in the intermediate/inner shelf). However, the species was considered coastal in other regions (i.e. Gulf of California, NIÑO-TORRES et al., 2006), but see (AURIOLES-GAMBOA et al., 2013) including Southeastern Brazilian waters (TAVARES et al., 2010). Risso’s dolphin (G. griseus) is a theutophagous species inhabiting deep waters from tropical and temperate oceans (BAIRD, 2009). Carbon and nitrogen values were different between specimens. One was an immature from NC with higher values of both isotopes and the other was a mature male from AE with signatures consistent with low trophic level on offshore feeding grounds. Other theutophagous species (e.g. G. macrorhynchus and P. electra) and those feeding on small pelagic fish and squid (e.g. L. hosei and S. attenuata) presented similar values of 13C and 15N 91 coinciding with their low trophic level predation in offshore areas. Alves et al. (1996) and Costa & Emin-Lima (2010) registered G. macrorhynchus and P. electra through stranding events in Northeastern and Erber et al. (2005) through sightings by ocean cruises in Eastern Pará. The presence of S. attenuata was reported for Siciliano et al. (2008), further two records from Piauí coast were reported (COSTA et al., 2015, unpub. data). Isotopic values of 13C showed a decrease in values typical with an ocean pattern. It is noteworthy mentioning that both records of L. hosei were based on live individuals stranded on the coast of Maranhão ( TOSI; MAGALHÃES; GARRI, 2008; COSTA et al., 2015, unpub. data). So far, no previous isotopic data for G. macrorhynchus and P. electra were reported for Brazilian waters, thus values presented here are unique for these species. Adult males, females and immature males of P. macrocephalus forage over different regions of the oceans. The former are usually found in deep waters up to the ice-edge from both hemispheres while females and immature males inhabit lower latitudes in subtropical and tropical oceans (WHITEHEAD, 2009). Ruiz-Cooley et al. (2004) found significantly differences in 13C and 15N between tissues of females and immature males and those of adult males, showing different diets and/or habitat use. Females prefer mesopelagic squids and fishes, while males prey upon larger squids and demersal fish in Antarctic and Artic waters (WHITEHEAD, 2009). On the Northeastern Brazilian coast, Gurjão et al. (2003) identified at least 15 squid families in stomach contents of sperm whales, belonging principally to pelagic cephalopods. In this study two specimens that presented similar values of 13C were females while the more 13 C enriched individual did not have its sex confirmed. All P. macrocephalus samples showed the most 15 N-enriched values than all other taxa, suggesting higher trophic level than the other marine species analyzed (see TRITES, 2001). Low carbon values indicate more offshore foraging areas as expected for the known foraging ecology of the species (RUIZ-COOLEY et al., 2012). Our values were similar to those found for P. macrocephalus from the Mauritania coast, Northwest coast of Africa (PINELA et al., 2010) and for Northwestern Spain (BORRELL et al., 2013). Niche partitioning of aquatic mammals in the Amazon Estuary Usually species have sufficient differences in their ecological niches (e.g. diet, habitats preferences) allowing their coexistence or niche partitioning between them. When these niches 92 are not sufficiently different, is expected that competition among species result in competitive exclusion (HUTCHINSON, 1957). The competitive exclusion can be minimized if species differ in some ecological aspects either in spatial or temporal scale, segregating food resources and habitats (HUTCHINSON, 1957; PIANKA, 1974). On the other hand it is noteworthy that the intraspecific competition for resources (between-individual variation can sometimes comprise the majority of the population’s niche width, (sensu, BOLNICK et al., 2003) is consider the main way for maintenance of individual diet specialization (i.e. individual uses a smaller portion of resources relative to the whole population). This is an important feature to cause intrapopulation niche variation (SVANBÄCK; BOLNICK, 2005; NEWSOME et al., 2015a). In this study was analyzed isotopic composition of aquatic mammal communities in the Amazon Estuary, adjacent coastal areas and the Parnaíba Delta, when it comes a scenery at community level. Beyond were characterized the isotopic variation at a population level for two ecological stocks of S. guianensis for the same study sites. Herein, Marajó Bay is considered as part as the Amazon Estuary sector (AE) where these manatee species occur (T. inunguis and T. manatus). Further, one estuarine-marine (Sotalia guianensis) and three freshwater (S. fluviatilis, Inia geoffrensis and I. araguaiaensis) cetacean species are also present (DOMNING, 1981; DA SILVA, 1983; CUNHA et al., 2010; SICILIANO et al., 2007, 2015 unpub. data). The tucuxi, S. fluviatilis was not analyzed in this study. No overlap in SEAc among freshwater species (T. inunguis and Inia spp., the latter including both Inia species) and S. guianensis, indicating a complete trophic segregation among these sympatric at least in Marajó Bay. Freshwater species, (Inia spp. and T. inunguis) showed a larger isotopic niche area, mainly resulting from a wide range of 13C values, which may reflect higher trophic plasticity than the estuarine-marine S. guianensis. Specimens analyzed here include those found in estuarine habitats (e.g. Marajó Bay, AE), and also those collected in areas of continental waters (AL) associated with typically more 13C-depleted primary producers of the floodplain (MARTINELLI; et al., 1994). This could be influencing the great range in carbon isotope values found in T. inunguis and Inia spp. samples. Amazonian manatees are exclusively herbivore, mainly feeding on aquatic and semiaquatic macrophytes (BEST, 1981; GUTERRES et al., 2008). In Marajó bay some primary producers like 93 Amaranthaceae (Blutaparon portulacoides), Cyperaceae (Eleocharis geniculata), Lythraceae (e.g. Crenea maritima) and Poaceae (grasses) families were described as part of the diet for manatees, among others (GUTERRES et al., 2008; SOUSA, 2011; SOUSA et al., 2014). Indeed, low nitrogen isotope values indicated lower trophic position reflecting it’s herbivory. Previous studies indicated that both manatee species, T. inunguis and T. manatus, occur in sympatry at Marajó Bay (DOMNING, 1981; SICILIANO et al., 2007) and the existence of hybrids in Amazon Estuary (VIANNA et al., 2006). Probably in this region T. inunguis share the same resources with T. manatus. Amazonian manatee specimens from AL exhibited great dispersion in 13C values, whilst those from AE showed less range. The dispersion in carbon isotope values resulted in a large isotopic niche area (i.e. SEAc values), showing the trophic plasticity of the species, which can forage along a gradient encompassing lowland freshwaters to the Amazon Estuary. This highly dynamic region influenced by river’s discharge regime, energy and variation of tides and rainy season (ROSÁRIO; SANTOS, 2014), could change vegetation composition and directly reflect in manatee’s diet as occur in the northeastern. Furthermore, T. inunguis in Amazon