sabouraud chloramphenicol gentamicin actidione

Transcrição

SABOURAUD CHLORAMPHENICOL GENTAMICIN ACTIDIONE AGAR
56596
AGAR / SELECTIVE MEDIUM FOR THE ISOLATION OF DERMATOPHYTES AND OTHER FUNGI
1- INTENDED USE
Sabouraud Chloramphenicol Gentamicin Actidione Agar is recommended for the isolation of Dermatophytes and other
pathogenic fungi from biological specimens, particularly when contaminated by mixed fungal and bacterial flora.
2- PRINCIPLE
The presence of an antibiotic mixture (chloramphenicol and gentamicin) inhibits the growth of almost all bacterial species.
Actidione inhibits the growth of saprophytic fungi, but also that of certain yeasts (Candida tropicalis, C. glabrata, Cryptococcus
neoformans), and some strains of Aspergillus and Fusarium.
3- HOW SUPPLIED
• Ready to use medium:
- 25 x 8 ml slant tubes
code 56596
4- THEORETICAL COMPOSITION (g/l of distilled water)
This agar is prepared according to the theoretical formula of medium C of the European Pharmacopoeia (1), with the addition of
chloramphenicol, gentamicin and actidione.
Peptones
10
Glucose
40
Agar
12
5- STORAGE
• Ready to use medium: at +2-8°C.
The expiry date and batch number are indicated on the packaging.
6- INSTRUCTIONS
Material:
• Material provided: Sabouraud Chloramphenicol Gentamicin Actidione agar.
Inoculation:
All biological specimens can be inoculated onto Sabouraud Chloramphenicol Actidione Agar. Refer to current recommendations
for storage of biological specimens (2).
Incubation:
The incubation temperature and incubation time vary according to the characteristics and the type of fungus examined.
These parameters are determined by the user.
Temperature:
As a rule, the optimal temperature for the detection of fungi in biological specimens is 30-35°C.
The incubation of several culture media at different temperatures (25-27°C, 30-35°C) may be justified when testing for particular
fungal species.
Duration:
The incubation time varies according to the nature of the specimen and the fungal species suspected.
Recommendations are generally as follows:
• For all specimens examined for the presence of yeasts (except C. neoformans): incubation for 24 to 72 hours with daily
examination of the culture.
• For deep specimens: incubation for 1 to 2 weeks with daily examination of the culture.
• Culture of integuments looking for Dermatophytes requires an incubation for 3 to 4 weeks with twice-weekly examination.
• When C. neoformans or a dimorphic fungus is suspected in CSF or any other specimen: incubation for 1 month with daily
examination of the culture.
Reading - Interpretation:
• After incubation, observe the growth of micro-organisms.
• Perform identification of the fungus (or fungi) isolated from clearly defined colonies: macroscopic and microscopic
morphological examination, biochemical tests*, complementary tests.
* The identification of yeast colonies (matt white appearance, 1 to 2 mm in diameter) can be performed with the Auxacolor® 2
gallery (code 56513).
7- PERFORMANCE/QUALITY CONTROL OF THE TEST
• Appearance of the ready to use medium: amber-coloured agar
• The growth performances of Sabouraud Chloramphenicol Gentamicin Actidione medium are verified with the following
strains:
STRAINS
Candida albicans ATCC 26790
Candida tropicalis ATCC 750
Candida glabrata
Cryptococcus neoformans
Trichophyton rubrum
Trichophyton violaceum
Epidermophyton floccosum
INCUBATION CONDITIONS
24-48 hours at 30-35°C
24-48 hours at 30-35°C
24-48 hours at 30-35°C
24-48 hours at 30-35°C C
7 days at 30-35°C and 7 days at 20-25°C
Microsporum canis
Staphylococcus aureus ATCC
25923
Pseudomonas aeruginosa
ATCC 27853
24-48 hours at 35-38°C
CULTURE RESULT
Good growth
Good growth
Good growth
Good growth
Downy surface, red brown pigmented underside
Good growth, violet pigment
Powdery appearance, red brown pigmented
underside
Good growth, chamois, orange yellow underside
No growth
24-48 hours at 35-38°C
No growth
8- QUALITY CONTROL OF THE MANUFACTURER
All manufactured reagents are prepared according to our Quality System, starting from reception of raw material to the final
commercialization of the product. Each lot is submitted to quality control assessments and is only released to the market, after
conforming to pre-defined acceptance criteria. The records relating to production and control of each single lot are kept within
Bio-Rad.
9- LIMITS OF USE
• As actidione can inhibit the growth of certain pathogenic fungi, yeasts such as Candida tropicalis, C. glabrata, Cryptococcus
neoformans, and fungi such as Aspergillus, it is recommended to inoculate a medium without actidione in parallel.
10- REFERENCES
1. Pharmacopée Européenne. Addendum 4.2 de la 4e édition. 2002.
2. Basic Laboratory Procedures Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva. 1991. 1st edition.
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GÉLOSE / MILIEU D'ISOLEMENT SÉLECTIF DES DERMATOPHYTES ET AUTRES CHAMPIGNONS
IVD
1- APPLICATION
La gélose Sabouraud chloramphénicol gentamicine actidione (Sabouraud Chloramphenicol Gentamicin Actidione Agar) est
recommandée pour l’isolement des Dermatophytes et de certaines levures à partir de prélèvements biologiques particulièrement
contaminés par une flore mixte fongique et bactérienne.
2- PRINCIPE
La présence d’un mélange antibiotique (chloramphénicol et gentamicine) inhibe la croissance de la presque totalité des espèces
bactériennes. L’actidione inhibe la croissance des champignons saprophytes, mais aussi de certaines levures (Candida tropicalis,
C. glabrata, Cryptococcus neoformans), et de certains Aspergillus et Fusarium.
3- PRÉSENTATION
• Milieu prêt à l’emploi
- 25 tubes inclinés de 8 ml
code 56596
4- COMPOSITION THÉORIQUE (en g/l d’eau distillée)
Cette gélose est préparée selon la formule théorique du milieu C de la Pharmacopée Européenne (1), additionnée de
chloramphénicol, de gentamicine et d’actidione.
Peptones
10
Glucose
40
Agar
12
5- CONSERVATION
• Milieu en tubes : à + 2 - 8°C.
La date de péremption et le numéro de lot sont indiqués sur le conditionnement.
6- UTILISATION
Matériel :
• Matériel fourni : gélose Sabouraud Chloramphénicol Gentamicine Actidione.
Ensemencement :
Tout prélèvement biologique peut être ensemencé sur gélose Sabouraud Chloramphénicol Gentamicine Actidione. Pour la
conservation des échantillons biologiques, se référer aux recommandations en vigueur (2).
Incubation :
La température et la durée d’incubation varient selon la nature et le type de champignon recherché.
Ces paramètres sont de la responsabilité de l’utilisateur.
1
Température :
En règle générale, la température optimale pour la détection des champignons dans les prélèvements biologiques est de 30-35°C.
