GREENERWAYS BUG REPELLENT

Transcrição

GREENERWAYS BUG REPELLENT
RELATÓRIO DE ENSAIO
TESTE DE EFICÁCIA COM PRODUTOS REPELENTES DE INSETOS PARA HUMANOS
Patrocinador:
Endereço:
Nome do Produto:
Lote / Fabricação / Validade:
Identificação da Amostra:
Emissão do Relatório:
FLAVIA PUNGILLO COSMÉTICOS EPP
RUA MANOEL BECKMANN, 355 – JD
PIRATININGA – OSASCO/SP – CEP 06230-040
GREENERWAYS BUG REPELLENT
Lote: 1280116 / FAB.: 12/2015 / VAL.: 12/2018
ENT.2016.0003
07/03/2016
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ÍNDICE
1.
INTRODUÇÃO ...................................................................................................................................... 3
2.
OBJETIVO............................................................................................................................................. 3
3.
METODOLOGIA.................................................................................................................................... 3
4.
3.1.
Cultivo dos mosquitos ................................................................................................................... 3
3.2.
Seleção dos voluntários ................................................................................................................ 3
3.3.
Aplicação do Produto-Teste .......................................................................................................... 4
3.4.
Procedimento da Pesquisa ........................................................................................................... 4
RESULTADOS ...................................................................................................................................... 5
4.1.
Aedes aegypti................................................................................................................................ 5
4.2.
Anopheles albimanus .................................................................................................................... 7
4.3.
Culex quinquefasciatus ................................................................................................................. 9
5.
CONCLUSÃO...................................................................................................................................... 11
6.
REFERÊNCIAS ................................................................................................................................... 12
7.
APROVAÇÕES ................................................................................................................................... 14
ANEXO 1 ..................................................................................................................................................... 15
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1. INTRODUÇÃO
A grande incidência e a gravidade de doenças relacionadas a culicídeos hematófagos justificam a
demanda por produtos químicos tópicos repelentes de insetos, cujo ideal é repelir a maioria das espécies
simultaneamente por pelo menos 8h sem causar toxidade, ter pouco cheiro e ser resistente a abrasão e
a água, além de ser cosmeticamente favorável e economicamente viável.
A norma vigente para registro de repelentes é a resolução da Diretoria Colegiada da Agência
Nacional de Vigilância Sanitária (RDC) Nº - 19, de 10 de abril de 2013, que descreve requisitos técnicos
mínimos a serem preenchidos, dentre eles, o teste de eficiência, que determina o Tempo de Proteção
1
Completa que indivíduos tratados com a Dose Típica de Consumo do produto dispõem quando
expostos à pelo menos três variedades de mosquitos.
Esses critérios avaliam a qualidade do produto oferecido ao consumidor.
2. OBJETIVO
Este ensaio visa estabelecer a eficácia da ação repelente em humanos ao longo do tempo da
substância teste GREENERWAYS BUG REPELLENT, usando como referência mosquitos das espécies
Aedes Aegypti, Anopheles albamanus e Culex quinquefascitus, em experimentos particulares e
individuais.
3. METODOLOGIA
Desenvolvida segundo o ‘Guia de teste de performance de produtos OPPTS 810.3700:
Repelentes de insetos a serem aplicados à pele humana’, divulgado pela Agência de Proteção Ambiental
dos Estados Unidos da América (EPA), conforme requer a ANVISA.
3.1. Cultivo dos mosquitos
Mosquitos das espécies Aedes Aegypti, Anopheles albamanus e Culex quinquefascitus são
criados separadamente em biotério com temperatura controlada entre 23 e 27°C, umidade relativa do ar
entre 50 e 70% e fosfofase de 12 horas.
Aproximadamente 200 mosquitos fêmeas de cada espécie com idade entre 5 e 10 dias, não
alimentados com sangue e acondicionados em gaiolas revestidas com tecido tipo ‘voile’ de 61cm x 61cm
x 61cm, com abertura protegida por manga externa por onde se insere o antebraço foram utilizados nos
testes.