basin needs to select their food in accordance to fluctuation of river levels and realize migrations to floodplain lakes with abundant foraging areas (ARRAUT, 2008). Therefore, the larger isotopic area could also be due to different resources consumed in response to changes in isotopically different food sources (i.e. mangrove, seagrass, macroalgae) availability as was demonstrated for T. manatus (SILVA et al., 1987; CASTELBLANCO-MARTÍNEZ et al., 2011; CIOTTI, 2012). Indeed, Ciotti (2012) found similar values of 13C but higher values of 15N for T. manatus from Northeastern Brazil. Moreover, that species forage primarily on seagrass (–14.2 ± 0.7‰) and macroalgae (–18.5 ± 1.8‰), while T. inunguis forage mainly grass, mangrove, in general more 13 C-depleted plants. The variation found between AL and AE, is probably because the supply of primary producers with enriched values of carbon as C4 plants (e.g. seagrass) to C3 plants such as 13 C-depleted mangrove leaves (13C = -28.4 ± 0.5‰, GIARRIZZO et al., 2011) which may be part of the T. inunguis diet as it does for T. manatus (BORGES et al., 2008; CIOTTI, 2012). Many aspects of Inia ecology remains unclear at the Amazon Estuary and surrounding areas. In this study, carbon and nitrogen stable isotope compositions were reported for the first time for specimens found in Amazonian lowland (AL) (i.e. Amazon floodplain) and from the estuarine region (AE). Until recently the pink river dolphin was considered endemic of the Amazon and 94 Orinoco basins (BEST; DA SILVA, 1993). Nevertheless, Costa et al. (2013) described the presence of this dolphin in estuarine areas on Marajó Island and eastern Pará coast based on stranded specimens. Furthermore, molecular analysis showed that a specimen from eastern Pará have high levels of genetic diversity that it was a new form of boto river compared with existing subspecies. In 2014, Hrbek et al. described a new species for Inia genus named Inia araguaiaensis, the Araguaian boto. They suggested that this species was distributed in and restricted to the Araguaia River basin, where the Tucuruí dam would be a geographical barrier and delimit the occurrence between I. geoffrensis and I. araguaiaensis. However, recent molecular analysis conducted on specimens found in the Eastern coast of Marajó Island and Curuçá Estuary at Pará coast, confirmed the occurrence of I. araguaiaensis in this area, extending the distribution area of over 400 km. Authors suggested that the species coexist with I. geoffrensis at least in these regions (SICILIANO et al., 2015 unpub. data). Although sample size did not allow us to compare the isotopic niche of these two species, values of 13C and 15N for I. araguaiaensis e I. geoffrensis were not significantly different (Fig.3). One I. araguaiaensis specimen collected in Curuçá Estuary, showed 13 C-depleted values similar from those of AL region suggesting that it probably fed in a 13C depleted food web and moved to estuarine areas during certain periods. Other samples of this region are being analyzed and forward studies could clarify this question. Another hypothesis is that I. araguaiensis at Curuçá Estuary participate of the “mangrove food web” (13C-depleted). In this estuary, there is no association with other ecosystems such as seagrass or salt marshes that would make prey become more enriched. Therefore the mangrove becomes the main carbon source for consumers of the three food webs characterized, mangrove, algal and mixed food webs (GIARRIZZO et al., 2011). Indeed, as a piscivorous species, they incorporate carbon of the main producers that support the food webs in these estuaries. Costa et al. (2013) suggested that the huge discharge inside Marajó Bay could facilitate the species to achieve other estuaries outside the Amazon Estuary; this fact could explain the dispersion for estuaries such as Curuçá. Although I. geoffrensis and I. araguaiaensis are considered exclusive freshwater species (DA SILVA, 1983; BEST; DA SILVA, 1993; HRBEK et al., 2014), our findings indicated that the use of the estuary for these species is not circumstantial and probably they actively forage in these environments. For Central Amazon, there are at least 50 fish species (e.g. sciaenids, cichlids and characins) identified as 95 part of the diet of Amazon River dolphins (DA SILVA, 1983) but there are no dietary data available for Inia on AE and AL considered in this study. Martin & Da Silva (2004) reported that water season (i.e. changes in water levels, dissolved oxygen, habitat availability, and productivity) might affect the species’ distribution. During water seasons, prey availability could determine their movements (MARTIN; DA SILVA, 2004; BERTA; SUMICH; KOVACS, 2006; DA SILVA et al., 2008). No overlap between S. guianensis and the sympatric Inia dolphins was detected. The latter seemed to forage at higher trophic levels than S. guianensis, suggesting some kind of resource segregation among species. Body characteristics of Inia allow individuals have the capacity to explore areas with dense vegetation on floodplain (i.e. várzea) and flooded forest (i.e. igapó) environments in the Amazon basin. S. fluviatilis does not have this behavior staying in open areas of the rivers (DA SILVA; MARTIN, 2010). This fact might reinforce that probably there is intra-specific competition (between members of Inia spp.) are higher than an interspecific competition (between specimens of Inia and Sotalia). Unlike, groups of Inia spp. were monitored from 2005 to 2013 in the port situated on the Camará River mouth, in the eastern portion of Marajó Bay. In that bay, species uses the margins and the confluence of rivers, but also indicate their ability to use open waters of this bay (COSTA et al., 2013). Curiously have not been observed mixed groups of Sotalia and Inia as in other regions at the Amazon basin (e.g. Caxiuanã River, southeast Pará, pers. obs.). Probably differences in habitat use, foraging strategies, prey availability as well as consumption on prey belonging to different trophic guilds, could reduce resource competition between Inia and Sotalia. Sotalia guianensis – Intraspecific variation in isotopic niche Isotopic composition based on carbon and nitrogen elements were used to evaluate two ecological stocks of Guiana dolphins: one from Amazon Estuary and adjacent coastal zone (Sgui_AE) and the other from Maranhão and Piauí coastlines (Sgui_NC). The notably similarity between populations in nitrogen isotope values indicate that they probably occupy comparable trophic positions in Amazon Estuary and Northeastern, although Sgui_NC presented higher mean 13C values compared to Sgui_AE. Some factors could explain the difference from this semiarid region: lower freshwater inputs, restricted rainy period, and high salinity ratios prompting a strong marine influence for the 96 aquatic fauna reflecting 13 C-enriched values in NC. In this region, 13 C-enriched primary producers might influence the isotopic composition for the whole food chain. Parnaíba River, the second system after Amazon, discharges into Atlantic Ocean forming a delta dominated by waves and influenced by mesotidal regime, the Parnaíba Delta (SZCZYGIELSKI et al., 2014). This pristine region provides a high primary productivity