faculdade montes belos

Transcrição

Revista Faculdade Montes Belos (FMB), v. 6, n° 1, 2013, p (1-21), 2013 ISSN 18088597
Avaliação da estabilidade e atividade antifúngica de formulações de xampu
anticaspa contendo piritionato de zinco e a influência da adição
de extratos vegetais
Mariana Almeida de Oliveira, Michelly-ross Basilio de Faria,
Wanessa Machado Andrade, Cristiane Karla Caetano Fernandes
1
Trabalho realizado por discentes das FMB para obtenção do título de Bacharel em Farmácia.
Discentes do curso de Farmácia da Faculdade de Montes Belos.
3
Orientadora do trabalho de conclusão de curso
2
Resumo-A caspa também conhecida como Pitiríase simples, é definida como uma
descamação leve a moderada do couro cabeludo, com diferentes graus de irritação ou eritema
e dor. É um distúrbio comum, que afeta 5% da população global. É um fenômeno que ocorre
principalmente após a puberdade (entre as idades de 20 e 30 anos), e afeta mais homens que
mulheres. Frequentemente esta associada à seborreia, sensações de prurido intermitente e
secura. A descamação característica do grau de irritação do couro cabeludo sugere
comprometimento ou alteração no processo de descamação natural. O aparecimento da caspa
normalmente se mostra com manchas pequenas e redondas, na parte superior da cabeça, no
entanto, pode ocorrer em qualquer parte do couro cabeludo. Isso resulta em dermatite
seborreica não é bem esclarecido ainda. É aceito como hipóteses para o surgimento, a
proliferação do fungo Malasseziafurfur. Estes microrganismos encontram-se especialmente
em regiões ricas em glândulas sebáceas, devido dispor de características lipofílicas,
ocasionando prurido e eritema. O tratamento da caspa é estabelecido considerando a idade do
paciente juntamente com a extensão e intensidade da manifestação clínica. Em grande parte
das terapias medicamentosas são empregados xampus, loções capilares ou cremes de uso
tópico. Há uma tendência mundial de adicionar em formulações cosméticas como os xampus
os extratos vegetais padronizados. Assim, este trabalho se ateve ao desenvolvimento, a
avaliação da estabilidade e atividade antifúngica de diferentes formulações de xampu
anticaspa contendo piritionato de zinco isolado e com a adição de extratos vegetais. Acerca
dos resultados, as formulações desenvolvidas apresentaramtolerância satisfatória em relação à
estabilidade, manutenção das características organolépticas, com pH sem variação
significativa nos valores das amostras e com viscosidade adequada frente as condições
adversas testadas no período de trinta diase em relação a atividade antifúngica pôde-se
concluir que as formulações mostraram resultados significativos podendo ser alternativas
viáveis ao combate à oleosidade capilar e ao tratamento da caspa. Porém mais testes são
necessários para determinar a concentração inibitória mínima e a ação inibitória de outros
extratos vegetais.
Palavras-chave: Alecrim. Arnica. Caspa. Piritionato de Zinco. Xampu.
Abstract: Dandruff also known as Common Pityriasis, is defined as mild to moderate scalp
scaling, with varying degrees of irritation or erythema and pain. It is a common disorder that
affects 5% of the global population. It is a phenomenon that occurs primarily after puberty
(between 20 and 30 year age), and affects more men than women. This is often associated with
seborrhea, intermittent itching and dryness sensations. The scaling feature of the degree scalp
irritation suggests impairment or change in natural desquamation process. The appearance of
dandruff usually shown with small round spots at held top, however, it can occur anywhere in
the scalp. This processcausesseborrheic dermatitis is not well understood yet. It is accepted as
hypotheses for the emergence, Malassezia furfur fungus proliferation. These microorganisms
are particularly in regions rich in sebaceous glands due have lipophilic characteristics, causing
itching and erythema. Dandruff treatment is determined having regard to patient age along
with the extent and severity of clinical manifestation. In much of drug therapies are employed
shampoos, lotions or topical creams. There is a worldwide trend to add in cosmetic
formulations such as shampoos standardized plant extracts. This study adhered to the
development, evaluation of stability and antifungal activity of different formulations for
dandruff shampoo containing zinc pyrithione alone and with the addition of plant extracts. On
these results, formulations developed tolerance exhibited satisfactory with respect to stability,
maintenance of organoleptic characteristics, with no significant variation in samples’ pH
values with suitable viscosity and front adverse conditions tested on thirty day period and for
antifungal activity could conclude that both formulations showed significant results could be
viable alternatives to combat hair greasiness and treatment of dandruff. But more tests are
needed to determine the minimum inhibitory concentration and the inhibitory action of other
plant extracts.
Key words: Arnica, Dandruff. Rosemary. Shampoo. Zinc Pyrithione.
psoríase e o eczema são outras condições
1 Introdução
que muitas vezes são confundidas com a
Eczema seborreica ou dermatite
dermatose seborreica e que requerem
caracteriza-se por uma alteração crônica,
atenção médica e outros (LAMORE et. al.,
recorrente e não contagiosa, pela qual se
2010).
observa inflamação em áreas da pele nas
O que causa a dermatite seborreica
quais há grande quantidade de glândulas
