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Breve história da cultura de Breve história da cultura
Breve história da cultura de células La science est la l’âme de la prospérité des nations e la source progrès g vive de tout p Louis Pasteur Luís Banha C Carmo O Ornelas l Responsável do Laboratório Virologia Em cada célula do homem, estão inscritas A cor dos olhos e a argúcia do olhar O desenho dos ossos e o contorno da boca Do poema “Deus escreve direito”, O Búzio de Cós, 1997. Sofia de Mello Breyner y Andresen 27-11-2012 I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha 2 Cultura de células 1900 … 1900 Cultura de células – 27-11-2012 I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha 3 C l d él l 1900 Cultura de células – 1900 … 1907 - 2007 27-11-2012 A Ross Harrison I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha 4 Cultura de células 1900 … 1900 Cultura de células – • Um pouco de História: – Ross Harrison (1907) A cultura de células começou em 1907, com uma experiência para resolver um controvérsia em Neurobiologia. A hipótese examinada era conhecida como “ e não o produto da fusao de muitas células. Para resolver esta controvérsia, pequenas p q pedaços p ç de medula ((fibras nervosas)) foram colocadas sobre linfa, em câmara húmida e aquecida. Após observação regular, células nervosas individualizadas poderem ser vistas alongando-se l d para dentro d t da d linfa. li f 27-11-2012 I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha 5 Cultura de células 1900 … 1900 Cultura de células – 27-11-2012 I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha 6 Cultura de células 1900 … 1900 Cultura de células – Alexis Carrel: Um pioneiro da cultura de células 1911 J.E. M. volume XIII Estudou: •Formulação do meio de cultura, substituindo o soro coagulado por plasma normal, suplementando com extracto de embrião ou de musculo. •Introduziu técnicas de assépsia rigorosas. •Controlou a temperatura das culturas. 27-11-2012 I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha 7 Cultura de células 1900 … 1900 Cultura de células – Alexis Carrel: Um pioneiro na cultura de células • Desenvolveu um frasco em vidro, pyrex que substituiria os de relógio e as placas, que eram usadas em culturas culturas. 27-11-2012 I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha vidros 8 Cultura de células 1900 … 1900 Cultura de células – De messias cientifico à superstição 1912 Cultura de um Coração de galinha imortal 2012 • Esta fraude manteve‐se até a sua morte (1944). • O meio de cultura era considerado o elixir da juventude • New York world telegram tinha uma coluna mensal sobre o tema de cultura de células. Anualmente, no dia de acção de graças era celebrada o Happy Birthday das células. 27-11-2012 I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha 9 Cultura de células 1900 … 1900 Cultura de células – Todas as culturas de células eram realizadas em salas negras 27-11-2012 I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha 10 Cultura de células 1900 … 1900 Cultura de células – Sala dos Relatórios da TAC ‐ Serviço de Radiologia Antiga sala de Cultura de Tecidos (Drª Maria Teresa Furtado Dias, Lab. Patologia Experimental) 27-11-2012 I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha 11 Cultura de células 1900 a 1944 1900 a 1944 Cultura de células ‐ Alexis Carrel Prémio Nobel em 1912 9 A sutura vascular. 9 Vasos sanguíneos conservados d no ffrio i poderiam d i ser transplantados; 9 Em conjunto com Charles Lindberg, desenvolve uma bomba de perfusão que permitia a conservação de órgãos fora do corpo; – Soluto de Dakin (anti‐séptico): Cloro e Ácido Bórico. Aplicado durante a I guerra mundial, l d k ( é ) l Á d ó l d d d l que ajudou a salvar vidas. – Autor do livro “O Homem, Esse Desconhecido” 27-11-2012 I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha 12 Cultura de células 1900 a 1944 1900 a 1944 Cultura de células ‐ 27-11-2012 I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha 13 Cultura de células 1900 … 1900 Cultura de células – 27-11-2012 I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha 14 Cultura de células 1900 … 1900 Cultura de células – 27-11-2012 I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha 15 Cultura de células 1900… 1900 Cultura de células – A enzima que foi utilizada a partir