due to extensive mangrove areas and vast beds of seagrass and macroalgae which provides a rich diversity of aquatic organisms (ALVES; et al., 2010). The only study about isotope composition of Parnaíba Delta, consist in the analysis of sediment around Canárias Island which signature is similar to mangrove ecosystems 13 C- depleted (SZCZYGIELSKI et al., 2014). Unfortunately, no stable isotopic data are available for aquatic organisms at this time for that region. Other variables besides diet can influence 13C and 15N values as growth rate, age, maturity, lactation, seasonality, migration (MENDES et al., 2007; NEWSOME et al., 2009; WITTEVEEN et al., 2009; DRAGO et al., 2010). Due the difficulty of collecting in the Amazon region and Northeastern where the hot weather accelerates carcasses decomposition, only few specimens had total length measured and in the most the sex were not confirmed. In order to minimize the factor growth rate, mainly for nitrogen values (NEWSOME et al., 2009), specimens analyzed were separated taking into account only the physical maturity based on either their skull degree of ossification, cranial and vertebrae sutures (PERRIN, 1975; FETTUCCIA; SIMÕES-LOPES, 2004; EMIN-LIMA, 2012). Sgui_AE occupy a broader isotopic niche area relative to Sgui_NC, indicating higher trophic plasticity (Fig. 6). Some aspects could explain this issue: a) stock from AE probably have availability to a larger diversity of preys, b) variability on carbon sources in AE habitats and c) differences in diet among sectors. We suggested that individuals may have preferences for different portions of the transitional estuarine system and their feeding behavior may reflect in the wider isotopic niche for this population. Some individuals of this group might spend most of their time in the upper estuary (i.e. with lower salinity variations) receiving influence of freshwater environments more 13 C-depleted given their low 13C values. Others remain in the lower estuary marine-influenced becoming their signatures more 13 C-enriched, which seems identical as samples collected from NC. Indeed, environmental features might be responsible for the control, diversity, abundance and availability of prey communities. Thus, foraging behavior 97 of consumers will directly command by temporal and spatial habitat characters (NEWSOME et al., 2015b). Individuals analyzed from AE came from different estuaries and adjacent areas and probably feed on different prey items in these sectors. The significant differences found in 13C values between groups from AE and NC sectors is tightly due lower values of individuals from Marajó Bay and Maracanã/Marapanim estuaries. Isotopic variation among individuals might be clarifying aspects of niche width of the same or different populations as well (BEARHOP et al., 2004; VIGHI et al., 2014). Botta (2011) analyzed stable isotopes in S. guianensis teeth along the Brazilian coast and found a latitudinal trend in increasing on nitrogen isotope values from north to south as well as regional differences in 13C. The northern group, constituted by specimens from the Amazon Estuary and adjacent coastal zone and Ceará state, did not present significant differences in stable isotope compositions among them. Resident populations of S. guianensis were reported along the distribution of the species (SANTOS; ROSSO, 2007; DAURA-JORGE et al., 2011; CREMER et al., 2012). In Amazon Estuary, S. guianensis is considered resident in many estuaries such as Marapanim Bay (EMIN-LIMA et al., 2010a), Curuçá Bay (pers. obs.), Salinópolis Bay (Emin-Lima, pers. comm.) having a strong dependence to these environments. In the Marajó Bay, however, sightings of this dolphin are rare and sporadic, despite the great occurrence of stranded specimens (EMIN-LIMA et al., 2010b). S. guianensis is a protein-dependent and probably prefer the most energetic and abundant preys. Indeed, Di Beneditto et al. (2009) observed that fish are more important in the diet of Guiana dolphin than squids. They found that protein constitute the largest fraction of organic matter. These results are in accordance with Cremer et al. (2012) which identified the high energy fishes M. curema and M. furnieri as an important prey for Guiana dolphin at Babitonga Bay, southeastern Brazil. Studies based on the analyses of stomach contents of S. guianensis described the species as a piscivorous predator, although it may incorporate some squid in their diet in some areas (DI BENEDITTO; RAMOS, 2004; BELTRÁN-PEDREROS; DE ARAÚJO PANTOJA, 2006; PANSARD et al., 2011; LOPES et al., 2012). Resources availability should directly influence on habitat use and therefore the assimilation of the most abundant prey in each region (BEGON, M., TOWSEND, C.R., HARPER, 2007). Begon et al. (2007) postulated that abundance of resources could induce 98 opportunistic behavior of species. Prey availability can influence the diet for an opportunistic feeding species such as Guiana dolphin (DAURA-JORGE; WEDEKIN; SIMÕES-LOPES, 2011; LOPES et al., 2012). The diet of the species based on the stomach contents of specimens incidentally captured in the AE region and adjacent coastal zones was mainly based on 13 fish species divided into three families (e.g. Scianidae, Trichiuridae and Ariidae) with squids showing low importance (BELTRÁN-PEDREROS; DE ARAÚJO PANTOJA, 2006). Recently, Vieira (2014) recognized 31 fish species, comprising 14 families and one cephalopod as diet composition of Guiana dolphin for Marajó Bay, Eastern coast of Pará and Parnaíba Delta. Preys identified belongs to different habits between the Northeastern Pará (e.g. pelagic, Lycengraulis grossidens) and Marajó Bay (e.g. demersal, Gobioides broussonnetii). The most representative families identified were Scianidae, Engraulidae and Ariidae. For the first time the goby G. broussonnetii was described in the diet of Guiana dolphin and is the most important prey for mature individuals of Marajó Bay. Species is abundant in the Amazon Estuary, found in shallow waters on muddy sediment associated to mangroves and is an important food item of estuarine predators (BRAGANÇA, 2005). Although the diversity of prey obtained, the index of relative importance (IRI), showed that Macrodon ancylodon and Lycengraulis grossidens represent 57% of prey abundance. Macrodon ancylodon is the most important prey for all surveyed areas. This is a coastal demersal species found in marine and estuarine waters associated to muddy bottoms (CARPENTER, 2002). The findings are consistent with reported by Camargo & Isaac (2002), authors highlighted that fish assemblages of Scianidae and Ariidae due high diversity and wide distribution were the most representative for Northern. The discharge of the Amazon forms a water barrier separating the coastal estuarine fish fauna of the Amazon into two groups: the fauna of Maranhão and Pará reentrances and 2) the fauna of the Marajó Bay, the mouth of the Amazon River and coast of Amapá (CAMARGO; ISAAC, 2002). Indeed, the authors recognized high diversity and wide distribution of preys in northern, indicating preferences for demersal habits. Comparing the diet composition with isotope values obtained in this study some assumptions can be raised. Diet differentiation between ecological