não é bem esclarecido ainda (FORMARIZ
sebáceas.
lesões
et al., 2005). É aceito como uma das
forma
hipóteses para o surgimento da dermatite
É
evidenciada
eritemato-descamativas
por
de
arredondada e ovaladas, em áreas muito
seborreica,
a
proliferação
do
oleosas como no couro cabeludo, dorso e
Malassezia furfur, que se encontra na pele.
face. Entretanto, outras partes corporais
Este
como, axilas, região mamária, nádegas e
especialmente
virilha também são alvos de acometimento
glândulas sebáceas, devido dispor de
(GUPTA, 2004; HARDING et al., 2002).
características
microrganismo
em
encontra-se
regiões
lipofílicas,
fungo
ricas
e
em
ocasionar
A dermatite seborreica, em muitos
prurido e eritema (FUJIWARA et al.,
casos, é tida como uma forma mais severa
2009). Em algumas situações de estresse
da caspa, pela qual requer cuidados
emocional ou fadiga, ingestão de bebidas
médicos, todavia, o mais provável é que
alcoólicas e alimentos gordurosos, fumo e
seja uma circunstância diferente, que
banhos quentes, a doença costuma se
ocasiona rubor, prurido e inflamação do
agravar (ISAAC et al., 2008).
couro cabeludo, além da descamação. A
De início, a caspa é um processo
mostra-se
simplesmente
como
uma
não inflamatório, mas, caso não seja
manifestação de atividade androgenética
tratada, porta-se como um ótimo meio para
aumentada,
o crescimento exagerado da microbiota
replicação celular acelerada. No primeiro
normal do couro cabeludo, sendo potencial
caso, observa-se a pitiríase esteatóide, e no
causador de queda de cabelos branda e
outro caso a pitiríase simples (CUNHA,
localizada (LEONARDI et al., 2002).
2009).
denotando
uma
taxa
de
A Pitiríase capitis, estado peculiar
A principal razão da manifestação
ou caspa é encontrada no couro cabeludo, é
de caspa é a irritação do couro cabeludo.
a expressão clínica mais habitual da
Descreve-se
Pitiríase, um tipo de micose lipofílica que
Malassezia furfur seja um dos fatores
se
de
desencadeadores dessa irritação sobre o
pequenas escamas, que acometem os
couro cabeludo. Alguns estudos afirmam
ombros e o tórax, especialmente, depois do
que esse fungo é capaz de prover lipídios
ato de pentear os cabelos, não propiciando
livres a partir do sebo humano. Assim
fenômenos
sendo, sugere-se que a irritação do couro
mostra
pelo
desprendimento
inflamatórios
no
couro
cabeludo (LIMA, 2002).
que
a
ação
do
fungo
cabeludo provenha da peroxidação e
Na Pitiríase graxa ou Pitiriase
oxidação desencadeada pela ação do
capitis steatoides, as escamas que se
Malassezia furfur sobre os lipídios do
desprendem
couro cabeludo (CARMINI, 1999).
são
mais
espessas
e
acompanhadas por leve eritema, que
O
tratamento
da
caspa
é
podem ser vistas na fronte e região lateral
estabelecido tendo como consideração a
do couro cabeludo. Tal tipo de Pitiríase
idade do paciente juntamente com a
está
extensão e intensidade da manifestação
acompanhado
hiperseborréia.
Suas
sempre
de
escamas
são
clinica.
Mas,
não
há
tratamento
pegajosas e amareladas, e que depois da
farmacológico que elimine definitivamente
higienização do couro cabeludo com
a doença, podendo somente controlar os
xampu, manifestam-se secas por um ou
sintomas (BALLONE, 2011).
dois dias (JORG HEUKELBACH et al,
2006).
Na maioria dos casos, o tratamento
é realizado com antifúngicos modernos,
Existem dois expressivos fatores
que possuem amplo espectro de ação e
para que ocorra a caspa. Um de natureza
altos
poderes
fungicidas,
como
os
irritativa, ligado à presença do Malassezia
Imidazólicos (BARNETT et al., 1977). Em
furfur e seborreia. E o outro fator, a caspa
grande parte das terapias medicamentosas
são
empregadas
formulações
como:
formulações de xampus são utilizadas
xampus, loções capilares ou cremes de uso
combinações com extratos vegetais a fim
tópico (BARONI et al., 2000).
de se conseguir fórmulas alternativas, com
É de extrema importância atentar
perfil eficaz e baixa agressividade que
para diversos fatores no desenvolvimento
possam ser utilizadas por uma vasta gama
de xampus para tratar a caspa, dentre eles a
de indivíduos (BALMÉ, 1994).
segurança dermatológica. Os xampus não
De acordo com (ISAAC et al.
devem apresentar riscos à pele e aos olhos.
2008), ultimamente, é fato evidenciado o
No decurso da higienização dos cabelos é
aumento no estudo de plantas provindas da
comum as formulações entrarem em
medicina popular. Esta valorização de
contato com a face e os olhos. Caso o
plantas gerou uma crescente procura por
produto seja adequadamente desenvolvido,
informações
este contato geralmente não apresenta
cientificamente se são realmente seguras e
risco, porém se ocasionalmente ocorrer
possuem eficácia terapêutica.
contato com a formulação concentrada
que
comprovasse
Um fitocosmético é submetido a
(devido ao tipo de tensoativo e sua
várias
concentração), graves riscos acerca de
proposição, criação e desenvolvimento
casos como irritação dos olhos ou pele
adicionando os testes de estabilidade, a fim
passam a existir. Dessa maneira, as
de garantir a qualidade durante a vida útil
formulações
devem
(FENNER et al., 2006).A reologia da
apresentar irritabilidade, ou baixa taxa de
formulação ajuda na avaliação e escolha da
irritação, contribuindo para ser usado
natureza físico-química do veículo, de tal
frequentemente,
garantir
maneira que torna possível perceber sinais
segurança aos pacientes com sensibilidade
iniciais de instabilidade física, tornando
dérmica e ocular (BARONI et al., 2000;
possível o controle de qualidade dos
ALMEIDA; BAHIA, 2003; CHORILLI et
