CO2-L - Roche

0003289923190COINV6.0
CO2-L
Bicarbonate liquid
Substratos
Informações para encomenda
REF
CONTENT
03289923 190
Bicarbonate liquid (250 testes)
20751995 190
20752401 190
20753009 190
12149435 122
12149435 160
12149443 122
12149443 160
Ammonia/Ethanol/CO2 Calibrator (2 × 4 mL)
Ammonia/Ethanol/CO2 Control Normal (5 × 4 mL)
Ammonia/Ethanol/CO2 Control Abnormal (5 × 4 mL)
Precinorm U plus (10 × 3 mL)
Precinorm U plus (10 × 3 mL, para os EUA)
Precipath U plus (10 × 3 mL)
Precipath U plus (10 × 3 mL, para os EUA)
Português
Precauções e avisos
Preste atenção a todos os avisos e precauções incluídos na
Secção 1 / Introdução deste Manual de Métodos.
Informações do sistema
Teste CO2‑L, ID do teste 0‑625
Finalidade
Teste in vitro para a determinação quantitativa da concentração de
bicarbonato (HCO3-) em soro e plasma humanos utilizando os sistemas
COBAS INTEGRA.
Sumário
O bicarbonato é a segunda fracção de maior dimensão dos aniões do
plasma. Nesta fracção estão incluídos os iões bicarbonato (HCO3-) e
carbonato (CO32-), assim como os compostos carbamino. No pH fisiológico
do sangue, a concentração de carbonato é 1/1000 da do bicarbonato. Os
compostos carbamino também se encontram presentes em quantidades
tão baixas que, regra geral, não são mencionadas especificamente.
Foram referidos vários métodos diferentes para a determinação do
bicarbonato no soro e no plasma. A maioria destes procedimentos utiliza a
acidificação da amostra e a conversão de todas as formas de dióxido de
carbono em gás CO2.1 A quantidade de gás formada é determinada por
dispositivos manométricos ou volumétricos, eléctrodos selectivos de iões,
ou técnicas espectrofotométricas.2,3 Estes métodos são complicados,
morosos, muito técnicos e/ou requerem equipamento especial.
Foram descritos procedimentos enzimáticos nos quais é utilizado
fosfoenolpiruvato carboxilase (PEPC).4,5
O teor de bicarbonato do soro ou do plasma é um indicador significativo da
dispersão electrolítica e do défice aniónico. Em conjunção com a
determinação do pH, as medições do bicarbonato são utilizadas no
diagnóstico e tratamento de um grande número de doenças potencialmente
graves associadas ao equilíbrio ácido‑base dos sistemas respiratório e
metabólico.
Princípio do teste
O bicarbonato reage com o fosfoenolpiruvato (PEP) na presença de PEPC,
produzindo oxaloacetato e fosfato:
PEPC
PEP + HCO3–
oxaloacetato + H2PO4–
A reacção acima referida está associada a uma reacção que envolve a
transferência de um ião de hidrogénio do análogo de NADH para o
oxaloacetato utilizando MDH.
Reagentes - soluções de trabalho
Fosfoenolpiruvato: ≥ 40 mmol/L; análogo de NADH: ≥ 2 mmol/L;
MDH (de origem porcina): ≥ 314.3 µkat/L; PEPC (de origem
microbiana): ≥ 30.8 µkat/L
A posição de R é B.
2014-01, V 6.0 Português
Armazenamento e estabilidade
Validade a 2‑8 °C
Consulte o prazo de
validade no rótulo do
cobas c pack.
Sistema COBAS INTEGRA 400 plus
No analisador a 10‑15 °C
6 semanas
Sistema COBAS INTEGRA 800
No analisador a 8 °C
6 semanas
Colheita e preparação das amostras
Para colheita e preparação das amostras, utilize apenas tubos ou cuvetes
de amostra apropriados.
Apenas as amostras indicadas em seguida foram testadas e consideradas
aceitáveis.
Soro
plasma: Tratado com heparina (Li, Na, NH4+).
A amostra preferida é de sangue venoso colhido anaerobicamente da
forma usual para análise do bicarbonato. O teor de bicarbonato em tubos
não tapados diminui aproximadamente 4 mmol/L após uma hora.6 Foi
referido que o soro alcalinizado conservado em cuvetes abertas
permanece estável durante um máximo de 4 horas.6
Os tipos de amostras indicados foram testados usando tubos de colheita
de amostras seleccionados e comercialmente disponíveis à data do teste,
i.e. nem todos os tubos dos diferentes fabricantes disponíveis no mercado
foram testados. Os sistemas de colheita de amostras de diferentes
fabricantes podem, por sua vez, conter materiais diferentes que, em alguns
casos, podem afectar os resultados dos testes. Se processar amostras em
tubos primários (sistemas de colheita de amostras) consulte as instruções
do fabricante dos tubos.
