GAMMA-GLUTAMILTRANSFERASE (γ-GT) GAMMA

COD 11584
1 x 50 mL
GAMMA-GLUTAMYLTRANSFERASE
(γγ-GT)
COD 11520
1 x 200 mL
CONSERVAR A 2-8ºC
GAMMA-GLUTAMILTRANSFERASE (γγ-GT)
Reagentes para medir a concentração de γ-GT
Só para uso in vitro nos laboratórios clínicos
IFCC
VALORES DE REFERÊNCIA
FUNDAMENTO DO MÉTODO
A gamma-glutamiltransferase (γ-GT) cataliza a transferência do grupo γ-glutamil da γ-glutamil-3carboxi-4-nitroanilida à glicilglicina, libertando 3-carboxi-4-nitroanilina. A concentração catalítica
determina-se a partir da velocidade de formação da 3-carboxi-4-nitroanilina1,2.
Temperatura de reacção
25ºC
30ºC
37ºC2
γ-GT
γ – Glutamil – 3 – carboxi – 4 – nitroanilida + Glicilglicina
γ – Glutamil – glicilglicina + 3 – carboxi – 4 - nitroanilina
CONTEÚDO
A.
B.
COD 11584
COD 11520
1 x 40 mL
1 x 10 mL
1 x 160 mL
1 x 40 mL
Reagente
Reagente
Homens
Mulheres
U/L
nkat/L
U/L
nkat/L
< 22
< 35
< 55
< 368
< 585
< 920
< 15
< 24
< 38
< 251
< 401
< 636
O valores a 25ºC e a 30ºC foram obtidos a partir dos de 37ºC utilizando um factor de conversão.
Estes valores dão-se unicamente a título orientativo; é recomendável que cada laboratório
estabeleça os seus próprios intervalos de referência.
CONTROLE DE QUALIDADE
Recomenda-se o uso dos Soros Controle de Bioquímica níveis I (Cod. 18005, 18009 e 18042) e
II (Cod. 18007, 18010 e 18043) para verificar a funcionalidade do procedimento de medida.
COMPOSIÇÃO
A. Reagente: Glicilglicina 206,25 mmol/L, hidróxido de sódio 130 mmol/L, pH 7,9.
Irritante (Xi): R36/38: Irrita os olhos e a pele. S26: Em caso de contacto com os olhos, lavar
imediata e abundantemente com água e recorrer a um médico. S37/39: Usar luvas e
equipamento protector para a vista/face adequados.
Cada laboratório deve estabelecer o seu próprio programa de Controle de Qualidade interno,
assim como procedimentos de correcção como em casos em que os controles não cumpram
com as tolerâncias aceitáveis.
CARACTERÍSTICAS METROLÓGICAS
B. Reagente: γ-Glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida 32,5 mmol/L.
− Límite de detección: 1,6 U/L = 27 nkat/L.
CONSERVAÇÃO
− Limite de lineariedade: 300 U/L = 5000 nkat/L. Quando se obtêm valores superiores, diluir a
amostra 1/2 com água destilada e repetir a medição.
Conservar a 2-8ºC.
Os reagentes são estáveis até à data de caducidade indicada na etiqueta, desde que se
conservem bem fechados e se evite a contaminação durante o seu uso.
− Repetibilidade (intraensaio):
Indicações de deterioração:
− Reagentes: Presença de partículas, turvação, absorvância do branco superior a 1,000 a 410
nm ou 1,450 a 405 nm (cuvete de 1 cm).
Concentração média
CV
n
31 U/L = 517 nkat/L
99 U/L = 1650 nkat/L
1,6 %
0,5 %
20
20
− Reprodutibilidade (interensaio):
PREPARAÇÃO DOS REAGENTES
Concentração média
CV
n
Reagente de Trabalho. Esvaziar o conteúdo do Reagente B no frasco de Reactivo A. Agitar
suavemente. Caso deseje preparar outros volumes, misturar na proporção: 4 mL de Reagente A +
1 mL de Reagente B. Estável 2 meses a 2-8ºC.
31 U/L = 517 nkat/L
99 U/L = 1650 nkat/L
4,8 %
1,4 %
25
25
EQUIPAMENTO ADICIONAL
− Analizador, espectrofotómetro ou fotómetro com cuvete termostatizada a 25, 30 ou 37ºC para
leituras a 405 nm ou 410 nm (Nota 1).
