O tratamento oncológico tem sido revolucionado pela translação

RTKS AND MAPK PATHWAY ALTERATIONS IN SOLID TUMORS: DISSECTING PROGNOSTIC
AND THERAPEUTIC BIOMARKERS
RESUMO
O tratamento oncológico tem sido revolucionado pela translação dos
conhecimentos da biologia tumoral no desenvolvimento de novos fármacos que
actuam através do reconhecimento molecular. A descoberta de alterações em
receptores tirosina cinase (RTK) e em vias de sinalização celular, como a via das
proteínas cinases
activadas por
mitógeneos (MAPK), tem
possibilitado
o
desenvolvimento de terapias moleculares dirigidas de sucesso em cancro. No entanto,
a complexa heterogeneidade genética dos tumores humanos pode constituir uma
limitação para a aplicação deste tipo de terapias. Para ultrapassar este problema é
necessária a identificação de alterações em alvos moleculares terapêuticos em cada
tipo tumoral específico. Assim sendo, o principal objectivo desta tese foi contribuir
para um melhor conhecimento das alterações moleculares em RTKs e via de
sinalização MAPK em tumores estromais gastrointestinais (GIST), tumores do colo
uterino e em gliomas.
Os GISTs, caracterizados pela presença de mutações oncogénicas nos genes KIT e
PDGFRA, representam actualmente o paradigma de como as terapias moleculares
dirigidas podem ter um impacto importante na sobrevida dos doentes. Doentes com
mutações específicas nestes dois oncogenes são tratados com sucesso com imatinib
(Gleevec®, Novartis), um fármaco inibidor específico de KIT e PDGFRA. No entanto,
existem doentes cujos tumores são wild-type para KIT e PDGFRA e o conhecimento de
outras alterações moleculares nestes doentes é escassa. A desregulação da via das
MAPK em tumores ocorre principalmente devido à presença de mutações activantes
nos oncogenes RAS e BRAF, e como descrito mais recentemente, pela perda de
expressão da proteína RKIP. No presente trabalho, verificámos que a via das MAPK
pode estar activa neste subtipo de doentes, pela presença de mecanismos
autócrinos/parácrinos entre KIT e o seu ligando SCF, ou pela presença de mutações no
gene BRAF, e não através de alterações nas proteínas RAS e RKIP. Adicionalmente,
numa série maior de casos -incluindo mutantes para KIT e PDGFRA- encontrámos que a
ausência de expressão da RKIP está associada com mau prognóstico em doentes com
GIST.
O sucesso da presença de mutações nos genes KIT e PDGFRA na predição da
resposta ao tratamento com imatinib em GISTs, tem incitado ao rastreio de outros
tumores que possuam as mesmas alterações, e que possam assim, beneficiar de uma
mesma terapia eficaz. Adicionalmente, o papel emergente da proteína RKIP na
predição do prognóstico de pacientes oncológicos tem destacado a importância da
pesquisa de tumores com expressão alterada de RKIP. Neste sentido, investigamos a
presença de alterações em KIT e PDGFRA e avaliamos o impacto biológico e clínico da
proteína RKIP em outros dois importantes tipos tumorais: tumores do colo uterino e
gliomas.
Em relação ao cancro do colo do útero, estudámos as alterações moleculares na
proteína KIT num subtipo específico de tumores, os carcinomas adenoescamosos, que
são
menos
frequentes,
mas
que
possuem
um
comportamento
bastante
agressivo. Verificámos que a proteína KIT pode estar activa através de mecanismos
autócrinos/parácrinos com o ligando SCF num subgrupo de tumores, apesar da
ausência de alterações moleculares como mutações ou amplificação génica.
Relatámos ainda que a expressão da proteína RKIP é significativamente diminuída em
carcinomas do colo uterino e verificámos in vitro e in vivo que a ausência da proteína
RKIP está associada a um aumento da viabilidade, migração e crescimento celular
independente de ancoragem e ainda com indução de angiogénse em tumores do colo
uterino.
Relativamente aos gliomas, descrevemos a co-expressão de PDGFA e PDGFRA e
sugerimos que a amplificação do gene PDGFRA, ao invés de mutação, pode ser o
mecanismo genético subjacente à sobre-expressão de PDGFRA nestes tumores. Estes
resultados levaram-nos a pesquisar a eficácia in vitro de terapias anti-PDGFRA nestes
tumores. Num painel de linhas celulares de glioma verificámos que o cediranib
(Rencentin®, Astrazeneca), quando comparado a outros inibidores como o imatinib ou
sunitinib (Sutent®, Pfizer), constitui uma opção eficaz para o tratamento destes
doentes. Adicionalmente, mostrámos que em gliomas os fármacos cediranib e
sunitinib actuam em alvos distintos dos que estão descritos. Finalmente, e de acordo
com os achados em GISTs e colo-uterino, observámos que a proteína RKIP está sob-
expressa em gliomas e a sua ausência associada a um fenótipo maligno, constituindo
ainda um marcador independente de prognóstico em doentes com glioma.
Em conclusão, esta tese sugere que o rastreio de alterações em RTKs e na via das
MAPKs deve ser feita para cada tipo de tumoral específico. A descoberta de novos
alvos para os fármacos cediranib e sunitinib em gliomas constitui uma esperança para
a identificação de novos potenciais biomarcadores preditivos da resposta a este tipo
de terapias. Assim, mesmo sabendo que há ainda um longo caminho a percorrer, os
resultados apresentados nesta tese poderão ajudar no desenho de terapias
moleculares dirigidas para estes doentes.
Candidata: Olga Catarina Lopes Martinho
Orientador: Rui Manuel Vieira Reis
Data: 28 Novembro 2011