Efeito do touro na taxa de embriões produzidos

EFEITO DO TOURO NA TAXA DE EMBRIÕES PRODUZIDOS IN VITRO,
PRENHEZ E MORTE EMBRIONÁRIA. RESULTADOS PRELIMINARES.
Pontes, J.H.F.1; Spegiorin, M.R.2 ; Silva, K.C.F.2; Seneda, M.M.2.
1
In Vitro Brasil Ltda, 13800-970, Mogi Mirim-SP, Brasil; 2 Departamento de Clínicas
Verterinárias, Universidade Estadual de Londrina, 86051-990, Londrina-PR, Brasil.
[email protected]
O efeito do touro é um dos principais obstáculos à obtenção de melhores índices de eficiência
na produção in vitro de embriões (PIVE). Para avaliar o impacto disso, quatro touros Nelore
foram avaliados quanto à taxa de produção de embriões, taxa de prenhez e morte embrionária
(ME). Os dados foram obtidos na empresa In Vitro Brasil Ltda, Mogi Mirim – SP. Os oócitos
foram obtidos por aspiração folicular (OPU), de vacas Nelore. Utilizou-se sêmen congelado,
obtido de centrais de colheita de sêmen. Os oócitos foram selecionados e, em seguida,
maturados in vitro (MIV), por 24 horas, em meio TCM 199 Bicarbonato, acrescido de
piruvato/LH/FSH +10% de SFB, a 38,8ºC, em 5% CO2 em ar. Após MIV os oócitos seguiram
para gotas de meio FIV (meio Tyrodes acrescido de BSA, piruvato, gentamicina e heparina,
esta numa concentração de 10µg/mL), onde receberam o sêmen diluído a 1x106
espermatozóides vivos/mL, preparado em gradiente Percoll (45-90%). Em seguida à
fecundação in vitro (FIV), os zigotos e as células do cumulus foram transferidos para gotas de
cultivo in vitro (CIV) contendo meio de cultura de embriões (fluido de oviduto sintético
modificado SOFaa BSA). Os embriões viáveis D7 (considerando D0 como dia da FIV) foram
transferidos para novilhas receptoras sincronizadas, por meio de inovulação transcervical. O
diagnóstico de gestação foi realizado com auxílio da ultra-sonografia. A morte embrionária
foi calculada pela diferença de percentual entre as taxas de gestação com 30 e 60 dias. Dos
14.270 oócitos, coletados nas 946 sessões de OPU, obteve-se um índice de 33,5%
(4.781/14.270) de embriões produzidos, sendo de 33,2% (4.736/14.270) o índice de embriões
considerados viáveis para transferência. A taxa de prenhez considerou apenas os embriões
com transferência confirmada, sendo, então, de 32,0% (1.467/4.586). A taxa de morte
embrionária total foi de 12,7 % (187/1.467). Os resultados de cada touro, quanto à variável
embriões produzidos, foram os seguintes: Touro A 23,3% (1.112/4.764), Touro B 37,6%
(1.183/3.148), Touro C 34,5% (962/2.785) e Touro D 42,7% (1.524/3.573). No aspecto taxa
de prenhez, o Touro A obteve 29,2% (301/1.031), o Touro B 31,8% (365/1.147), o Touro C
33,6% (307/915) e o Touro D 33,1% (494/1.493). No que se refere à morte embrionária, o
Touro A obteve 14,0% (42/301), o Touro B 9,9% (36/365), o Touro C 12,4% (38/307) e o
Touro D 14,4% (71/494). Desse modo, a partir da constatação da importância do efeito do
touro, modificações nos protocolos de processamento do sêmen estão em andamento, a fim de
incrementar os índices dos touros que obtiveram os piores resultados.
Produção in vitro de embriões (PIV).
EFFECT OF THE BULL ON IN VITRO EMBRYO PRODUCTION, PREGNANCY
AND EMBRYONIC DEATH RATES. PRELIMINARY RESULTS.
Pontes, J.H.F.1; Spegiorin, M.R.2; Silva, K.C.F.2; Seneda, M.M.2.
1
In Vitro Brasil Ltda, 13800-970, Mogi Mirim-SP, Brasil; 2 Departamento de Clínicas
Verterinárias, Universidade Estadual de Londrina, 86051-990, Londrina-PR, Brasil.
[email protected]
The effect of the bull is one of the principal problems to obtain better efficiency rates on the
in vitro embryos production. To evaluate the impact of that, four Nelore bulls were evaluated
on embryo production, pregnancy and embryonic death. The data were obtained in the
company In Vitro Brasil Ltda, Mogi Mirim - SP. The oocytes were obtained by ovum pick up
(OPU), from Nelore cows. Frozen semen were obtained from commercial centers. Oocytes
were selected and immediately matured in vitro (IVM) for 24 hours in TCM 199 Bicarbonate,
added of piruvate/LH/FSH +10% of SFB, to 38,8ºC, in 5% CO2 in air. After IVM, oocytes
were cultured in FIV medium (Tyrodes medium added of BSA, piruvate, gentamicin and
heparin, this in a concentration of 10µg/mL), where they received semen (1x106 /mL),
prepared in Percoll gradient (45-90%). Immediately after in vitro fertilization (IVF), zygotes
and cumulus were transferred for drops of in vitro culture with medium (fluid of synthetic
oviduct modified SOFaa BSA). The viable embryos on D7 (considering D0 as day of IVF)
were transferred to synchronized heifers. The pregnancy diagnosis was performed by
ultrasound. The embryonic death was evaluated by the difference of percentile between the
pregnancy rates on 30 and 60 days. We obtained 14.270 oocytes, collected in the 946 sessions
of OPU, resulting in 33,5% (4.781/14.270) embryos, being 33,2% (4.736/14.270) were
transferred. The pregnancy rate just considered the embryos with confirmed transfer, was
32,0% (1.467/4.586). The total embryonic death rate was 12,7% (187/1.467). The results of
each bull, considering the produced embryos, were the following: Bull A 23,3%
(1.112/4.764), Bull B 37,6% (1.183/3.148), Bull C 34,5% (962/2.785) and Bull D 42,7%
(1.524/3.573). About pregnancy rate, Bull A obtained 29,2% (301/1.031), Bull B 31,8%
(365/1.147), Bull C 33,6% (307/915) and Bull D 33,1% (494/1.493). Considering embryonic
death, Bull A obtained 14,0% (42/301), Bull B 9,9% (36/365), Bull C 12,4% (38/307) and
Bull D 14,4% (71/494). In conclusion, after we realized the importance of bull effect,
modifications in the protocols of semen processing are in progress, in order to increase in
vitro embryo production.