08h30 FELIPE GEYER
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08h30 FELIPE GEYER
Patologia Molecular dos Tipos Histológicos Especiais de Câncer de Mama Dr. Felipe Geyer Sumário • Heterogeneidade do câncer de mama • Tipos especiais de carcinomas de mama – vs subtipos moleculares – entidades distintas • Tipos especiais como modelo para identificação de alvos terapêuticos Heterogeneidade de câncer de mama RE- RE+ Classificação molecular Hu et al. BMC Genomics 2006;7:96 Taxonomia de microarrays foi baseada em… Ductal Lobular Tubular Medular Micropapilífero Lobular pleomórfico Mucinoso Rico em lipídeos Metaplásico Secretor Tipos especiais de câncer de mama • 17 tipos especiais morfológicos • 25-30% de todos carcinomas • Implicações clínicas e prognósticas importantes • Características biológicas distintas Questionamentos • Têm os tipos histológicos especiais subtipos moleculares distintos? • São os tipos histológicos especiais entidades moleculares distintas? Têm os tipos especiais subtipos moleculares distintos? • 113 tumores incluindo 11 tipos especiais – Operon arrays – 24,650 genes – TMAs – 22 marcadores imuno-histoquímicos Tipos especiais são mais homogêneos ao nível transcriptômico Luminal Basal-like Mol apócrino Adenóide cístico Medular Metaplásico Mucinoso A CLI clássico/ Tubular Mucinoso B Neuroendócrino Micropapilífero CLI pleomórfico Apócrino Weigelt et al. J Pathol 2008 Tipos especiais vs subtipos moleculares Neuroendócrino Luminal Mucinoso Tubular CLI clássico HER2 Micropapilífero Apócrino CLI pleomórfico Molecular apócrino Adenóide cístico Secretor Medular Basal-like Metaplásico Weigelt, Geyer & Reis-Filho Mol Oncol 2010 CLI vs CDI pareados por grau e subtipo molecular CDI CLI Weigelt et al. J Pathol 2010 CA mucinoso vs CA neuroendócrino vs CDI pareados por grau e subtipo molecular CDI mucinoso/neuroendócrino IPA Network: Desenvolvimento e função de tecido conjuntivo, desenvolvimento e função de sistema muscular esquelético, desenvolvimento de tecidos Weigelt et al. Mod Pathol 2009 CA metaplásico vs CDIs de subtipo basal Carcinomas metaplásicos apresentam menor expressão de PTEN e TOP2A: Possível causa para baixa resposta a antracíclicos? Weigelt et al. BCRT 2009 CA tubular vs CDI G1 pareados por subtipo molecular CA tubular Via do RE hiperexpressa INPP4B: gene supressor tumoral com atividade inibitória na via PI3K Hipótese: melhor prognóstico de CAs tubulares poderia estar associado à maior ativação da via do RE e ativação menos robusta da via PI3K? Lopez-Garcia et al. J Pathol 2010 São os tipos histológicos especiais entidades moleculares distintas? Carcinoma secretor t(12;15) (p13;q25) ETV6 split apart ETV6-NTRK3 fusão Reis-Filho et al. Histopathology 2008 Carcinomas adenóide císticos t(6;9) (q22-23;p23-24) t(6;9)(q22–23;p23–24) MYB-NFIB Persson et al. PNAS November 2009 Carcinoma micropapilífero • 1-3% de todos carcinomas mamários, 7% em carcinomas mistos • padrão de crescimento“inside-out” • associação frequente com invasão angiolinfática • alta incidência de metástase linfonodal • estágio avançado na apresentação • pior prognóstico mesmo em casos com histologia mista Carcinoma micropapilífero puro Marchio et al. J Pathol 2008 Subtipo Luminal B Carcinoma micropapilífero vs CDI Marchio et al. J Pathol 2008 Carcinoma micropapilífero misto Componentes micropap e ñ-micropap de carcinomas micropapilíferos mistos Componentes micropapilíferos e não-micropapilíferos são praticamente idênticos ao nível genético Marchio et al. J Pathol 2009 Carcinoma micropapilífero vs CDI Pure and mixed MPC cluster Carcinomas micropapilíferos puros e mistos são distintos de CDIs pareados para RE e grau histológico Marchio et al. J Pathol 2009 Tipos especiais como modelo para identificação de alvos terapêuticos Subgrupo estudado • Tipos especiais de