O valor de testes pré-natais não invasivos (TPNI).

O valor de testes pré-natais
não invasivos (TPNI).
Um suplemente ao livreto do
Conselheiro Genético
TPNIs usam DNA livre de células.
Amostra de sangue materno
cfDNA materno
cfDNA fetal
TPNIs usam DNA livre de células.
• A amostra do sangue materno contém uma mistura de ambos cfDNA materno e fetal.
• Fragmentos materno e fetal são contados e analisados no TPNI.
• Aneuploidias são detectadas comparando a quantidade de material cromossômico contra um conjunto de
referências de cromossomos.
SPM — uma abordagem mais profunda do
sequenciamento.
cfDNA materno e fetal
Alinhamento e contagem
Gravidez
não afetada
cfDNA sequenciado via
Sequenciamento Paralelo Maciço
(SPM)
Gravidez
afetada
SPM — uma abordagem mais profunda do
sequenciamento.
• A amostra do sangue materno contém uma mistura de ambos cfDNA materno e fetal.
• SPM ou Sequenciamento Paralelo Maciço, analisa fragmentos do cfDNA da amostra sanguínea
materna.
• Sequências são alinhadas ao genoma para identificar a origem do cromossomo do fragmento.
• Aneuploidias são detectadas comparando a quantidade de material cromossômico de
um cromossomo específico em uma amostra de uma paciente, contra um conjunto de
cromossomos de referência.
Detecção de anomalias cromossômicas fetais.
Cromossomos
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
Trissomia 13
ou
19
Trissomia 21
20
21
22
XX-mulher
Trissomia 18
XY-homem
Detecção de anomalias cromossômicas fetais.
• O teste pré-natal verifi® detecta a trissomia 21, 18 e 13 tanto em gestações unifetais como de gêmeos.
Detecção de anomalias relacionadas aos
cromossomos sexuais.
Cromossomos
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
o
19
20
21
XXX
22
XX-mulher
Monossomia X
XY-homen
XXY
XYY
Detecção de anomalias relacionadas aos
cromossomos sexuais.
• Em gestações unifetais, as aneuploidias dos cromossomos sexuais também podem ser detectadas. O teste
é opcional baseado na preferência da paciente e do médico.
–– As aneuploidias dos cromossomos sexuais detectadas incluem 45,X, 47,XXX, 47,XXY, 47,XYY.
• Em gestações de gêmeos, a presença ou ausência do Y é detectada. O teste é opcional baseado na
preferência da paciente e do médico.
Como o teste verifi é relatado.
Resultados
Aneuploidia detectada
Aneuploidia suspeita
Aneuploidia não detectada
Resultados do teste.
Existem três resultados possíveis para os autossomos:
• Aneuploidia detectada, Aneuploidia suspeita (valor limítrofe), Aneuploidia não detectada.
Existem dois resultados possíveis para cromossomos sexuais em unifetais:
• Aneuploidia detectada e aneuploidia não detectada.
–– Caso a aneuploidia não seja detectada, o sexo do feto será relatado.
–– Para gravidez de gêmeos, a presença ou ausência do Y será relatada.
Para pacientes que recebem um resultado de aneuploidia detectada ou aneuploidia suspeita, devese oferecer uma discussão dos resultados e opções de testes invasivos (CVS e amniocentese) para
confirmação.
Sequência normal de teste pré-natal.
NÃO
Pacientes decidem
pelo teste pré-natal.
SIM
Triagem
sérica
Diagnóstico
CVS/Amniocentese
(invasivo)
TPNI
(não invasivo)
SIM
O resultado da triagem
sérica deu positivo?
NÃO
Continua com o gerenciamento
da gravidez de acordo com os
protocolos do consultório.
O resultado do teste verifi
deu aneuploidia
detectada ou suspeita?
SIM
NÃO
Continua com o gerenciamento
da gravidez de acordo com os
protocolos do consultório.
Continua com o gerenciamento
da gravidez de acordo com os
protocolos do consultório.
Sequência normal de teste pré-natal.
Considerações de aconselhamento pré-teste
• O teste de aneuploidia deve ser uma decisão informada.
• O teste pré-natal verifi testa para aneuploidia dos cromossomos 21, 18 e 13. O teste dos cromossomos
sexuais é opcional.
• Qualquer teste oferecido deve se basear em contexto clínico.
• CVS e amniocentese continuam a ser opções para todas as mulheres grávidas.
Considerações de aconselhamento pós-teste
• 3 resultados possíveis para cada cromossomo testado.
–– Nenhuma aneuploidia detectada — Esse resultado é tranquilizador, mas não garante uma gravidez não
afetada.
