08h30 FELIPE GEYER

Patologia Molecular dos Tipos
Histológicos Especiais de Câncer
de Mama
Dr. Felipe Geyer
Sumário
• Heterogeneidade do câncer de mama
• Tipos especiais de carcinomas de mama
– vs subtipos moleculares
– entidades distintas
• Tipos especiais como modelo para
identificação de alvos terapêuticos
Heterogeneidade de câncer de mama
RE-
RE+
Classificação molecular
Hu et al. BMC Genomics 2006;7:96
Taxonomia de microarrays foi baseada em…
Ductal
Lobular
Tubular
Medular
Micropapilífero
Lobular pleomórfico
Mucinoso
Rico em lipídeos
Metaplásico
Secretor
Tipos especiais de câncer de mama
• 17 tipos especiais morfológicos
• 25-30% de todos carcinomas
• Implicações clínicas e
prognósticas importantes
• Características biológicas
distintas
Questionamentos
• Têm os tipos histológicos especiais subtipos moleculares
distintos?
• São os tipos histológicos especiais entidades moleculares
distintas?
Têm os tipos especiais subtipos
moleculares distintos?
• 113 tumores incluindo 11 tipos especiais
– Operon arrays – 24,650 genes
– TMAs – 22 marcadores imuno-histoquímicos
Tipos especiais são mais homogêneos ao
nível transcriptômico
Luminal
Basal-like Mol apócrino
Adenóide cístico
Medular
Metaplásico
Mucinoso A
CLI clássico/ Tubular
Mucinoso B
Neuroendócrino
Micropapilífero
CLI pleomórfico
Apócrino
Weigelt et al. J Pathol 2008
Tipos especiais vs subtipos moleculares
Neuroendócrino
Luminal
Mucinoso
Tubular
CLI clássico
HER2
Micropapilífero
Apócrino
CLI pleomórfico
Molecular apócrino
Adenóide cístico
Secretor
Medular
Basal-like
Metaplásico
Weigelt, Geyer & Reis-Filho Mol Oncol 2010
CLI vs CDI
pareados por grau e subtipo molecular
CDI
CLI
Weigelt et al. J Pathol 2010
CA mucinoso vs CA neuroendócrino vs CDI
pareados por grau e subtipo molecular
CDI
mucinoso/neuroendócrino
IPA Network: Desenvolvimento e função de
tecido conjuntivo, desenvolvimento e
função de sistema muscular esquelético,
desenvolvimento de tecidos
Weigelt et al. Mod Pathol 2009
CA metaplásico vs CDIs de subtipo basal
Carcinomas metaplásicos apresentam menor expressão de PTEN e TOP2A:
Possível causa para baixa resposta a antracíclicos?
Weigelt et al. BCRT 2009
CA tubular vs CDI G1
pareados por subtipo molecular
CA tubular
Via do RE hiperexpressa
INPP4B: gene supressor
tumoral com atividade inibitória
na via PI3K
Hipótese: melhor prognóstico de CAs tubulares poderia estar associado
à maior ativação da via do RE e ativação menos robusta da via PI3K?
Lopez-Garcia et al. J Pathol 2010
São os tipos histológicos
especiais entidades moleculares
distintas?
Carcinoma secretor
t(12;15) (p13;q25)
ETV6 split apart
ETV6-NTRK3 fusão
Reis-Filho et al. Histopathology 2008
Carcinomas adenóide císticos
t(6;9) (q22-23;p23-24)
t(6;9)(q22–23;p23–24)
MYB-NFIB
Persson et al. PNAS November 2009
Carcinoma micropapilífero
• 1-3% de todos carcinomas mamários, 7% em carcinomas mistos
• padrão de crescimento“inside-out”
• associação frequente com invasão angiolinfática
• alta incidência de metástase linfonodal
• estágio avançado na apresentação
• pior prognóstico mesmo em casos com histologia mista
Carcinoma micropapilífero puro
Marchio et al. J Pathol 2008
Subtipo Luminal B
Carcinoma micropapilífero vs CDI
Marchio et al. J Pathol 2008
Carcinoma micropapilífero misto
Componentes micropap e ñ-micropap de carcinomas
micropapilíferos mistos
Componentes micropapilíferos e não-micropapilíferos são
praticamente idênticos ao nível genético
Marchio et al. J Pathol 2009
Carcinoma micropapilífero vs CDI
Pure and mixed MPC cluster
Carcinomas micropapilíferos puros e mistos são distintos de
CDIs pareados para RE e grau histológico
Marchio et al. J Pathol 2009
Tipos especiais como modelo
para identificação de alvos
terapêuticos
Subgrupo estudado
• Tipos especiais de câncer de mama
•
•
•
perfil molecular mais homogêneo
menos hits genéticos
meio para identificação de alvos
terapêuticos
• Carcinoma lobular invasivo
– 10-15% de todos carcinomas
– RE+/ RP+/ HER2-
• Perfil molecular
– luminal A
– ganho de 1q
– perda de 16q
• Inativação de CDH1 (E-caderina)
• Opções terapêuticas limitadas
– tamoxifeno / inibidores de aromatase
– pouca resposta à quimioterapia
Carcinoma lobular invasivo clássico
• N=13
• Análise do número de cópias
• aCGH
– 5.8K array
– Chromosome 8 Tiling Path Arrays
