Identificação do gene da longevidade de Geochelone gigantea
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Identificação do gene da longevidade de Geochelone gigantea
Identificação do gene da longevidade de Geochelone gigantea Drago, M.1; Mateus,C.2; Monteiro,H.3 Introdução A tartaruga-gigante-de-aldabra (Geochelone gigantea), originária das ilhas de Aldabra, tem uma longevidade média de 150 anos e a tartaruga-estrelada-de-Madagáscar (Geochelone radiata), originária de Madagáscar, sobrevive em média 80 anos. Comparando genéticamente estas duas espécies é possível determinar qual o gene responsável pela maior longevidade de uma em relação à outra. Fig.1 - Geochelone gigantea Objectivos Com este projecto pretendemos isolar o(s) gene(s) da longevidade, os quais se expressam apenas na espécie Geochelone gigantea. As espécies escolhidas são do mesmo género, o que nos permite obter o mínimo de genes diferentes, os quais são potenciais responsáveis pela longevidade. Fig.2 - Geochelone radiata Metodologia Isolar e sequenciar o(s) gene(s) Extracção de células da medula óssea de Geochelone gigantea e Geochelone radiata Extracção de mRNA de cada célula Identificar os genes que se expressam unicamente na espécie Geochelone gigantea Síntese de cDNA Microarrays Sonda molecular específica dos genes Amplificação de cDNA por PCR Hibridação da sonda com o banco genómico Sequenciação dos genes Testar o(s) gene(s) cDNA sintetizado anteriormente Transfecção de tecidos Amplificação de cDNA por PCR Fig.3 - Microarrays Cronograma 1º mês 2º mês Recolha de dados 3º mês 4º mês 5º mês 6º mês Isolamento e sequenciação de genes 7º mês 8º mês 9º mês 10º mês 11º mês 12º mês Teste de genes Financiamento Recursos Humanos Deslocamento 36.000 € 4.500 € Aluguer de Laboratório 14.400 € Total 54.900 € Resultados esperados Pretende-se isolar e identificar o(s) gene(s) responsáveis pela longevidade da Geochelone gigantea, ausente(s) na Geochelone radiata. A técnica de microarrays permite-nos obter os genes que estão a ser expressos apenas na espécie de maior longevidade, os quais são potenciais responsáveis por esta característica. Após a transfecção de tecidos com os mesmos obteremos tecidos com maior duração, os quais contêm os genes que procuramos. Os genes seleccionados podem servir como referências futuras, podendo vir a ser utilizados noutras células, tecidos ou organismos, com o objectivo de aumentar a sua longevidade. Bibliografia Kent, G., Carr, R.; 2001; Comparative Anatomy of the Vertebrates; 9ª edição; Mcgraw-Hill; New York. Glick, B., Pasternak, J.; 2003; Molecular Biotechnology Principles and Applications of Recombinant DNA; 3ª edição; ASM Press; Washington. Purves, W., Sadava, D., Orians, G., Heller, H.; Life The Science of Biology; 6ª edição; Sinauer Associates, Inc.; Massachussetts. Hartl, D., Jones, E.; 2001; Genetics Analysis of Genes and Genomes; 5ª edição; Jones and Bartlett Publishers, Inc; London. Keeton, W., Gould, J.; 1993; Biological Science; 5ª edição; W. W. Norton & Company; New York. 1 Aluno nº 17427 do curso de Biologia da Universidade de Évora; 2 Aluno nº 17674 do curso de Biologia da Universidade de Évora; 3 Aluno nº 17586 do curso de Biologia da Universidade de Évora