instrução de uso

CARACTERÍSTICAS DE DESEMPENHO
Sensibilidade e Especificidade
O teste foi realizado com um total de 1268
amostras, sendo 137 amostras sabidamente
positivas e 1131 negativas. Foi realizado o
teste comparativo com um kit comercial.
Durante os estudos com realizados
observou-se uma sensibilidade de 100%
e Especificidade de 99,9% para o método.
Repetitividade
Foram realizados ensaios em 04 amostras
estudadas. As amostras eram divididas em
01 negativa e 03 positivas. Houve correta
identificação em 100% das vezes.
Reprodutibilidade
Foram realizados ensaios de 10 amostras
durante 03 dias diferentes. As amostras
eram divididas em 06 negativas e 04
positivas. Houve correta identificação em
mais de 100% das vezes.
BIBLIOGRAFIA CONSULTADA
Center for Disease Control and Prevention.
First 500.000 AIDS cases United States,
1995. MMWR, 44/46: 849-853, 1995.
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doctors office test for antibodies to human
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Reference: 581-603, 1997.
Ra t t n e r, L . : M o l e c u l a r b i o l o g y a n d
pathogenesis of HIV infection. Curr. Opinion
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SAC: (62) 3269 0000 (Grande Goiânia)
SAC: 0800 644 6433 (Demais localidades)
Infect. Dis., 6: 181-190, 1993.
Schüpback, J.: Human Immunodeficiency
Viruses. In: Murray, P.R.; Baron, E.J.; Pfaller,
M.A.; Tenover, F.C. and Yolken, R.H. editors.
Manual of Clinical Microbiology, 7th ed. ASM
Press, Washington, D.C.: 847-870, 1999.
Doles. Dados de Arquivo.
TERMOS E CONDIÇÕES DE GARANTIA
DA QUALIDADE DO PRODUTO
As garantias do fabricante ao consumidor
seguem estritamente as relacionadas na
Lei no 8.078, de 11 de setembro de 1.990 Código de Defesa do Consumidor.
Os reagentes que compõem este sistema
para diagnóstico são garantidos na sua
performance, reprodutibilidade e qualidade
até a data de vencimento.
Os produtos que apresentarem
problemas técnicos comprovados
serão substituídos, sem ônus para o
consumidor.
Doles Reag. Equip. para Laboratórios Ltda.
CNPJ: 01.085.513/0001-05
Rodovia BR 153, Km 493, Lt.07
Chácara Retiro, Conjunto Palmares.
CEP: 74775-027
Goiânia - GO – Brasil
e-mail: [email protected]
M.S.: 10231810109
Revisão: 05 (04/2011)
HIV1&2
FINALIDADE
Kit para determinação qualitativa de
anticorpos anti-HIV1 e anti-HIV2 por
método imunocromatográfico, usando uma
combinação de proteínas recombinantes dos
vírus HIV 1 e 2 imobilizadas na membrana
para identificação seletiva dos anticorpos
anti-HIV em amostras de soro, plasma ou
sangue total.
PRINCÍPIO
Os anticorpos anti-HIV 1 e/ou anti-HIV2
presentes na amostra ligam-se ao anticorpo
monoclonal-corante formando um complexo.
Este flui pela membrana indo se ligar
ao antígeno (gp41/gp36) na área teste
(T) determinando o surgimento de uma
banda colorida rosa-clara. Na ausência de
anticorpo anti-HIV 1 e/ou anti-HIV 2 não
há o aparecimento da banda. Um reagente
controle imobilizado à membrana da
placa-teste determinará o surgimento de
uma segunda banda rosa, cuja presença
demonstrará que os reagentes estão
funcionando corretamente (área controle “C”).
METODOLOGIA
Imunocromatográfico
REAGENTE E APRESENTAÇÃO
PLACAS-TESTE (1): As placas testes do
Imuno-RÁPIDO HIV 1 e 2 utilizam como
reagente de captura, imobilizado na placa
teste, proteínas recombinantes do HIV 1,
correspondente às regiões da gp 41, mais
um epítopo correspondente à proteína gp
36 do HIV 2.
