Colesterol HDL

HDLc -D
Colesterol HDL
Directo. Enzimático colorimétrico
Determinação quantitativa de colesterol HDL
IVD
Conservar a 2-8ºC
PRINCÍPIO DO MÉTODO
Determinação directa do HDLc (colesterol de lipoproteínas de
alta densidade) sem necessidade de pré-tratamento ou
centrifugação da amostra.
O método baseia-se nas propriedades de um detergente que
solubiliza só a fracção HDL, de forma que o HDLc liberta-se
reagindo com a colesterol esterase, a colesterol oxidase e os
cromógenios.
As lipoproteínas LDL, VLDL e quilomícrons são inibidas
devido à adsorção do detergente nas suas superfícies
tornando-as resistentes à enzima.
A intensidade da coloração formada é proporcional à da
concentração do HDLc presente na amostra testada.
SIGNIFICADO CLÍNICO
As partículas de HDL são lipoproteínas que transportam o
colesterol para as células. O colesterol transportado pelas
lipoproteínas de alta densidade é geralmente denominado de
“ bom colesterol”, já que niveis elevados estão relacionados
com um menor risco cardiovascular. Um nível baixo de
colesterol HDL é considerado um dos principais factores de
1,5,6
risco cardiovascular e patologias das artérias coronárias .
O diagnóstico clínico deve realizar-se tendo em conta todos
os dados clínicos e de laboratorio.
APLICAÇÃO AO MINDRAY BS-120 / BS-200E
PARAMETROS
Nome Abrev
HDL / HDL
R1
225 / 225
Numero
**
R2
75 / 75
Nome
HDL / HDL
Volume da amostra
3/3
Num standard
Branco R1
Modo
P.Final / P.Final
Branco mistura reagente
Comp. onda primário
578 / 570
Inter. linearidade 0.0mg/dL 250.0mg/dL
Comp. onda secundário
Limite linearidade
*
Direcção
Aumen/ Aumen
Limite Substrato
*
Tempo reacção
-1_18 / -1_18
Factor
*
Tempo Incubação
Efeito Prozona
*
Unidades
mg/dL / mg/dL
q1
q2
Precisão
0.1 / 0.1
q3
q4
PC
Abs
CALIBRAÇÃO (Cal + Br reagente)
Tipo curva
Linear um ponto/ Linear dois ponto
Sensibilidade
1/1
Replicados
2/2
Intervalos (días)
0/0
Limite aceitação
Desvio Padrão
Resposta do Branco
REAGENTES
R1
R2
Error Límite
GOOD pH 7,0
Colesterol oxidase
DSBmT
GOOD pH 7,0
Colesterol esterase
4 – Aminoantipirina
Detergente
Ascórbico oxidase
Peroxidase
< 1000 U/L
< 1 mM
< 1500 U/L
< 1 mM
< 2%
< 3000 U/L
<1300 U/L
PREPARAÇAO
- R 1 e R 2: Prontos a usar.
CONSERVAÇÃO E ESTABILIDADE
Todos os componentes do kit são estáveis, até ao final do
prazo de validade indicado no rótulo, quando mantidos nos
frascos bem fechados, a 2-8ºC, protegidos da luz e evitando a
sua contaminação. Não congelar os reagentes.
- R 1 e R 2: Uma vez abertos são estáveis por 8 semanas a
2-8ºC. Não usar reagentes fora de prazo.
Indicadores de deterioração dos reagentes:
- Presença de partículas e turvação.
MATERIAL ADICIONAL
- Auto-analisador MINDRAY BS-120 / BS-200E.
- Equipamento habitual de laboratorio.
AMOSTRAS
1
Soro ou plasma: Não usar anticoagulantes com citrato.
Não utilizar amostras hemolizadas. Separar o soro das
hemácias o mais rápidamente possível. Estabilidade da
amostra: 7 dias a 2-8ºC.
VALORES DE REFERENCIA
20/03/14
CONTROLO DE QUALIDADE
É conveniente calibrar e analisar juntamente com as amostras os soros
controlo e calibradores padrão: SPINTROL H Calibrador, SPINTROL H
Normal e Patológico (Ref. 1002011, 1002120 e 1002210).
Se os valores determinados estiverem fora do intervalo de tolerância,
verificar o equipamento, os reagentes e o calibrador.
Cada laboratório deve dispor do seu próprio Controlo de Qualidade e
estabelecer correcções caso os controles não cumpram com as tolerâncias.
NOTAS
O reagente 2 apresenta coloração amarelada devido ao conteúdo
de peroxidase, o qual não afecta de modo algum a funcionalidade
do reagente.
BIBLIOGRAFIA
1. Naito H K HDL Cholesterol. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V.
Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1207-1213 and 437.
2. US National Cholesterol Education Program of the National
Institutesof Health.
3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC
Press, 1995.
4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC
2001.
5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC
1999.
6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC
1995
2
Homens
Mulheres
Risco menor
> 50 mg/dL
> 60 mg/dL
Risco normal
35 – 50 mg/dL 45 – 60 mg/dL
Risco elevado
< 35 mg/dL
< 45 mg/dL
Estes valores são orientativos. É recomendável que cada
laboratório estabeleça os seus próprios valores de referência.
MIBSIS37-P
Coeficiente correlação
Você precisa aplicar o branco neste parâmetro para obter resultados
correctos na tela principal de CALIB. Calibração pelo branco de reagente é
estável até 35 dias. Após este período, é necessário voltar a aplicar o
reagente em branco para validar a calibração
APRESENTAÇÃO
Ref:MI1001096
Cont.