Lors de la recherche d’espèces fongiques particulières, l’incubation de plusieurs milieux de culture à des températures différentes
(25-27°C, 30-35°C…) peut être justifié.
Durée :
La durée d’incubation varie en fonction de la nature du prélèvement et de l’espèce fongique suspectée.
Les recommandations sont généralement les suivantes :
• Pour tout prélèvement dans lequel des levures (excepté C. neoformans) sont recherchées : incubation 24 à 72 H avec observation
journalière des cultures.
• Pour les prélèvements profonds : incubation 1 à 2 semaines avec examen quotidien des cultures.
• La culture de phanères pour recherche de Dermatophytes nécessite une incubation pendant 3 à 4 semaines avec examen bihebdomadaire .
• En cas de suspicion de C. neoformans ou de champignon dimorphique dans un L.C.R. ou tout autre prélèvement : incubation
pendant 1 mois avec examen quotidien des cultures
Lecture - Interprétation :
• Après incubation, observer la croissance des micro-organismes
• Réaliser l’identification du/des champignons isolés à partir de colonies bien individualisées : examen morphologique
macroscopique et microscopique, tests biochimiques*, tests complémentaires.
*L’identification des colonies de levures (aspect blanc, mat, diamètre 1-2 mm) peut être réalisée à l’aide de la galerie Auxacolor® 2
(code 56513).
7- PERFORMANCES / CONTRÔLE QUALITÉ DU TEST
• Aspect du milieu prêt à l’emploi : gélose ambrée
• Les performances culturales du milieu Sabouraud Chloramphénicol Gentamicine Actidione sont contrôlées à l’aide des souches
suivantes :
SOUCHES
CONDITION D’INCUBATION
24-48H à 30-35°C
RÉSULTAT DE LA CULTURE
Bonne croissance
24-48H à 30-35°C
Bonne croissance
Candida glabrata
24-48H à 30-35°C
Bonne croissance
Trichophyton rubrum
7 jours à 30-35°C et 7 jours à 20-25°C
Dessus duveteux, revers pigmenté en rouge brun
Bonne croissance, pigment violet
aspect poudreux, revers pigmenté en rouge brun
Staphylococcus aureus ATCC 25923
24-48H à 35-38°C
Inhibition
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853
24-48H à 35-38°C
Inhibition
8- CONTRÔLE QUALITÉ DU FABRICANT
Tous les produits fabriqués et commercialisés par la société Bio-Rad sont placés sous un système d'assurance qualité de la réception
des matières premières jusqu'à la commercialisation des produits finis. Chaque lot de produit fini fait l'objet d'un contrôle de qualité
et n'est commercialisé que s'il est conforme aux critères d'acceptation. La documentation relative à la production et au contrôle de
chaque lot est conservée par le fabricant.
9- LIMITES D’UTILISATION
• L’Actidione pouvant inhiber le développement de certains champignons pathogènes : levures comme Candida tropicalis,
C. glabrata, Cryptococcus neoformans, et moisissures comme Aspergillus, il est recommandé d’ensemencer en parallèle un milieu
sans actidione.
10-RÉFÉRENCES BIBLIOGRAPHIQUES
1.Pharmacopée Européenne. Addendum 4.2 de la 4e édition. 2002.
2.Basic Laboratory Procedures Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva. 1991. 1st edition.
Bio-Rad
3, boulevard Raymond Poincaré
92430 Marnes-la-Coquette France
Tel. : +33 (0) 1 47 95 60 00
Fax : +33 (0) 1 47 41 91 33
07/2003
code: 18071 - A4
2
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AGAR / MEDIO SELECTIVO PARA EL AISLAMIENTO DE DERMATOPHYTES Y OTROS HONGOS
1- USO PREVISTO
El agar Sabouraud cloranfenicol gentamicina actidiona se recomienda para el aislamiento de Dermatophytes y otros hongos
patógenos de muestras biológicas, especialmente cuando están contaminadas por flora mixta fúngica y bacteriana.
2- PRINCIPIO
La presencia de una mezcla de antibióticos (cloranfenicol y gentamicina) inhibe el crecimiento de casi todas las especies
bacterianas. La actidiona inhibe el crecimiento de hongos saprofitas, pero también de determinadas levaduras (Candida
tropicalis, C. glabrata, Cryptococcus neoformans), y algunas cepas de Aspergillus y Fusarium.
3- CÓMO SE SUMINISTRA
• Medio listo para usar:
- 25 tubos inclinados de 8 ml
código 56596
4- COMPOSICIÓN TEÓRICA (g/l de agua destilada)
Este agar se elabora de acuerdo con la fórmula teórica del medio C de la Farmacopea Europea (1), con la adición de
cloranfenicol, gentamicina y actidiona.
Peptonas
10
Glucosa
40
Agar
12
5- CONSERVACIÓN
• Medio listo para usar: a +2-8°C
La fecha de caducidad y el número de lote están indicados en el envasado.
6- INSTRUCCIONES
Material:
• Material suministrado: Agar Sabouraud cloranfenicol gentamicina actidiona.
Inoculación:
Todas las muestras biológicas pueden inocularse en agar Sabouraud cloranfenicol actidiona. Consúltense las
recomendaciones actuales para la conservación de muestras biológicas (2).
Incubación:
La temperatura y el tiempo de incubación varían de acuerdo con las características y el tipo de hongos examinados.
Estos parámetros son determinados por el usuario.
Temperatura:
Como norma, la temperatura óptima para la detección de hongos en muestras biológicas es de 30-35°C.
Puede estar justificada la incubación de varios medios de cultivo a diferentes temperaturas (25-27°C, 30-35°C) cuando se
estudian especies concretas de hongos.
Duración:
El tiempo de incubación varía de acuerdo con la naturaleza de la muestra y la especie de hongo sospechada.
Generalmente, las recomendaciones son las siguientes:
• Para todas las muestras examinadas para la presencia de levaduras (excepto C. neoformans): incubación durante 24 a 72
horas con examen diario del cultivo.
• Para las muestras profundas: incubación durante 1 a 2 semanas con examen diario del cultivo.
• El cultivo de integumentos en busca de Dermatophytes exige una incubación durante 3 a 4 semanas con examen dos
veces por semana.
• Cuando se sospechan C. neoformans o un hongo dimórfico en el LCR o cualquier otra muestra: incubación durante 1 mes
con examen diario del cultivo.
Lectura – Interpretación:
• Después de la incubación, observe el crecimiento de microrganismos.
• Realice la identificación del hongo (u hongos) aislados de colonias claramente definidas: examen morfológico macroscópico
y microscópico, pruebas bioquímicas*, pruebas complementarias.
* La identificación de colonias de levaduras (aspecto blanco mate, de 1 a 2 mm de diámetro) puede realizarse con la galería
Auxacolor® 2 (código 56513).
7- RENDIMIENTO / CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA
• Aspecto del medio listo para usar: agar de color ámbar.
