Tratamento de Água na Indústria Farmacêutica

Faculdade de Ciências Farmacêuticas
Dep. Tecnologia Bioquímico-Farmacêutica
Curso de Tecnologia Químico-Farmacêutica
Dissertação
para obtenção do grau de Mestre
Alzira Maria da Silva Martins
Orientadora:Prof. Titular Dra Thereza Christina Vessoni Penna
Identificação e verificação da
resistência aos sanitizantes dos
microrganismos presentes na água
destinada ao abastecimento público
e em diferentes pontos de um
sistema de purificação .
Introdução:
Aplicações da água:
•Água potável
•Água industrial
•Água purificada
•Água para injetáveis
Principais contaminantes da água
• Contaminantes particulados
• Contaminantes inorgânicos
• Contaminantes orgânicos
• Contaminantes microbiológicos
Características químicas da água para abastecimento público
(Portaria n° 1469 de 29/12/200)
Aspecto
Límpido
Odor
Cheiro de cloro levemente perceptível/ agradável
Sólidos dissolvidos Totais
Até 1000mg/litro
pH
Entre 6 a 9,5
Oxigênio consumido
Até 10mg/litro em oxigênio
Nitrogênio nítrico
Até 10mg/litro em nitrogênio
Ferro
Até 0,3mg/litro em ferro
Cloretos
Até 250mg/litro íon cloreto
Sulfatos
Até 250mg/litro em íon sulfito
Cloro residual
2,0mg/litro em cloro residual
Parâmetros microbiológicas da água para abastecimento público
Escherichia coli ou coliformes
termotolerantes
Ausência em 100 mL
Coliformes Totais
Ausência em 100 mL
Determinação de padrões de qualidade de água,
segundo a Farmacopéia
Água purificada
Limites
Condutividade
< 1,3uS/cm
TOC
< 0,5mg/L
Bactérias
Água para injetáveis
Limites
Condutividade
< 1,3uS/cm
TOC
< 0,5mg/L
Bactérias
Pirogênio
•
< 100UFC/mL
< 10UFC/mL
< 0,25UE/mL
Sistema de água purificada da Edwards Lifesciences Macchi
Água de alimentação –Ponto 1
Filtros Multimeios – Ponto2
Abrandadores – Ponto 3
Filtro de Carvão – Ponto 4
Filtro de 5 micras – Ponto 5
Osmose Reversa – Ponto 6
Deionização continua – Ponto 7
Água Purificada – Ponto 8
UV- Ponto 9
Filtros de 0.05 micras – Ponto 10
Pontos de Uso –Ponto 11,12,13
A Edwards Lifesciences Macchi fornece na linha
cardiovascular uma extensa gama de produtos e serviços
divididos em 4 quatro grandes áreas.
Perfusão/CEC
Cirurgia Cardíaca
Cuidado Intensivo
Vascular
•Pontos de uso
LAVAGEM DE
COMPONENTES
LAVAGEM DE FILTROS
TESTE DE ESTANQUEIDADE
•Agentes químicos utilizados na higienização dos subsistemas de tratamento de água
Conc. de
uso (%)
Valor
final do
pH
Tempo de
contato
(minutos)
aplicação
PAA(0,4
5%)+H2
O2
(2,2%)
2.1
Osmose reversa
Unidade deionização
180
Desinfetante
Álcool
70,0
7.2
Pontos de amostragem(externo)
01
Desinfetante
Hipoclorito
de sódio
0,5
11,9
Tanque de água purificada
Linha de distribuição aos pontos
de uso
60
Desinfetante
Bissulfito
de sódio
1,0
4,0
Filtros multimeios
Abrandadores
Filtro de Carvão
90
Declorinação
Hidróxido
de Sódio
0,4
12,8
Osmose Reversa
Deionização Continua
30
Ajuste de pH
Ácido cítrico
0,5
2,4
Osmose Reversa
30
Ajuste de pH
Ácido
clorídrico
0,5
0,3
Unidade de Deionização
30
Ajuste de pH
Agente
químico
Minncare
Ponto de uso
Material e Métodos
Amostragem: Todos os pontos foram sanitizados com álcool 70%,
seguido pela coleta em sacos estéreis de polietileno
Filtração: As amostras foram submetidas ao método de filtração de
membrana 0,45 um. Incubadas em meio TSA 35°C/72 horas
(contagem total), em meio m Endo Agar Less 34,5-35,5°C/22 horas
(coliformes total)
Isolamento
•Contagem das colônias
•Subcultura das colônias
•Coloração de Gram
•Indol
•Oxidase
Identificação
•BBL Crystal
Substratos
enzimáticos
e
bioquímicos. As reações são
baseadas na habilidade do
microrganismo em metabolizar o
substrato, provocando alteração
de cor do indicador de pH.
•API 20 NE
É composto por 20 microtubos (8
testes convencionais e 12 de
assimilação).
As reações durante o período de
incubação,
se
traduzem
em
rinsagens espontâneas coloridas e
reveladas por adição de reativos.
Nos testes de assimilação as
bactérias
crescem
se
forem
capazes de utilizar o substrato
correspondente.