Após o uso, os insetos foram mortos por exposição a gás carbônico e descartados em lixo
comum (acondicionados em saco preto).
3.2. Seleção dos voluntários
A fim de ter uma amostra válida da população local, o escopo abrange adultos de todos os
grupos étnicos, gênero e faixa etária, desde que os indivíduos sejam saudáveis e tenham leve ou
nenhuma irritação dérmica à picada de mosquito.
Para cada coleção de insetos, um grupo preferencialmente misto de seis voluntários participa.
Eles não devem usar produtos cosméticos perfumados nem consumir álcool ou cafeína desde 12 horas
antecedentes até o fim dos testes.
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Porque cada indivíduo é suscetível a aplicar uma quantidade diferente de repelente em ensaios clínicos não controlados, a "dose
típica" é calculada como a média de múltiplas aplicações por cada um dos muitos indivíduos
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3.3. Aplicação do Produto-Teste
3.4.1 Preparo da área teste
O voluntário deve lavar o antebraço com sabonete sem perfume e enxaguar com água em
abundância, passar álcool 70% na área lavada e tornar a enxaguar, enxugando com papel toalha a
seguir.
3.4.2 Critério de inclusão de voluntários
O voluntário, com a área teste já preparada, expõe o antebraço por 30 segundos numa gaiola
individual contendo mosquitos para verificar a atratividade ou repelência natural. Caso algum voluntário
não apresente pousos nem picadas, é dispensado do ensaio.
3.4.3 Dosagem da substância teste
1g de amostra para cada 600cm² de área teste é a dose típica de consumo, portanto, os valores
tomados das medidas dos antebraços dos voluntários aceitos pelo critério de inclusão completam a
fórmula:
(
)
Na qual: D é dose de amostra(g); Ci é circunferência do antebraço na altura do pulso (P), do
cotovelo (C), e de duas medidas equidistantes entre o pulso e o cotovelo e Co é o comprimento do
antebraço(cm).
A quantidade de amostra calculada para cada voluntário é medida em balança analítica e
aplicada por toda a superfície do antebraço em teste.
3.4. Procedimento da Pesquisa
Trinta (30) minutos após a aplicação da amostra e calçando luva descartável, o voluntário
introduz o antebraço em teste na sua gaiola individual de mosquitos através da manga de voile, e
permanece por 5 minutos (Ver Figura 1). O número de pousos e picadas durante a exposição de cada
voluntário é registrado. A operação se repete a cada meia hora, até confirmação de picada. Os
indivíduos devem evitar atividades que aumentam a transpiração e evitar esfregar, tocar ou molhar a
área tratada.
Define-se uma picada confirmada quando ocorrer mais de uma picada num mesmo período de
exposição, ou, quando ocorrer uma picada em cada uma de duas exposições consecutivas que
confirmem o resultado da exposição antecedente.
A média do tempo de ação do repelente é considerada o tempo médio de ação da substância
teste.
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Figura 1: (a) Vista geral da gaiola e (b) vista da abertura onde os voluntários expõem o antebraço, com
destaque para a tela na qual os mosquitos pousam.
4. RESULTADOS
4.1. Aedes aegypti
Tabela 1 Características dos voluntários e resultado da exposição a mosquitos da espécie Aedes aegypti sem produto repelente,
conforme critério de inclusão. As medidas dos antebraços (área de teste) dos voluntários considerados aptos foram tiradas para cálculo
da quantidade de amostra a ser aplicada na região. CiP é a circunferência do antebraço na altura do pulso; Ci1 e Ci2 são respectivamente
duas medidas de circunferências equidistantes entre o pulso e o cotovelo, CiC é a circunferência do antebraço na altura do cotovelo e Co
é o comprimento do antebraço(cm).
