Apresentação do PowerPoint - Encontro de Jovens Pesquisadores

VALIDAÇÃO DE METODOLOGIA ESPECTROFOTOMÉTRICA
PARA A DETERMINAÇÃO DE FRUTOSE
ROMANA MIGLIAVACA GRANDO, MELISSA DEMOLINER, ALANA PERES DE OLIVEIRA, SABRINA CARRA,
MAURICIO MOURA DA SILVEIRA, ELOANE MALVESSI
Laboratório de Bioprocessos – Instituto de Biotecnologia
Sigla do Projeto: GFOR2. E-mail: [email protected]
INTRODUÇÃO
A validação tem como objetivo demonstrar que o método é apropriado para a finalidade pretendida, considerando os parâmetros:
especificidade, linearidade, precisão, exatidão, limite de detecção e quantificação. Entre os métodos qualitativos utilizados para
identificação de cetoses, destaca-se o reagente de Seliwanoff
Frutose
HCl
Resorcinol
Composto furfural
Khan et al. (2006)
Brasil (2003)
Composto de cor
OBJETIVO
Desenvolver e validar uma metodologia de determinação de frutose.
Reagente Seliwanoff: resorcinol 0,05% (m/v) em HCl 4,0 mol/L.
Análise: 0,2 mL de amostra + 1,8 mL de reagente de Seliwanoff
100°C por 15 minutos
3mL de água destilada
Espectrofotômetro, a 486nm.
VALIDAÇÃO
METODOLOGIA
Resolução ANVISA RE n° 899, de 29 de maio de 2003.
• Linearidade → Amostras de 0,1 a 1 g/L
• Exatidão → Nove repetições (teórico/0,5 g/L)
• Precisão intra dia → Nove análises (0,5g/L)
• Precisão inter dia → três dias diferentes (0,5; 0,8 e 1 g/L)
• Limite de Quantificação (LQ)
• Limite de Detecção (LD)
RESULTADOS
Resultados gerais da validação do método espectrofotométrico para a
determinação de frutose.
Parâmetros
Coeficiente de correlação (R2)
Exatidão (%)
Precisão intra dia (DPR%)
Limite de detecção (g/L)
Limite de quantificação (g/L)
Especificidade (%)
Resultados
0,99
97
3,64
0,04
0,14
96
Valores de absorbância obtidos em função da concentração de
frutose. Média e desvio padrão de três curvas, em diferentes dias.
Resultados do teste de precisão inter-dia para amostras com diferentes
concentrações de frutose.
Concentração
de frutose
(g/L)
0,5
Média
Desvio padrão Desvio padrão
(absorbância) (absorbância) relativo (%)
0,25933
0,01002
3,86
0,8
0,407
0,007
1,72
1,0
0,53833
0,01274
2,37
Curva de calibração representativa dos compostos de cor
derivados de furfural após reação de condensação com resorcinol
contido no reagente de Seliwanoff.
CONCLUSÃO
O método espectrofotométrico de determinação de frutose utilizando o reagente de Seliwanoff demonstrou ser uma metodologia
precisa, seletiva, exata, linear e adequada para análises, assegurando a confiabilidade dos resultados.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Brasil (2003). Agência Nacional de Vigilância Sanitária. Resolução
nº 899, de 29 de maio de 2003.
Khan, M.A. et al. (2006) J. Anal. Chem., 61:32-36.
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