stocks is being reflected in isotopic 99 variations, values showed that Guiana dolphins from AE presented lower carbon values compared to more enriched values for NC. Likely, S. guianensis AE population is feeding on food webs with 13 C-depleted carbon source compared to NC. Indeed, Giarrizzo et al. (2011) analyzing the Curuçá Estuary found that carbon sources become from three distinct food webs (mangrove, algal and mixed food webs). Species identified as part of S. guianensis were analyzed and presented low 13C values (e.g. Diapterus auratus, Genyatremus luteus). These preys are identified as part of S. guianensis diet in other areas Campos (2012) for Ceará state and Vieira (2014) for Eastern Pará coast, respectively. The engraulid L. grossidens is a pelagic/neritic species found in freshwater, estuarine and marine waters (CERVIGÓN et al., 1992). We suggested that low carbon values obtained in specimens from AE probably is due the high consumption of species associated to freshwater habitats (e.g. Lycengraulis grossidens and Gobioides broussonnetti). In the study area S. guianensis showed preference for demersal species with association with bottom of rivers and estuaries. Stable isotopes as evidence of ecological stocks of S. guianensis Guiana dolphin, S. guianensis, is considered for IUCN as “Data Deficient” (SECCHI, 2012). However, the species is categorized as “Vulnerable” in the official endangered species list of Brazil (BRASIL, 2014). Along their wide distribution, the species undergo different levels of threats such as habitat degradation, boat traffic, estuaries exploration, incidental captures, human consumption and use as love charms are some of them (SICILIANO, 1994; TOSI; MAGALHÃES; GARRI, 2007; MONTEIRO-FILHO, E.L.A., MONTEIRO, 2008; SHOLL et al., 2008; FLORES; DA SILVA, 2009). In order to suggest management and conservation strategies in different geographical areas, it is essential to define the population stocks (SECCHI et al., 2003). Moritz (1994) defined two categories of conservation units: a) the Evolutionarily Significant Unit (ESU) deals with long-term conservation requirements e.g. historical population structure, mtDNA phylogeny and, b) the Management Unit (MU) which needs short-term management necessities e.g. recent population structure, allele frequencies. The knowledge on ecological requirements including trophic relationships is a crucial point to trace conservation and management strategies (NEWSOME et al., 2007; NIÑO-TORRES et al., 2013). 100 Previous studies on S. guianensis revealed by molecular analysis Cunha et al. (2005) and morphometry (FETTUCCIA et al., 2009; EMIN-LIMA, 2012) the existence of distinct management units (MUs). Molecular analysis evidenced a strong population division with no gene flow along the Brazilian coast (e.g. Pará, Ceará, Rio Grande do Norte, Bahia, Espírito Santo and the southsoutheastern area), whilst morphometric analysis corroborate a latitudinal pattern in the growth of skulls from North to South. The same trend was observed by Arcoverde et al. (2013) analyzing periotic-tympanic bones from five Guiana dolphin populations along the Brazilian coast. Emin-Lima (2012) and Arcoverde et al. (2013) identified a lesser form of S. guianensis compared to the rest of the Northeastern, Southeastern and Southern Brazilian populations. It seems to be a typical form from estuaries of the Northern coast, suggesting a strong local adaptation to heterogeneous estuarine environments in that region. Factors such as macrotidal regime, availability and variety of preys from different habits (e.g. diverse trophic guilds), besides other biotic and abiotic factors may have strong influence to explain this dwarf form of Sotalia as described for T. truncatus in Mediterranean Sea (SHARIR et al., 2011). Therefore, our results indicate that in a small scale, ecological differences occur in this region. This information is in accordance to the above mentioned morphological differentiation found, thus contributing to separate at least two different stocks of S. guianensis (Northern and Northeastern stocks). This study combined the analysis of stable isotopes to elucidate basic questions of biology and ecology of Sotalia guianensis. However, must be carried specific research to characterize the different food chains that sustain this species throughout its wide distribution off Brazilian coast. 101 5. CONCLUSIONS It was detected a spatial pattern from coastal to offshore habitats in 13C values evidenced among all delphinids except for Sotalia guianensis. Neritic species such as Steno bredanensis and Tursiops truncatus, and offshore species (G. macrorhynchus, Delphinus sp., G. griseus, L. hosei, P. electra, S. attenuata) exhibited carbon isotope values reflecting the expected pattern of decreasing 13C values towards more offshore habitats. Physeter macrocephalus presented the most depleted 13C values and the most 15 N-enriched, evidencing higher trophic level compared to all marine species analyzed. Delphinid species presented similar 13C and 15N values, with some overlap between this group and S. guianensis from Amazon Estuary and Northeastern Brazilian coast, indicating trophic niche partitioning. Isotopic niches were highly distinct among Sotalia guianensis, Inia spp. and Trichechus inunguis, indicating strong niche segregation among these sympatric species at least in Marajó Bay. T. inunguis and river dolphins presented no differences in 13C values, but exhibited significant differences in 15N values as expected for an herbivorous and a carnivorous species remaining distinct trophic levels. T. inunguis, Inia geoffrensis e I. araguaiensis presented the largest isotopic niche widths, demonstrating a wide trophic diversity. S. guianensis populations presented the smallest isotopic niche area compared to all groups analyzed. Values of 15N were similar between stocks, but 13C values from NC were higher compared to AE. Sgui_AE and Sgui_NC presented high niche overlap, although Sgui_AE occupy a broader isotopic niche area indicating differences on feeding habits. 102 6. ACKNOWLEDGEMENTS We wish to thank all staff of Grupo de Estudos de Mamíferos Aquáticos da Amazônia/MPEG for logistical and technical support for activities during our research along all these years. A.F. Costa is indebted to Herbert Freitas and Mario Serejo for their assistance in field works at Parnaíba Delta. Special thanks to Ingrid Clark for all support during activities at Projeto Cetáceos do Maranhão (PROCEMA). Thanks to Rory Romero for assistance with isotope processing and Allan Jameson for his help in R analysis. Financial support was provided by VALE/FAPESP/FAPESPA/FAPEMIG (Grants no. 038/2011), Projeto Bicho D’água and PROCEMA were sponsored by Petrobras. This paper was the product of Alexandra Costa’s PhD thesis and as part of the requirement for the achievement of a PhD title in Aquatic Ecology and Fishery from the Universidade Federal do Pará. A.F. Costa was supported by Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) during PhD course and Programa de Capacitação Institucional (MPEG/MCTI) for the scholarship to the first author. T. Giarrizzo is funded by CAPES (PNPD), and receives a productivity grant from CNPq (Process no. 308278/2012-7). Silvina Botta is supported by CAPES (PNPD). 