Participante Idade
1
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Sexo
Homem
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Iniciais
nome
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Exposição 30s
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Aceite
Picada
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Medidas do antebraço (cm)
CiP
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Ci1
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17,5
18,6
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20
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15,8
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Ci2
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22,8
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22,2
19,2
17,8
18,8
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CiC
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23,2
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Co
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24,5
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Dose
Aplicada
(g)
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0,74
0,92
0,88
0,87
0,77
0,64
0,70
0,79
Tabela 2 Número de pousos e picadas por voluntário utilizando produto repelente durante exposição de 5 minutos a mosquitos da espécie
Aedes aegypti com intervalos de trinta minutos. Cálculo da média aritimética de tempo de ação da amostra para avaliação de eficácia
Quantidade de Pousos e Picadas
Participante
1
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Pouso
Picada
Pouso
Picada
Pouso
Picada
Pouso
Picada
Pouso
Picada
Pouso
Picada
Pouso
Picada
Pouso
Picada
Pouso
Picada
Pouso
Picada
0,5h
1h
1,5h
2h
2,5h
3h
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0
0
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4.2. Anopheles albimanus
Tabela 3 Características dos voluntários e resultado da exposição a mosquitos da espécie Anopheles albimanus sem produto repelente,
conforme critério de inclusão. As medidas dos antebraços (área de teste) dos voluntários considerados aptos foram tiradas para cálculo da
quantidade de amostra a ser aplicada na região. CiP é a circunferência do antebraço na altura do pulso; Ci1 e Ci2 são respectivamente
duas medidas de circunferências equidistantes entre o pulso e o cotovelo, CiC é a circunferência do antebraço na altura do cotovelo e Co é
o comprimento do antebraço(cm).
Participante Idade
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Sexo
Iniciais
nome
Homem
Mulher
Mulher
Mulher
Mulher
Mulher
Mulher
Mulher
Mulher
Mulher
MAS
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CTB
KCO
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CAP
ZPN
SAM
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Exposição 30s
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15,8
16,7
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Ci2
18
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19,1
22,8
21,3
22,2
19,2
17,8
18,8
21,6
CiC
21
18,4
22,3
25,2
24,5
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23,2
20
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Co
24,5
20,3
23,8
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24,5
22,7
23,7
24,3
Dose
Aplicada
(g)
0,69
0,52
0,74
0,92
0,88
0,87
0,77
0,64
0,70
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Tabela 4 Número de pousos e picadas por voluntário utilizando produto repelente durante exposição de 5 minutos a mosquitos da espécie
Anopheles albimanus com intervalos de trinta minutos. Cálculo da média aritimética de tempo de ação da amostra para avaliação de eficácia
Quantidade de Pousos e Picadas
Participante
Pouso
Picada
Pouso
Picada
Pouso
Picada
Pouso
Picada
Pouso
Picada
Pouso
Picada
Pouso
Picada
Pouso
Picada
Pouso
Picada
Pouso
Picada
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1h
1,5h
2h
2,5h
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MÉDIA DE TEMPO DE AÇÃO REPELENTE DA SUBSTÂNCIA TESTE
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4.3. Culex quinquefasciatus
Tabela 5 Características dos voluntários e resultado da exposição a mosquitos da espécie Culex quinquefasciatus sem produto repelente,
conforme critério de inclusão. As medidas dos antebraços (área de teste) dos voluntários considerados aptos foram tiradas para cálculo da
quantidade de amostra a ser aplicada na região. CiP é a circunferência do antebraço na altura do pulso; Ci1 e C12 são respectivamente duas
medidas de circunferências equidistantes entre o pulso e o cotovelo, CiC é a circunferência do antebraço na altura do cotovelo e Co é o
comprimento do antebraço(cm).