câncer de mama • • • perfil molecular mais homogêneo menos hits genéticos meio para identificação de alvos terapêuticos • Carcinoma lobular invasivo – 10-15% de todos carcinomas – RE+/ RP+/ HER2- • Perfil molecular – luminal A – ganho de 1q – perda de 16q • Inativação de CDH1 (E-caderina) • Opções terapêuticas limitadas – tamoxifeno / inibidores de aromatase – pouca resposta à quimioterapia Carcinoma lobular invasivo clássico • N=13 • Análise do número de cópias • aCGH – 5.8K array – Chromosome 8 Tiling Path Arrays 8p11 MDA-MB-134 tem um fenótipo luminal, 16q-, deleção de E-caderina FGFR1 Integração de CGH e expressão gênica Gene Expression data SPFH domain protein 2 precursor -0.8361 PROSC 0.776691 G protein-coupled receptor 124 -0.83295 RNA polymerase III transcription initiation factor BRF2 NA Rab11-FIP1 0.815596 Eukaryotic translation initiation factor 4E-binding protein 1 (4E-BP1) NA Set1/Ash2 histone methyltransferase complex subunit ASH2 2.425071 Steroidogenic acute regulatory protein, mitochondrial precursor NA Small nuclear ribonuclear CaSm NA BAG-4 NA DDHD domain containing 2 1.370019 HTPAP 1.577745 WHSC1L1 2.016795 leucine zipper-EF-hand containing transmembrane protein 2 NA FGFR-1 3.03378 Transforming, acidic coiled-coil containing protein 1 2.420038 Pleckstrin homology domain containing 2 -0.03859 BBP-like protein 1 (BLP1) 0.736262 ADAM 9 0.390474 ADAM5 -0.05962 ADAM 18 -0.00801 ADAM 3A -0.85178 Indoleamine-pyrrole 2,3-dioxygenase -0.15382 C8orf4 (Thyroid cancer protein 1) 0.283563 zinc finger, matrin type 4 NA Secreted frizzled-related protein 1 NA golgi autoantigen, golgin subfamily a, 7 -0.66328 SLD5 0.567344 1-AGP acyltransferase 6 -0.2739 Inibição de FGFR1 diminui sobrevida de células MDA-MB-134 cal51 ZR75.1 mcf7 mda134 *: p<0.05 Reis-Filho et al. Clin Cancer Res 2006 Amplificação/ hiperexpressão de FGFR1 está associada à tumores RE+, RP-, Ki67 alto, pior sobrevida e resistência à terapia endócrina Tumores RE+ - DFS Elbauomy Elsheikh et al. Breast Cancer Res 2007 Turner et al. Cancer Res 2010 Amplificação de FGFR1 está associada à resistência à terapia endócrina Turner et al. Cancer Res 2010 Ensaio clínico fase II de inibidor de FGFR1 sugere ação anti-tumoral em pctes com tumor RE+/FGFR1+ A multicenter, open-label phase II trial of dovitinib, a fibroblast growth factor receptor 1 (FGFR1) inhibitor, in FGFR1amplified and nonamplified metastatic breast cancer (BC). • Dovitinib (TKI258) em ca de mama metastático HER2• 77 pacientes – Grupo 1 FGFR1+/ HR+ - 21 pctes – Grupo 3 FGFR1-/ HR+ - 34 pctes – Grupo 4 FGFR1-/ HR- - 22 pctes • Resultados – 13% de resposta parcial no grupo 1 – 44%, 29% e 11% de doença estável em grupos 1, 3 e 4, respectivamente Andre F et al JCO 2011/ ASCO abstract Conclusões • Tipos especiais de câncer de mama – Boa correlação com subtipos moleculares – Entidades morfológicas e moleculares distintas • Carcinoma secretório – translocação específica • Carcinoma adenóide cístico – translocação específica • Carcinoma micropapilífero – perfil fenotípico e genético de luminal B – Meio para identificação de alvos terapêuticos • FGFR1 é um potencial alvo terapêutico em carcinomas RE+ Agradecimentos HIAE Angela Vergara de Oliveira Alanna M. P. S. Bezerra Christina Shiang Denise da C. Pasqualin Ebe Christie de Oliveira José Norberto Stavale Leandro A. L. Martins Lidiane V. Marins Marcos Takeo Obara Marcus V. N. Corpa Renee Zon Filippi Ricardo S. Macarenco Vanderlei Segatelli ICESP Fernando Aguiar Evandro Sobroza Ibere C. Soares Juliana Ravanini Leika Miyahara Marcelo Gianotti Raphael Medeiros Romulo Loss Mattedi ICR Jorge S Reis-Filho Maryou Lambros Rachael Natrajan Radost Vatcheva Caterina Marchio Konstantin Dedes Daniel Wetterskog Magali Lacroix-Triki M. Angeles Lopez-Garcia Kay Savage Take home messages • Cada tipo