− Cuvetes de 1 cm de passo de luz.
− Veracidade: Os resultados obtidos com estes reagentes não mostram diferenças sistemáticas
significativas quando comparados com reagentes de referência. Os detalhes do estudo
comparativo estão abaixo disponíveis.
− Interferências: A hemólise (hemoglobina > 5 g/L), a lipemia (triglicéridos > 4 g/L) e a
bilirrubina (> 10 mg/dL) interferem. Outros medicamentos e substâncias podem interferir4.
AMOSTRAS
Estes dados foram sido obtidos utilizando um analizador. Os resultados podem variar ao mudar
de equipamento ou ao realizar-se o procedimento manualmente.
Soro recolhido mediante procedimentos standard.
CARACTERÍSTICAS DIAGNÓSTICAS
A gamma-glutamiltransferase no soro é estável 5 dias a 2-8ºC.
A gamma-glutamil encontra-se em elevadas concentrações no fígado, em tumores renais e
intestino ainda que tambem esteja presente noutros tecidos como páncreas, próstata, glándula
salival, vesícula seminal, cérebro e coração.
Observa-se uma elevada actividade da gamma-glutamil transferase em doenças hepáticas,
mostrando valores máximos em casos de obstrucção biliar intra ou post-hepática. Tambem se
detectam importantes elevações em pacientes com metástase no fígado. Em pancreatite e
cancro do páncreas, a actividade enzimática pode elevar-se moderadamente5,6.
PROCEDIMENTO
1. Pré-aquecer o Reagente de Trabalho e o equipamento á temperatura de reacção.
2. Pipetar numa cuvete: (Nota 2)
Reagente de Trabalho
1,0 mL
Amostra
100 µL
O diagnóstico clínico não se deve realizar tendo em conta o resultado de um unico teste, mas
deve integrar-se nos dados clínicos e de laboratório.
3. Misturar e inserir a cuvete no fotómetro.
4. Apontar a absorvância inicial e efectuar novas leituras a cada minuto, durante 3 minutos.
NOTAS
1. Apesar do método recomendado pela IFCC especificar uma longitude de onda de 410 nm, as
leituras podem tambem realizar-se a 405 nm. Esta mudança afecta unicamente a absorção
inicial do reagente (que se duplica aproximadamente) e ao factor empregue para os cálculos.
5. Calcular a razão do incremento da absorvância por minuto (∆A/min).
CÁLCULOS
A concentração catalítica de γ-GT na amostra calcula-se a partir da seguinte fórmula geral:
∆A/min x Vt x 106
= U/L
ε x I x Vs
2. Estes reagentes podem utilizar-se na maioria dos analizadores automáticos. Solicite
informação ao seu distribuidor.
O coeficiente da absorção molar (ε) da 3-carboxi-4-nitroanilina é 7.908 a 410 nm e 9.900 a 405
nm, o passo de luz (l) é 1 cm, o volume total de reacção (Vt) é 1,1, o volume da amostra (Vs) é
0,1, e 1 U/L equivale a 16,67 nkat/L. Deduzem-se os seguintes factores para calcular a
concentração catalítica:
1. IFCC methods for the measurement of catalytic concentration of enzymes. Part 4. IFCC
method for γ-glutamyltransferase. J Clin Chem Clin Biochem 1983; 21: 633-646.
2. Beleta J, Gella FJ. Método recomendado para la determinación en rutina de la concentración
catalítica de la γ-glutamiltransferasa en suero sanguíneo humano. Quim Clin 1990; 9:58-61
3. IFCC Primary reference Procedures for the measurement of catalytic activity concentrations of
enzymes at 37ºC. Part 6. Reference procedure for the measurement of catalytic concentration
of γ-Glutamyltransferase. Clin Chem Lab Med 2002; 40:734-738.
4. Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests, 5th ed. AACC Press, 2000.
5. Tietz Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics, 4th ed. Burtis CA, Ashwood
ER, Bruns DE. WB Saunders Co, 2005.
6. Friedman and Young. Effects of disease on clinical laboratory tests, 4th ed. AACC Press,
2001.
∆A/min
M11584p-10
405 nm
410 nm
x 1111 = U/L
x 18520= nkat/L
x 1391 = U/L
x 23188 = nkat/L
BIBLIOGRAFIA
BioSystems S.A. Costa Brava 30, Barcelona (Spain)
Quality System certified according to
EN ISO 13485 and EN ISO 9001 standards
04/2011