• Los rendimientos de crecimiento del agar Sabouraud cloranfenicol gentamicina actidiona se verifican con las siguientes
cepas:
CEPAS
Candida glabrata
Trichophyton rubrum
CONDICIONES DE INCUBACIÓN
24-48 horas a 30-35°C
24-48 horas a 30-35°C
24-48 horas a 30-35°C
24-48 horas a 30-35°C
7 días a 30-35°C y 7 días a 20-25°C
7 días a 30-35°C y 7 días a 20-25°C
7 días a 30-35°C y 7 días a 20-25°C
Microsporum canis
7 días a 30-35°C y 7 días a 20-25°C
Staphylococcus aureus
ATCC 25923
ATCC 27853
24-48 horas a 35-38°C
RESULTADO DEL CULTIVO
Buen crecimiento
Buen crecimiento
Buen crecimiento
Buen crecimiento
Superficie vellosa, superficie inferior pigmentada
roja-marrón
Buen crecimiento, pigmento violeta
Aspecto polvoriento, superficie inferior pigmentada
roja marrón
Buen crecimiento, superficie inferior con aspecto
de gamuza, naranja amarillo
Sin crecimiento
24-48 horas a 35-38°C
Sin crecimiento
8- CONTROL DE CALIDAD DEL FABRICANTE
Todos los reactivos fabricados se elaboran según nuestro sistema de calidad, que va desde la recepción de las materias
primas hasta la comercialización final del producto. Cada lote se somete a valoraciones de control de calidad y sale al mercado
sólo cuando está de acuerdo con los criterios de aceptación predefinidos. Los registros relativos a la producción y al control de
cada lote se conservan en Bio-Rad.
9- LÍMITES DE USO
• Como la actidiona puede inhibir el crecimiento de determinados hongos patógenos, levaduras como Candida tropicalis, C.
glabrata, Cryptococcus neoformans y hongos como Aspergillus, se recomienda inocular en paralelo un medio sin actidiona.
10- BIBLIOGRAFÍA
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AGAR / SELEKTIVES MEDIUM FÜR DIE ISOLIERUNG VON DERMATOPHYTEN UND ANDEREN PILZEN
1- VERWENDUNGSZWECK
Sabouraud-Chloramphenicol-Gentamicin-Actidion-Agar wird für die Isolierung von Dermatophyten und anderen pathogenen
Pilzen aus biologischen Proben, insbesondere von mit gemischter Pilz- und Bakterienflora kontaminierten Proben.
2- PRINZIP
Das Vorliegen einer Antibiotikamischung (Chloramphenicol und Gentamicin) hemmt das Wachstum der meisten
Bakteriengattungen. Actidion hemmt das Wachstum saprophyter Pilze und mancher Hefen (Candida tropicalis, C. glabrata,
Cryptococcus neoformans) sowie mancher Aspergillus- und Fusarium-Stämme.
3•
-
DARREICHUNGSFORM
Gebrauchsfertiges Medium:
25 x 8 ml-Schrägröhrchen
Kat.-Nr. 56596
4- THEORETISCHE ZUSAMMENSETZUNG (g/l destilliertes Wasser)
Dieser Agar wird gemäß der theoretischen Formel des Mediums C der Europöischen Pharmakopoe (1) mit Zugabe von
Chloramphenicol, Gentamicin und Actidion hergestellt.
Peptone
10
Glukose
40
Agar
12
LAGERUNG
Gebrauchsfertiges Medium: bei +2 - 8°C.
Das Verfallsdatum und die Chargennummer sind auf der Verpackung angegeben.
5•
6- GEBRAUCHSANWEISUNG
Material:
• Geliefertes Material: Sabouraud-Chloramphenicol-Gentamicin-Actidion-Agar.
Beimpfung:
Sabouraud-Chloramphenicol-Gentamicin-Actidion-Agar kann mit allen biologischen Proben
Lagerbedingungen für biologische Proben entnehmen Sie bitte den aktuellen Empfehlungen (2).
beimpft
werden.
Die
Inkubation:
Die Inkubationstemperatur und –zeit variiert gemäß den Merkmalen und der Art des zu testenden Pilzes.
Diese Parameter werden vom Benutzer festgelegt.
Temperatur:
In der Regel liegt die optimale Temperatur für den Nachweis von Pilzen zwischen 30 und 35°C.
Für unterschiedliche Pilzgattungen kann jedoch eine Inkubation mehrerer Kulturmedien bei unterschiedlichen Temperaturen
(25-27°C, 30-35°C) erforderlich sein.
Dauer:
Die Inkubationszeit variiert nach Probentyp und vermuteter Pilzgattung.
Folgendes wird empfohlen:
•
Für alle auf das Vorliegen von Hefen getesteten Proben (außer C. neoformans): Inkubation über 24 bis 72 Stunden mit
täglicher Untersuchung der Kultur.
•
Für tiefe Proben: Inkubation über 1 bis 2 Wochen mit täglicher Untersuchung der Kultur.
•
Hautkultur, die auf Dermatophyten getestet wird, erfordert eine Inkubation von 3 bis 4 Wochen mit einer Untersuchung
zweimal pro Woche.
•
Bei Verdacht auf C. neoformans oder einen dimorphen Pilz im Liquor oder einer anderen Probe: Inkubation über 1 Monat
mit täglicher Untersuchung der Kultur.
Ablesen - Interpretation der Ergebnisse:
•
Nach der Inkubation auf Wachstum von Mikroorganismen untersuchen.
•
Den auf eindeutig definierten Kolonien isolierten Pilz (bzw. die Pilze) identifizieren: mittels makroskopischer und
mikroskopischer morphologischer Untersuchung, biochemischer Tests* und zusätzlicher Tests.
* Die Identifizierung von Hefekolonien (matte weiße Erscheinung von einem Durchmesser von 1 bis 2 mm) kann mit Auxacolor®
2 Gallery (Kat.-Nr. 56513) durchgeführt werden.
7-
•
•
LEISTUNG/QUALITÄTSKONTROLLE DES TESTS
Erscheinung des gebrauchsfertigen Mediums: bernsteinfarbener Agar.
Die Leistungsmerkmale des Wachstums auf Sabouraud-Chloramphenicol-Gentamicin-Actidion-Mediums werden mit
folgenden Stämmen überprüft:
STÄMME
Candida glabrata
Trichophyton rubrum
INKUBATIONSBEDINGUNGEN
24-48 Stunden bei 30-35°C
7 Tage bei 30-35°C und 7 Tage bei 20-25°C
Microsporum canis
ATCC 25923
ATCC 27853
KULTURERGEBNIS
Gutes Wachstum
Gutes Wachstum
Gutes Wachstum
Gutes Wachstum
Flaumige Oberfläche, rot-braun pigmentierte
Unterseite
Gutes Wachstum, violett pigmentiert
Pulverige Erscheinung, rot-braun pigmentierte
Unterseite
Gutes Wachstum, Chamois, orange-gelbe
Unterseite
Kein Wachstum
Kein Wachstum
8- QUALITÄTSKONTROLLE DES HERSTELLERS
Alle von der Firma Bio-Rad hergestellten Reagenzien unterliegen einem Qualitätssicherungssystem vom Rohstoffeingang bis
zur Vermarktung der Fertigprodukte. Jede Fertigproduktcharge wird einer Qualitätskontrolle unterzogen und nur dann verkauft,
wenn sie den Freigabekriterien entspricht. Die Unterlagen bezüglich Herstellung und Kontrolle der einzelnen Chargen werden
bei Bio-Rad aufbewahrt.