especial de câncer de mama é mais homogêneo ao nível molecular • Luminal: – Tubular, CLI clássico, neuroendócrino e mucinoso • Basal-like: – Medular, metaplásico, secretório e adenóide cístico • Molecular apócrino e HER2: – Apócrino e CLI pleomórfico Take home messages • Carcinoma secretório – translocação cromossômica recorrente específica • Carcinoma micropapilífero – entidade morfológica e molecular distinta – características fenotípicas e genéticas de luminal B – presença de um componente micropapilífero em carcinoma misto • características fenotípicas e genéticas micropapilares-símile Take home messages • Carcinoma adenóide cístico – – – – – – entidade morfológica e molecular distinta triplo negativo por imuno-histoquímica basal-like por microarrays fusão gênica MYB-NFIB recorrente poucas alterações de número de cópias de DNA ausência de disfunção de BRCA1 Take home messages • Cerca de 50% dos CLIs apresentam amplificação de FGFR1. • Cerca de 10% dos carcinomas RE+ apresentam amplificação de FGFR1. – – – – PRKI67 alto pior sobrevida resistência à terapia endócrina • FGFR1 é um potencial alvo terapêutico em carcinomas RE+. FGFR1 é hiperexpresso quando amplificado Tipos especiais: entidades distintas ou apenas figuras bonitas? Carcinoma adenóide cístico • • • • 0,1 – 1% de todos carcinomas mamários morfologia semelhante à glândula salivar maioria de baixo grau histológico comportamento clínico excelente Carcinomas adenóide císticos apresentam perfil triplo negativo Trendell Smith et al., 1999 (N=6) Arpino et al., 2002 (N=28) Mastropasqua et al., 2005 (N=20) Crisi et al., 2005 (N=6) Azoulay et al., 2005 (N=18) Weigelt et al, 2008 (N=4) Kahnfir et al, 2011 (n=61) RE + 0% 46% 15% 0% 0% 0% 4% RP + 0% 36% 10% 0% 0% 0% 7% HER2 + 0% NA 0% 0% 0% 0% 0% p63 + NA NA 85% NA 100% 50% NA Citoqueratina 5/6 + NA NA NA NA 100% 75% NA c-KIT (CD117) + NA NA 95% 100% 100% 100% NA Marchio et al. JCP 2010 (atualizado em agosto 2011) Carcinomas adenóide císticos são do subtipo basal-like por microarrays Basal-like Adenóide cístico Weigelt et al. J Pathol 2008 A translocação t(6;9) resulta em hiperexpressão do mRNA e proteína de MYB Persson et al. PNAS 2009 Nem todos carcinomas adenóide císticos de cabeça e pescoço apresentam fusão gênica MYB-NFIB Study Cases MYB-NIFB + MYB-NFIB- Persson et al. PNAS 2010 7 (Frozen) 7 (100%) 0 (0%) Mitani et al. Clin Cancer Res 2010 72 (Frozen) 20 (28%) 52 (72%) West et al. Am J Surg Pathol 2011 37 (FFPE) 18 (49%) 19 (51%)* (6 casos c/ rearranjo de MYB) Brill et al. Mod Pathol 2011 29 (Frozen) 28 (FFPE) 25 (86%) 12 (43%) 4 (14%) 16 (57%) Carcinomas adenóide císticos de mama apresentam fusão gênica MYB-NFIB • 13 casos revistos por 3 patologistas – 12 mostraram a fusão gênica MYB-NFIB Wetterskog et al. J Pathol 2011 Carcinomas adenóide císticos mostram perfil genômico distinto de CDIs pareados por grau histológico CDI GH1 Ca Ad Cístico vs CDI pareado por GH Carcinomas adenóide císticos Wetterskog et al. J Pathol 2011 Carcinomas adenóide císticos mostram perfil genômico distinto de CDIs triplo negativo e basal-like CDI triplo negativo Ca Ad Císticos vs CDIs triplo negativo Carcinoma adenóide cístico Wetterskog et al. J Pathol 2011 Carcinomas adenóide císticos não apresentam disfunção de BRCA1 Non-TNBC TNBC Turner et al. Oncogene 2007 Wetterskog et al. J Pathol 2011 MDA-MB-134 é sensivel ao inibidor de FGFR1 SU5402 cal51 ZR75.1 mcf7 mda134 *: p<0.05 Reis-Filho et al. Clin Cancer Res 2006 Tipos especiais vs imunofenótipo Mucinoso Neuroendócrino Medular Metaplásico Apócrino Micropapilífero Secretor CLI pleomórfico Papilífero Adenóide cístico Células acinares Reis-Filho et al., Histopathology 2006; Rakha E, Reis-Filho JS, Ellis IO. JCO, 2008; Lae et al. Mod Pathol 2008; Weiget et al., J Pathol 2008; Weigelt et al., Breast Cancer Res Treat 2008