constituintes, das formulações teste e do
al, 2006).
produto final (ISAAC et al., 2008).
de
xampu
e
não
também
Há uma tendência mundial de
etapas
de
pesquisa,
como:
Entre as várias espécies vegetais, a
adicionar, em formulações cosméticas os
arnica
extratos vegetais padronizados. Destes, são
chamissonis) e o alecrim (Rosmarinus
exigidos
officinalis)
estudos
minuciosos
sobre
(Arnica
montana
e
apresentam
terapêuticas
Arnica
diversas
composição do vegetal ou das plantas que
propriedades
tais
como
o compõem, dando origem assim aos
atividade anti-inflamatória, antimicrobiana
fitocosméticos (FENNER et al., 2006). Nas
e antioxidante (MONTALDO, 1991; MC
CAGE
et al., 2002; PERARO, 2006;
LEITE et al., 2009).
lactona
sesquiterpênica
helenalin
(BALMÉ, 1994; ARNICA IN FLORA OF
NORTH AMERICA, 2009).
1.1 Pirionato de zinco.
No tratamento da caspa, esta
espécie,
O Piritionato de zinco, de nome
científico
bis2-pyridylthio)zinc
estimula
o
bulbo
capilar,
auxiliando no recrescimento dos fios, na
1,1'-
rápida multiplicação das células da fibra, e
dioxide, é um agente antimicrobiano de
fornecendo fortalecimento para as raízes
amplo espectro. Apresenta-se como um
do cabelo. Também, ajuda a tratar os sinais
sólido incolor, usado como um agente
e sintomas de vermelhidão, prurido e
antifúngico
secura
e
streptococcus
antibacteriano
e
anti
(anti
staphylococcus)
relatado pela primeira vez na década de
provocados
pela
dermatite
seborreica e caspa (GOTO et al., 1996;
ROCHA, 2006).
1930 (BARNETT et al., 1977; LAMORE
et al., 2010).
E
1.3 Alecrim
bastante
utilizado
para
o
tratamento da caspa e dermatite seborreica
O alecrim, pertencente à Família
além de psoríase, eczema, micose, pele
Lamiaceae, é uma especiaria conhecida
seca, dermatite atópica (que é uma doença
desde a antiguidade por seus efeitos
crônica que causa inflamação da pele,
medicinais. Atualmente, diversos estudos
levando ao aparecimento de lesões e
têm
coceira), tinea crural (micose da virilha), e
antioxidante e antimicrobiana (BOND;
vitiligo. Deve ser usado topicamente em
BARRY, 1988).
concentrações em torno de 1 a 2 %
(CHARRO, 1997; BELLARE et al., 2001).
apontado
tal
especiaria
como
Os compostos ativos presentes nos
Rosmarinus
são
biomoléculas
considerados
secundárias.
As
como
partes
utilizadas das plantas são as folhas e as
1.2 Arnica
sumidades floridas, de onde é obtido o óleo
A arnica compreende um gênero
essencial
(CHORILLI,
2009).
Na
pertencente à família Asteraceae com
farmacologia é empregado in natura, como
cerca de 30 espécies herbáceas. Algumas
outras drogas vegetais ricas em óleos
espécies, como Arnica Montana e Arnica
voláteis, na preparação de infusões, na
chamissonis,
forma de preparações galênicas, como
apresentam
propriedades
antiinflamatórias, devido à presença da
xampus ou na aromatização de fórmulas
cabeça, no entanto, pode ocorrer em
destinadas ao uso oral (PERARO, 2006).
qualquer
Quando adicionado as formulações
parte
Clinicamente,
do
os
couro
cabeludo.
flocos
branco-
de xampus, o alecrim aumenta a circulação
acinzentados proveniente da descamação
no couro cabeludo e, assim, melhora o
do epitélio da cabeça são frequentemente
crescimento do cabelo, e também atua
visíveis, presos no cabelo e nos ombros
como um condicionador geral e tônico para
(SIMÕES et al., 2000).
o cabelo e couro cabeludo. (PIE´RARDFRANCHIMONT, 2005).
Comumente, a caspa é classificada
como uma dermatite seborreica branda do
couro cabeludo. Sua patogênese ainda não
é completamente esclarecida, embora a
2 Revisão bibliográfica
levedura
A caspa também conhecida como
Malasseziafurfur
tenha
sido
proposta como um dos fatores etiológicos.
Pitiríase simples, é definida como uma
Existem
descamação leve a moderada do couro
Malassezia, porém as mais relacionadas
cabeludo, com diferentes graus de irritação
com a dermatite seborreica do couro
ou
(PIE´RARD-
cabeludo são: M. globosa, M. restricta, M.
FRANCHIMONT et al., 2005; RUIZ et al.,
obtusa, M. sloofiae, M. sympodialis, M.
2008). É um distúrbio comum, que afeta
furfur e M.pachydermatis. O crescimento
5% da população global. E um fenômeno
destas espécies pode ser exacerbado pela
que
a
hipersecreção de sebo e hiperproliferação
puberdade (entre as idades de 20 e 30
do estrato córneo (camada de barreira
anos), e afeta mais homens que mulheres.
protetora da pele). Até hoje, a espécie M.
Frequentemente esta associada à seborreia,
globosa
sensações de prurido intermitente e secura.
associadas com caspa nos seres humanos.
A descamação característica do grau de
A Malassezia pode estimular a produção
irritação
de citocinas pelos queratinócitos (células
eritema
ocorre
do
e
principalmente
couro
comprometimento
processo
de
dor
após
cabeludo
ou
sugere
alteração
descamação
(PIE´RARD-FRANCHIMONT
mais
e
M.
de
sete
restricta
espécies
foram
de
mais
no
epidérmicas que sintetizam queratina),
natural
contribuindo para o processo inflamatório
et
al.,
da patologia (STEFANAKI et al., 2010).
2005).
Diversos autores correlacionam o
O
aparecimento
da
caspa
surgimento da caspa com a presença de
normalmente se mostra com manchas
outros
patógenos
como
a
levedura
pequenas e redondas, na parte superior da
Malasseziafurfur (WARNER et. al., 2001).
Esta espécie alimenta-se de lipídios e
Quando se desenvolve xampus
proteínas da derme e facilita a atividade da
usados no tratamento da Pitiríase simples,
lipase, que libera ácidos graxos livres pró-
é necessário ter total atenção para fatores
inflamatórias,
e
relacionados à segurança dermatológica.
