PESQUISA DE SOROGRUPOS DE EPEC E TESTE DE - CRMV

PESQUISA DE SOROGRUPOS DE EPEC E TESTE DE SENSIBILIDADE AOS
ANTIMICROBIANOS EM ESTIRPES DE Escherichia coli ISOLADAS DE ALIMENTOS
COMERCIALIZADOS NA CIDADE DE SALVADOR – BAHIA.
RESEARCH OF EPEC SEROGROUPS AND ANTIMICROBIAL SUSCEPTIBILITY
TESTING OF Escherichia coli STRAINS ISOLATED FROM FOODS
COMMERCIALIZED IN THE CITY OF SALVADOR – BAHIA.
Carina Santiago Chaves1; Wellington Luís Reis Costa1; Tatiane Santana Sales2;
Juliana da Silva Rocha3; Lia Muniz Barreto Fernandes4;
Maurício Costa Alves da Silva4.
1
Médico (a) Veterinário (a), pós-graduando (a) em Inspeção Industrial e Sanitária de
Produtos de Origem Animal, Sociedade Baiana de Medicina Veterinária.
2
Médica Veterinária, Laboratório de Sanidade Avícola da Bahia, Escola de Medicina
Veterinária, Universidade Federal da Bahia.
3
Docente do Instituto Médio Agrário de Waku Kungo, Angola.
4
Docente do Departamento de Medicina Veterinária Preventiva, Escola de Medicina
Veterinária, Universidade Federal da Bahia.
Palavras-chave: Alimentos; Escherichia coli; Anitimicrobianos; EPEC.
Introdução
A bactéria Escherichia coli habita os intestinos dos animais e dos humanos, normalmente
produzindo efeitos benéficos no organismo hospedeiro. No entanto, algumas estirpes de
E. coli podem apresentar potencial patogênico aos humanos aos animais, não sendo
consideradas como parte da microbiota intestinal normal (TODAR, 2008). Por ser um
microrganismo de habitat intestinal, sua presença em alimentos indica a falta de qualidade
higiênico-sanitária dos produtos, além de sugerir que outros patógenos intestinais possam
estar presentes nesses alimentos (PEDRO, 2009). Sabe-se que o uso indiscriminado de
antimicrobianos em medicina humana e veterinária tem favorecido a seleção de linhagens
de micro-organismos cada vez mais resistentes, interferindo no tratamento efetivo das
infecções bacterianas tanto em humanos quanto nos animais. Desta forma, objetivou-se
neste estudo avaliar o perfil de sensibilidade aos antimicrobianos de 44 estirpes de E. coli
isoladas de alimentos comercializados na cidade de Salvador, bem como identificar
sorologicamente a presença de estirpes de Escherichia coli enteropatogênica clássica
(EPEC) nas amostras isoladas.
Material e Métodos
Foram utilizadas 44 estirpes de Escherichia coli, identificadas através de provas
bioquímicas de rotina em estudos anteriores, isoladas de amostras de diversos alimentos
comercializados na cidade de Salvador-BA. A técnica utilizada para determinação do perfil
de sensibilidade aos antimicrobianos foi o teste de difusão em ágar, utilizando-se a
metodologia descrita por Bauer et al. (1966), sendo testados os seguintes
antimicrobianos: amoxicilina (10µg); ampicilina (10µg); tetraciclina (30µg); estreptomicina
(10µg); trimetoprim (5µg); cefalotina (30µg); gentamicina (10µg); ciprofloxacina (5µg);
norfloxacina (10µg); sulfonamida (300µg) e nitrofurantoína. Para a pesquisa de EPEC, as
44 estirpes de E. coli foram repicadas em caldo BHI e incubadas a 35oC por 18 a 24
horas. Em seguida, as estirpes foram semeadas em ágar Müller-Hinton (Himedia) e
incubadas a 35oC por 24 horas. Foram, então, preparadas suspensões espessas em
0,3mL de solução salina (NaCl a 0,85%) estéril, as quais foram aquecidas em banhomaria a 100oC por 15 minutos. Placas de vidro foram utilizadas para verificar a reação de
positividade quanto à presença de sorogrupos de EPEC, através da adição de uma gota
da suspensão bacteriana após o tratamento térmico com uma gota de cada um dos antisoros polivalentes A, B e C, separadamente. Em seguida, as suspensões bacterianas e
os anti-soros foram homogeneizados para posterior leitura do teste através da formação
ou não de precipitados (Probac do Brasil Ltda, São Paulo, Brasil).
Resultados e Discussão
Das 44 estirpes de Escherichia coli submetidas ao teste de sensibilidade aos
antimicrobianos, 42 (95,4%) foram resistentes entre dois e nove antimicrobianos, sendo
que nenhuma cepa apresentou sensibilidade a todos os antimicrobianos testados. Das 11
drogas testadas ressalta-se que as estirpes de E. coli foram mais sensíveis para
gentamicina, norfloxacina e trimetoprin, concordando com o trabalho realizado com
estirpes da mesma bactéria oriundas de amostras de alcatra (KASNOWSKI et al., 2007).
Em contrapartida, apresentaram maior perfil de resistência para ampicilina (77,3%),
sulfonamida (81,8%) e tetraciclina (90,9%). Das estirpes testadas, 84 apresentaram-se
multi-resistentes, sendo este percentual bastante expressivo. Das 44 estirpes submetidas
aos testes sorológicos, 4 (9,1%) foram confirmadas como pertencentes ao grupo das
EPEC, sendo que todas estas apresentaram resistência a pelo menos um antimicrobiano.
Conclusão
O elevado índice de multi-resistência encontrado entre as estirpes analisadas é bastante
preocupante e exige uma fiscalização maior para o cumprimento de normas que visem à
garantia da utilização de antimicrobianos de forma mais racional. Embora os resultados
da presença de EPEC encontrados no presente estudo sejam relativamente baixos, sabese que as estirpes de EPEC podem acometer pessoas de diversas faixas etárias,
especialmente crianças e pessoas imunocomprometidas, podendo causar sérios danos
ao organismo hospedeiro, representando assim, um grave problema de saúde pública.
Referências
BAUER, A.W.; KIRBY, W. M. M.; SHERRIS, J.C.; TURCK, M. Antibiotic susceptibility
testing by a standartized single disck method. The American Journal of Clinical
Pathology. v.45, n.4, p. 493-496. 1966.
KASNOWSKI, M.C.; FRANCO, R.M.; OLIVEIRA, L.A.T., VALENTE, A.M.; MESQUITA,
E.F.M.; CARVALHO,J.C.A.P. Resistência a antimicrobianos de estirpes de Listeria spp. e
Escherichia coli isoladas de amostras de alcatra. Higiene Alimentar, vol. 21. nº 156,
novembro, 2007.
PEDRO, S.C.M. Determinação de grupos filogenéticos e pesquisa de genes de
virulência em isolados de Escherichia coli obtidos de amostras de queijo minas.
2009. 73f. Tese (doutorado) - Universidade de São Paulo, São Paulo.
TODAR, K. Pathogenic E. coli, Todar’s Online Textbook of Bacteriology. 2008,
Disponível em: http://www.textbookofbacteriology.net/e.coli.html, Acesso em: 24 ago 09.
Autor a ser contactado: Mauricio Costa Alves da Silva - Universidade Federal da Bahia, Salvador – BA –
e-mail: [email protected]