de 1953 como rotina na cultura de celulas – A tripsina 24-11-2012 Cartilagem articular - IV Curso - Carmo Ornelas e Luis Banha 16 Cultura de células 1900 … 1900 Cultura de células – • George Otto Gey: – 1952: Estabelecimento da primeira “linha celular” humana, a partir de um adenocarcinoma do colo de ti de d uma biópsia bió i d d i d l d Henrietta Lacks (são células que sofreram uma mudança ge genética ét ca que as to torna a imortais); o ta s); Células HeLa com genoma do HPV 18 integrado (aneuploidia) 27-11-2012 I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha 17 Cultura de células 1900 … 1900 Cultura de células – • • Assim, em 6 meses consegue, de facto, uma linha celular que serviu para estudar o vírus da P li Polio O padrão seguro de exposição aos Raios X X, ao plutónio plutónio, ouro e fósforo radioactivo, onde foram estudados mais de 300 produtos químicos, extractos de plantas como taxol, foram determinados em células HeLa. 27-11-2012 Células HeLa I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha 18 Cultura de células 1900 … 1900 Cultura de células – 30 anos depois – 1980: A linha celular HeLa imortalizada por um virus oncogénico HPV 18 Só na decada de 80, o Professor Harald zur Hausen Só d d d 80 P f H ld H identifica o agente que imortalizou as celulas. Harald zur Hausen 27-11-2012 I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha 19 Cultura de células 1900 … 1900 Cultura de células – • Henry Eagle: – Publicou na Science, em 1959 a constituição do 1959, meio para cultura de células (meio MEM), em que todos os constituintes eram quimicamente definidos; – Condecorado em 1987 pelo Presidente Ronald Reagan, com a medalha da Ciência; 27-11-2012 I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha 20 Cultura de células 1900 … 1900 Cultura de células – Limite de Hayflick´ Hayflick´s – 1965: Demonstrou que os fibroblastos humanos, em cultura, tinham um número limitado de divisões; MRC5: Fibroblastos pulmão de embrião humano Leonard Hayflick 27-11-2012 I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha 21 Cultura de células 1900 … 1900 Cultura de células – • John Littlefield: – 1964: Técnica de fusão de células. Meio do Chapéu M i HAT: Meio HAT Meio M i que permite it selecção l ã artificial tifi i l d das células él l Trabalho original publicado na Science 145: 709, 1964 27-11-2012 I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha 22 Cultura de células 1900 … 1900 Cultura de células – • H. Harris e Watkins: – 1965: 1965 H Heterocario t i Fusão de duas células afim de formar uma célula combinada com dois núcleos separados. 27-11-2012 I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha 23 Cultura de células 1900 … 1900 Cultura de células – • George Kohler e Cesar Milstein: ¾ 1975: Descoberta dos anticorpos p monoclonais ((anticorpos p especificos); ¾ Prémio Nobel em 1984 Máquina de fazer anticorpos monoclonais George Kohler Cesar Milstein 27-11-2012 I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha 24 Cultura de células 1900 … 1900 Cultura de células – • Martin Evans: – 1986: Cultivou e Isolou células estaminais de embrião de ratinho (células pluripotenciais); • Em 1989 nasceram os primeiros ratinhos em que 1 gene podia ser desactivado; 27-11-2012 I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha 25 Cultura de células 1900 … 1900 Cultura de células – • James Thompson e John Gearhart: – 1998: Cultura e Isolamento de células estaminais humanas (células imortais e pluripotenciais) 27-11-2012 I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha 26 Cultura de células 1900 … 1900 Cultura de células – • Olivier Smithies (Bioquímico) • Martin Evans (Embriologista) • Mario Capecchi (Biofísico) – Prémio Nobel 2007 Descoberta “dos princípios que permitem introduzir alterações nos genes de ratinho através da utilização de células estaminais embrionárias” Comité Nobel sueco Jornal Público, 09-10-2007 27-11-2012 I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha 27 Cultura de células 1900 … 1900 Cultura de células – De Ross Harrisson: – 1907 – Cultura de fibra nervosa em vidro de g relógio A Shinya Yamanaka: – 2007 – Células estaminais induzidas a partir de pele humana p “doutrina doutrina do neurónio” neurónio 27-11-2012 I curso de virologia molecular em oncologia Carmo Ornelas e Luis Banha 28