8p11
MDA-MB-134 tem um fenótipo luminal, 16q-, deleção de E-caderina
FGFR1
Integração de CGH e expressão gênica
Gene
Expression data
SPFH domain protein 2 precursor
-0.8361
PROSC
0.776691
G protein-coupled receptor 124
-0.83295
RNA polymerase III transcription initiation factor BRF2
NA
Rab11-FIP1
0.815596
Eukaryotic translation initiation factor 4E-binding protein 1 (4E-BP1)
NA
Set1/Ash2 histone methyltransferase complex subunit ASH2
2.425071
Steroidogenic acute regulatory protein, mitochondrial precursor
NA
Small nuclear ribonuclear CaSm
NA
BAG-4
NA
DDHD domain containing 2
1.370019
HTPAP
1.577745
WHSC1L1
2.016795
leucine zipper-EF-hand containing transmembrane protein 2
NA
FGFR-1
3.03378
Transforming, acidic coiled-coil containing protein 1
2.420038
Pleckstrin homology domain containing 2
-0.03859
BBP-like protein 1 (BLP1)
0.736262
ADAM 9
0.390474
ADAM5
-0.05962
ADAM 18
-0.00801
ADAM 3A
-0.85178
Indoleamine-pyrrole 2,3-dioxygenase
-0.15382
C8orf4 (Thyroid cancer protein 1)
0.283563
zinc finger, matrin type 4
NA
Secreted frizzled-related protein 1
NA
golgi autoantigen, golgin subfamily a, 7
-0.66328
SLD5
0.567344
1-AGP acyltransferase 6
-0.2739
Inibição de FGFR1 diminui sobrevida de células MDA-MB-134
cal51
ZR75.1
mcf7
mda134
*: p<0.05
Reis-Filho et al. Clin Cancer Res 2006
Amplificação/ hiperexpressão de FGFR1 está
associada à tumores RE+, RP-, Ki67 alto, pior
sobrevida e resistência à terapia endócrina
Tumores RE+ - DFS
Elbauomy Elsheikh et al. Breast Cancer Res 2007
Turner et al. Cancer Res 2010
Amplificação de FGFR1 está associada à
resistência à terapia endócrina
Turner et al. Cancer Res 2010
Ensaio clínico fase II de inibidor de FGFR1 sugere
ação anti-tumoral em pctes com tumor RE+/FGFR1+
A multicenter, open-label phase II trial of
dovitinib, a fibroblast growth factor
receptor 1 (FGFR1) inhibitor, in FGFR1amplified and nonamplified metastatic
breast cancer (BC).
• Dovitinib (TKI258) em ca de mama metastático HER2• 77 pacientes
– Grupo 1 FGFR1+/ HR+ - 21 pctes
– Grupo 3 FGFR1-/ HR+ - 34 pctes
– Grupo 4 FGFR1-/ HR- - 22 pctes
• Resultados
– 13% de resposta parcial no grupo 1
– 44%, 29% e 11% de doença estável em grupos 1, 3 e 4,
respectivamente
Andre F et al JCO 2011/ ASCO abstract
Conclusões
• Tipos especiais de câncer de mama
– Boa correlação com subtipos moleculares
– Entidades morfológicas e moleculares distintas
• Carcinoma secretório – translocação específica
• Carcinoma adenóide cístico – translocação específica
• Carcinoma micropapilífero – perfil fenotípico e genético de luminal B
– Meio para identificação de alvos terapêuticos
• FGFR1 é um potencial alvo terapêutico em carcinomas RE+
Agradecimentos
HIAE
Angela Vergara de Oliveira
Alanna M. P. S. Bezerra
Christina Shiang
Denise da C. Pasqualin
Ebe Christie de Oliveira
José Norberto Stavale
Leandro A. L. Martins
Lidiane V. Marins
Marcos Takeo Obara
Marcus V. N. Corpa
Renee Zon Filippi
Ricardo S. Macarenco
Vanderlei Segatelli
ICESP
Fernando Aguiar
Evandro Sobroza
Ibere C. Soares
Juliana Ravanini
Leika Miyahara
Marcelo Gianotti
Raphael Medeiros
Romulo Loss Mattedi
ICR
Jorge S Reis-Filho
Maryou Lambros
Rachael Natrajan
Radost Vatcheva
Caterina Marchio
Konstantin Dedes
Daniel Wetterskog
Magali Lacroix-Triki
M. Angeles Lopez-Garcia
Kay Savage
Take home messages
• Cada tipo especial de câncer de mama é mais
homogêneo ao nível molecular
• Luminal:
– Tubular, CLI clássico, neuroendócrino e mucinoso
• Basal-like:
– Medular, metaplásico, secretório e adenóide cístico
• Molecular apócrino e HER2:
– Apócrino e CLI pleomórfico
Take home messages
• Carcinoma secretório
– translocação cromossômica recorrente específica
• Carcinoma micropapilífero
– entidade morfológica e molecular distinta
– características fenotípicas e genéticas de luminal B
– presença de um componente micropapilífero em carcinoma
misto
• características fenotípicas e genéticas micropapilares-símile
Take home messages
• Carcinoma adenóide cístico
–
–
–
–
–
–
entidade morfológica e molecular distinta
triplo negativo por imuno-histoquímica
basal-like por microarrays
fusão gênica MYB-NFIB recorrente
poucas alterações de número de cópias de DNA
ausência de disfunção de BRCA1
Take home messages
• Cerca de 50% dos CLIs apresentam
amplificação de FGFR1.