Participante
Idade
Sexo
Iniciais
nome
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Mulher
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Homem
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Mulher
Homem
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Mulher
Homem
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JVC
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PK
CP
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Exposição 30s
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Aceite
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Apto
Apto
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Apto
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Apto
Medidas do antebraço (cm)
CiP
13,5
14,3
12
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14,5
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13,6
14,8
14
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Ci1
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15,3
13,6
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15
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Ci2
17,9
17,2
15,3
19,1
18,3
21,4
17,3
18,8
18
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CiC
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19,5
16,2
20,3
20
24,3
19,9
21,1
21
22
Co
23
22,2
18,8
22,7
23
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22,6
23,8
24,5
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Dose
Aplicada (g)
0,66
0,61
0,45
0,68
0,66
0,85
0,62
0,72
0,69
0,75
Tabela 6 Número de pousos e picadas por voluntário utilizando produto repelente durante exposição de 5 minutos a mosquitos da espécie
Culex quinquefasciatus com intervalos de trinta minutos. Cálculo da média aritimética de tempo de ação da amostra para avaliação de
eficácia
Quantidade de Pousos e Picadas
Participante
Pouso
Picada
Pouso
Picada
Pouso
Picada
Pouso
Picada
Pouso
Picada
Pouso
Picada
Pouso
Picada
Pouso
Picada
Pouso
Picada
Pouso
Picada
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5. CONCLUSÃO
Dentre as três espécies de mosquitos testadas, aquela em que houve menor ação repelente e,
portanto, determina a eficácia do produto foi Culex quinquefasciatus.
Desse modo, considera-se que a substância teste GREENERWAYS BUG REPELLENT, atingiu um
tempo médio de ação de 2 horas para as três espécies estudadas: Anopheles albimanus, Culex
quinquefasciatus e Aedes aegypti.
Este relatório se destina exclusivamente à Agência Nacional de Vigilância Sanitária do
Ministério da Saúde e ao uso interno da empresa FLAVIA PUNGILLO COSMÉTICOS EPP Nenhuma
informação deste relatório pode ser divulgada em quaisquer veículos de comunicação sem autorização
por escrito do autor.
NOTA 1: O resultado refere-se à amostra recebida.
NOTA 2: A amostragem foi realizada pelo Patrocinador do estudo.
NOTA 3: O ensaio garante a rastreabilidade dos dados gerados.
NOTA 4: É proibida a reprodução parcial deste Relatório de Ensaio.
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6. REFERÊNCIAS
Portal ANVISA, Resolução - Rdc Nº - 19, De 10 de Abril de 2013.
Environmental Protection Agency, Product Performance Test Guidelines OPPTS 810.3700: Insect
Repellents to be Applied to Human Skin.
ARAÚJO, M.J.C.; CÂMARA, C.A.G.; BORN, F.S.; MORAES, M.M.; BADJI, C.A. (2012). Acaricidal activity
and repellency of essential oil from Piper aduncum and its components against Tetranychus urticae. Exp.
Appl. Acarol. 57(2):139–155. CDC (2014).
Chikungunya: information for the general public. [atualizado em 17 de setembro de 2014; citado em 16
de outubro de 2014]. Disponível em: . Acesso em 14 de outubro de 2014.
DRAPEAU, J.; VERDIER, M.; TOURAUD, D.; KRÖCKEL, U.; GEIER, M.; ROSE, A; KUNZ, W. (2009).
Effective insect repellent formulation in both surfactantless and classical microemulsions with a longlasting protection for human beings. Chem. Biodivers. 6(6):934- 947.
EATON, A.T. (2009). Insect repellents fact sheet. University of New Hampshire (UNH) Cooperative
Extension. [atualizado em fevereiro de 2009; citado em agosto de 2014]. Disponível em: . Acesso em
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7. APROVAÇÕES
Cassiano Carlos Escudeiro
Amanda Souza Barreto Cunha
(Químico Responsável)
(Biotecnologista Responsável)
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ANEXO 1
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