danos no tecido dérmico (STEFANAKI et
Os xampus devem portar-se de forma
al., 2010) À atividade de lipase indica que,
segura quando em contato com a pele e
além
a
olhos, pois, durante a lavagem dos cabelos
Malasseziafurfur libera substâncias tóxicas
essas formulações podem acometer a face
como os lipoperóxidos, que contribuem
e os
para o desenvolvimento de uma infecção
preparado, este contato não representa
fúngica
perigo, mas se por acaso ocorrer contato
causando
da
inflamação
hipersensibilidade,
(WEREMCZUK-JEZYNA;
WYSOKIŃSKA, 2006).
Neste
olhos. Caso
seja devidamente
com o produto concentrado (devido ao tipo
contexto,
indústria
de tensoativo utilizado e a concentração do
farmacêutica tem investido em pesquisa e
mesmo na formulação), graves riscos
desenvolvimento a fim de se produzir
relacionados à irritação do tegumento ou
produtos
antidermatite
mucosas passam a existir. Assim, as
consequentemente
formulações de xampu devem possuir
minimizam o fenômeno da caspa. Tais
baixa irritabilidade, propiciando o uso
produtos oferecem uma opção terapêutica
diário, seguro e também garantindo a
conveniente
segurança
com
seborreica
a
potencial
que
para
o
tratamento
de
dos
indivíduos
descamação e prurido do couro cabeludo
sensibilidade
(BARONI et. al., 2000).
(CONSELHO NACIONAL DE SAÚDE,
O tratamento da caspa é definido
dérmica
e
com
ocular
2011).
levando em consideração a idade do
Estes produtos têm a vantagem de
paciente e o grau de acometimento e
serem
manifestação clínica. No entanto, não há
formulações tópicas, tais como soluções,
medicação que resolva de forma definitiva
pomadas, e espumas. Os xampus limpam o
a doença, podendo ser controlados os
cabelo e o couro cabeludo (BARONI et.
sintomas (BELLARE, 2001).
al., 2000).
Na maioria dos casos, o tratamento
mais
Dentre
práticos
as
opções
que
outras
terapêuticas
é realizado com antifúngicos recentes, que
disponíveis para o tratamento e controle da
possuem amplo espectro de ação e grande
caspa estão o piritionato de zinco, ácido
atuação fungicida, como os imidazólicos
salicílico, derivados imidazólicos, ácido
(BARONI et al., 2000).
glicólico, esteroides, derivados de enxofre
e alcatrão. No entanto, esses agentes têm
sulfato de trietanolamina, coco amido
certas limitações, seja devido à baixa
propilbetaína, extrato Glicólico de Arnica,
eficácia clínica ou devido a questões de
adquiridos da DEG, dietanolamina de
conformidade, como a restrição do uso dos
ácido graxo de coco, adquirido da Synth,
derivados
de
metilparabeno, Piritionato de zinco, ambos
suspeita de gravidez (ou nos 3 primeiros
da Natural Pharma, cloreto de sódio e
meses desta) e aleitamento. Além disso,
ácido cítrico, adquiridos da Dinâmica e
Estes
na
extrato glicólico de alecrim da Via Farma.
e
As amostras foram denominadas A1, A2,
reduzindo o número de Malassezia, devem
A3, A4, A5, A6, A7, A8 e A9 sendo as
ser
período
quatro primeiras amostras submetidas a
(geralmente meses) deixando a pele do
análises periódicas de estabilidade e todas
couro cabeludo seco (o que leva a
as amostras foram submetidas aos testes de
frequente irritação do couro cabeludo),
atividade
antifúngica
podendo, também, descolorir o tom do
identificar
diversos
cabelo (CARMINI, 1999).
potencial, isolados ou não, pudessem
imidazólicos
xampus
diminuição
usados
da
por
em
mesmo
atuando
renovação
um
casos
celular
longo
que
fatores
visavam
que
em
Assim, as terapias disponíveis
interferir na qualidade dos produtos. Os
controlam os sintomas da dermatite do
testes iniciais foram realizados com o
couro cabeludo, porém não proporcionam
propósito de identificar as características
a cura desta patologia (CHORILLI, 2006).
dos produtos e posteriormente compará-las
Neste sentido foi proposto neste estudo o
com os resultados obtidos.
desenvolvimento
e
avaliação
da
Foram utilizados os equipamentos
estabilidade de novas formulações de
como Balança eletrônica digital, modelo
xampus anticaspa contendo Piritionato de
FA-2104N,
zinco e a influência de extratos vegetais
Compo Ford, Gehaka, pHmetro digital
como os extratos glicólico de arnica e de
direto
alecrim.
OdontoBras EL-1.3., Geladeira CONSUL
com
Bioprecisa,
eletrodo,
Viscosímetro
Phtek,
semi-automática CRA 30-127.
3 Material e métodos.
Foram analisadas (09) amostras de
600g de xampus nos quais os componentes
empregados no preparo das formulações
foram: lauril éter sulfato de sódio, lauril
Estufa
3.1 Preparo das amostras.
ácido graxo de coco, em béquer (fase I).
Pesou 12g de cloreto de sódio e 0,6g de
Figura l- Xampu base.
ácido
cítrico
em
vidro
relógio
separadamente e solubilizou em parte de
água em um cálice com capacidade de
1.000ml (Fase II), verteu-se fase I em fase
II,
homogeneizando
lentamente
com
espátula de plástico, adicionou-se 18g de
coco amido propilbetaína, 120g de Lauril
éter sulfato de sódio (Tabela 2) e 60g de
Lauril
sulfato
de
trietanolamina,
acrescentando agua destilada até completar
Foram preparadas 600g de nove
os 600 ml homogeneizando lentamente
formulações diferentes, de acordo com a
(Figura 1).
TABELA l.
As formulações A1, A2, A3 e A4
O modo de preparo seguiu o
seguinte
processo:
Metilparabeno
em
pesou
vidro
18g
de
relógio
e
(Tabela 1) foram divididas em amostras
para serem submetidas ao estudo de
estabilidade.
solubilizou em 18g de Dietanolamida de
Tabela 1-
Composição das formulações
Concentração (%)
Matéria-prima
A1
A2
A3
A4
A5
A6
A7
A8
A9
FASE 1
Metilparabeno
0,6
0,6
0,6
0,6
0,6
0,6
0,6
0,6
0,6
Dietanolamida de ácido graxo coco
18
18
18
18
18