As amostras que contêm precipitado têm de ser centrifugadas antes da
realização do ensaio.
Separar dos eritrócitos e armazenar tapado de forma estanque.
malato + análogo NAD+
O consumo de análogo de NADH resultante causa uma diminuição da
absorvância nos 409 nm, que é proporcional à concentração de
bicarbonato da amostra que está a ser analisada.
R
Preparação dos reagentes
Pronto a ser utilizado
Estabilidade:
MDH
Oxalacetato + análogo NADH + H+
Analisador(es) onde o suporte de reagentes
cobas c pack pode ser utilizado
400 plus
System-ID 07 6725 5 COBAS INTEGRA
COBAS INTEGRA 800
System-ID 07 5199 5
System-ID 07 5240 1
System-ID 07 5300 9
System-ID 07 7999 7
System-ID 07 7999 7
System-ID 07 8000 6
System-ID 07 8000 6
7 dias a 4 °C7
40 horas a 15‑25 °C8,9
A conservação do soro a ‑20 °C ou ‑80 °C durante um máximo de
6 meses não teve nenhum efeito significativo.10
Materiais fornecidos
Consulte a secção “Reagentes - soluções de trabalho” para mais
informações sobre os reagentes.
Ensaio
Para assegurar a correcta execução do ensaio é importante cumprir as
instruções fornecidas neste documento para o analisador utilizado.
Consulte o manual do operador apropriado para obter instruções mais
específicas sobre o ensaio realizado neste analisador.
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CO2-L
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CO2-L
Bicarbonate liquid
Substratos
Aplicação para soro e plasma
Os intervalos e limites de controlo deverão ser adaptados às exigências
específicas de cada laboratório. Os valores obtidos devem situar-se dentro
dos limites definidos. Cada laboratório deve estabelecer as medidas
correctivas a tomar no caso de os valores se situarem fora dos limites
definidos.
Cumpra os regulamentos governamentais aplicáveis e as directrizes locais
de controlo da qualidade.
Definição do teste COBAS INTEGRA 400 plus
Modo de medida
Absorvância
Modo de cálculo da abs.
Ponto final
Modo de reacção
R-S
Sentido da reacção
Decrescente
Comprimento de onda A/B
409/512 nm
Primeiro/último cálc.
21/45
Unidade
mmol/L
Cálculo dos resultados
Os analisadores COBAS INTEGRA calculam automaticamente a
concentração do analito de cada amostra. Para mais informações, consulte
a secção Análise de dados na Ajuda online (analisadores
COBAS INTEGRA 400 plus/800).
Factor de conversão: mmol/L × 1 = mEq/L11
Parâmetros de pipetagem
Diluente (H2O)
R
50 µL
120 µL
Amostra
2 µL
10 µL
Volume total
182 µL
Definição do teste COBAS INTEGRA 800
Modo de medida
Absorvância
Modo de cálculo da abs.
Ponto final
Modo de reacção
R-S
Sentido da reacção
Decrescente
Comprimento de onda A/B
409/512 nm
Primeiro/último cálc.
24/67
Factor pós-diluição
Não
Unidade
mmol/L
Parâmetros de pipetagem
Diluente (H2O)
R
50 µL
120 µL
Amostra
2 µL
10 µL
Volume total
182 µL
Calibração
Calibrador
Calibrador Roche Ammonia/Ethanol/CO2
Utilize água desionizada como
calibrador zero.
Modo de calibração
Regressão linear
Repetição da calibração
Duplicado recomendado
Intervalo de calibração
Cada lote e conforme necessário,
segundo os procedimentos de controlo
da qualidade
Rastreabilidade: Este método foi padronizado contra um padrão primário.
Controlo da qualidade
Intervalo de referência
Roche Ammonia/Ethanol/CO2 Control
Normal ou Precinorm U plus
Intervalo patológico
Roche Ammonia/Ethanol/CO2 Control
Abnormal ou Precipath U plus
Intervalo de controlo
24 horas (recomendado)
Sequência de controlo
Definida pelo utilizador
Controlo após calibração
Recomendado
Para o controlo da qualidade, utilize os materiais de controlo indicados na
secção "Informações para encomenda". Adicionalmente, pode ser utilizado
outro material de controlo adequado.
