Efeito do touro na taxa de embriões produzidos
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Efeito do touro na taxa de embriões produzidos
EFEITO DO TOURO NA TAXA DE EMBRIÕES PRODUZIDOS IN VITRO, PRENHEZ E MORTE EMBRIONÁRIA. RESULTADOS PRELIMINARES. Pontes, J.H.F.1; Spegiorin, M.R.2 ; Silva, K.C.F.2; Seneda, M.M.2. 1 In Vitro Brasil Ltda, 13800-970, Mogi Mirim-SP, Brasil; 2 Departamento de Clínicas Verterinárias, Universidade Estadual de Londrina, 86051-990, Londrina-PR, Brasil. [email protected] O efeito do touro é um dos principais obstáculos à obtenção de melhores índices de eficiência na produção in vitro de embriões (PIVE). Para avaliar o impacto disso, quatro touros Nelore foram avaliados quanto à taxa de produção de embriões, taxa de prenhez e morte embrionária (ME). Os dados foram obtidos na empresa In Vitro Brasil Ltda, Mogi Mirim – SP. Os oócitos foram obtidos por aspiração folicular (OPU), de vacas Nelore. Utilizou-se sêmen congelado, obtido de centrais de colheita de sêmen. Os oócitos foram selecionados e, em seguida, maturados in vitro (MIV), por 24 horas, em meio TCM 199 Bicarbonato, acrescido de piruvato/LH/FSH +10% de SFB, a 38,8ºC, em 5% CO2 em ar. Após MIV os oócitos seguiram para gotas de meio FIV (meio Tyrodes acrescido de BSA, piruvato, gentamicina e heparina, esta numa concentração de 10µg/mL), onde receberam o sêmen diluído a 1x106 espermatozóides vivos/mL, preparado em gradiente Percoll (45-90%). Em seguida à fecundação in vitro (FIV), os zigotos e as células do cumulus foram transferidos para gotas de cultivo in vitro (CIV) contendo meio de cultura de embriões (fluido de oviduto sintético modificado SOFaa BSA). Os embriões viáveis D7 (considerando D0 como dia da FIV) foram transferidos para novilhas receptoras sincronizadas, por meio de inovulação transcervical. O diagnóstico de gestação foi realizado com auxílio da ultra-sonografia. A morte embrionária foi calculada pela diferença de percentual entre as taxas de gestação com 30 e 60 dias. Dos 14.270 oócitos, coletados nas 946 sessões de OPU, obteve-se um índice de 33,5% (4.781/14.270) de embriões produzidos, sendo de 33,2% (4.736/14.270) o índice de embriões considerados viáveis para transferência. A taxa de prenhez considerou apenas os embriões com transferência confirmada, sendo, então, de 32,0% (1.467/4.586). A taxa de morte embrionária total foi de 12,7 % (187/1.467). Os resultados de cada touro, quanto à variável embriões produzidos, foram os seguintes: Touro A 23,3% (1.112/4.764), Touro B 37,6% (1.183/3.148), Touro C 34,5% (962/2.785) e Touro D 42,7% (1.524/3.573). No aspecto taxa de prenhez, o Touro A obteve 29,2% (301/1.031), o Touro B 31,8% (365/1.147), o Touro C 33,6% (307/915) e o Touro D 33,1% (494/1.493). No que se refere à morte embrionária, o Touro A obteve 14,0% (42/301), o Touro B 9,9% (36/365), o Touro C 12,4% (38/307) e o Touro D 14,4% (71/494). Desse modo, a partir da constatação da importância do efeito do touro, modificações nos protocolos de processamento do sêmen estão em andamento, a fim de incrementar os índices dos touros que obtiveram os piores resultados. Produção in vitro de embriões (PIV). EFFECT OF THE BULL ON IN VITRO EMBRYO PRODUCTION, PREGNANCY AND EMBRYONIC DEATH RATES. PRELIMINARY RESULTS. Pontes, J.H.F.1; Spegiorin, M.R.2; Silva, K.C.F.2; Seneda, M.M.2. 1 In Vitro Brasil Ltda, 13800-970, Mogi Mirim-SP, Brasil; 2 Departamento de Clínicas Verterinárias, Universidade Estadual de Londrina, 86051-990, Londrina-PR, Brasil. [email protected] The effect of the bull is one of the principal problems to obtain better efficiency rates on the in vitro embryos production. To evaluate the impact of that, four Nelore bulls were evaluated on embryo production, pregnancy and embryonic death. The data were obtained in the company In Vitro Brasil Ltda, Mogi Mirim - SP. The oocytes were obtained by ovum pick up (OPU), from Nelore cows. Frozen semen were obtained from commercial centers. Oocytes were selected and immediately matured in vitro (IVM) for 24 hours in TCM 199 Bicarbonate, added of piruvate/LH/FSH +10% of SFB, to 38,8ºC, in 5% CO2 in air. After IVM, oocytes were cultured in FIV medium (Tyrodes medium added of BSA, piruvate, gentamicin and heparin, this in a concentration of 10µg/mL), where they received semen (1x106 /mL), prepared in Percoll gradient (45-90%). Immediately after in vitro fertilization (IVF), zygotes and cumulus were transferred for drops of in vitro culture with medium (fluid of synthetic oviduct modified SOFaa BSA). The viable embryos on D7 (considering D0 as day of IVF) were transferred to synchronized heifers. The pregnancy diagnosis was performed by ultrasound. The embryonic death was evaluated by the difference of percentile between the pregnancy rates on 30 and 60 days. We obtained 14.270 oocytes, collected in the 946 sessions of OPU, resulting in 33,5% (4.781/14.270) embryos, being 33,2% (4.736/14.270) were transferred. The pregnancy rate just considered the embryos with confirmed transfer, was 32,0% (1.467/4.586). The total embryonic death rate was 12,7% (187/1.467). The results of each bull, considering the produced embryos, were the following: Bull A 23,3% (1.112/4.764), Bull B 37,6% (1.183/3.148), Bull C 34,5% (962/2.785) and Bull D 42,7% (1.524/3.573). About pregnancy rate, Bull A obtained 29,2% (301/1.031), Bull B 31,8% (365/1.147), Bull C 33,6% (307/915) and Bull D 33,1% (494/1.493). Considering embryonic death, Bull A obtained 14,0% (42/301), Bull B 9,9% (36/365), Bull C 12,4% (38/307) and Bull D 14,4% (71/494). In conclusion, after we realized the importance of bull effect, modifications in the protocols of semen processing are in progress, in order to increase in vitro embryo production.
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