18
18
18
18
Cloreto de sódio
12
12
12
12
12
12
12
12
12
Ácido Citrico
0,6
0,6
0,6
0,6
0,6
0,6
0,6
0,6
0,6
Coco amido proprilbetaína
18
18
18
18
18
18
18
18
18
Lauril éter sulfato de sódio
18
18
18
18
18
18
18
18
18
Lauril sulfato de trietanolamina
60
60
60
60
60
60
60
60
60
Água deionizada
Qsp
qsp
Qsp
Qsp
qsp
qsp
qsp
qsp
qsp
Piritionato de zinco
---
2
2
2
3
5
2
---
2
Extrato glicólico de arnica
---
---
3
3
---
---
5
5
5
Extrato glicólico de alecrim
---
---
---
3
---
---
---
5
5
FASE 2
FASE 3
Tabela 2–
Função dos componentes da formulação.
Matéria prima
FUNÇÃO
Lauril Éter Sulfato de Sódio (sol. 27%)
Tensoativo aniônico com alto poder espumógeno
Lauril Sulfato de Trietanolamina
Tensoativo aniônico e detergente
Dietanolamina de ácido graxos de coco
Agente estabilizador de espumas, espessante e desengordurante
Coco betaína
Tensoativo anfótero
Metilparabeno
Conservante microbiológico
Cloreto de Sódio
Viscosificante
Ácido Cítrico
Corretivo de pH
Água deionizada
Veículo da formulação
Piritionato de Zinco
Bacteriostático e Fungistático
Extrato Glicólico de Arnica
Antiinflamatório, adstringente, descongestionante, antisséptico e anticaspa
Extrato Glicólico de Alecrim
Dermopurificante, tonificante, antioxidante, ativador da circulação periférica,
antifúngico.
3.2 Estudo de estabilidade.
procedimento foi realizado semanalmente
3.2.1 Avaliações das características
organolépticas.
durante 30 dias em triplicata (LEONARDI,
As formulações A1, A2, A3 e A4
et al, 2002).
(Tabela 1) foram submetidas ao teste de
estabilidade preliminar no qual se analisou
características
como
cor,
odor
3.2.3 Determinação de viscosidade.
e
A viscosidade das amostras foi
homogeneidade. Os testes foram realizados
semanalmente, durante 30 dias e as amostras
foram mantidas em geladeira (4°C), estufa
(40ºC) e temperatura ambiente, de acordo
com o proposto por Leonardi (2002,
CHORILLI et al., 2006). As analises foram
medida
em
viscosímetro
copo
Ford
(GEHAKA) uma vez por semana em
triplicata, durante 30 dias. Foi utilizado o
orifício número 7 de acordo com as
características
da
formulação.
O
viscosímetro foi nivelado, ajustando os pés
realizadas em triplicata.
niveladores. O orifício foi fechado com o
dedo e o Copo preenchido com a amostra
3.2.2 Determinação de pH
até o nível mais elevado, derramando o
As formulações foram diluídas em
água destilada na proporção de 1:10. Logo
depois,
o
pH
das
soluções
foram
mensurados em pHmetro de Bolso com
Eletrodo
Direto
(PHTEK).
Este
xampu lentamente para que não surgissem
bolhas. O excesso de xampu foi removido
com uma placa de vidro, fazendo com que
ela corresse pela boca do Copo. Retirou-se
o dedo do orifício, retendo o xampu dentro
do Copo. Colocou-se um béquer entre os
pés do viscosímetro, removeu-se o vidro
As
plano e um cronometro foi acionado
viscosidade
quando o liquido começou a escorrer.
seguintes:
Assim que ocorreu a primeira interrupção
do fluxo de escoamento o tempo em
equações
em
para
cálculo
centistokes
da
são
as
V¹= Coef.A x T+ Coef.B
Onde: V¹=Viscosidade em centistokes
segundos foi anotado para o cálculo da
viscosidade.
Foram
utilizadas
as
Equações para cálculo da viscosidade em
expressões matemáticas representadas pela
centipoises.
equação 1 e a tabela 3 para calcular a
V¹x d=V²
viscosidade relativa em centistokes e a
V²=Viscosidade em centipoises
Figura 3 para determinação da viscosidade
d=densidade em g/cm³
absoluta em cetipoises.
T=tempo em segundos
Tabela 3-
Coeficientes para cálculo da viscosidade.
Orificio
Coef A
Coef B
2
0,6658
-17,08
3
1,5765
-11,01
4
3,8239
-31,95
5
6,5408
-29,48
6
12,9309
-40,23
7
23,7929
-64,64
8
39,4549
-93,59
Fonte: adaptado do Manual Gehaka (2005)
3.3
Determinação da atividade
antifúngica
das
diferentes
formulações frente a colonias de
malassezia sp.
antimicrobiana contra Malasseziasp. A
amostra do fungo foi coletada de um
voluntário portador de pitiriase seguindo as
normas
Para
verificar
a
atividade
antifúngica das formulações de xampu
base e xampu acrescentado de extrato de
arnica,
alecrim
realizados
e
testes
piritionato
de
foram
atividade
de
segurança
definidas
pelo
Conselho Nacional de Saúde na resolução
196/96.
Para os ensaios microbiológicos foi
utilizado o ágar Sabouraud dextrose,
preparado de acordo com as instruções do
fabricante (HIMEDIA). A amostra fúngica
quais as amostras de xampus foram
coletada foi incubada em tubo de ensaio
adicionadas, para verificação da atividade
contendo 3 ml de solução salina, e
antifúngicas dos mesmos. As placas foram
colocada em estufa a 37ºC por 24 horas.
colocadas na estufa a 37ºC durante 72
Após o crescimento em solução salina o
horas e o resultado final foi determinado
fungo foi transferido para tubos com ágar
pela média dos halos de inibição, sendo
Sabouraud para crescimento e isolamento
considerados
das colônias a 37ºC por 72 horas. (LIMA
diâmetros igual ou superior a 10mm
et al, 2002).
(LIMA et al, 2002).
As colonias isoladas foram colhidas
Os
positivos,
ensaios
aqueles
foram
feitos
com
em
com auxílio da alça de platinae colocados
triplicata. Foi também realizado uma
em tubos contendo solução salina e as
comparação da atividade antifúngica entre
mesmas
as diferentes formulações visto que foram
foram
inoculadas
em
Agar
Mueller Hinton preparado de acordo com
utilizados
as instruções do fabricante (HIMEDIA®).
piritionato de zinco e de extratos de arnica
Ápos
e alecrim.
inoculação
do
fungo
foram
concentrados
diferentes
de
depositados discos de papelfiltronos as
4 Resultados e discussão
