Microbiologia para Análise de Águas - GuiaMicroAguas

GUIA DOS MÉTODOS DE
REFERÊNCIA
MICROBIOLOGIA PARA ÁGUA
*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.
“BIOKAR Diagnóstico coloca o seu conhecimento à sua disposição para fornecer
soluções simples e rápidas para atender suas necessidades.
Os laboratórios de microbiologia devem obedecer os critérios regulamentares que estão
em constante evolução, e é por isso que nós oferecemos este guia de métodos de
referência para ajudá-lo diariamente na aplicação das normas às suas atividades.”
SUMÁRIO:
C:
Coliformes e coliformes termorresistentes
Pesquisa e Contagem
Página 3
(Semeadura em meio líquido – NPP)
E:
Enterococcus intestinais
Pesquisa e Contagem
Página 4
Pesquisa e Contagem
Página 4
Pesquisa e Contagem
Página 5
Pesquisa e Contagem
Página 6
(Semeadura em meio líquido – NPP)
Enterococcus intestinais
(Filtração por membrana)
Escherichia coli e coliformes
(Filtração por membrana)
Escherichia coli e coliformes
(Semeadura em meio líquido – NPP)
L:
Legionella spp. e Legionella pneumophila
Pesquisa e Contagem
Página 7
(Semeadura direta depois de concentração por centrifugação ou filtração por membrana)
Legionella
Pesquisa e Contagem
Página 8
(Filtração direta por membrana)
M:
Microrganismos viáveis
Contagem
Página 8
P:
Pseudomonas aeruginosa
(Filtração direta por membrana)
Pesquisa e Contagem
Página 9
S:
Salmonella spp.
Esporos de bactérias anaeróbicas sulfitoredutase e Clostridium sulfito-redutase
Pesquisa
Página 10-11
Pesquisa e Contagem
Página 12
Esporos de microrganimos anaeróbicos
sulfito-redutase (Clostridia) (Enriquecimento
em meio líquido)
Pesquisa e Contagem
Página 13
Esporos de microrganimos anaeróbicos
sulfito-redutase (Clostridia) (Filtração por
membrana)
Pesquisa e Contagem
Página 13
Staphylococcus patogênico
Pesquisa e Contagem
Página 14-15
(Filtração direta por membrana)
ANEXOS:
Anexo A: Outras normas de microbiologia para água.
Anexo B: Testes para água.
Anexo C: Métodos alternativos rápidos para a microbiologia da água.
Para maiores informações, entre em contato com a gente.
*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.
NF T 90-413
T90-413
Pesquisa e Contagem de Coliformes e Coliformes Termorresistentes
Métodos gerais para semeadura em meio líquido
(Outubro 1985)
Princípios: - Semeadura da amostra para ensaio recolhida em tubos de meio presuntivo.
- Incubação à 30,0 ± 1ºC por 24 à 48 horas.
- Repique dos tubos que apresentam um aspecto turvo e presença de gás nos
tubos de confirmação.
- Incubação à 37,0 ± 1ºC por 48 horas para coliformes e 44,0 ± 0,5ºC para
coliformes termorresistentes.
Meio de Cultura
Solução de Ringer
Solução de RINGER à 1/4
BR00108 – 100 tablets
Água destilada
Água destilada estéril
BM11508 – 50 tubos de 18 mL
Diluente
Caldo Lactose
Meios
presuntivos
(1)
Meios de
confirmação
(1)
BIOKAR Diagnóstico
Caldo Lactose ou BCP
BK119HA – frasco 500g
Caldo Lauril Sulfato de Sódio
Caldo Bile
Brilhante
Lactose
ou
Caldo Lauril-Sulfato Triptose
BK010HA – frasco 500g
BM09708 – 50 tubos 10 mL, com
Duhran (concentração simples)
BM09808 – 50 tubos 10 mL, com
Duhran (concentração dupla)
Caldo Bile Lactose ou Verde
Verde Brilhante (BLBVB)
BK002HA – frasco 500g
BM01108 – 50 tubos 10 mL, com
Duhran
Meio de Schubert (modificado por
Fennel) (3)
(1) Ou à escolha do microbiologista.
(2) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína.
(3) Para a pesquisa dos coliformes termorresistentes.
*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.