Eficácia dos desinfetantes
•Concentração inibitória mínima(CIM)
A avaliação do espectro da ação do agente químico quanto a
resistência dos microrganismos é realizada através de diluições,
onde é determinada a menor concentração inibitória mínima.
•Tempo de redução decimal (Valor D)
É o intervalo de tempo necessário para a redução de um ciclo
logarítmico de uma população microbiana quando em contato com
agentes desinfetante ou esterilizante.
•RESULTADOS
Contagem total de heterotróficos (UFC/100mL)
U F C /1 0 0 m L
9000
8000
7000
6000
5000
4000
3000
2000
1000
0
1
2
3 4 5
6 7 8 9 10 11 1 2 13
pontos de amostragem
Resultados
% de bactérias identificadas
Microrganismos
N° colônias
%de identificação
Pseudomonas aeruginosa
25
32.05
Pseudomonas picketti
18
23.08
Pseudomonas vesiculares
10
12.82
Pseudomonas diminuta
09
11.54
Flavobacterium aureum
05
6.42
Pseudomonas fluorescens
04
5.13
Acinetobacter lwoffi
02
2.56
Pseudomonas putida
02
2.56
Pseudomonas alcaligenes
01
1.28
Pseudomonas paucimobilis
01
1.28
Flavobacterium multivorum
01
1.28
Contagem Total
78
100.0
•Resultados
•Concentração inibitória mínima
Agente químico
Pseudomonas
aeruginosa
identificada
(%)
E. Coli
ATCC 25922
0,5% acido cítrico
0,25
0,125
0,5% acido clorídrico
0,16
0,16
70% álcool
17,5
2,18
0,5% Bissulfito de sódio
0,078
0,03
0,4% Hidróxido de sódio
0,3
0,1
0,5% Hipoclorito de sódio
0,25
0,06
1% Minncare
(acido peracético+ H2O2)
0,50
0,06
Resultados
Valor D - Pseudomonas aeruginosa isolada e identificada
Log N=
Log N0-1/Dt
R2
Valor D
(min)
6log10
0.5% acido cítrico
1.77-0.244
0.97
4
24
0.5%Acido clorídrico
2.32-0.1502
0.92
6
36
70% Álcool
1.71-0.103
0.95
9
54
0.5% Bissulfito de
sódio
2.02-0.1619
0.95
6
36
0.4% Hidróxido de
sódio
2.22-0.121
0.94
8
48
0.5% Hipoclorito de
sódio
1.50-0.1063
0.98
9
54
1% Minncare
(acido peracético +
H2O2)
1.27-0.1808
0.98
5
30
Agente químico
Resultados
Valor D Eschericihia coli ATCC 25922
Log N=
Log N0-1/Dt
R2
Valor D
(min)
6log10
0,5%Acido cítrico
2,05-0,12
0,95
7
42
0,5% Acido clorídrico
1,50-0,24
0,98
4
24
70% Álcool
1,31-0,17
0,98
6
36
0,5% Bissulfito de sódio
1,77-0,20
0,97
5
30
0,4% Hidróxido de sódio
1,81-0,19
0,94
5
30
0,5% Hipoclorito de sódio
1,16-0,22
0,99
4
24
1%Minncare
(acido peracético+H2O2)
1,11-0,24
0,90
4
24
Agente químico
Discussão
♦Hipoclorito de sódio
♦Valor D
Log (UFC/mL)
Hipoclorito de Sódio 0,5%
2,00
P.aeruginosa D=9min
1,50
E.coli D=4min
1,00
0,50
0,00
0
2
4
6
8
10
12
tempo de contato (min)
♦ CIM
•P.aeruginosa = 0,25%
•E.coli = 0,06%
♦Minncare
♦Valor D
Minncare 1%
Log (UFC/mL)
2,00
P.aeruginosa D=5min
1,50
E.coli D=4min
1,00
0,50
0,00
0
1
2
3
4
5
6
tempo de contato (min)
♦ CIM
•P.aeruginosa = 0,50%
•E.coli = 0,06%
Conclusões
A Pseudomonas aeruginosa foi a bactéria com
maior % de identificação e maior resistência ao
cloro.
O Hipoclorito de sódio na concentração 0,5%/
60min, mostrou-se adequado para sanitização
dos reservatórios de água, linhas de distribuição e
pontos de uso.
O MinncareR na concentração de 1%/ 180 min,
mostrou-se adequado para sanitização das
membranas de osmose reversa e unidade de
deionização.
As bactérias gram negativas não fermentadoras
de glicose, se mostraram adequadas para
monitoração da sanitização em sistemas de
tratamento de água.
Em águas tratadas a análise para P.aeruginosa e
faz necessária, pois sua presença é marcante e
também por sua capacidade de formar biofilme,
que
causa
interferência
em
processos
farmacêuticos e hospitalares.
O procedimento de higienização de tanques de
armazenamento da água do abastecimento
público e sistemas de tratamento de água devem
ser rigorosos, de forma a assegurar a ausência de
microrganismos patógenos e pirogênio