.
R1: 4 x 30 mL
R2: 2 x 20 mL
SPINREACT,S.A./S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail: [email protected]
HDLc -D
HDL Cholesterol
Direct. Enzymatic colorimetric
MINDRAY BS-120 / BS-200E APPLICATION
Quantitative determination of HDL cholesterol
IVD
PARAMETERS
Store at 2-8ºC
PRINCIPLE OF THE METHOD
Directly determination of serum HDLc (high-density lipoprotein cholesterol)
levels without the need for any pre-treatment or centrifugation of the
sample.
The assay takes place in two steps.
 1º Elimination of lipoprotein no-HDL
Test
HDL / HDL
R1
225 /225
Nº
**
R2
75 / 75
Full Name
HDL / HDL
Sample volume
3/3
Standard Nº
R1 Blank
Reac. Type
EndPoint / Endpoint
Mixed Rgt Blank
CHE
Pri. Wavelength
578 / 570
Linearity Range
CHOD
Sec. Wavelength
Cholesterol esters 
 Cholesterol + Fatty acids
Cholesterol + O2  4-Cholestenone + H2O2
Catalase
2 H2O2  2H2O + O2
 2º Measurement of HDLc
CHOD
Cholesterol + O2  4-Cholestenone + H2O2
Increase / Increase
Substrate Limit
*
Reac. Time
-1 _ 18 / -1 _ 18
Factor
*
Prozone check
*
Units
mg/dL / mg/dL
q1
q2
Precision
0.1 / 0.1
q3
q4
PC
Abs
POD
2 H2O2 + HDAOS + 4-AA 
 Quinonimine + 4H2O
The intensity of the color formed is proportional to the HDLc concentration
in the sample.
CLINICAL SIGNIFICANCE
HDL particles are high-density lipoproteins that transport cholesterol from
the body tissues to the liver. Since HDL can remove cholesterol from the
arteries and carry it back to the liver for their excretion, HDL is known as
“good cholesterol” because high levels are thought to lower the risk of heart
disease and coronary artery disease.
A low HDL cholesterol levels, is considered a greater heart disease risk1,5,6.
Clinical diagnosis should not be made on a single test result; it should
integrate clinical and other laboratory data.
*
Direction
Incuba. Time
CHE
Cholesterol esters 
 Cholesterol + Fatty acids
0.0 mg/dL 250.0 mg/dL
Linearity Limit
CALIBRATION (Cal + Rgt Blk)
Rule
One-point Linear / Two-point Linear
Sensitivity
1/1
Replicate
2/2
Interval (days)
0/0
Difference Limit
SD
Blank Response
Error Limit
REAGENTS
R1
R2
Correlation Coefficient
N,N-bis(2-hydroxyethyl)-2aminoethanesulphonic acid pH 6.6
N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)-3,5dimethoxyaniline (HDAOS)
Cholesterol Esterase
Cholesterol oxidase
Catalase
Ascorbic oxidase
0.7 mM
≥ 800 U/L
≥ 500 U/L
≥ 300 KU/L
≥ 3000 U/L
N,N-bis(2-hydroxyethyl)-2aminoethanesulphonic acid pH 7.0
4 – Aminoantipyrine (4-AP)
Peroxidase
100 mM
4 mM
≥ 3500 U/L
100 mM
PREPARATION
- R 1 and R 2: Are ready to use.
STORAGE AND STABILITY
All the components of the kit are stable until the expiration date on the label
when stored tightly closed at 2-8ºC and contaminations are prevented
during their use. Do not freeze the reagents.
- R 1 and R 2: Once opened is stable 4 weeks at 2-8ºC.
Do not use reagents over the expiration date.
Signs of reagent deterioration:
- Presence of particles and turbidity.
ADDITIONAL EQUIPMENT
- MINDRAY BS-120 / BS-200E Autoanalyzer.
- General laboratory equipment.
SAMPLES
Serum or heparinized plasma, free of hemolysis1: Anticoagulants containing
citrate should not be use.
Removed from the blood clot as soon as possible
Stability of the sample: 7 days at 2-8ºC .
Blank parameter must be performed in order to get good results in CALIB screen
from main menu. The blank calibration is stable until 35 days. After this period
the blank parameter must be performed again in order to validate the calibration.
QUALITY CONTROL
Control sera and calibrators are recommended to monitor the performance of
assay procedures: SPINTROL H Calibrator, SPINTROL H Normal and
Pathologic (Ref. 1002011, 1002120 and 1002210).
If control values are found outside the defined range, check the instrument,
reagents and technique for problems.
Each laboratory should establish its own Quality Control scheme and corrective
actions if controls do not meet the acceptable tolerances.
NOTES
The reagent 2 presents yellowish coloration due to the peroxidase, but it does
not affect its functionality.
BIBLIOGRAPHY
1.
Naito H K HDL Cholesterol. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co.
St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1207-1213 and 437.
2.
US National Cholesterol Education Program of the National Institutesof
Health.
3.
Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press,
1995.
4.
Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
5.
Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
6.
Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
PACKAGING
Ref:MI1001096
Cont.
.
R1: 4 x 30 mL
R2: 2 x 20 mL
REFERENCE VALUES2
Men
Women
Low risk
> 50 mg/dL
> 60 mg/dL
Normal risk
35 – 50 mg/dL
45 – 60 mg/dL
High risk
< 35 mg/dL
< 45 mg/dL
These values are for orientation purpose; each laboratory should establish
its own reference range.
MIBSIS37-I
20/03/14
SPINREACT,S.A./S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail: [email protected]