CO2-L
Limitações – interferências
Critério: Recuperação dentro de ± 10 % do valor inicial.
Icterícia:12 Nenhuma interferência significativa até a um índice I de 60 para
bilirrubina conjugada e não conjugada (concentração aproximada de
bilirrubina conjugada e bilirrubina não conjugada: 1026 µmol/L ou
60 mg/dL).
Hemólise:12 Nenhuma interferência significativa até a um índice H de 1000
(concentração aproximada de hemoglobina: 621 µmol/L ou 1000 mg/dL).
Lipemia (Intralipid):12 Sem interferência significativa até um índice L de
2000. Existe uma correlação fraca entre o índice L (corresponde à turbidez)
e a concentração de triglicéridos.
Fármacos: Não se encontrou qualquer interferência com concentrações
terapêuticas utilizando painéis de fármacos comuns.13,14
Em casos muito raros, a gamapatia, em particular a de tipo IgM
(macroglobulinemia de Waldenström), pode produzir resultados pouco
fiáveis.15
Uma concentração anormalmente elevada de dióxido de carbono ambiental
(CO2) pode ocorrer em certas condições ambientais do laboratório. A
concentração flutuante de CO2 ambiental pode interferir com o teste de
CO2‑L e produzir resultados elevados de CO2. Nestas condições, é
necessário reduzir o intervalo da re-calibração, caso o laboratório seja
incapaz de manter a concentração ambiental de CO2 em níveis normais
mediante medições de controlo apropriadas.
Quando o objectivo é o diagnóstico, os resultados devem ser sempre
interpretados em conjunto com a história clínica do paciente, o exame
clínico e outros resultados.
ACÇÃO NECESSÁRIA
Programação de lavagem especial: É obrigatória a utilização de ciclos de
lavagem suplementares sempre que determinadas combinações de testes
sejam executadas em conjunto nos analisadores COBAS INTEGRA. Para
instruções mais detalhadas, consultar a Introdução do Manual de métodos,
secção Ciclos de lavagem suplementares.
Onde requerido, a programação de lavagem especial/carry‑over
(arrastamento) deve ser implementada antes de reportar os resultados
deste teste.
Limites e intervalos
Intervalo de medição
2.0‑50 mmol/L (2.0‑50 mEq/L)
Limites inferiores de medição
Limite inferior de detecção do teste:
2.0 mmol/L (2.0 mEq/L)
O limite de detecção inferior representa o nível de analito mais baixo
mensurável passível de ser distinguido de zero. É calculado como o valor
situado 3 desvios padrão (DP) acima do padrão mais baixo (padrão mais
baixo + 3 DP; repetibilidade n = 21).
Valores teóricos
22-29 mmol/L (22-29 mEq/L)1
Cada laboratório deve verificar a transferibilidade dos valores teóricos para
a sua própria população de pacientes e, se necessário, determinar os seus
próprios intervalos de referência.
Dados específicos sobre o desempenho
São apresentados a seguir dados representativos do desempenho dos
analisadores COBAS INTEGRA. Os resultados podem diferir de laboratório
para laboratório.
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2014-01, V 6.0 Português
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Bicarbonate liquid
Substratos
Precisão
A precisão foi determinada utilizando amostras humanas e controlos num
protocolo interno com repetibilidade (n = 21) e precisão intermédia
(3 alíquotas por série, 1 série por dia, 21 dias). Obtiveram-se os seguintes
resultados:
Média
Repetibilidade CV
Média
Precisão intermédia CV
Nível 1
Nível 2
19.7 mmol/L
35.4 mmol/L
(19.7 mEq/L)
(35.4 mEq/L)
0.6 %
0.5 %
Nível 1
Nível 2
16.8 mmol/L
28.8 mmol/L
(16.8 mEq/L)
(28.8 mEq/L)
3.5 %
3.8 %
Comparação dos métodos
Os valores de bicarbonato para amostras de soro e plasma humanos
obtidos no analisador COBAS INTEGRA 800 utilizando o reagente
COBAS INTEGRA Bicarbonate liquid (y) foram comparados com os valores
determinados utilizando o reagente COBAS INTEGRA Carbon Dioxide
(CO2-S) num analisador COBAS INTEGRA 800 (x) e utilizando o ensaio
Bicarbonate liquid num analisador Roche/Hitachi 917 (x).