–– Aneuploidia suspeita/Valores limítrofes — Esse resultado é sugestivo de aneuploidia. Existe uma
pequena possibilidade de que os resultados não reflitam os cromossomos dos fetos, mas podem refletir
mudanças na placenta ou no paciente.
–– Aneuploidia detectada — Esse resultado é consistente com aneuploidia. Existe uma pequena
possibilidade de que os resultados não reflitam os cromossomos dos fetos, mas podem refletir mudanças
na placenta ou no paciente.
–– Aconselhamento genético e CVS/amniocentese são recomendados para resultados Suspeitos e
Detectados.
• A triagem de defeito do tubo neural aberto não faz parte do teste TPNI e deve ser oferecida separadamente.
• Todos os resultados devem ser revistos no contexto do histórico clínico, médico e familiar.
Perfil TPNI: o teste verifi por números.
1
frasco de sangue
0.1%
taxa mais baixa
de falhas em
testes
10
Nas primeiras
semanas de gravidez
3
Testes para as
aneuploidias
autossômicas mais comuns e
aneuploidias sexuais adicionais
2a4
Resultados
em apenas
dias úteis
Onde não se pode colocar um número
na tranquilidade em saber
Em que o teste pré-natal verifi se diferencia?
• O teste verifi é um exame de sangue fácil feito no consultório - apenas um tubo de sangue é necessário.
• Pode ser realizado nas primeiras 10 semanas de gravidez.
• Testa para trissomia 21, 18 e 13 e tem a opção para aneuploidias dos cromossomos sexuais (Monossomia X, XXX, XXY,
XYY).
• Os resultados dos testes geralmente estão disponíveis em 2 – 4 dias úteis após recebimento da amostra.
• Tem a menor taxa de falha entre os TPNIs (0,1%).
Por esse motivo, o teste verifi é capaz de fornecer respostas confiáveis sobre as anomalias cromossômicas mais comuns.
O que é mosaicismo?
Divisão de células
Tecido mosaico
Células normais
Células com mutação genética
O que é mosaicismo?
• Mosaicismo é um fenômeno biológico que resulta na presença de células com composição genética
diferente, em um mesmo indivíduo. Geralmente ocorre durante o processo de divisão mitótica de células.
• Mosaicismo pode ser uma causa biológica subjacente de resultados discordantes do TPNI.
Tipos de mosaicismo.
Dissomia
Mosaicismo
generalizado
Mosaicismo Placentário
Confinado (CPM)
Mosaicismo fetal
Trissomia
Tipos de mosaicismo.
Existem três tipos de mosaicismo:
• Mosaicismo generalizado — Presença de duas ou mais linhagens de células cariotipicamente diferentes
tanto na placenta como no feto. Em casos de mosaicismo generalizado, existe a possibilidade de um
resultado positivo falso ou negativo falso do NIPT dependendo da origem do cfDNA.
• Mosaicismo placentário confinado — Presença de duas ou mais linhagens de células cariotipicamente
diferentes confinadas à placenta e não presentes no feto. Em casos de mosaicismo placentário confinado,
existe a possibilidade de um resultado positivo falso do TPNI.
• Mosaicismo fetal — Presença de duas ou mais linhagens de células cariotipicamente diferentes presentes
no feto, mas não na placenta. Em casos de mosaicismo fetal, existe a possibilidade de um resultado negativo
falso do TPNI.
Mosaicismo placentário confinado.
Estrutura normal
do vilo corial
Técnicas laboratoriais usadas
para biópsia de vilo corial (CVS)
Coluna de células
citotrofoblásticas
CVS
Sinciciotrofoblasto
Núcleo mesenquimal
Núcleo
mesenquimal
Suspensão de
citotrofoblasto
Cultura
de vilo
Preparação
direta
Citotrofoblasto
Mosaicismo Placentário Confinado (CPM).
• Mosaicismo placentário confinado (CPM) - Presença de duas ou mais linhagens de células cariotipicamente
diferentes confinadas à placenta e não presentes no feto.
• O cfDNA analisado no TPNI vem do citotrofoblasto; por isso o resultado do TPNI é similar ao resultado de
preparo direto de uma CVS.
• CPM Tipo 1 — O mosaicismo está confinado a células trofoblásticas.
• CPM Tipo 2 — O mosaicismo está confinado a células do estroma do vilo corial.
• CPM Tipo 3 — O mosaicismo está presente tanto nas células trofoblásticas como no estroma.
• CPM Tipo 1 e Tipo 3 podem resultar em resultados positivos falsos do TPNI.
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