SOLUÇÃO DILUENTE (2): fosfato de sódio
bibásico, dodecyl sulfato de sódio, HCl 4N
e azida sódica.
Ref.A
Placa-teste: 10 unidades
Solução diluente: 1x 3mL
SAC: (62) 3269 0000 (Grande Goiânia)
SAC: 0800 644 6433 (Demais localidades)
TESTE RÁPIDO
Ref. B
Placa-teste: 20 unidades
Solução diluente: 1 x 6mL
Ref. C
Placa-teste: 40 unidades
Solução diluente: 2 x 6mL
EQUIPAMENTOS E MATERIAIS
NECESSÁRIOS NÃO FORNECIDOS
Recipientes para descarte do material
Pipeta semiautomática
ARMAZENAMENTO E ESTABILIDADE
DOS REAGENTES
PLACA-TESTE: Conservar entre 2 e 30ºC.
Não congelar. As placas são sensíveis
a umidade; não abrir até que se tenha
alcançado a temperatura ambiente para
evitar condensação. Estável até a data de
vencimento indicada no rótulo do produto,
obedecidas as condições de armazenamento.
SOLUÇÃO DILUENTE: Pronta para uso.
Conservar entre 2 e 30ºC. Não congelar.
Se armazenado em geladeira, não utilizar
até que se tenha alcançado a temperatura
ambiente para evitar condensação. Estável
até a data de vencimento indicada no rótulo
do produto, obedecidas as condições de
armazenamento.
CUIDADOS E PRECAUÇÕES COM O USO
DOS REAGENTES
Todos os reagentes são somente para uso
diagnóstico in vitro. Seu manuseio deve
ser cuidadoso, evitando-se o contato com
pele e mucosas. Em caso de contaminação
acidental, lavar a área afetada em água
corrente. O descarte do material utilizado
deverá ser feito obedecendo-se aos critérios
de biossegurança estabelecidos pelo
laboratório, de acordo com as normas locais,
estaduais ou federais.
Observar a simbologia
constante nos rótulos
do produto:
Irritante
1/4
AMOSTRA
Soro, plasma ou sangue total.
A amostra utilizada deve estar isenta
de hemólise, lipemia e contaminação.
Utilizar preferencialmente amostras recém
colhidas. Se as amostras não forem testadas
imediatamente, devem ser refrigeradas á
temperatura de 2 a 8°C por no máximo 48
horas. Para períodos de armazenamento
superior a dois dias, o congelamento (-20ºC)
é recomendado. As amostras congeladas
deve ser descongeladas gradualmente e
homogeneizadas ao atingir a temperatura
ambiente. Evitar repetidos congelamentos
e descongelamentos, na ocorrência desta
situação haverá possibilidade surgimento
de falsos resultados.
INTERPRETAÇÃO DOS RESULTADOS
Negativo
Haverá a formação de uma banda rosa clara
na área do controle (C).
Positivo
Haverá a formação de duas bandas, ambas
rosa clara. Sendo uma na área de teste (T)
e a outra na área do controle (C).
Não utilizar amostras diluídas devido a
possibilidade de falsos negativos.
PROCEDIMENTO TÉCNICO
As placas e amostras devem estar
equilibradas com a temperatura ambiente
antes do início do teste.
Nota: a formação de bandas teste e
controle, com diferenças de intensidade
de coloração, não afeta o desempenho
do teste.
1. Retirar a placa teste do envelope e
colocá-la sobre uma superfície plana.
2. C o m o a u x í l i o d e u m a p i p e t a
semiautomática dispensar 10µL da
amostra (sem bolhas de ar) na cavidade
da amostra da placa teste ( ).
3. Adicionar 02 gotas (100µL) da solução
diluente na cavidade da amostra da placa
teste ( ).
Inválido
O teste será considerado inválido se não
ocorrer a formação de banda na área
controle.
4. Deixar a placa sobre uma superfície
plana.
5. A leitura deve ser feita entre 10 e 15
minutos, após a adição da amostra.
6.Qualquer banda de coloração que
surja após 20minutos não tem valor
diagnóstico.