9- GRENZEN DES TESTS
•
Da Actidion das Wachstum von manchen pathogenen Pilzen und Hefen wie Candida tropicalis, C. glabrata, Cryptococcus
neoformans sowie von Pilzen wie Aspergillus hemmen kann, wird empfohlen, parallel ein Medium ohne Actidion zu
beimpfen.
10- LITERATUR
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AGAR / MEZZO SELETTIVO PER L'ISOLAMENTO DI DERMATOFITI E ALTRI FUNGHI
1- USO PREVISTO
L'agar Sabouraud Cloramfenicolo Gentamicina Actidione è indicato per l'isolamento di dermatofiti e altri funghi patogeni da
campioni biologici, in particolare in caso di contaminazione da parte di flora fungina e batterica mista.
2- PRINCIPIO
La presenza di una miscela antibiotica (cloramfenicolo e gentamicina) inibisce la crescita di quasi tutte le specie batteriche.
L'actidione inibisce la crescita dei funghi saprofiti, ma anche di alcuni lieviti (Candida tropicalis, C. glabrata, Cryptococcus
neoformans), e di alcuni ceppi di Aspergillus e Fusarium.
3•
PRESENTAZIONE
Mezzo pronto all’uso:
- 25 x 8 ml tubi di coltura a becco di clarino
codice 56596
4- COMPOSIZIONE TEORICA (g/l di acqua distillata)
Questo agar è preparato secondo la formula teorica del mezzo C della Farmacopea europea (1), con l'aggiunta di
cloramfenicolo, gentamicina e actidione.
Peptoni
10
Glucosio
40
Agar
12
CONSERVAZIONE
Mezzo pronto all’uso: a +2-8°C.
La data di scadenza e il numero di lotto sono indicati sulla confezione.
5-
•
6- ISTRUZIONI
Materiale:
•
Materiale fornito: agar Sabouraud Cloramfenicolo Gentamicina Actidione.
Inoculazione:
Tutti i tipi di campione biologico possono essere inoculati sull'agar Sabouraud Cloramfenicolo Actidione. Per la conservazione di
campioni biologici, fare riferimento alle raccomandazioni vigenti (2).
Incubazione:
La temperatura e il tempo di incubazione possono variare a seconda delle caratteristiche e del tipo di fungo esaminato.
Questi parametri sono determinati dall'utente.
Temperatura:
Come regola generale, la temperatura ottimale per l'individuazione di funghi all'interno di campioni biologici è di 30-35°C.
L'incubazione di svariati mezzi di coltura a temperature diverse (25-27°C, 30-35°C) potrebbe essere giustificata nel caso in cui
si stiano testando particolari specie di funghi.
Durata:
Il tempo di incubazione può variare a seconda della natura del campione e della specie di fungo presunta.
Le raccomandazioni consistono generalmente in quanto segue:
•
Per tutti i campioni esaminati per la presenza di lieviti (eccetto C. neoformans): incubazione da 24 a 72 ore con esame
giornaliero della coltura.
•
Per i campioni prelevati in profondità: incubazione da 1 a 2 settimane con esame giornaliero della coltura.
•
La coltura di tegumenti per l'individuazione di Dermatophytes richiede un'incubazione della durata di 3 - 4 settimane con
esame due volte alla settimana.
•
In caso di sospetto C. neoformans o fungo dimorfico all'interno di un LCR o qualsiasi altro campione: incubazione per
1 mese con esame giornaliero della coltura.
Lettura – interpretazione:
•
In seguito all'incubazione, osservare la crescita di micro-organismi.
•
Effettuare l'identificazione del fungo (o funghi) isolati rispetto a colture chiaramente definite mediante: esame morfologico
macroscopico e microscopico, test biochimici*, test complementari.
* L'identificazione delle colonie di lieviti (aspetto bianco opaco, diametro da 1 a 2 mm ) può essere effettuata mediante la
galleria Auxacolor® 2 (codice 56513).
7-
•
•
CONTROLLO DI QUALITÀ / PRESTAZIONE DEL TEST
Aspetto del mezzo pronto all’uso: agar color ambra
Le prestazioni di crescita del mezzo Sabouraud Cloramfenicolo Gentamicina Actidione sono verificate usando i seguenti
ceppi:
CEPPI
Candida glabrata
Trichophyton rubrum
CONDIZIONI DI INCUBAZIONE
24 - 48 ore a 30-35°C
24 - 48 ore a 30-35°C
24 - 48 ore a 30-35°C
24 - 48 ore a 30-35°C
7 giorni a 30-35°C e 7 giorni a 20-25°C
Microsporum canis
24-48 ore a 35-38°C
24-48 ore a 35-38°C
RISULTATO DELLA COLTURA
Crescita idonea
Crescita idonea
Crescita idonea
Crescita idonea
Superficie lanuginosa, parte inferiore con
pigmentazione rosso marrone
Crescita idonea, pigmentazione viola
Aspetto polverulento, parte inferiore con
pigmentazione rosso marrone
Crescita idonea, parte inferiore color
camoscio, arancio-giallo
Nessuna crescita
Nessuna crescita
8- CONTROLLO DI QUALITÀ DEL PRODUTTORE
Tutti i reagenti realizzati sono preparati in base al nostro Sistema di Assicurazione di Qualità dal ricevimento delle materie
prime, alla commercializzazione finale del prodotto. Ciascun lotto di prodotto finito è sottoposto a un controllo di qualità e viene
messo in commercio soltanto se risulta conforme ai criteri di approvazione predefiniti. La documentazione relativa alla
produzione e al controllo di ciascun singolo lotto è conservata presso Bio-Rad.
9•
LIMITI DI UTILIZZO
Dal momento che l'actidione inibisce la crescita di alcuni funghi patogeni, lieviti come ad esempio Candida tropicalis,
C. glabrata, Cryptococcus neoformans, e funghi quali l'Aspergillus, si raccomanda di inoculare un mezzo senza l'actidione
in parallelo.
10- BIBLIOGRAFIA
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GELOSE / MEIO SELECTIVO PARA ISOLAMENTO DE DERMATÓFITOS E OUTROS FUNGOS
1- UTILIZAÇÃO PRETENDIDA
A Gelose Sabouraud com Cloranfenicol, Gentamicina e Actidiona está recomendada para o isolamento de Dermatófitos e
outros fungos patogénicos a partir de amostras biológicas, particularmente quando contaminadas por uma flora fúngica e
bacteriana mista.