O fator relacionado à estética da
4.1 Avaliação visual e características
formulação é extremamente relevante para
organolépticas.
aceitação
Uma
das
adesão
ao
busca
em
de
formulações tópicas é uma aparência
nas
homogênea com odor agradável. Não raro,
características organolépticas do produto
se observa a busca por formulações tópicas
(CUNHA et al., 2009)
que sejam suaves ao toque, espalháveis
formulações
é
a
alteração
relacionado à
que
paciente
tratamento.
físico-química
O
do
de
instabilidade
evidências
e
coloração e odor durante o período de 30
facilmente
dias,
apresentaram
observáveis, fáceis de serem transferidas
colorações
de recipiente, e não pegajosa ou de difícil
branca e levemente amareladas com odor
remoção. Para uma ação terapêutica
característico (Tabela 4).
concreta é necessário que o paciente se
os
alteração,
xampus
não
mantendo-se
as
aplique
sem
se
no
deixarem
tratamento.
resíduos
Assim,
a
formulação deve ser agradável do ponto de
princípio que a avaliação visual é uma
vista sensorial, para que se tenha uma
maneira clara para se observar separação
aplicação constante, beneficiando-se das
de fases ou instabilidade, capaz de fornecer
vantagens (CHARRO, 1997).
informações
Utilizou-se de análise macroscópica
para visualizar as formulações, tendo como
Tabela 4-
dissipação de
significativas,
fases
das
como
formulações
(CHORILLI, 2009).
Resultados da avaliação da coloração de odor no período de 30 dias.
Dias
Formulação 1
Formulação 2
Formulação 3
Formulação 4
0
Transparente
Branca / Sem alteração
Levemente Amarelada /
Sem alteração
Sem alteração
7
Transparente
Sem alteração
Sem alteração
14
Transparente
Sem alteração
Sem alteração
21
Transparente
Sem alteração
Sem alteração
30
Transparente
Sem alteração
Sem alteração
0
Transparente
Sem alteração
Sem alteração
7
Transparente
Sem alteração
Sem alteração
14
Transparente
Sem alteração
Sem alteração
21
Transparente
Sem alteração
Sem alteração
30
Transparente
Sem alteração
Sem alteração
0
Transparente
Sem alteração
Sem alteração
7
Transparente
Sem alteração
Sem alteração
14
Transparente
Sem alteração
Sem alteração
21
Transparente
Sem alteração
Sem alteração
30
Transparente
Sem alteração
Sem alteração
4ºC
25ºC
40ºC
a
Foram satisfatórios e perfeitamente aceitáveis os resultados obtidos na avaliação da
coloração e odor deste estudo de estabilidade, pois todas as preparações apresentaram-se
estáveis, sem nenhum sinal de instabilidade acerca da cor, odor, aparência e homogeneidade,
Figura 3.
Figura 3-
Avaliação
visual
das
4.2 Determinação de Ph
amostras.
ocorrer instabilidade também em razão do
tempo
de
estocagem
e/ou
falta
de
condições adequadas de transporte e
armazenamento (CUNHA etal., 2009).
Neste
trabalho,
todas
as
formulações apresentaram valor de pH na
faixa de 5,9 e 6,96, demonstrando que são
compatíveis com as matérias-primas que
Com relação ao pH também, não
foram
usadas
na
manipulação
e
foram encontradas variações relevantes
biocompatíveis com o pH fisiológico do
(Tabela 5) através dos valores da dispersão
couro
das amostras estudadas.
organolépticas
cabeludo.As
e
o
características
pH
do
produto
Devido a constância dos valores de
formulado por si só permitem observar se
pH apresentados pelas formulações, é de se
as matérias-primas estão sendo acometidas
concordar
de
que
não
houve
alterações
degradação
ou
não
com
significativas, sendo assim, observa-se que
armazenamento.
não houve formação de compostos de
relevante observar que o couro cabeludo,
degradação durante o período avaliado.
devido à caspa, sofre agressão física e caso
Determinar o pH em formulações é
muito
importante
para
se
verificar
Adicionalmente,
o
é
o pH (Tabela 5)não seja o ideal pode
desencadear
outros
problemas
como
estabilidade, devido ao fato de que
inflamação, levando a um desconforto do
qualquer alteração nesses valores sugerem
paciente, o que muitas vezes, desencadeia
desde impurezas, hidrólise, decomposição,
na interrupção do tratamento.
até erro no processo de produção. Pode
Tabela 5-
Avaliação de pH no período de 30 dias.
Dias
4ºC
25ºC
40ºC
0
7
14
21
30
0
7
14
21
30
0
7
14
21
30
pH
Formulação Formulação Formulação Formulação
1
2
3
4
6,4
6,3
6,2
6,2
6,3
6,4
6,2
6,2
6,4
6,5
6,4
6,3
6,2
6,5
6,4
6,7
6,5
6,5
6,5
6,3
6.7
6,5
6.5
6,4
6,4
6,7
6,5
6,6
6,5
6,5
6,7
6,3
6,7
6,4
6,4
6,7
6,4
6,5
6,5
6,5
6,7
6,5
6,7
6,4
6,4
6,5
6,4
6,3
6,5
6,5
6,6
6,5
6,4
6,5
6,7
6,3
6,3
6,4
6,5
6,4
Assim sendo, a avaliação quantitativa do pH é essencial na detecção de possíveis
alterações em função do tempo, garantindo que o valor esteja de acordo com os componentes
da formulação e com o local de aplicação do produto, prevenindo , dessa maneira, irritações
(AZZINI, 2009).
4.3 Determinação de viscosidade.
Tabela 6-
Viscosidade das amostras em centipoises.
Viscosidade – Copo Ford (Gehaka)
4ºC
25ºC
40ºC
Formulação 1
Formulação 2
0
3958,23 cps
3559,17 cps
4720,63 cps
3739,62 cps
7
3995,30 cps
3834,47 cps
4718,65 cps
3644,10 cps
14
4356,32 cps
3563,19 cps
4710,60 cps
3740,64 cps
21
4853,04 cps
2321,97 cps
4717,63 cps
4907,14 cps
30
4708,59 cps
2321,97 cps
0
3956,78 cps
1005,23 cps
2234,94 cps
4006,70 cps
7
3872,43 cps
1896,81 cps
4700,48 cps
2435,18 cps
14
4122,14 cps
2017,29 cps
5007,02 cps
3160,54 cps
21
4063,29 cps
2426,94 cps
4869,21 cps
3160,65 cps
30
3716,64 cps
4457,08 cps
4451,85 cps
2241,75 cps
0
3046,82 cps
2416,02cps
3477,46cps
2759,24 cps
7
3253,61 cps
2716,66 cps
2217,91 cps
14
3337,79 cps
2416,02 cps
3477,46 cps
2250,93 cps
21
3406,26 cps
2483,08 cps
4506,33 cps
2152,77 cps
30