103 7. REFERENCES ALONSO, M. K. et al. Stomach contents of false killer whales (Pseudorca crassidens) stranded on the coasts of the Strait of Magellan, Tierra del Fuego. Marine Mammal Science, v. 15, n. 3, p. 712–724, 1999. ALVES, M. H.; CARVALHO, L. M. O. Diversidade de Fanerógamas do Delta do Parnaíba, litoral piauiense. In: GUZZI, A. (Ed.). Biodiversidade do Delta do Parnaíba: litoral piauiense. EDUFPI, 466p., 2012. ALVES-JUNIOR, T.T.A., ÁVILA, F.J.C., OLIVEIRA, J.A., FURTADO-NETO, M.A.A., MONTEIRO-NETO, C. Registros de Cetáceos para o litoral do estado do Ceará, Brasil. Arquivos de Ciências do Mar, v. 30, n. 1, p. 79–92, 1996. ANDRADE, L.; PINEDO, M. C.; BARRETO, A. S. Gastrointestinal parasites and prey items from a mass stranding of false killer whales, Pseudorca crassidens, in Rio Grande do Sul, Southern Brazil. Revista Brasileira de Biologia, v. 61, n. 1, p. 55–61, 2001. ARCOVERDE, D. L. et al. Evaluation of periotic–timpanic bone complex of Sotalia guianensis (Cetacea: Delphinidae) as tool in identification of geographic variations. Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom, v. 94, n. 06, p. 1127–1132, 2013. ARRAUT, E. M. Migração do Peixe-boi Amazônico: uma abordagem por sensoriamento remoto, radiotelemetria e geoprocessamento. 2008. 139p. Tese (Doutorado em Sensoriamento Remoto) Instituto Nacional de Pesquisas Espaciais, São José dos Campos, 2008. AURIOLES-GAMBOA, D. et al. Habitat, trophic level, and residence of marine mammals in the Gulf of California assessed by stable isotope analysis. Marine Ecology Progress Series, v. 488, p. 275–290, 2013. BAIRD, R. W. Risso’s Dolphin: Grampus griseus. In: PERRIN, W. F.; BERND WURSIG; THEWISSEN, J. G. (Eds.). Encyclopedia of Marine Mammals. 2nd. ed. Elsevier, 2009. p. 975–976. BARRETO, A. S. et al. Plano de Ação nacional para Conservação dos Mamíferos Aquáticos - Pequenos Cetáceos. Brasília: Instituto Chico Mendes de Conservação da Biodiversidade, ICMBio, 132p., 2010. BASTIDA, R., RODRÍGUEZ, D., SECCHI, E., & SILVA, V. DA. Mamíferos acuáticos de Sudamérica y Antártida. 1a. ed. Buenos Aires: Vázquez Manzini Editores, 2007. BEARHOP, S. et al. Determining trophic niche width : a novel approach using stable isotope analysis. Journal of Animal Ecology, v. 73, n. 5, p. 1007–1012, 2004. BEARZI, M. Dolphin sympatric ecology. Marine Biology Research, v. 1, n. 3, p. 165–175, 2005. BEGON, M., TOWSEND, C.R., HARPER, J. L. Ecology from Individuals to Ecosystems. Fourth Ed. ed. Malden: Blackwell Publishing, 2006. BELTRÁN-PEDREROS, S.; DE ARAÚJO PANTOJA, T. M. Feeding habits of Sotalia fluviatilis in the Amazonian Estuary. Acta Scientiarum - Biological Sciences, v. 28, n. 4, p. 389–393, 2006. 104 BENTALEB, I. et al. Foraging ecology of Mediterranean fin whales in a changing environment elucidated by satellite tracking and baleen plate stable isotopes. Marine Ecology Progress Series, v. 438, p. 285– 302, 2011. BERTA, A.; SUMICH, J. L.; KOVACS, K. M. Marine Mammals: Evolutionary Biology. 2a. ed. Elsevier, 2006. BEST, R. C. Foods and feeding habitats of wild and captive Sirenia. Mammal, v. 11, n. 1, p. 3–29, 1981. BEST, R. C.; DA SILVA, V. M. F. Inia geoffrensis. Mammalian Species, n. 426, p. 1–8, 1993. BEZERRA, M. O.; ROLLNIC, M. Physical oceanographic behavior at the Guama/Acara-Moju and the Paracauari river mouths, Amazon Coast (Brazil). Journal of Coastal Research. Anais. Proceedings of The 11th International Coastal Synposium, 2011. BISI, T. L. et al. Trophic Relationships and Habitat Preferences of Delphinids from the Southeastern Brazilian Coast Determined by Carbon and Nitrogen Stable Isotope Composition. PlosOne, v. 8, n. 12, p. e82205, 2013. BOLNICK, D. I. et al. The ecology of individuals: incidence and implications of individual specialization. The American Naturalist, v. 161, n. 1, p. 1–28, 2003. BORGES, J. C. G.; EMMANUEL, G.; MIRANDA, C. DE. Identificação de itens alimentares constituintes da dieta dos peixes-boi marinhos (Trichechus manatus) na região Nordeste do Brasil. Biotemas, v. 21, n. 2, p. 77–81, 2008. BORRELL, A. et al. Stable isotopes provide insight into population structure and segregation in eastern north atlantic sperm whales. PLosOne, v. 8, n. 12, p. 1–10, 2013. BOTTA, S. Caracterização do uso do habitat e identificação de Unidades Populacionais de pequenos cetáceos do Atlântico Sul-Ocidental através de métodos químicos. 2011. 238p. Tese (Doutorado em Oceanografia Biológica) - Universidade Federal do Rio Grande/FURG, Rio Grande, 2011. BOTTA, S. et al. Isotopic variation in delphinids from the subtropical western South Atlantic. Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom, p. 1–10, 2012. BRAGANÇA, A. J. Pesca, Alimentação, Reprodução e Crescimento do Amuré, Gobioides broussonnetii Lacepède, 1800 (Pisces: Gobiidae) no Estuário Amazônico, Município de Vigia- Pará. 2005, 69p. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal do Pará, Bragança, 2005. BRASIL. Portaria No 444. Brasil. Ministério do Meio Ambiente, 2014. Disponível em: <www.in.gov.br/autenticidade.html> BROWNING, N. E.; COCKCROFT, V. G.; WORTHY, G. A J. Resource partitioning among South African delphinids. Journal of Experimental Marine Biology and Ecology, v. 457, p. 15–21, 2014. CAMARGO, M.; ISAAC, V. Os peixes estuarinos da região norte do Brasil: lista de espécies e considerações sobre sua distribuição geográfica. Boletim do Museu Paraense Emílio Goeldi, série Antropologia, v. 17, n. 2, p. 133–157, 2002. 105 CAMPOS, T. M. Ecologia alimentar do boto-cinza, Sotalia guianensis (Cetacea, Delphinidae) no estado do Ceará, Brasil. 2012. 84p. Dissertação (Mestrado em Ecologia e Conservação) - Universidade Federal do Paraná, Curitiba, 2012. CAPELLI, R. et al. Distribution of trace elements in organs of six species of cetaceans from the Ligurian Sea (Mediterranean), and the relationship with stable carbon and nitrogen ratios. Science of the Total Environment, v. 390, n. 2-3, p. 569–578, 2008. CARPENTER, K. E. The living marine resources of the Western Central Atlantic FAO Species Identification Guide for Fishery Purposes and American Society of Ichthyologists and Herpetologists. Special Publication FAO, 1375-2127, 2002. CASTELBLANCO-MARTÍNEZ, D. N. et al. The trophic role of the Endangered Caribbean Manatee Trichechus manatus in an Estuary with low Abundance of Seagrass. Estuaries and Coasts, v. 35, n. 1, p. 60–77, 2011. CERVIGÓN, F., R. CIPRIANI, W. FISCHER, L. GARIBALDI, M. HENDRICKX, A.J. LEMUS, R. MÁRQUEZ, J.M. POUTIERS, G. R.; RODRIGUEZ, B. Fichas FAO de identificación de especies para los fines de la pesca. Guía de campo de las especies comerciales marinas y de aquas salobres de la costa septentrional de Sur América. FAO, 1992. CIOTTI, L. L. Isótopos estáveis de carbono e nitrogênio aplicados ao estudo da ecologia trófica do peixeboi marinho (Trichechus manatus) no Brasil. 2012. 