2- PRINCÍPIO
A presença de uma associação de antibióticos (cloranfenicol e gentamicina) inibe o crescimento de quase todas as espécies
bacterianas. A actidiona inibe o crescimento, não só de fungos saprófitas, mas também de certas leveduras (Candida tropicalis,
C. glabrata, Cryptococcus neoformans) e de algumas estirpes de Aspergillus e Fusarium.
3- APRESENTAÇÃO
• Meio pronto a usar:
- 25 tubos inclinados x 8 ml
código 56596
4- COMPOSIÇÃO TEÓRICA (g/l de água destilada)
Esta gelose é preparada em conformidade com a fórmula teórica do meio C da Farmacopeia Europeia (1), com a adição de
cloranfenicol, gentamicina e actidiona.
Peptonas
10
Glucose
40
Gelose
12
5- CONSERVAÇÃO
• Meio pronto a usar: a +2-8°C.
O prazo de validade e o número do lote estão indicados na embalagem.
6- INSTRUÇÕES
Material:
• Material fornecido: Gelose Sabouraud com Cloranfenicol, Gentamicina e Actidiona.
Inoculação:
Todas as amostras biológicas podem ser inoculadas na gelose Sabouraud com Cloranfenicol, Gentamicina e Actidiona.
Consulte as actuais recomendações para a conservação de amostras biológicas (2).
Incubação:
A temperatura e o tempo de incubação variam em função das características e do tipo de fungo analisado.
Estes parâmetros são determinados pelo utilizador.
Temperatura:
Como regra geral, a temperatura óptima para a detecção de fungos em amostras biológicas é de 30-35°C.
Poderá justificar-se a incubação de vários meios de cultura a temperaturas diferentes (25-27°C, 30-35°C) quando se pesquisa
alguma espécie de fungo em particular.
Duração:
O tempo de incubação varia consoante a natureza da amostra e a espécie de fungo da qual se suspeita.
De um modo geral, são as seguintes as recomendações:
• Para todas as espécies analisadas para pesquisa de leveduras (excepto C. neoformans): incubação durante 24 a 72 horas
com observações diárias da cultura.
• Para amostras profundas: incubação durante 1 a 2 semanas com observações diárias da cultura.
• A cultura de tegumentos para pesquisa de Dermatófitos requer uma incubação durante 3 a 4 semanas com observações
duas vezes por semana.
• Quando se suspeita da presença de C. neoformans ou de um fungo dimórfico no CSF ou em qualquer outra amostra:
incubação durante 1 mês com observações diárias da cultura.
Leitura - Interpretação:
• Após a incubação, observe o crescimento de microrganismos.
• Proceda à identificação do fungo (ou fungos) isolados a partir de colónias claramente definidas: observação morfológica
macroscópica e microscópica, testes bioquímicos*, ensaios complementares.
* A identificação das colónias das leveduras (aspecto branco mate, 1 a 2 mm de diâmetro) pode ser efectuada com a galeria
Auxacolor® 2 (código 56513).
7- DESEMPENHO/CONTROLO DE QUALIDADE DO ENSAIO
• Aspecto do meio pronto a usar: gelose transparente com uma coloração âmbar
• As taxas de crescimento do meio de Sabouraud com Cloranfenicol, Gentamicina e Actidiona são verificadas com as
seguintes estirpes:
ESTIRPES
Candida glabrata
Trichophyton rubrum
CONDIÇÕES DE INCUBAÇÃO
24-48 horas a 30-35°C
24-48 horas a 30-35°C
24-48 horas a 30-35°C
24-48 horas a 30-35°C
7 dias a 30-35°C e 7 dias a 20-25°C
7 dias a 30-35°C e 7 dias a 20-25°C
7 dias a 30-35°C e 7 dias a 20-25°C
Microsporum canis
7 dias a 30-35°C e 7 dias a 20-25°C
24-48 horas a 35-38°C
24-48 horas a 35-38°C
RESULTADO DA CULTURA
Bom crescimento
Bom crescimento
Bom crescimento
Bom crescimento
Superfície penugenta, reverso pigmentado de
vermelho acastanhado
Bom crescimento, pigmento violeta
Aspecto pulverulento, reverso pigmentado de
vermelho acastanhado
Bom crescimento, colónias lanosas, reverso
laranja amarelado
Inexistência de crescimento
Inexistência de crescimento
8- CONTROLO DE QUALIDADE DO FABRICANTE
Todos os reagentes fabricados são preparados de acordo com o nosso Sistema de Qualidade, desde a recepção das matérias
primas até à comercialização final do produto. Cada lote é submetido a avaliações de controlo de qualidade, sendo apenas
colocado no mercado se estiver em conformidade com os critérios de aceitação pré-definidos. Os registos relativos à produção
e controlo de cada lote são conservados pela Bio-Rad.
9- LIMITES PARA A SUA UTILIZAÇÃO
• Dado que a actidiona pode inibir o crescimento de certos fungos patogénicos, como é o caso das leveduras Candida
tropicalis, C. glabrata, Cryptococcus neoformans e dos fungos Aspergillus, recomenda-se a inoculação em paralelo de um
meio sem actidiona.
10- REFERÊNCIAS
56596
AGAR / SELEKTIVT MEDIUM FÖR ISOLERING AV DERMATOFYTER OCH ANDRA SVAMPAR
1- ANVÄNDNINGSOMRÅDE
Sabouraud kloramfenikol-gentamicin-actidion-agar rekommenderas för isolering av dermatofyter och andra patogena
svampar från biologiska prover, i synnerhet då dessa är förorenade med en blandad svamp- och bakterieflora.
2- PRINCIP
Närvaron av en antibiotikablandning (kloramfenikol och gentamicin) hämmar tillväxt av nästan alla bakteriearter. Actidion
hämmar tillväxten av saprofytisk svamp, men även av vissa jästsvampar (Candida tropicalis, C. glabrata, Cryptococcus
neoformans) och vissa stammar av Aspergillus och Fusarium.
3•
-
INNEHÅLL
Medium färdigt att använda:
25 x 8 ml lutande rör
kod 56596
4- TEORETISK SAMMANSÄTTNING (i g/l destillerat vatten)
Denna agar bereds i enlighet med den teoretiska formeln för medium C från Europeiska farmakopén (1) med tillsats av
kloramfenikol, gentamicin och actidion.
Peptoner
10
Glukos
40
Agar
12
FÖRVARING
Medium färdigt att använda: i +2–8 °C.
Utgångsdatum och partinummer står på förpackningen.
5•
6- INSTRUKTIONER
Material:
• Material som medföljer: Sabouraud kloramfenikol-gentamicin-actidion-agar.
Inokulering:
Alla biologiska prover kan inokuleras på Sabouraud kloramfenikol-actidion-agar. Följ aktuella rekommendationer vid förvaring av
biologiska prover (2).
Inkubering:
Inkuberingstemperatur och inkuberingstid varierar beroende på egenskaperna för och typen av svamp som undersöks.
Dessa parametrar bestäms av användaren.
Temperatur:
Som regel är optimal temperatur för detektion av svamp i biologiska prover 30–35 °C.