Conformidade
Total
Total
Total (2)
Total
Total
-
NF EN ISO 7899-1
T90-432
Pesquisa e Contagem de Enterococcus Intestinais das águas de
superfície e residuais
Parte 1: Método resumido (NPP) para semeadura em meio líquido
(Março 1999)
Princípios: - Semeadura da amostra diluída em microplaca contendo o meio de cultura
desidratado.
- Incubação à 44,0 ± 0,5ºC por 36 à 72 horas.
- Análise sob radiação UV em 366 ηm.
Meio de Cultura
Diluente especial (DS)
Diluente
Água destilada
BIOKAR Diagnóstico
Conformidade
Sal marinho sintético
BR00308 – frasco 100g
BM08808 – 50 tubos 18 mL
Total
Água destilada estéril
BM11508 – 50 tubos de 18 mL
Total
Microplaca MUG/SF
BT00308 – 25 placas opacas
Total
Solução A
Meio de
cultura
(MUD/SF)
Solução B
Solução C
Solução D
NF EN ISO 7899-1
T90-416
Pesquisa e Contagem de Enterococcus Intestinais
Parte 2: Método de filtração por membrana
(Agosto 2000)
Princípios: - Filtração da amostra por membrana e transferência desta membrana para o
meio seletivo.
- Incubação à 36,0 ± 2ºC por 44 ± 4 horas.
- Confirmação das colônias características por transferência da membrana
para um ágar pré-aquecido à 44ºC e incubação à 44,0 ± 0,5ºC por 2 horas.
Meio de Cultura
BIOKAR Diagnóstico
Diluente
Água destilada
Água destilada estéril
BM11508 – 50 tubos de 18 mL
Meio seletivo
Meio de base – Meio de Slanetz e
Bartley
Ágar de SLANETZ e BARTLEY
(base)
BK129HA – frasco 500g
Solução TTC
Meio completo
Meio de
confirmação
Ágar bile esculina e azida
*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.
Suplemento TTC 12,5 mg
BS02608 – 10 flaconetes
Suplemento TTC 50 mg
BS02708 – 10 flaconetes
Ágar de SLANETZ e BARTLEY
BK037HA – frasco 500g
BM14608 – 20 placas de Ø 55 mm
BM09408 – 120 placas de Ø 55 mm
Ágar BEA
BM10408 – 10 flaconetes 100 mL
Conformidade
Total
Total
Total
Total
Total
NF EN ISO 9308-1
T90-414
Pesquisa e Contagem de Escherichia coli e coliformes
Parte 1: Método de filtração por membrana
(Setembro 2000)
Princípios: - Filtração da amostra por membrana.
- Para a amostra padrão, transferir a membrana para o ágar lactose ou TTC
com heptadecil sulfato de sódio
- Incubação à 36,0 ± 2ºC por 21 ± 3 horas.
- Para o ensaio rápido, transferir a membrana para o ágar caseína de soja e
incubar à 36,0 ± 2ºC por 4 à 5 horas, em seguida transferir a membrana para o meio TSA
e incubar à 44,0 ± 0,5ºC por 19 à 20 horas.
- Confirmação das colônias características por pesquisa de oxidase e produção
de indol.
(1) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína.
*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.
NF EN ISO 9308-3
T90-433
Pesquisa e Contagem de Escherichia coli e de coliformes das águas de
superfície e residuais
Parte 2: Método resumido (NPP) para semeadura em meio líquido
(Março 1999)
Princípios: - Semeadura da amostra diluída em microplaca contendo o meio de cultura
desidratado.
- Incubação à 44,0 ± 0,5ºC por 36 à 72 horas.
- Análise sob radiação UV em 366 ηm.
Meio de Cultura
Diluente especial (DS)
Diluente
Meio de
cultura
(MUD/EC)
BIOKAR Diagnóstico
Sal marinho sintético
BR00308 – frasco 100g
BM08808 – 50 tubos 18 mL
Conformidade
Total
Água destilada
Água destilada estéril
BM11508 – 50 tubos de 18 mL
Total
Meio MUG/EC
Microplaca MUG/EC
BT00108 – 25 placas opacas
Total
*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.
NF T 90-431
T90-431
Pesquisa e Contagem de Legionella spp. e de Legionella pneumophila
Método para semeadura direta e depois concentração por
filtração por membrana ou centrifugação
(Setembro 2003)
Princípios:
- Semeadura da amostra direta em meio seletivo.