85p. Dissertação (Mestrado em Oceanografia Biológica) - Universidade Federal de Rio Grande/FURG, Rio Grande, 2012. CIOTTI, L.L., LUNA, F.O., SECCHI, E. Intra- and interindividual variation in 13C and 15N composition in the Antillean manatee Trichechus manatus manatus from northeastern Brazil. Marine Mammal Science, p. 1–10, 2014. CLEMENTZ, M. T.; KOCH, P. L. Differentiating aquatic mammal habitat and foraging ecology with stable isotopes in tooth enamel. Oecologia, v. 129, n. 3, p. 461–472, 2001. COSTA, A. et al. Bottlenose dolphin communities from the southern Brazilian coast: do they exchange genes or are they just neighbours? Marine and Freshwater Research, p. A–J, 2015a. COSTA, A. F. et al. How far does it go along the coast? Distribution and first genetic analyses of the boto (Inia geoffrensis) along the coast of Pará, Amazon, Brazil. IWC Scientific Commitee, 2013. COSTA, A. F.; EMIN-LIMA, R. Mamíferos Marinhos. In: GIACOMETTI MAI, A. C.; LOEBMANN, D. (Eds.). Biodiversidade do Litoral do Piauí. Sorocaba: Paratodos Sorocaba, 2010. p. 232–247. CREMER, M. J.; PINHEIRO, P. C.; SIMÕES-LOPES, P. C. Prey consumed by Guiana dolphin Sotalia guianensis (Cetacea, Delphinidae) and franciscana dolphin Pontoporia blainvillei (Cetacea, Pontoporiidae) in an estuarine environment in southern Brazil. Iheringia. Série Zoologia, v. 102, n. 2, p. 131–137, 2012. 106 CUNHA, H. A. et al. Riverine and marine ecotypes of Sotalia dolphins are different species. Marine Biology, v. 148, n. 2, p. 449–457, 2005. CUNHA, H. A.; DA SILVA, V. M. F.; SOLÉ-CAVA, A. M. Molecular Ecology and Systematics of Sotalia Dolphins. In: RUIZ-GARCIA, M.; SHOSTELL, J. (Eds.). Biology, Evolution and Conservation of Rivers Dolphins within South America and Asia. New York: Nova Science Publishers, Inc., p. 261–283, 2010. DA SILVA, V. M. F. Ecologia Alimentar dos golfinhos da Amazônia. 1983. 183p. Dissertação (Mestrado em Biologia de Água Doce e Pesca Interior) - Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia, Manaus, 1983. DA SILVA, V. M. F.; GOULDING, M.; BARTHEM, R. Golfinhos da Amazônia. Manaus: INPA, 2008. DA SILVA, V. M. F.; MARTIN, A. R. Status, threats, conservation initiatives and possible solutions for Inia geoffrensis and Sotalia fluviatilis in Brazil. In: TRUJILLO, F. et al. (Eds.). The Action Plan for South American River Dolphins 2010-2020. Bogotá, Colombia: WWF, Fundación Omacha, WDS, WDCS, Solamac., 2010. p. 249. DAS, K. et al. Marine mammals from northeast atlantic: Relationship between their trophic status as determined by 13C and 15N measurements and their trace metal concentrations. Marine Environmental Research, v. 56, n. 3, p. 349–365, 2003. DAURA-JORGE, F. G.; WEDEKIN, L. L.; SIMÕES-LOPES, P. C. Feeding habits of the Guiana dolphin, Sotalia guianensis (Cetacea: Delphinidae), in Norte Bay, southern Brazil. Scientia Marina, v. 75, n. 1, p. 163–169, 2011. DENIRO, E.; EPSTEIN, S. Influence of diet on the distribution of carbon isotopes in animals. Geochimica et Cosmochimica Acta, v. 42, p. 495–506, 1978. DI BENEDITTO, A. P. M. et al. Use of multiple tools to assess the feeding preference of coastal dolphins. Marine Biology, v. 158, n. 10, p. 2209–2217, 4 jun. 2011. DI BENEDITTO, A. P. M. et al. Trophic niche comparison between two predators in northern Rio de Janeiro State , Brazil : a stable isotopes approach. Biota Neotropica, v. 13, n. 3, p. 29–33, 2013. DI BENEDITTO, A. P. M.; DOS SANTOS, M. V. B.; VIDAL, M. V. V. J. Comparison between the diet of two dolphins from south-eastern Brazil: proximate-composition and caloric value of prey species. Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom, v. 89, n. 05, p. 903–905, 2009. DI BENEDITTO, A. P. M.; RAMOS, R. M. A. Biology of the marine tucuxi dolphin (Sotalia fluviatilis) in south-eastern Brazil. Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom, v. 84, n. 6, p. 1245–1250, 2004. DOMNING, D. P. Distribution ans status of manatees Trichechus spp. near the mouth of the Amazon River, Brazil. Biological Conservation, v. 19, n. 9, p. 85–97, 1981. DRAGO, M. et al. Change in the foraging strategy of female South American sea lions (Carnivora: Pinnipedia) after parturition. Scientia Marina, v. 74, n. 3, p. 589–598, 2010. 107 DRAGO, M. et al. Sexual foraging segregation in South American sea lions increases during the prebreeding period in the Río de la Plata plume. Marine Ecology Progress Series, v. 525, p. 261–272, 2015. EMIN-LIMA, R. et al. Note on the group size and behavior of Guiana dolphins (Sotalia guianensis) (Cetacea: Delphinidae) in Marapanim Bay, Pará, Brazil. Latin American Journal of Aquatic Mammals, v. 8, n. 1-2, p. 167–170, 2010a. EMIN-LIMA, R. et al. Os mamíferos aquáticos associados aos manguezais da costa norte brasileira. In: Mamíferos de Restingas e Manguezais do Brasil. Rio de Janeiro: Sociedade Brasileira de Mastozoologia, 2010b. p. 45–57. EMIN-LIMA, R. Preenchendo Lacunas em Saúde de Ecossistemas: Estudo Morfológico e de Contaminantes nos Botos-cinza (Sotalia guianensis) da Costa Norte do Brasil. 2012. 147p. Tese (Doutorado em Saúde Pública e Meio Ambiente) – FIOCRUZ, Escola Nacional e Saúde Pública, Rio de Janeiro, 2012. ERBER, C. S. C. et al. Avistagens de baleia-piloto, orca-pigméia, falsa-orca, orca e golfinho-de- Risso: dados inéditos para ampliar o conhecimento de espécies pouco conhecidas. In: CONGRESSO BRASILEIRO DE MASTOZOOLOGIA, 2005, Aracruz. Anais...: Sociedade Brasileira de Mastozoologia e Universidade Federal do Espírito Santo, 2005. p 85. FETTUCCIA, D. C.; DA SILVA, V. M. F.; SIMÕES-LOPES, P. C. Non-metric characters in two species of species of Sotalia (Gray, 1866) (Cetacea, Delphinidae). Brazilian Journal of Biology, v. 69, n. 3, p. 907– 917, 2009. FETTUCCIA, D. C.; SIMÕES-LOPES, P. C. Morfologia da coluna vertebral do boto-cinza, Sotalia guianensis (Cetacea, Delphinidae). Biotemas, v. 17, n. 2, p. 125–148, 2004. FLORES, P. A. C.; DA SILVA, V. M. F. Tucuxi and Guiana Dolphin. In: PERRIN, W. (Ed.). Encyclopedia of Marine Mammals. Second ed. United Kingdom: Elsevier, 2009. p. 1188–1192. FOOTE, A. D. et al. Ecological, morphological and genetic divergence of sympatric North Atlantic killer whale populations. Molecular Ecology, v. 18, n. 24, p. 5207–5217, 2009. FOOTE, A. D. et al. Tracking niche variation over millennial timescales in sympatric killer whale lineages. Proceedings. Biological sciences / The Royal Society, v. 280, p. 2–9, 2013. FRUET, P. F. et al. Abundance of bottlenose dolphins, Tursiops truncatus (Cetacea: Delphinidae), inhabiting the Patos Lagoon estuary, southern Brazil: implications for conservation. Zoologia (Curitiba, Impresso), v. 28, n. 1, p. 23–30, 2011. FRUET, P. F. et al. Remarkably low genetic diversity and strong population structure in common bottlenose dolphins (Tursiops truncatus) from coastal waters of the Southwestern Atlantic Ocean. Conservation Genetics, v. 15, n. 4, p. 879–895, 2014. 