Inkubering av flera odlingsmedier vid olika temperaturer (25–27 °C, 30–35 °C) kan vara motiverat vid test för speciella
svamparter.
Varaktighet:
Inkuberingstiden varierar beroende på provets egenskaper och de svamparter som misstänks.
Följande allmänna rekommendationer kan ges:
•
För alla prover som undersöks med avseende på förekomst av jästsvampar (utom C. neoformans): inkubering i 24 till 72
timmar med daglig undersökning av odlingen.
•
För djupa prover: inkubering i 1 till 2 veckor med daglig undersökning av odlingen.
•
Odling av integument för sökning av Dermatophyta kräver inkubering i 3 till 4 veckor med undersökning två gånger i veckan.
•
När C. neoformans eller en dimorf svamp misstänks i CSF eller något annat prov: inkubering i 1 månad med daglig
undersökning av odlingen.
Avläsning – utvärdering:
•
Efter inkubering iakttas tillväxten av mikroorganismer.
•
Utför identifiering av den svamp (eller de svampar) som isolerats från klart definierade kolonier. makroskopisk och
mikroskopisk morfologisk undersökning, biokemiska tester*, kompletterande tester.
* Identifiering av jästkolonier (matt vitt utseende, 1 till 2 mm i diameter) kan utföras med Auxacolor® 2 galleri (kod 56513).
7•
•
TESTRESULTAT/KVALITETSKONTROLL AV TESTET
Mediets utseende (färdigt att använda): bärnstensfärgad agar
Tillväxtresultatet för Sabouraud kloramfenikol-gentamicin-actidion-medium verifieras med följande stammar:
STAMMAR
Candida glabrata
Trichophyton rubrum
Microsporum canis
ATCC 25923
ATCC 27853
INKUBERINGSFÖRHÅLLANDEN
24–48 timmar i 30–35 °C
24–48 timmar i 30–35 °C
24–48 timmar i 30–35 °C
24–48 timmar i 30–35 °C
7 dagar i 30–35 °C och 7 dagar i 20–25 °C
24–48 timmar i 35–38 °C
ODLINGSRESULTAT
God tillväxt
God tillväxt
God tillväxt
God tillväxt
Luddig yta, rödbrun pigmenterad undersida
God tillväxt, violett pigment
Pudrigt utseende, rödbrun pigmenterad undersida
God tillväxt, sämskskinnsliknande, orange-gul
undersida
Ingen tillväxt
24–48 timmar i 35–38 °C
Ingen tillväxt
8- TILLVERKARENS KVALITETSKONTROLL
Alla reagenser tillverkas och bereds i enlighet med vårt kvalitetssystem, från mottagandet av råmaterial till den slutliga
marknadsföringen av produkten. Varje parti genomgår en kvalitetskontroll och släpps endast ut på marknaden om det
överensstämmer med fördefinierade acceptanskriterier. Handlingar som beskriver produktion och kontroll av varje enskilt parti
sparas hos Bio-Rad.
9- ANVÄNDNINGENS BEGRÄNSNINGAR
•
Eftersom actidion kan hämma tillväxt av vissa patogena svampar, jästsvampar som till exempel Candida tropicalis, C.
glabrata, Cryptococcus neoformans och svampar som till exempel Aspergillus, bör ett medium utan actidion inokuleras
parallellt.
10- REFERENSER
56596
AGAR/SELEKTIVT MEDIUM TIL ISOLATION AF DERMATOPHYTER OG ANDRE SVAMPETYPER
1- FORMÅL
Sabouraud Chloramphenicol Gentamicin Actidion-agar anbefales til isolation af dermatophyter og
sygdomsfremkaldende svampetyper fra biologiske prøver, især ved smitte med en blandet fungal og bakteriel flora.
andre
2- PRINCIP
Forekomsten af en antibiotisk blanding (chloramphenicol og gentamicin) hæmmer væksten af næsten alle bakteriearter.
Actidion hæmmer væksten af saprofytiske svampe, men også væksten af visse gærtyper (Candida tropicalis, C. glabrata,
Cryptococcus neoformans) og visse stammer af Aspergillus og Fusarium.
3- PRODUKTETS INDHOLD
•
Brugsklart medium:
25 x 8 ml-skrårør
kode 56596
4- TEORETISK SAMMENSÆTNING (g/l destilleret vand)
Denne agar forberedes ifølge European Pharmacopoeias (1) teoretiske formel for medium C med tilsættelse af
chloramphenicol, gentamicin og actidion.
Peptoner
10
Glykose
40
Agar
12
OPBEVARING
Brugsklart medium: ved +2-8°C.
Udløbsdatoen og partinummeret er angivet på emballagen.
5-
•
6- BRUGSVEJLEDNING
Materialer:
•
Materialer, der medfølger: Sabouraud Chloramphenicol Gentamicin Actidion-agar.
Inokulation:
Alle biologiske prøver kan inokuleres på Sabouraud Chloramphenicol Actidion-agar. Se de gældende anbefalinger angående
opbevaring af biologiske prøver (2).
Inkubation:
Inkubationstemperaturen og inkubationstiden varierer alt efter, hvilke svampeegenskaber og -typer, der undersøges.
Disse parametre bestemmes af brugeren.
Temperatur:
Som hovedregel er den optimale temperatur for konstatering af svampe i biologiske prøver 30-35°C.
Inkubation af flere dyrkningsmedier ved forskellige temperaturer (25-27°C, 30-35°C) kan evt. retfærdiggøres, når der testes for
bestemte svampetyper.
Varighed:
Inkubationstiden varierer ifølge prøvens art og de formodede svampetyper.
Følgende anbefales normalt:
•
For alle prøver, der undersøges for forekomsten af gær (undtagen C. neoformans): Inkubation i 24-27 timer med daglig
undersøgelse af kulturen.
•
For dybe prøver: Inkubation i 1-2 uger med daglig undersøgelse af kulturen.
•
Dyrkning af hud, hvor der søges efter dermatophyter, kræver inkubation i 3-4 uger med 2 ugentlige undersøgelser.
•
Når C. neoformans eller en dimorfisk svamp formodes i CSF eller en hvilken som helst anden prøve: Inkubation i 1 måned
med daglig undersøgelse af kulturen.
Aflæsning – Fortolkning:
•
Observer væksten af mikroorganismer efter inkubation.
•
Identificer den svamp (eller de svampe), der er isoleret fra klart definerede kolonier: Makroskopisk og mikroskopisk
morfologisk undersøgelse, biokemiske test*, supplerende test.
* Identifikationen af gærkolonier (mathvid præsentation, 1-2 mm i diameter) kan udføres med Auxacolor® 2-galleriet
(kode 56513).