- Em paralelo, preparação de um concentrado por filtração por membrana
com ressuspensão por raspagem ou por ultrassom, ou por centrifugação com a
recuperação do pelete num volume pequeno.
- Descontaminação do concentrado, uma parte por tratamento térmico e a
outra por tratamento ácido (1).
- Semeadura e depois descontaminação do concentrado por meio seletivo.
- Incubação por 8 à 10 dias à 36,0 ± 2ºC.
- Realçar a Legionella por repique para pesquisa de bactérias que requerem
L-cisteína.
- Realização de testes imunológicos para pesquisa de Legionella pneumophila.
(1) para água suja, a combinação dos dois tratamentos.
(2) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína.
*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.
NF EN ISO 11731-2
T90-430
Pesquisa e Contagem de Legionella
Parte 2: Método de filtração direta por membrana para águas
com baixa carga bacteriana
(Julho 2008)
Princípios: - Filtração da amostra por membrana e tratamento do filtro com tampão ácido.
- Transferência do filtro para meio seletivo e incubação à 36,0 ± 2ºC por pelo
menos 10 dias.
- Confirmação por repique para a pesquisa de bactérias exigentes de L-cisteína
e ferro.
Meio de Cultura
BIOKAR Diagnóstico
Conformidade
Reativo
Tampão ácido
-
-
Meio GVPC
Meio completo
Ágar
seletivo
GVPC
para
Legionella
BM07108 – 20 placas de Ø 90 mm
Total
Meio BCYE α sem L-cisteína
Ágar BCYE α sem L-cisteína
BM07308 – 20 placas de Ø 90 mm
Total
Ágar BCYE α com L-cisteína
BM07208 – 20 placas de Ø 90 mm
Total
Meios
BCYE α
NF EN ISO 6222
T90-401
Meio BCYE α sem antibiótico
Contagem de microrganismos viáveis
Contagem de colônias por semeadura em ágar nutritivo
(Julho 1999)
Princípios: - Semeadura em profundidade em meio não seletivo.
- Incubação à 36,0ºC por 44 horas e paralelamente à 22,0ºC por 68 horas.
Meio de Cultura
Diluente
Meio de
cultura
BIOKAR Diagnóstico
Conformidade
Se refere à norma NF EN ISO 8199
Ágar com extrato de levedura
*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.
Ágar Contagem de Placa (PCA)
sem glicose
BK153HA – frasco 500g
BM06808 – 10 flaconetes 200 mL
Total
NF EN ISO 16266
T90-419
Detecção e Contagem de Pseudomonas aeruginosa
Método de filtração por membrana
(Agosto 2008)
Princípios: - Filtração da amostra por membrana ou de uma diluição da amostra.
- Transferência da membrana para meio seletivo e i ncubação à 36,0 ± 2ºC e
leitura em 22 ± 2 horas e 44 ± 4 horas
- Confirmação das colônias suspeitas por pesquisa de oxidase e teste de
fluorescência.
Meio de Cultura
Meio
cultura
BIOKAR Diagnóstico
de Ágar base para Pseudomonas Ágar CN para Pseudomonas
Meios e
reagente de
confirmação
Conformidade
(Ágar CN)
BK165HA – frasco 500g (1)
BM14508 – 20 placas de Ø 55 mm
Total
Meio de King B
Ágar KING B
BM10508 – 7 tubos 7 mL
Total
Caldo de Acetamida
Caldo de Acetamida
BM09508 – 7 tubos 5 mL
Ágar Nutritivo
Ágar Nutritivo à 2,5%
BM12508 – 50 tubos 18 mL
Total
Total (2)
Reagente para a pesquisa de
oxidade
-
-
Reagente de Nessler
-
-
(1) O meio desidratado necessita da adição de 10 mL de glicerol por litro de meio ágar base.
(2) A triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína.
*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.
NF ISO 19250
T90-435
(Outubro 2010)
Pesquisa de Salmonella spp.
Princípios:
- Pré-enriquecimento à 36,0 ± 2ºC por 18 ± 2 horas. (1)
- Enriquecimento em caldo Rappaport-Vassiliadis com soja à 41,5 ± 1ºC e
caldo Müller-Kauffmann tetrationato-novobiocina à 37,0 ± 1ºC por 24 ± 3 horas.