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LIMITAÇÕES DO SISTEMA
• Para se obter ótimo desempenho do
sistema, é necessário que o procedimento
técnico seja rigorosamente seguido
conforme instruções de uso. Qualquer
alteração poderá levar a resultados
errôneos.
• Antes do início do testes, a placa teste e
a amostra devem estar equilibradas com
a temperatura ambiente.
• A leitura não deve ser feita após 20
minutos.
• O produto é indicado para determinar a
presença de anticorpos anti-HIV1 e
anti-HIV2; sendo um teste de triagem
utilizado com a finalidade de detectar
tais anticorpos. A ocorrência repetida de
resultados positivos para este teste, é
presumível da presença de anticorpos na
amostra. Em se tratando de um método
de triagem os resultados deverão ser
confirmados por testes mais específicos.
• Seguir as orientações contidas na Legislação
Sanitária referentes aos critérios de
liberação para o diagnóstico laboratorial da
infecção pelo HIV. Na data da elaboração
desta instrução de uso as portarias
vigentes eram: Portaria nº151/SVS/MS de
14/10/2009 e Portaria nº59/SVS/MS de
28/01/2003. Consulte sempre a legislação
vigente no site da ANVISA – www.anvisa.
gov.br.
CONTROLE DA QUALIDADE DO SISTEMA
• Ler cuidadosamente as instruções de uso
antes de realizar o teste.
• A data de validade corresponde ao último dia
do mês assinalado na etiqueta do envelope
da placa-teste e da caixa do kit.
• Deve-se evitar expor o kit a temperaturas
elevadas, bem como diretamente ao sol.
• Não congelar a placa-teste, pois isto causará
deterioração irreversível.
• Deixar os reagentes adquirirem a temperatura
ambiente antes de iniciar os testes.
• Não usar componentes do kit após a data
de validade.
• Utilizar as Boas Práticas de Laboratório
(BPLs) na conservação, manuseio e descarte
dos materiais.
• Não substituir componentes deste kit com o
de outros fabricantes, nem usar componentes
de lotes e códigos diferentes.
• Quando realizado o teste, a formação
da banda controle na placa teste indica
o perfeito desempenho do produto e do
procedimento técnico.
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SAC: 0800 644 6433 (Demais localidades)
SIGNIFICADO CLÍNICO
O HIV é um vírus com genoma RNA, da
família Lentiviridae. Pertence ao grupo dos
retrovírus não-citopáticos e não-oncogênicos
que necessitam, para multiplicar-se, de
uma enzima denominada transcriptase
reversa, responsável pela transcrição do
RNA viral para uma cópia DNA, que pode
então se integrar ao genoma do hospedeiro.
O vírion do HIV 1 é cilíndrico, circundado
por um envelope lipídico. Seu genoma
RNA contém 10.000 pares de base e é
caracterizado pela presença de duas LTR’s
(Long Terminal Repeats) e nove regiões, três
delas codificadoras de proteínas estruturais
(gag, pol, env) e outras seis reguladoras
(tat, rev, nef, vpv, vpr, vif). As regiões do
gag, pol e env codificam as proteínas e
glicoproteínas p-24, p-17, gp-120, gp-41 e
as enzimas transcriptase reversa, proteases
e integrases.
Existem dois tipos de HIV, denominados HIV
1 e HIV 2. A homologia genética observada
nos genomas provirais dos dois tipos é de
aproximadamente 40-45%, o que determina
a codificação e síntese de diversos produtos
gênicos semelhantes. Este fato justifica
certa taxa de sororreatividade cruzada entre
ambos, observada nos testes sorológicos.
Têm sido descritas variantes genômicas
(subtipos) do HIV 1 e do HIV 2. Assim,
os isolados de HIV 1 são classificados
em dois grupos: M (major) e O (outlier),
com variabilidade genética de até 30% no
segmento env. No grupo M identificam-se
nove subtipos (A, B, C, D, E, F, G, H e I) e
no grupo O apenas um. Em relação ao HIV
2 descrevem-se cinco subtipos (A, B, C, D
e E).
Este vírus tem período de incubação
prolongado antes do surgimento dos
sintomas da doença, infecção das células do
sangue e do sistema nervoso e supressão
do sistema imune.
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