MacConkey Agar, Ágar MacConkey, Product Information
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ÁGAR MacCONKEY – MacCONKEY AGAR (7102) Uso Previsto O Ágar MacConkey é utilizado para o isolamento e diferenciação de bacilos entéricos Gram-negativos. Harmonizado de acordo com os requerimentos USP/EP/JP.1,2,3 Sumário e Explicação do Produto O Ágar MacConkey é baseado no ágar sais biliares-vermelho neutro-lactose de MacConkey.4 O meio original foi utilizado para diferenciar cepas de Salmonella typhosa dos membros do grupo dos coliformes. Modificações na fórmula melhoraram o crescimento das cepas de Shigella e Salmonella. Estas modificações incluem a adição de 5% de cloreto de sódio, diminuição no conteúdo de ágar, alteração dos sais biliares e concentrações de vermelho neutro. As modificações da fórmula melhoraram as reações diferenciais entre os patógenos entéricos e coliformes. O Ágar MacConkey é recomendado para a detecção e isolamento de organismos Gram-negativos a partir de fontes clínicas,5 lácteos,6 alimentos,7,8 água,9 farmacêutica1,2,3 e industrial10. O caldo MacConkey é harmonizado de acordo com a Farmacopeia dos Estados Unidos (USP), Farmacopeia da Europa (EU) e Farmacopeia do Japão (JP).1,2,3 Princípios do Procedimento A Digestão Enzimática de Gelatina, Digestão Enzimática de Caseína e Digestão Enzimática de Tecido Animal são as fontes de nitrogênio e vitaminas no Ágar MacConkey. A lactose é um carboidrato fermentável. Durante a fermentação da lactose, uma diminuição do pH local ao redor da colônia, causa uma modificação da cor no indicador de pH, vermelho neutro e precipitação da bile. A Mistura de Sais Biliares e Cristal Violeta são os agentes seletivos, inibindo os cocos Gram-positivos e permitindo o crescimento de organismos Gram-negativos. O Cloreto de Sódio mantém o equilíbrio osmótico do meio. O ágar é o agente solidificante. Fórmula / Litro Digestão Enzimática de Gelatina ............................................ 17 g Digestão Enzimática de Caseína ........................................... 1,5 g Digestão Enzimática de Tecido Animal ................................. 1,5 g Lactose ................................................................................... 10 g Mistura de Sais Biliares ......................................................... 1,5 g Cloreto de Sódio ....................................................................... 5 g Vermelho Neutro .................................................................. 0,03 g Cristal Violeta ..................................................................... 0,001 g Ágar ..................................................................................... 13,5 g pH Final: 7,1 ± 0,2 a 25°C A fórmula pode ser ajustada e/ou suplementada conforme necessário para atender as especificações de desempenho. Precauções 1. Somente para o uso em laboratório. 2. IRRITANTE. Irritante para os olhos, sistema respiratório e pele. Modo de Preparo 1. Suspenda 50 g do meio em 1 litro de água purificada. 2. Aqueça, agitando frequentemente e ferva por 1 minuto para dissolver completamente o meio. 3. Autoclave a 121°C por 15 minutos. Especificações De Controle de Qualidade Aparência Desidratado: Pó é homogêneo, fluxo livre e bege rosado claro. PI7102, Rev 5, Março 2011 Aparência Preparado: Ágar MacConkey preparado apresenta coloração rosa-violeta de médio a escuro e uma aparência ligeiramente turva. Resposta Esperada de Cultivo: Resposta esperada de cultivo do Ágar MacConkey testado sob temperaturas e tempos de incubação especificados de acordo com os requerimentos USP/EP/JP.1,2,3 . Micro-organismo Enterococcus faecalis ATCC® 29212 Inóculo Aproximado (UFC/mL) ~ 1000 Resultados Esperados Crescimento Reações Escherichia coli ATCC® 25922 10 - 100 Notou-se a inibição completa Bom a excelente Escherichia coli ATCC® 8739 10 - 100 Bom a excelente Proteus mirabilis ATCC® 12453 10 - 100 Regular a excelente Salmonella typhimurium ATCC® 14028 Staphylococcus aureus ATCC® 6538 10 - 100 Regular a excelente Inibido ~ 1000 -Colônias rosas com precipitados de bile Colônias rosas com precipitados de bile Colônias incolores; inibição parcial de crescimento Colônias incolores --- Os organismos listados são os mínimos que devem ser avaliados para teste de controle de qualidade. Procedimento do Teste Refira-se às referências apropriadas para a utilização do Ágar MacConkey para o isolamento e identificação de organismos entéricos. Resultados Organismos fermentadores de lactose crescem como colônias rosas com ou sem a presença de uma zona de precipitado de bile. Os organismos que não são fermentadores de lactose crescem como colônias incolores ou transparentes. Armazenamento Armazene o meio desidratado entre 2 - 30°C. Uma vez aberto e fechado novamente, coloque o frasco em um ambiente de baixa umidade e na mesma temperatura de armazenamento. Proteja contra a umidade e luz mantendo o frasco firmemente fechado. Validade Refira-se à data de validade no frasco. O meio desidratado deve ser descartado se não fluir livremente ou se houver mudança na coloração inicial. A validade se aplica ao meio em sua embalagem intacta quando armazenado como indicado. Limitações do Procedimento 1. Algumas cepas podem apresentar um crescimento fraco ou ausência de crescimento neste meio. 2. Apesar do Ágar MacConkey ser um meio seletivo principalmente para bacilos entéricos Gram-negativos, testes bioquímicos e sorológicos utilizando culturas puras são recomendados para uma identificação completa. 3. Tem sido relatada uma diminuição no crescimento e recuperação de diversas cepas de bacilos Gram-negativos, quando placas do Ágar MacConkey são incubadas sob um aumento de CO2.11 PI7102, Rev 5, Março 2011 Embalagem Ágar MacConkey N° Código 7102A 7102B 7102C 500 g 2 kg 10 kg Referências 1. United States Pharmacopeial Convention. 2007. The United States pharmacopeia, 31st ed., Amended Chapters 61, 62, 111. The United States Pharmacopeial Convention, Rockville, MD. 2. Directorate for the Quality of Medicines of the Council of Europe (EDQM). 2007. The European Pharmacopoeia, Amended Chapters 2.6.12, 2.6.13, 5.1.4, Council of Europe, 67075 Strasbourg Cedex, France. 3. Japanese Pharmacopoeia. 2007. Society of Japanese Pharmacopoeia. Amended Chapters 35.1, 35.2, 7. The Minister of Health, Labor, and Welfare. 4. MacConkey, A. 1905. Lactose-fermenting bacteria in feces. J. Hyg. 5:333-379. 5. Murray, P. R., E. J. Baron, M. A. Pfaller, F. C. Tenover, and R. H. Yolken (eds.). 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American Society for Microbiology. C179. Informação Técnica Contate a Neogen do Brasil para Serviços Técnicos ou questões envolvendo a preparação ou desempenho do meio de cultura desidratado no telefone 19.3935-3727. Contate a Acumedia Manufacturers, Inc. para Serviços Técnicos ou questões envolvendo a preparação ou desempenho do meio de cultura desidratado no telefone +1 (517)372-9200 ou fax +1 (517)372-2006. PI7102, Rev 5, Março 2011
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