- Para a detecção de Salmonella com crescimento lento, incubação do caldo
Rappaport-Vassiliadis com soja por 24 ± 3 horas adicionais.
- Isolamento em meio XLD à 36,0 ± 2ºC por 24 ± 3 horas e em um segundo
meio à escolha do laboratório.
- Confirmação por testes bioquímicos e sorológicos apropriados.
Meio de Cultura
Meio de préenriquecimento
Primeiro
meio de
enriquecimento
EPT (20g/L) (2)
BK131HA – frasco 500g
BK131GC – embalagem 5 Kg
EPT (25,5g/L) (3)
BK018HA – frasco 500g
Água peptonada tamponada (EPT) BK018GC – embalagem 5 Kg
BM01008 – 10 flaconetes 225 mL
BM05608 – 50 tubos 9 mL
BM05708 – 10 flaconetes 90 mL
BM13108 – 3 embalagens 3 L
BM13208 – 2 embalagens 5 L
Conformidade
Total
Meio base – Caldo RappaportVassiliadis de soja (RVS)
-
-
Solução B
-
-
Solução C
-
-
Meio completo
Caldo Muller-Kauffamann
tetrationato novobiocina (MKTTn)
(base)
Segundo
meio de
enriquecimento
BIOKAR Diagnóstico
Solução iodo-iodeto
Solução de novobiocina
Caldo RAPPAPORT-VASSILIADIS
Soja (RVS)
BK148HA – frasco 500g
BM07408 – 50 tubos 10 mL
Caldo
MULLER-KAUFFMANN
tetrationato novobiocina (base
MKTTn sem iodo, novobiocina)
BK169HA – frasco 500g
Caldo
MULLER-KAUFFMANN
tetrationato novobiocina (base
MKTTn sem iodo)
BK208HA – frasco 500g
Total (4)
Total (5)
-
-
Suplemento
Seletivo
Novobiocina 10 mg
BS03308 – 10 flaconetes qsp 250
mL
Suplemento
Seletivo
Novobiocina 40 mg
BS05608 – 8 flaconetes qsp 1 L
Total
Meio completo
Meio de
isolamento
Ágar Xilose Lisina Desoxicolato
(Ágar XLD)
Caldo
MULLER-KAUFFMANN
tetrationato novobiocina (pronto
para uso)
BM07808 – 50 tubos 10 mL
Ágar XLD (ISO 6579)
BK168HA – frasco 500g
BM08708 – 20 placas de Ø 90 mm
Total
Total
(6)
Ágar Nutritivo
Ágar férrico com três açúcares
(TSI)
Reagente de
confirmação Meio base – Ágar com uréia
Ágar Nutritivo à 2%
BK185HA – frasco 500g
BM11808 – 50 tubos 18 mL
Ágar Nutritivo à 2,5%
BM12508 – 50 tubos 18 mL
Ágar TSI
BK059HA – frasco 500g
Equivalente
Total
(5) (7)
-
-
Solução de uréia
-
-
Meio de descarboxilação da Llisina
-
-
Caldo Selenito Cistina
-
-
(Christensen)
(1) volumes maiores podem ser concentrados através de filtração por membrana, depois esta membrana é
transferida para a água peptonada tamponada.
(2) fórmula incluindo 90,0 g/L de fosfato dissódico (dodecaidratado) (massa molar 358,14)
(3) fórmula incluindo 3,56 g/L de fosfato dissódico anidro (massa molar 141,96)
(4) fórmula incluindo cloreto de magnésio anidro em vez da forma hexaidratada descrita.
(5) a triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína.
(6) suas qualidades intrínsecas serão complementares às do ágar XLD e permitirem a detecção de
Salmonella lactose + (que compreende typhi e paratyphi).
(7) taxa de triptona de 14,0 g/L, ao invés de peptona (20) descrita.
*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.
NF T90-415
T90-415
Pesquisa e Contagem dos esporos de bactérias anaeróbicas sulfitoredutase e de Clostridium sulfito-redutase
Método geral para incorporação em ágar em tubos profundos
(Outubro 1985)
Princípios: - Destruição das formas vegetativas por aquecimento adequado da amostra.
- Semeadura em meio seletivo e incubação sob anaerobiose à 37,0 ± 1ºC por
24 e/ou 48 horas.