108 GAVRILCHUK, K. et al. Trophic niche partitioning among sympatric baleen whale species following the collapse of groundfish stocks in the Northwest Atlantic. Marine Ecology Progress Series, v. 497, p. 285– 301, 2014. GERACI, J. R.; LOUNSBURY, V. J. Marine Mammals Ashore - A field guide for strandings. Texas A&M University Sea Grant College Program and the U.S, 1993. GEYER, W. R. et al. Physical oceanography of the Amazon shelf. Continental Shelf Research, v. 16, n. 5-6, p. 575–616, 1996. GIARRIZZO, T.; SCHWAMBORN, R.; SAINT-PAUL, U. Utilization of carbon sources in a northern Brazilian mangrove ecosystem. Estuarine, Coastal and Shelf Science, v. 95, p. 447–457, 2011. GOULDING, M.; BARTHEM, R.; FERREIRA, E. The Smithsonian Atlas of the Amazon. Princeton ed. Smithsonian Books, 2003. GURJÃO, L. M. DE et al. Notas sobre a dieta de cachalotes (Cetacea: Physeteroidea), encalhados no Ceará, Nordeste do Brasil. Arquivos de Ciências do Mar, v. 36, p. 67–75, 2003. GUTERRES, M. G. et al. Anatomia e morfologia de plantas aquáticas da Amazônia utilizadas como potencial alimento por Peixe-Boi amazônico. Instituto de Desenvolvimento Sustentável Mamirauá, Belém-PA: 2008. HAMMER., Ø.; HARPER, D. A. T.; RYAN, P. D. Paleontological Statistics Software Package for Education and Data Analysis, 2001. HOBSON, K. A. Tracing origins and migration of widlife using stable isotopes: a review. Oecologia, v. 120, p. 314–326, 1999. HOBSON, K. A; ALISAUSKAS, R. T.; CLARK, R. G. Stable-Nitrogen Isotope Enrichment in Avian Tissues Due to Fasting and Nutritional Stress : Implications for Isotopic Analyses of Diet Stable-Nitrogen Isotope Enrichment in Avian Tissues Due to Fasting And Nutritional Stress: implications for isotopic analyses of diet. The Condor, v. 95, n. 2, p. 388–394, 1993. HOBSON, K. A; CLARK, R. G. Assessing avian diets using Stable Isotopes. 1. Turnover of C-13 in tissues. The Condor, v. 94, n. 1, p. 189–197, 1992. HRBEK, T. et al. A new species of river dolphin from Brazil or: How little do we know our biodiversity. PLosOne, v. 9, n. 1, 2014. HÜCKSTÄDT, L. A. et al. Stable isotope analyses reveal individual variability in the trophic ecology of a top marine predator, the southern elephant seal. Oecologia, v. 169, n. 2, p. 395–406, 2012. HUTCHINSON, G. E. Concluding Remarks. Cold Spring Harbor Symposia on Quantitative Biology, v. 22, p. 415–427, 1957. JACKSON, A. L. et al. Comparing isotopic niche widths among and within communities: SIBER - Stable Isotope Bayesian Ellipses in R. Journal of Animal Ecology, v. 80, n. 3, p. 595–602, 2011. 109 JUNK, W. J. et al. A classification of major naturally-occurring amazonian lowland wetlands. Wetlands, v. 31, n. 4, p. 623–640, 2011. LAYMAN, C. A. et al. Applying stable isotopes to examine food-web structure: An overview of analytical tools. Biological Reviews, v. 87, n. 3, p. 545–562, 2011. LOPES, X. M. et al. Feeding habits of Guiana dolphins, Sotalia guianensis, from south-eastern Brazil: new items and a knowledge review. Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom, v. 92, n. 8, p. 1–11, 2012. MARTIN, A. R. R.; DA SILVA, V. M. F. M. F. River dolphins and flooded forest: seasonal habitat use and sexual segregation of botos (Inia geoffrensis) in an extreme cetacean environment. J. Zool. Lond., v. 263, p. 295–305, 2004. MARTINELLI, L. A.; VICTORIA, R. L.; FORSBERG, B. R. Isotopic Composition of Majors Carbon reservoirs in the Amazon Floodplain International Journal of Ecology and Environmental Sciences, 1994. MARTINS, B. M. L. A pesca e os botos: Análise das capturas acidentais de pequenos cetáceos no estuário Amazônico. 2015. 72p. Dissertação (Mestrado em Ecologia e Conservação da Biodiversidade) Universidade Estadual de Santa Cruz, Ilhéus, 2015. MCGRATH, D. et al. Manejo comunitário da pesca nos lagos de várzea do Baixo Amazonas. Povos das águas, p. 213–230, 1993. MENDES, S. et al. Stable carbon and nitrogen isotope ratio profiling of sperm whale teeth reveals ontogenetic movements and trophic ecology. Oecologia, v. 151, n. 4, p. 605–615, 2007. MICHENER, R.; KAUFMAN, L. Stable isotope ratios as tracers in marine food webs: An update. In: MICHENER, R.; LAJTHA, A. K. (Eds.). Stable Isotopes in Ecology and Environmental Science. Blackwell, 2007. v. 28p. 238–270. MINAGAWA, M.; WADA, E. Stepwise enrichment of 15N along food chains: Further evidence and the relation between δ15N and animal age. Geochimica et Cosmochimica Acta, v. 48, p. 1135–1140, 1984. MONTEIRO-FILHO, E.L.A., MONTEIRO, K. D. K. A. Biologia, Ecologia e Conservação do Boto-cinza. São Paulo: Páginas & Letras Editora e Gráfica, 2008. MOREIRA, A. M.; MAVIGNER, D. S. Conhecendo história e geografia do Piauí. Parnaíba Gráfica Ferraz, 2007. MORITZ, C. Defining “Evolutionarily Significant Units” for conservation. Tree, v. 9, n. 10, p. 373–375, 1994. NEWSOME, S. D. et al. A niche for isotopic ecology. Front Ecol Environ, v. 5, n. 8, p. 429–436, 2007. NEWSOME, S. D. et al. Retrospective characterization of ontogenetic shifts in killer whale diets via δ13C and δ15N analysis of teeth. Marine Ecology Progress Series, v. 374, p. 229–242, 2009. 110 NEWSOME, S. D. et al. Tools for quantifying isotopic niche space and dietary variation at the individual and population level. Journal of Mammalogy, v. 93, n. 2, p. 329–341, 2012. NEWSOME, S. D. et al. Individual variation in anthropogenic resource use in an urban carnivore. Oecologia, v. 178, n. 1, p. 115–128, 2015a. NEWSOME, S. D. et al. The interaction of intraspecific competition and habitat on individual diet specialization: a near range-wide examination of sea otters. Oecologia, v. 178, n. 1, p. 45–59, 2015b. NEWSOME, S. D.; CLEMENTZ, M. T.; KOCH, P. L. Using stable isotope biogeochemistry to study marine mammal ecology. Marine Mammal Science, v. 26, n. 3, p. 509–572, 2010. NIÑO-TORRES, C. A. et al. Isotopic analysis of δ13C, δ15N, and δ34S “a feeding tale” in teeth of the longbeaked common dolphin, Delphinus capensis. Marine Mammal Science, v. 22, n. 4, p. 831–846, 2006. NIÑO-TORRES, C. A. et al. Dietary preferences of Bryde’s whales (Balaenoptera edeni) from the Gulf of California: A δ13C, δ15N analysis. Marine Mammal Science, v. 30, n. 3, p. 1140–1148, 2013. NITTROUER, C. A.; DEMASTER, D. J. The Amazon shelf setting: tropical, energetic, and influenced by a large river. Continental Shelf Research, v. 16, n. 5-6, p. 553–573, 1996. OTT, P. H.; DANILEWICZ, D. Southward range extension of Steno bredanensis in the Southwest Atlantic and new records of Stenella coeruleoalba for Brazilian waters. Aquatic Mammals, v. 22, n. 3, p. 185–189, 1996. PANSARD, K. C. A. et al. Feeding ecology of the estuarine dolphin (Sotalia guianensis) on the coast of Rio Grande do Norte, Brazil. Marine Mammal Science, v. 27, n. 4, p. 673–687, 2011. PARO, B. Ecologia trófica da falsa-orca (Pseudorca crassidens) no sul do Brasil: análise de isótopos estáveis e conteúdos estomacais. Universidade Federal do Rio Grande, 2013. PAULY, D. et al. Towards sustainability in world fisheries. Nature, v. 418, n. August, p. 689–695, 2002. PERRIN, W. F. Variation of spotted and spinner porpoise (genus Stenella) in the Eastern Pacific and Hawaii. v. 21, 212p., 1975. PERRIN, W. F. et al. Common bottlenose dolphins (Tursiops truncatus) in California waters: Cranial differentiation of coastal and offshore ecotypes. Marine Mammal Science, v. 27, n. 4, p. 769–792, 2011. PIANKA, E. R. Niche overlap and diffuse competition. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, v. 71, n. 5, p. 2141–2145, 1974. PINELA, A. M. et al. Stable isotope analysis reveals habitat partitioning among marine mammals off the NW African coast and unique trophic niches for two globally threatened species. Marine Ecology Progress Series, v. 416, p. 295–306, 2010. 111 POST, D. M. Using stable isotopes to estimate trophic position: models, methods and assumptions. Ecology, v. 83, n. 3, p. 703–718, 2002. RAMOS, R. M. A. Variação morfológica em Pontoporia blainvillei e Sotalia fluviatilis (Cetacea) na costa sudeste do Brasil. 2001. 