7-
•
•
YDEEVNE/KVALITETSKONTROL AF TESTEN
Brugsklart mediums præsentation: gulfarvet agar
Vækstresultaterne for Sabouraud Chloramphenicol Gentamicin Actidion-mediet bekræftes med følgende stammer:
STAMMER
Candida glabrata
Trichophyton rubrum
Microsporum canis
25923
Pseudomonas aeruginosa ATCC
27853
INKUBATIONSBETINGELSER
24-48 timer ved 30-35°C
24-48 timer ved 30-35°C
24-48 timer ved 30-35°C
24-48 timer ved 30-35°C
7 dage ved 30-35°C og 7 dage ved
20-25°C
20-25°C
20-25°C
20-25°C
24-48 timer ved 35-38°C
24-48 timer ved 35-38°C
KULTURRESULTAT
God vækst
God vækst
God vækst
God vækst
Lodden overflade, rødbrunfarvet underside
God vækst, violet pigment
Pulveragtig overflade, rødbrunfarvet underside
God vækst, chamois, orangegul underside
Ingen vækst
Ingen vækst
8- PRODUCENTENS KVALITETSKONTROL
Alle producerede reagenser fremstilles ifølge vores kvalitetssikringssystem, lige fra modtagelsen af råmaterialerne til
markedsføringen af slutproduktet. Hvert parti af slutproduktet gennemgår kvalitetskontrol og markedsføres kun, hvis det opfylder
de foruddefinerede kvalitetskriterier. Dokumentation vedrørende produktion og kontrol af hvert parti opbevares inden for
virksomheden.
9- BEGRÆNSNINGER FOR BRUG
•
Da actidion kan hæmme væksten af visse sygdomsfremkaldende svampe, gærtyper som f.eks. Candida tropicalis, C.
glabrata, Cryptococcus neoformans og svampetyper som f.eks. Aspergillus, anbefales det at foretage en parallel inokulation
uden actidion.
10- REFERENCER
SABOURAUD-CHLORAMPHENICOL-GENTAMICIN-ACTIDION AGAR
56596
AGAR / SZELEKTÍV TÁPTALAJ DERMATOPHYTONOK ÉS EGYÉB GOMBÁK IZOLÁLÁSÁHOZ
1- FELHASZNÁLÁS
A chloramphenicol-gentamicin-actidionos Sabouraud agart biológiai mintákból származó dermatophytonok és más patogén
gombák izolálásához ajánljuk, különösen akkor, ha a minta gombákból és baktériumokból álló vegyes flórát tartalmaz
2- ALAPELV
Az antibiotikum keverék (chloramphenicol és gentamicin) gátolja a legtöbb baktériumfaj növekedését. Az actidion gátolja a
szaprofita gombák növekedését, ezen felül még egyes élesztőkét (Candida tropicalis, C. glabrata, Cryptococcus neoformans),
és egyes Aspergillus és Fusarium törzsekét is.
3- KISZERELÉS
• Felhasználásra kész közeg:
- 25 db 8 ml-es ferde agaros cső
4- ELVI ÖSSZETÉTEL (g/l desztillált víz)
A táptalajt az Európai Gyógyszerkönyv (1) C
hozzáadásával.
Peptonok
Glükóz
Agar
Végső pH-érték: 5,8 ± 0,2
kódszám 56596
közegének elvi receptje szerint készítjük, chloramphenicol, gentamicin és actidion
10
40
12
5- TÁROLÁS
• A felhasználásra kész közeget +2-8°C között tároljuk.
A szavatossági idő és a gyártási sorozat száma a csomagoláson olvasható.
6- HASZNÁLATI ÚTMUTATÓ
Anyag:
• A forgalmazó által szállított Sabouraud-chloramphenicol-gentamicin-actidion agar.
Leoltás:
A Sabouraud-chloramphenicol-gentamicin-actidion agarra bármilyen biológiai minta leoltható. Ld. biológiai minták tárolására
vonatkozó aktuális ajánlások (2).
Inkubálás:
Az inkubálási hőmérséklet és idő változó lehet a vizsgált gomba típusától és jellegzetességeitől függően.
A paramétereket a felhasználónak kell meghatároznia.
Hőmérséklet:
Alapszabályként elmondható, hogy biológiai mintákban előforduló gombák kimutatásához az optimális hőmérséklet 30-35°C.
Ha kifejezetten csak egyes gombafajokra vizsgálunk, akkor indokolt lehet több táptalajt különböző hőmérsékleteken inkubálni
(25-27°C, 30-35°C).
Időtartam:
Az inkubálási idő a minta jellegétől és a gyanítható gombafajtól függ.
Általában az alábbiakat ajánljuk:
• Az élesztőkre (kivéve a C. neoformans-t) vizsgált minden mintát 24 – 72 órán át inkubáljunk, és naponta vizsgáljuk meg a
tenyészetet.
• Mélységi mintákat 1 – 2 hétig inkubáljunk, és naponta vizsgáljuk meg a tenyészetet.
• Ha kültakarót vizsgálunk dermatophytonokra, akkor 3 – 4 hétig inkubáljunk, és hetente kétszer vizsgáljuk meg a
tenyészetet.
• Ha C. neoformans vagy dimorf gomba jelenlétére gyanakszunk gerincűri folyadékban, vagy bármely más mintában, akkor 1
hónapig inkubáljunk, és naponta vizsgáljuk meg a tenyészetet.
Leolvasás - Kiértékelés:
• Inkubálás után figyeljük meg a mikroorganizmusok növekedését.
• Az egyértelműen elkülönülő telepekből izolált gombát (vagy gombákat) identifikáljuk makro- és mikroszkópos morfológiai
vizsgálattal, biokémiai tesztekkel* és kiegészítő vizsgálatokkal.
* Az élesztőtelepek (matt fehér kinézetűek, 1 – 2 mm átmérőjűek) az Auxacolor® 2-vel identifikálhatók (kódszám 56513).
7- MINŐSÉG/A TÁPTALAJ MINŐSÉGÉNEK ELLENŐRZÉSE
•
A felhasználásra kész közeg megjelenés: víztiszta, borostyánszínű agar.
• A Sabouraud-chloramphenicol-gentamicin-actidion táptalaj szaporítóképességét az alábbi törzsekkel ellenőrizzük:
TÖRZSEK
Candida glabrata
Trichophyton rubrum
Microsporum canis
25923
Pseudomonas aeruginosa ATCC
27853
INKUBÁLÁSI KÖRÜLMÉNYEK
24-48 óra 30-35°C-on
24-48 óra 30-35°C-on
24-48 óra 30-35°C-on
24-48 óra 30-35°C-on
7 nap 30-35°C-on és 7 nap 20-25°Con
24-48 óra 35-38°C-on
TENYÉSZTÉS EREDMÉNYE
Jó növekedés
Jó növekedés
Jó növekedés
Jó növekedés
Pelyhes/dombos felület, alulról nézve
vörösesbarna pigmentáció
Jó növekedés, ibolyaszínű pigment
Porszerű megjelenés, alulról nézve vörösesbarna
pigmentáció
Jó növekedés, szarvasbőrszerű, alulról nézve
narancssárga-sárga
Nincs növekedés
24-48 óra 35-38°C-on
Nincs növekedés
8- A GYÁRTÓNÁL FOLYÓ MINŐSÉGELLENŐRZÉS
Az összes termékünk a saját minőségellenőrző rendszerünk szerint készült, a nyersanyag átvételétől kezdve a termék
forgalmazásáig. Minden egyes gyártási sorozat minőségét ellenőrizzük, és csak akkor hozzuk forgalomba, ha az megfelel az
előre felállított kritériumoknak. Minden sorozat gyártási és minőségellenőrzési jegyzőkönyve megtalálható a Bio-Radnál.