3379,89 cps
2018,98 cps
4504,32 cps
2250,93 cps
Relacionado
2931,89 cps
conseguinte, quanto maior a viscosidade,
resultados obtidos foram satisfatórios para
maior a resistência ao fluxo (ALMEIDA,
formulações de xampus (Tabela 6). A
& BAHIA, 2003).
define-se
viscosidade,
4807,86 cps
4297,81cps
os
viscosidade
à
Formulação 3
Formulação 4
Dias
pela
resistência
A viscosidade em xampus pode ser
interna ao fluxo, que uma solução fluida
determinada por viscosímetro rotativo
apresenta, provinda da aplicação de uma
como, por Brookfield ou pelo copo de
força capaz de deformar temporariamente
Ford.
ou permanente a matéria; ou de maneira
recomendável que as formulações de
simples, a resistência da solução fluida
xampu tenham viscosidade de pelo menos
frente ao fluxo ou movimento. Por
2000
Segundo
cps.
comerciais apresenta viscosidade entre 2000 e 5000cps.
A
esses
maioria
autores,
dos
é
xampus
Portanto, as formulações portaram-se adequadas, para o teste de viscosidade sendo que
todas as formulações apresentaram resultados superiores a 2000 cps.
Pelo fato de se tratar de produtos para uso tópico, a viscosidade (Figura 6) énecessária,
a fim de permitir a aderência ao couro cabeludo para realizar a ação antimicrobiana e facilitar
a função anticaspa. Na mesma vertente, para que haja ação terapêutica, alega-se que, depois
de aplicar o produto, este deve permanecer em contato com couro cabeludo por um período de
5
min
antes
de
realizar
a
lavagem
(CUNHA
etal.,
2009).
4). Em todas as amostras de xampu
4.4 Determinação da atividade
antifúngica
com piritionato de zinco foi visualizado
halo
de 30 mm
sendo considerado
Quanto à atividade antifúngica o
inibitório para Malasseziasp (Figura 5) e
xampu base, amostra A1, não apresentou
pode-se observar também que a ação
nenhuma ação inibitória do crescimento de
antifúngica do piritionato de zinco pode ser
Malasseziasp
xampu
potencializada pela adição dos extratos
contendo somente extratos de arnica e
vegetais. Mais testes são necessários para
alecrim,
determinar
(Figura
amostra
A8,
4).
O
também
não
apresentou inibição do crescimento (Figura
a
concentração
inibitória
mínima e a ação inibitória de outros
extratos vegetais.
5 Considerações
Manipular produtos que são de uso
mostraram-se estáveis e aceitáveis para os
tópico contendo piritionato de zinco e
padrões
extratos vegetais requerem, assim como
também com a inibição microbiana das
em outras formulações, cuidados para
formulações visto que a maioria das
evitar a perda da ação antifúngica e da
formulações
estabilidade do produto durante sua vida
contra o fungo Malasseziasp.
útil.
comerciais.
Fato
apresentou
esta
observado
inibição
Portanto, a determinação de novos
Depois
as
compostos contra cepas de M. furfuramplia
como
mais ainda as perspectivas na busca de
coloração, homogeneidade, odor, pH e
produtos de origem natural e/ou sintética
viscosidade, no período de trinta dias,
potente, que possam ser utilizados na
pode-se concluir que as formulações
produção de fármacos eficientes para
características
de
das
avaliadas
formulações
tratamento
produzidas
de
infecções
por
fúngicas
oportunistas e emergentes.
microrganismos
Figura 4Apresentação dos testes para atividade antimicrobiana do xampu base, do
xampu acrescido de piritionato de zinco, arnica e alecrim e do xampu acrescido só com os
extratos de arnica e alecrim contra o fungo Malassezia sp.
Figura 5Crescimento de Malassezia
sp e a formação de halo com a presença de
xampu acrescido de piritionato de zinco a
2%, 3% e 5%.
BARONI, A; DEROSA, R; DEROSA, A.
New strategies in dandruff treatment:
Growth control of Malasseziaovalis.
Dermatologyv.201, n.4, p,332–336.2000.
BELLARE, J; IYER, R;MAINKAR, A.R;
JOLLY, C.I.
A
study
on the
conditioning effects of natural shampoos
using the scanning electron microscope.
International Journal of cosmetic
science, v.23, n.3, p.139-145. 2001.
BOND, JR, BARRY, BW.Hairless mouse
skin is limited as a model for assessing the
effects of penetration enhancers in human
skin.J.InvestDermatol, v.90, p.810–813.
1988.
CARMINI, M. A. Xampus anticaspas.
Revista Racine, v. 48, p.61-65, 1999.
Referência bibliográfica
ALMEIDA, I.F, BAHIA, M.F. Reologia:
interesse e aplicação na área cosméticofarmacêutica. Cosmet.Toiletries, v.15,
n.3, p.96-100. 2003.
BALLONE, G.J. Fitoterápicos in
PsiqWeb. Disponível em: www.psiqweb.
med.br. Acesso em 28 set. 2011.
BALMÉ, F. Plantas Medicinais.Helmus,
1994.s.p.
BARNETT, B. L.; KRETSCHMAR, H.
C.; HARTMAN, F. A. Structural
characterization of bis (N-oxopyridine-2thionato) zinc (II). Inorganic Chemistry.
v.16, n.8, p.1834 – 1838, 1977.
CHARRO, M.B.D. Sistemas dispersos
heterogéneos.
In: JATO, J.L.V.
Tecnologia
Farmacéutica:
aspectos
fundamentales
de
los
sistemas
farmacêuticos y operaciones básicas.
Madri: Editorial Sintesis. v.1. p.207-316.
1997.
CHORILLI, Marlus, CHIAVACCI, Leila
Apareceida; SCARPA, Maria Virgínia.
Desenvolvimento de sistemas líquidocristalinos empregando silicone fluido de
co-polímero glicol e poliéter funcional
siloxano.Quim. Nova.v.32, n.4, p.10361040. 2009.
CHORILLI, M.; UDO, M.S. &
CAVALLINI, M.E. Desenvolvimento e
estudos preliminares de estabilidade de
formulações
fotoprotetoras
contendo
Granlux GAI-45 TS. Revista de Ciência
Básica e Aplicada,v.27, p. 237-246. 2006.
CONSELHO NACIONAL DE SAÚDE.
Diretrizes e normas regulamentadoras
de pesquisas envolvendo seres humanos.
Resolução 196/96.s.p.
CUNHA, A. R.; SILVA, R. S. &
CHORILLI, M. Desenvolvimento e
avaliação
daestabilidade
física
de
formulações
de