• Cerca de 10% dos carcinomas RE+ apresentam
amplificação de FGFR1.
–
–
–
–
PRKI67 alto
pior sobrevida
resistência à terapia endócrina
• FGFR1 é um potencial alvo terapêutico em
carcinomas RE+.
FGFR1 é hiperexpresso quando amplificado
Tipos especiais: entidades
distintas ou apenas figuras
bonitas?
Carcinoma adenóide cístico
•
•
•
•
0,1 – 1% de todos carcinomas mamários
morfologia semelhante à glândula salivar
maioria de baixo grau histológico
comportamento clínico excelente
Carcinomas adenóide císticos apresentam
perfil triplo negativo
Trendell
Smith et al.,
1999 (N=6)
Arpino et
al., 2002
(N=28)
Mastropasqua
et al., 2005
(N=20)
Crisi et al.,
2005
(N=6)
Azoulay et al.,
2005
(N=18)
Weigelt et
al, 2008
(N=4)
Kahnfir et
al, 2011
(n=61)
RE +
0%
46%
15%
0%
0%
0%
4%
RP +
0%
36%
10%
0%
0%
0%
7%
HER2 +
0%
NA
0%
0%
0%
0%
0%
p63 +
NA
NA
85%
NA
100%
50%
NA
Citoqueratina 5/6 +
NA
NA
NA
NA
100%
75%
NA
c-KIT (CD117) +
NA
NA
95%
100%
100%
100%
NA
Marchio et al. JCP 2010 (atualizado em agosto 2011)
Carcinomas adenóide císticos são do
subtipo basal-like por microarrays
Basal-like
Adenóide cístico
Weigelt et al. J Pathol 2008
A translocação t(6;9) resulta em hiperexpressão
do mRNA e proteína de MYB
Persson et al. PNAS 2009
Nem todos carcinomas adenóide
císticos de cabeça e pescoço
apresentam fusão gênica MYB-NFIB
Study
Cases
MYB-NIFB +
MYB-NFIB-
Persson et al.
PNAS 2010
7 (Frozen)
7 (100%)
0 (0%)
Mitani et al. Clin
Cancer Res 2010
72 (Frozen)
20 (28%)
52 (72%)
West et al. Am J
Surg Pathol 2011
37 (FFPE)
18 (49%)
19 (51%)*
(6 casos c/
rearranjo de
MYB)
Brill et al. Mod
Pathol 2011
29 (Frozen)
28 (FFPE)
25 (86%)
12 (43%)
4 (14%)
16 (57%)
Carcinomas adenóide císticos de mama
apresentam fusão gênica MYB-NFIB
• 13 casos revistos por 3 patologistas
– 12 mostraram a fusão gênica MYB-NFIB
Wetterskog et al. J Pathol 2011
Carcinomas adenóide císticos mostram perfil genômico
distinto de CDIs pareados por grau histológico
CDI GH1
Ca Ad Cístico vs CDI pareado por GH
Carcinomas adenóide císticos
Wetterskog et al. J Pathol 2011
Carcinomas adenóide císticos mostram perfil genômico
distinto de CDIs triplo negativo e basal-like
CDI triplo negativo
Ca Ad Císticos vs CDIs triplo negativo
Carcinoma adenóide cístico
Wetterskog et al. J Pathol 2011
Carcinomas adenóide císticos não
apresentam disfunção de BRCA1
Non-TNBC
TNBC
Turner et al. Oncogene 2007
Wetterskog et al. J Pathol 2011
MDA-MB-134 é sensivel ao inibidor de FGFR1 SU5402
cal51
ZR75.1
mcf7
mda134
*: p<0.05
Reis-Filho et al. Clin Cancer Res 2006
Tipos especiais vs imunofenótipo
Mucinoso
Neuroendócrino
Medular
Metaplásico
Apócrino
Micropapilífero
Secretor
CLI pleomórfico
Papilífero
Adenóide cístico
Células acinares
Reis-Filho et al., Histopathology 2006; Rakha E, Reis-Filho JS, Ellis IO. JCO, 2008; Lae et al. Mod Pathol 2008;
Weiget et al., J Pathol 2008; Weigelt et al., Breast Cancer Res Treat 2008