181p. Tese (Doutorado em Biociências e Biotecnologia) - Universidade Estadual do Norte Fluminense, Campos dos Goytacazes, 2001. RICCIALDELLI, L. et al. Isotopic assessment of prey and habitat preferences of a cetacean community in the southwestern South Atlantic Ocean. Marine Ecology Progress Series, v. 418, p. 235–248, 2010. RICCIALDELLI, L.; GOODALL, N. Intra-specific trophic variation in false killer whales (Pseudorca crassidens) from the southwestern South Atlantic Ocean through stable isotopes analysis. Mammalian Biology Zeitschrift für Säugetierkunde, v. 80, n. 4, p. 298–302, 2015. ROSÁRIO, R. P.; BEZERRA, M. O.; VINZON, S. B. Dynamics of the saline front in the northern channel of the Amazon river - influence of fluvial flow and tidal range (Brazil). Journal of Coastal Research, v. 2, n. 56, p. 1414–1418, 2009. ROSÁRIO, R. P.; SANTOS, A. S. Contribution to understanding the surface seawater intrusion in the Pará River estuary during low discharge. Proceedings of the 17th Physics of Estuaries and Coastal Seas (PECS), 2014. ROUGHGARDEN, J. Evolution of Niche Width. American Naturalist, v. 106, p. 683–687, 1972. RUBENSTEIN, D. R.; HOBSON, K. A. From birds to butterflies: Animal movement patterns and stable isotopes. Trends in Ecology and Evolution, v. 19, n. 5, p. 256–263, 2004. RUIZ-COOLEY, R. I. et al. Trophic relationships between sperm whales and jumbo squid using stable isotopes of C and N. Marine Ecology Progress Series, v. 277, p. 275–283, 2004. RUIZ-COOLEY, R. I.; ENGELHAUPT, D. T.; ORTEGA-ORTIZ, J. G. Contrasting C and N isotope ratios from sperm whale skin and squid between the Gulf of Mexico and Gulf of California: Effect of habitat. Marine Biology, v. 159, n. 1, p. 151–164, 2012. RYAN, C. et al. Stable isotope analysis of baleen reveals resource partitioning among sympatric rorquals and population structure in fin whales. Marine Ecology Progress Series, v. 479, p. 251–261, 2013. SANTOS, M. C. O. et al. Insights on small cetacean feeding habitats in southeastern Brazil. Aquatic Mammals, v. 28, n. 1, p. 38–45, 2002. SANTOS, M. C. O.; ROSSO, S. Ecological aspects of marine tucuxi dolphins (Sotalia guianensis) based on group size and composition in the Cananéia Estuary, Southeastern Brazil. Latin American Journal of Aquatic Mammals, v. 6, n. 1, p. 71–82, 2007. SECCHI, E. R. The IUCN Red List of Threatened Species, 2012. Disponível em: <www.iucnredlist.org>. Acesso em: 1 ago. 2015. 112 SECCHI, E. R.; DANILEWICZ, D.; OTT, P. H. Applying the phylogeographic concept to identify franciscana dolphin stocks: implications to meet management objectives. Journal of Cetacean Research and Management, v. 5, n. 1, p. 61–68, 2003. SHARIR, Y. et al. Small size in the common bottlenose dolphin Tursiops truncatus in the eastern Mediterranean: A possible case of Levantine nanism. Marine Ecology Progress Series, v. 438, p. 241– 251, 2011. SHOLL, T. G. C. et al. Taxonomic identification of dolphin love charms commercialized in the Amazonian region through the analysis of cytochrome b DNA. Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom, v. 88, n. 06, p. 1207 – 1210, 2008. SICILIANO, S. Review of small cetaceans and Fishery Interactions in Coastal Waters of Brazil. Rep. Int. Whal. Commn (Special Issue 15). Report f the International Whalling Commision, v. 15, p. 241-250, 1994. SICILIANO, S. et al. Confirmed sightings of the Antillean manatee (Trichechus manatus) on the coast of Ilha de Marajó, northern Brazilian coast. JMBA Global Marine Environment, p. 34–35, 2007. SICILIANO, S. et al. REVISÃO DO CONHECIMENTO. Arquivos do Museu Nacional, v. 66, n. 2, p. 381–401, 2008. SICILIANO, S.; FLACH, L. What is so funny about rough-toothed dolphins? MBA Global Marine Environment, v. 5, p. 5, 2007. SILVA, R. L. et al. Structure of a bed of Gracilaria spp. (Rhodophyta) in northeastern Brazil. Botanica Marina, v. 30, p. 517–523, 1987. SIOLI, H. Amazônia: fundamentos da ecologia da maior região de florestas tropicais. Petrópolis: Vozes, 1991. SOUSA, M. et al. Learning with Omar: lessons from a semi-captive orphaned manatee and its environment on the east coast of Pará, Brazil. Sirenews. Number 62, n. October 2014, p. 9, 2014. SOUSA, M. E. M. Análise da ocorrência de peixes-boi com base no Conhecimento Ecológico Local e nos parâmetros ambientais na costa leste da Ilha de Marajó, Pará. 2011. 174p. Dissertação (Mestrado em Biologia Ambiental) - Universidade Federal do Pará, Bragança, 2011. SOUZA-FILHO, P. W. M. et al. Environmental sensitivity index (ESI) mapping of oil spill in the amazon coastal zone: The PIATAM Mar project. Revista Brasileira de Geofisica, v. 27, n. SUPPL. 1, p. 7–22, 2009. SVANBÄCK, R.; BOLNICK, D. I. Intraspecific competition affects the strength of individual specialization: An optimal diet theory method. Evolutionary Ecology Research, v. 7, n. 7, p. 993–1012, 2005. SZCZYGIELSKI, A. et al. Evolution of the Parnaíba Delta (NE Brazil) during the late Holocene. Geo-Marine Letters, v.35, n. 2, p. 105-117, 2014. TAVARES, M. et al. Biogeography of common dolphins (genus Delphinus) in the southwestern Atlantic Ocean. Mammal Review, v. 40, n. 1, p. 40–64, 2010. 113 TOSI, B. C.; MAGALHÃES, F.; GARRI, R. Can the estuarine dolphin (Sotalia guianensis) be classified as Vulnerable Species in Maranhão coast, Northeastern Brazil? Cetacean Society International, v. XVI, n. 2, p. 2–4, 2007. TOSI, C. H.; MAGALHÃES, A. F.; GARRI, R. G. Meat Consumption of a Fraser’s Dolphin (Lagenodelphis hosei) Stranded Alive in the Northern Brazilian Coast. Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom, v. 1, p. 5969, 2008. TRITES, A. W. W. Marine mammal trophic levels and interactions. In: STEELE, JOHN H., THORPE, STEVE A. AND TUREKIAN, K. K. (Ed.). Encyclopedia of Ocean Sciences. San Diego: Academic Press, p. 1628–1633, 2001. VANDER ZANDEN, H. B. et al. Individual specialists in a generalist population: results from a long-term stable isotope series. Biology Letters, v. 6, n. 5, p. 711–714, 2010. VIANNA, J. A. et al. Phylogeography, phylogeny and hybridization in trichechid sirenians: implications for manatee conservation. Molecular Ecology, v. 15, n. 2, p. 433–447, 2006. VIEIRA, J. O. Diferenças alimentares em populações de boto-cinza Sotalia guianensis (Van Benédén, 1864) (Cetacea, Delphinidae) nas costas Norte e Nordeste brasileira. 2014. 50p. Dissertação (Mestrado em Zoologia) - Universidade Federal do Pará, Museu Paraense Emílio Goeldi, Belém, 2014. VIGHI, M. et al. Stable isotopes indicate population structuring in the Southwest Atlantic population of right whales (Eubalaena australis). PLosOne, v. 9, n. 3, 2014. WALKER, J.; MACKO, S. Dietary studies of marine mammals using stable carbon and nitrogen isotopic ratios of teeth. Marine Mammal Science, v. 15, n. 2, p. 314–334, 1999. WHITEHEAD, H. Sperm whale. In: PERRIN, W. F.; WURSIG, B.; THEWISSEN, J. (Eds.). Encyclopedia of Marine Mammals. Elsevier, p. 1091–1097, 2009. WITTEVEEN, B. H.; WORTHY, G. A J.; ROTH, J. D. Tracing migratory movements of breeding North Pacific humpback whales using stable isotope analysis. Marine Ecology Progress Series, v. 393, p. 173–183, 2009. ZENTENO, L. et al. Stable isotopes of oxygen reveal dispersal patterns of the South American sea lion in the southwestern Atlantic Ocean. Journal of Zoology, v. 291, n. 2, p. 119-126, 2013.