xampu
anticaspa
acrescidas ou não de extratos aquosos de
hipérico, funcho e gengibre. Revista
Brasileira de Farmácia, v. 90, n. 3,
p.190-195, 2009.
FENNER, R.; BETTI, A.H.; MENTZ,
L.A. & RATES, S.M.K. Plantas utilizadas
na medicina popular brasileira com
potencial atividade antifúngica. Revista
Brasileira de Ciências Farmacêuticas,
v.42, n.3, p.369-394. 2006.
FORMARIZ, T.P.; SPERA, L.J.; URBAN,
M.C.C. & GREMIÃO, M.P.D. Dermatite
seborréica:
causas,
diagnóstico
e
tratamento. Infarm,v.16, p.77-80. 2005.
FUJIWARA, Gislene M.; COSTA, Camila
K.; ZANIN, Sandra M.W.; MIGUEL,
Marilis D. Avaliação De Diversas
Formulações De Xampus De Cetoconazol
Quanto Ao Emprego De Diferentes
Antioxidantes E Solubilizantes.Visão
Acadêmica, Curitiba, v.10, n.2,p. 1-16.
Jul. - Dez./2009.
GOTO, R. Efeitos de fitorreguladores na
emergencia e desenvolvimento de gengibre
(Zengiberofficinale, Roscoe) Sao Pedro:
Centro de Raizes Tropicais/UNESP/SBM,
1996 1p. In: CONGRESSO LATINO
AMERICANO DE RAIZES TROPICAIS,
1 E CONGRESSO BARASILEIRO DE
MANDIOCA, São Pedro: Centro de
Raízes Tropicais/UNESP/SBM. 9, 1996, 1
p.
GUPTA AK, BATRA R, BLUHM R,
BOEKHOUT T, DAWSON TL Jr. Skin
diseases associated with Malassezia
species. J AmAcadDermatolv.51, n.5,
p.785–798. 2004.
HARDING,CR;MOORE, A.E.;ROGERS,
J.S.; MELDRUM, H; SCOTT, A.E.;
MCGLONE, F.P.Caspa: uma condição
caracterizada pela diminuição dos níveis
de lipídios intercelulares no couro
cabeludo estrato córneo ea função de
barreira prejudicada ArchDermatol Res v.
294:221-230. 2002.
HEUKELBACH,
Jörg,
Oliveira,
FABÍOLA, A.S., SPEARE, Richard. A
new
shampoo
based
on
neem
(Azadirachtaindica) is highly effective
against head lice in vitro.Parasitology
Research,v.99, n.4, p. 353-356. 2006.
ISAAC, V.L.B.; CEFALI, L.C.; CHIARI,
B.G.; SALGADO, H.R.N. & CORRÊA,
M.A. Protocolo para ensaios físicoquímicos
de
estabilidade
de
fitocosméticos.
Rev.
Ciências
Farmacêuticas Básica Aplicada,
v.29, n.1,p.81-96. 2008.
LAMORE
SD,
Cabello
CM,
WONDRAK.GT.The topical antimicrobial
zinc pyrithione is a heat shock response
inducer that causes DNA damage and
PARP-dependent energy crisis in human
skin cells. Cell Stress Chaperones,
v.15, n.3, p.309–22.2010.
LAPA, A.J.; SOUCCAR, C.; LIMALANDMAN, M.T.R.; GODINHO, R.O.;
NOGUEIRA, T.C.M.L. Farmacologia e
toxicologia
de
produtosnaturais.In:
SIMÕES, C.M.O.; SCHENKEL, E.P.;
GOSMANN, G.;
MELLO,
J.C.P.;
MENTZ, L.A. & PETROVICH, P.R.
Farmacognosia: da plantaaomedicamento
.5. ed., Florianópolis: UFSC, 2003, p. 248262.
LEONARDI, Gislaine Ricci; GASPAR,
Lorena RigoandCAMPOS, Patrícia M. B.
G. Maia. Estudo da variação do pH da pele
humana exposta à formulação cosmética
acrescida ou não das vitaminas A, E ou de
ceramida,
por
metodologia
não
invasiva.An. Bras. Dermatol, v.77, n.5, p.
563-569. 2002.
LIMA EO, Belém LF, Cechinel Filho V,
Corrêa RN, Nunes RJ, Andricopulo A,
Silva VE da. Avaliação da sensibilidade de
cepas de Malasseziafurfura imidas
cíclicas. Rev. Bras. Cienc. Farm. V.38,
n.4, p. 443-450. 2002.
LEITE, Mateus Freire. Desenvolvimento e
caracterização
de
microemulsões
contendo extrato e óleo essencial de
Baccharisdracunculifolia
para
enxaguatóriobucal.Tese de Doutorado.
RibeirãoPreto, 2009.166 p.
McCAGE C.M; WARD,S.M;PALING,
C.A;FISHER,
D.A,
FLYNN
P.J.;
MCLAUGHLIN, J.L.Development of a
Paw Herbal Shampoo for the removal of
head lice.Phytomedicine, v.9, n.8, p. 743
– 748.2002.
MONTALDO, A. Cultivo de raices y
tuberculostropicales.2.ed. San Jose :
IICA, 1991.407 p.
PERARO, A.C.; KEDOR, E.R.M.;
SINGH, A.K. & SANTORO, M.I.R.M.
First-derivativeultravioletspectrophotome
tricand
high
performanceliquid
chromatographicdeterminationofketonazol
e in pharmaceuticalemulsions.RBCF.
Revista
Brasileira
de
Ciências
Farmacêuticas, v. 42, p. 91- 98.2006.
PIE´RARD-FRANCHIMONT,
E.
XHAUﬂAIRE-UHODA AND G. E.
PIE´RARD.Revisiting dandruff J Cosmet
Dermatol. 2003Jan, v.2, n.1, n.21-28.
ROCHA, A. A. Obtenção e avaliação das
atividades analgésica e antiinflamatória
do extrato hidroalcoólico bruto da
arnica brasileira (Solidagomicroglossa,
DC). 2006. 69 p. Dissertação (Mestrado
em Promoção da Saúde) – Universidade de
Franca, Franca.
RUIZ, Ana Lúcia T. G.; TAFFARELLO,
Denise; SOUZA, Vanessa H. S.;
CARVALHO, João E..Farmacologia e
Toxicologia
de
Peumusboldus
e
Baccharisgenistelloides.Rev.
bras.
farmacogn.v.18, n.2, p. 295-300.2008.
STEFANAKI, MD; KATSAMBAS, MD.
Skin Therapy Letter. University Of
Athens, Andreas Sygros Hospital, Athens,
Greece:Department of Dermatology, v.15,
n.5. May 2010.
WARNER RR, Schwartz JR, Boissy Y,
Dawson TL.Dandruff has an altered
stratum corneum ultrastructure that is
improved with zinc pyrithioneshampoo.J
Am Acad. Dermatolv.45, n.6, p.897–
903.2001.
WOLF, S.J. Flora of North America.
Disponível em www. Efloras.org. Acesso
em 25 out. 2012.
WEREMCZUK-JEZYNA I, KISIEL W,
WYSOKIŃSKA H. "Thymol derivatives
from hairy roots of Arnica montana".Plant
Cell Rep. v.2, n.9, p.993–996. 2006.

faculdade montes belos

Transcrição

Documentos relacionados

Informações para a Imprensa

Testar a água para detectar chumbo: perguntas e respostas

Electroencefalograma (EEG)

CONFERÊNCIA DA UNIÃO AFRICANA Vigésima

avaliação da fase de transição para cuidados paliativos exclusivos

Edital nº 403

Arnica montana e desordens musculares mastigatórias

Concretos com Agregados de Lama Vermelha para Reparo

alkonat - Oxiteno

Psoríase: Formas Especiais - International Psoriasis Council

Bárbara S. Metzner

Português

HOMEOPATIA SIMPLES Alternativa para Pequenos Agricultores

bulldog campeiro