Analisador COBAS INTEGRA 800 Tamanho da amostra (n) = 57
Passing/Bablok16
Regressão linear
y = 0.981 x + 0.176 mmol/L
y = 0.974x + 0.348 mmol/L
τ = 0.984
r = 0.999
DP (md 95) = 0.400
Sy.x = 0.195
As concentrações das amostras variaram entre 1.13 e 46.2 mmol/L (1.13 e
46.2 mEq/L).
Analisador Roche/Hitachi 917
Tamanho da amostra (n) = 57
Passing/Bablok16
Regressão linear
y = 1.010x + 0.128 mmol/L
y = 1.006x + 0.427 mmol/L
τ = 0.969
r = 0.998
DP (md 95) = 1.06
Sy.x = 0.434
8
Boyanton BL, Blick KE. Stability studies of Twenty-Four Analytes in
Human Plasma and Serum. Clin Chem 2002;48/12:2242-2247.
9 O'Keane MP, Cunningham SK. Evaluation of three different specimen
types (serum, plasma lithium heparin and serum gel separator) for
analysis of certain analytes: clinical significance of differences in results
and efficiency in use. Clin Chem Lab Med 2006;44(5):662-668.
10 Elfath D, Cooney J, McDaniel R, et al. Effect of frozen storage of serum
on the level of 22 chemistry analytes. Clin Chem 1991;37:931.
11 Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. Philadelphia
PA: WB Saunders Company 1995;84.
12 Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of
Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation.
Clin Chem 1986;32:470-475.
13 Breuer J. Report on the Symposium “Drug effects in Clinical Chemistry
Methods”. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34:385-386.
14 Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry:
recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug
interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38:376-385.
15 Bakker AJ, Mücke M. Gammopathy interference in clinical chemistry
assays: mechanisms, detection and prevention.
Clin Chem Lab Med 2007;45(9):1240-1243.
16 Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure
for method transformation. Application of linear regression procedures
for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin
Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11):783-790.
Nesta Folha de Métodos é sempre utilizado um ponto como separador de
casas decimais para marcar a separação entre o número inteiro e as partes
fraccionadas de um número decimal. Não são utilizados separadores de
milhares.
Símbolos
Roche Diagnostics utiliza os seguintes símbolos e sinais além dos listados
na norma ISO 15223‑1.
CONTENT
Volume após reconstituição ou
homogeneização
As alterações ou os acréscimos significativos estão assinalados por uma barra de alteração na margem.
© 2013, Roche Diagnostics
As concentrações das amostras variaram entre 1.1 e 44.3 mmol/L (1.1 e
44.3 mEq/L).
Bibliografia
1 Scott MG, Heusel JW, LeGrys VA, et al. Electrolytes and blood gases,
in Tietz NW. Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia, PA:
WB Saunders Co 1999;1065-1066.
2 Natelson S. Microtechniques of Clinical Chemistry. Springfield, Il:
Charles C Thomas 1975;147.
3 Segal MA. A rapid electrotitrimetric method for determining CO2
combining power in plasma or serum. Am J Clin Pathol
1955;25:1212-1216.
4 Wilson W, Jesyk P, Rand R, et al. Use of Vickers discrete analyzer for
enzymatic determination of the bicarbonate content of serum. Clin
Chem 1973;19(6):640.
5 Norris KA, Atkinson AR, Smith WG, et al. Colorimetric enzymatic
determination of serum total carbon dioxide, as applied to the Vickers
Multichannel 300 discrete analyzer. Clin Chem 1975;21:1093-1101.
6 Gambino SR, Schreiber H. The measurement of CO2 content with the
autoanalyzer. A comparison with 3 standard methods and a description
of a new method (alkalinization) for preventing loss of CO2 from open
cups. Am J Clin Path 1966;45:406.
7 Guder WG, da Fonseca-Wollheim F, Heil W, et al. Quality of Diagnostic
Samples, in brochure: Recommendations of the Working Group on
Preanalytical Quality of the German Society for Clinical Chemistry and
Laboratory Medicine, 3rd Ed. 2010.
2014-01, V 6.0 Português
Conteúdo do dispositivo
Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim
www.roche.com
Distribution in USA by:
Roche Diagnostics, Indianapolis, IN
US Customer Technical Support 1-800-428-2336
3/3
CO2-L