9•
AZ ALKALMAZÁS KORLÁTAI
Mivel az actidion gátolhatja egyes patogén élesztők, például a Candida tropicalis, C. glabrata, Cryptococcus neoformans,
és gombák, például az Aspergillus növekedését, ezért ilyen esetben célszerű párhuzamosan egy actidiont nem tartalmazó
táptalajt is leoltani.
10- HIVATKOZÁSOK
WYBIÓRCZE PODŁOŻE AGAROWE DO IZOLACJI DERMATOFITÓW I INNYCH GRZYBÓW
56596
1- ZASTOSOWANIE
Podłoże agarowe Sabouraud z chloramfenikolem, gentamycyną i aktydionem jest rekomendowane do izolacji
dermatofitów i innych chorobotwórczych grzybów z materiałów klinicznych, zawierających mieszaną florę
grzybiczą i bakteryjną.
2- ZASADA METODY
Mieszanina antybiotyków (chloramfenikol i gentamycyna) hamuje wzrost prawie wszystkich gatunków bakterii.
Aktydion hamuje wzrost grzybów saprofitycznych, a także niektórych drożdżaków (Candida tropicalis, C.glabrata,
Cryptococcus neoformans) oraz niektórych szczepów Aspergillus i Fusarium.
3- POSTAĆ PODŁOŻA
•
Podłoże gotowe do użycia:
- skosy 25 x 8 ml
nr kat. 56596
4- PODSTAWOWE SKŁADNIKI (g/l wody destylowanej)
Podłoże agarowe przygotowane zgodnie ze składem podłoża C opisanym w Farmakopei Europejskiej (1,
uzupełnione aktydionem, gentamycyną i chloramfenikolem.
Peptony
10
Glukoza
40
Agar
15
5- PRZECHOWYWANIE
•
Podłoże gotowe użycia: w temperaturze +2 do 8°C
Data ważności i numer serii znajduje się na opakowaniu.
6- PROCEDURA
Dostarczony materiał:
•
Podłoże Sabouraud Chloramphenicol Gentamicin Actidione Agar.
Inokulacja:
Na podłoże można wysiać każdy materiał kliniczny. Należy zapoznać się z zaleceniami dotyczącymi
przechowywania materiałów biologicznych. (2).
Inkubacja:
Czas i temperatura inkubacji zależy od charakterystyki i typu badanych gatunków grzybów.
Warunki inkubacji określa użytkownik.
Temperatura:
Optymalną temperaturą do wykrywania grzybów w materiałach klinicznych jest 30-35°C. Inkubacja kilku podłoży
w różnych temperaturach (25-27°C, 30-35°C) jest uzasadniona w przypadku badania w kierunku określonych
gatunków grzybów.
Czas inkubacji:
Zależy głównie od rodzaju wysianego materiału oraz spodziewanych gatunków grzybów.
Najczęściej zaleca się:
•
W przypadku wszystkich materiałów klinicznych, badanych na obecność drożdżaków (z wyjątkiem
C.neoformans): inkubacja 24-72 godziny, codzienne oglądanie hodowli.
•
W przypadku głębokich materiałów klinicznych: inkubacja 1-2 tygodnie, codzienne oglądanie hodowli.
•
Hodowle zaszczepione materiałem pobranym ze skóry lub jej wytworów, badanie w kierunku dermatofitów:
inkubacja 3-4 tygodnie, oglądanie hodowli dwa razy w tygodniu.
•
Przy podejrzeniu zakażenia C.neoformans lub grzybami dimorficznymi, po wysianiu płynu mózgowordzeniowego lub innego materiału inkubacja 1 miesiąc, codzienne oglądanie hodowli.
Odczyt i interpretacja
•
Po inkubacji należy obserwować wzrost kolonii drobnoustrojów.
•
Reprezentatywne, pojedyncze kolonie grzybów należy pobrać do identyfikacji: określić cechy morfologiczne,
wykonać preparat mikroskopowy, testy biochemiczne* i uzupełniające.
*Identyfikację kolonii drożdżaków (białe, matowe, o średnicy 1-2 mm) można wykonać za pomocą testu
Auxacolor® 2 (nr kat. 56513).
7- KONTROLA JAKOŚCI
•
Podłoże gotowe do użytku jest bursztynowe.
•
Morfologia kolonii szczepów wzorcowych na podłożu Sabouraud Chloramphenicol Gentamicin Actidione
Agar:
SZCZEP
Candida glabrata
Trichophyton rubrum
Microsporum canis
ATCC 25923
ATCC 27853
WARUNKI INKUBACJI
24-48 godzin w temp. 30-35°C
7 dni w temp. 30-35°C
i 7 dni w temp. 20-25°C
RODZAJ WZROSTU
Wzrost dobry
Wzrost dobry
Wzrost dobry
Wzrost dobry
Kolonie meszkowate, rewers
pigmentowany czerwono-brązowy
Wzrost dobry, pigment fioletowy
24-48 godz. w temp. 35-38°C
Kolonie pudrowane, rewers
pigmentowany czerwono-brązowy
Wzrost dobry, kolonie skórzaste,
rewers pigmentowany
pomarańczowo-żółty
Brak wzrostu
24-48 godz. w temp. 35-38°C
Brak wzrostu
8- KONTROLA JAKOŚCI PRODUCENTA
Każdy produkt Bio-Rad został przygotowany zgodnie z systemem jakości, poczynając od materiałów
wyjściowych, aż do ostatecznego produktu komercyjnego.
Każda seria ostatecznego produktu podlega oznaczeniu kontrolnemu i jest dopuszczona do użytku, jeśli spełnia
wymagane kryteria. Bio-Rad posiada protokoły produkcji i kontroli jakości każdej serii.
9- OGRANICZENIA METODY
•
Ponieważ aktidion może hamować wzrost niektórych grzybów chorobotwórczych, drożdżaków takich, jak
Candida tropicalis, C.glabrata, Cryptococcus neoformans, i grzybów z rodzaju Aspergillus, zaleca się
równoległy posiew badanego materiału na podłoże bez aktidionu.
10- BIBLIOGRAFIA
1. Pharmacopée Européenne, Addendum 4.2 de la IVe édition, 2002, p. 2841.
2. Basic Laboratory Procedures in Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva.1991. 1st edition.
Bio-Rad
3, boulevard Raymond Poincaré
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Tel. : +33 (0) 1 47 95 60 00
Fax : +33 (0) 1 47 41 91 33
11/2003
2

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Transcrição

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