P.A.S. Periodic Acid Schiff Hotchkiss

P.A.S. Periodic Acid Schiff
Hotchkiss - MC Manus
04 – 130802
IVD Dispositivo médico-diagnóstico in vitro
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Código CND: W01030799
número de testes executáveis .... 100
tempo de realização .................... 50 minutos
validade do produto ..................... 1 ano
temperatura de armazenamento . 2 - 8°C
equipamento complementar ........ não necessário
Fim previsto
Preparado para o processamento de amostras cito-histológicas a examinar em microscopia óptica.
Aplicação
Para a demonstração dos componentes tissulares, normais ou patológicos, distinguidos de grupos
glicólicos ou amino-hidroxílicos adjacentes em secções histológicas (método1) e em esfregaços
hemáticos e citológicos (método 2).
Princípio
A especificidade deste método baseia-se na oxidação electiva, mediante ácido periódico, dos grupos:
1,2- glicol; amino primário (ou 1-hidroxi-2-amino); amino secundário (ou 1-hidroxi-2-alquilamino) e 1hidroxi-2-cetona; (ocorre ainda a oxidação de alguns derivados metoxílicos e de alfa-cetonas que, porém,
não são transformados em aldeídos). Durante esta oxidação ocorre a ruptura da ligação entre os átomos
de carbono situados na posição 1,2 com a consequente formação de grupos aldeídicos. Na reacção
seguinte, os dois grupos aldeídicos estreitamente contíguos são transformados pela fucsina sulfurosa do
reagente de Schiff num composto colorido insolúvel, semelhante, mas não igual, à fucsina básica.
As condições necessárias para que estas reacções possam ocorrer são:
- que os grupos hidroxi estejam livres;
- que os compostos que se formam após a oxidação não possam ser difundidos no tecido;
- que os grupos aldeídicos destes compostos sejam em quantidade suficiente para poderem ser
detectados histoquimicamente.
Assim, pode constatar-se que apenas macromoléculas como os polissacarídeos e as mucinas cumprem
estes requisitos. A escolha do ácido periódico como oxidante deve-se ao facto de que bloqueia a reacção
de oxidação no estádio aldeídico. Os mucopolissacarídeos ácidos, à excepção da heparina
monossulfúrica, não reagem, pois a presença do grupo -SO3H bloqueia os grupos glicólicos reactivos.
Empresa fabricante: Bio-Optica Milano s.p.a.
Bio Optica Milano s.p.a.
via San Faustino 58 • I - 20134 Milano
tel. +39 02212713.1 • fax +39 022153000
www.bio-optica.it
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Método
1)
2)
Método para secções histológicas:
Desparafine e hidrate a secção com água destilada.
Deite 10 gotas do reagente A na secção: deixe actuar durante 10 minutos.
Lave em água destilada.
Deite 10 gotas do reagente B na secção: deixe actuar durante 20 minutos.
Lave em água destilada.
Deite 10 gotas da solução C na secção: deixe actuar durante 2 minutos.
Deixe escorrer a lâmina e, sem lavar, deite na secção 10 gotas do reagente D: deixe
actuar durante 2 minutos.
Lave em água destilada.
Deite na secção 10 gotas do reagente E: deixe actuar durante 3 minutos.
Vire em água corrente da fonte durante 5 minutos.
Desidrate na série ascendente dos alcoóis, xileno e bálsamo.
Método para esfregaços hemáticos e citológicos:
Ponha os esfregaços secos ao ar em água destilada.
Deite 10 gotas do reagente A no esfregaço: deixe actuar durante 10 minutos.
Lave em água destilada.
Deite 10 gotas do reagente B no esfregaço: deixe actuar durante 20 minutos.
Lave em água destilada.
Deite 10 gotas da solução C no esfregaço: deixe actuar durante 2 minutos.
Deixe escorrer a lâmina e, sem lavar, deite na secção 10 gotas do reagente D: deixe actuar durante
2 minutos.
Lave em água destilada.
Deite
10 gotas do reagente E no esfregaço: deixe actuar durante 3 minutos.
Vire em água corrente da fonte durante 5 minutos.
Desidrate na série ascendente dos alcoóis, xileno e bálsamo.
Resultados
Substâncias P.A.S. positivas .......................................................................................Vermelho magenta
Núcleos ......................................................................................................................................... ……Azul
Reagentes
A)
B)
C)
D)
E)
Advertências e
precauções
O produto destina-se a ser utilizado por pessoal técnico especializado.
O produto é classificado como perigoso.
Leia atentamente as informações indicadas no rótulo (símbolos de perigo, frases de risco e de
segurança) e consulte sempre a ficha de segurança, onde é possível obter informações relativas aos
riscos apresentados pelo preparado, medidas de precaução a adoptar durante o uso e medidas de
primeiros socorros e em caso de derrame acidental. Não utilize caso a embalagem primária esteja
danificada.
Conservação
Conserve o preparado a 2 - 8°C. Mantenha as embalagens devidamente fechadas.
Estabilidade
Após a primeira abertura, o reagente deve considerar-se válido até à data de validade indicada, desde
que seja correctamente conservado.
Eliminação
Resíduo perigoso; entregue-o a empresas especializadas e autorizadas, segundo a legislação vigente.
Bibliografia
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Solução de ácido periódico......................................................................................................... 30 ml
Reagente de Schiff ..................................................................................................................... 30 ml
Solução de metabissulfito de potássio ....................................................................................... 30 ml
Solução fixadora ......................................................................................................................... 30 ml
Hemalum de Mayer .................................................................................................................... 30 ml
Cook HC. Human tissue mucins. Lab. Aid Series - Baker Editor London
Hotchkiss RD. A microchemical reaction resulting in the standing of polysaccaride structures in fixed
tissue preparations. Arch Bioch 1948; 16: 131.
Mc Manus JFA Periodic acid routine applied to kidney Amer J Path 1948; 24:643.
Data de publicação: Junho 2013
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