- Caracterização do Clostridium a partir das colônias isoladas.
Meio de Cultura
Solução de Ringer
Solução de RINGER à 1/4
BR00108 – 100 tablets
Água destilada
Água destilada estéril
BM11508 – 50 tubos de 18 mL
Diluente
Meios e
reagentes
para a
detecção de
esporos de
bactérias
anaeróbicas
sulfitoredutase
Meios e
reagentes
para a
identificação
dos esporos
de
Clostridium
sulfitoredutase
BIOKAR Diagnóstico
Conformidade
Total
Total
Ágar glicose carne de fígado
Sulfito de sódio
Ágar glicose carne de fígado
BK157HA – frasco 500g
Total
Sais de ferro
Ágar TSC (base)
Meio base – Ágar Triptose-Sulfito BK031HA – frasco 500g
BM03908 – 50 tubos 20 mL
D-cicloserina
BM07708 – 10 frascos 200 mL
Solução de D-cicloserina
Suplemento Seletivo Dcicloserina 200 mg
BS00608 – 10 flaconetes qsp 500
mL
Total (1)
Total
Caldo glicose carne de fígado
-
-
Peróxido de hidrogênio
-
-
(1) o texto normativo contem um erro de composição (ausência de ágar): presença de triptona no lugar da
Triptose preconizada.
*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.
NF EN 26461-1/
ISO 6461-1
T90-434
Pesquisa e Contagem dos esporos de microorganismos
anaeróbicos sulfito- redutase (Clostridia)
Parte 1: Método para enriquecimento em meio líquido
(Julho 1993)
Princípios: - Inoculação em meio líquido de enriquecimento.
- Incubação sob anaerobiose à 37,0 ± 1ºC por 44 ± 4 horas.
Meio de Cultura
Diluente
BIOKAR Diagnóstico
Se refere à norma NF EN ISO 8199
Meio de base concentração
simples
Meio
reforçado
Meio de base concentração dupla
especial para
clostridia
Sulfito de sódio, solução à 4%
(m/m)
(DRCM)
Citrato e ferro III, solução à 7%
(m/m)
NF EN 26461-2/
ISO 6461-2
T90-417
Conformidade
-
-
-
-
-
-
-
-
Pesquisa e Contagem dos esporos de microorganismos
anaeróbicos sulfito- redutase (Clostridia)
Parte 1: Método por filtração por membrana
(Julho 1993)
Princípios: - Filtração da amostra por membrana e transferência para meio seletivo.
- Incubação à 37,0 ± 1ºC e por 20 ± 2 horas e 44 ± 4 horas.
Meio de Cultura
Meio base – Ágar Nutritivo
Ágar
ferro
sulfito (1)
Outro meio
seletivo (1)
BIOKAR Diagnóstico
Ágar Nutritivo à 2%
BK185HA – frasco 500g
BM11808 – 50 tubos 18 mL
Ágar Nutritivo à 2,5%
BM12508 – 50 tubos 18 mL
Sulfito de sódio, solução
-
Sulfito de ferro III, solução
-
Ágar Sulfito-triptose
Ágar TSC (base)
BK031HA – frasco 500g
BM03908 – 50 tubos 20 mL
BM07708 – 10 frascos 200 mL
Conformidade
Equivalente
Total (2)
(1) à escolha do laboratório
(2) o texto normativo contém um erro de composição (ausência de ágar): presença de triptona no lugar
da Triptose preconizada.
*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.
XP T 90-412
T90-412
Pesquisa e Contagem de Staphylococcus patogênicos
Método de filtração por membrana
(Junho 2006)
Princípios: - Filtração da amostra por membrana e transferência da mesma para meio
seletivo.
- Incubação à 36,0 ± 2ºC e por 44 ± 4 horas.
- Confirmação pelo teste da coagulase ou pelo teste da aglutinação em latex
ou por exame microbiológico.
Meio de Cultura
Meio de Chapman com manitol
Meio base – Ágar Baird Parker
Meio
cultura
de
Ágar CHAPMAN com manitol
BK030HA -frasco 500g
BM14808 – 20 placas de Ø 55 mm
Total (1)
Ágar BAIRD-PARKER (base)
BK055HA – frasco 500g
BK055GC – embalagem 5 Kg
Total (1)
Emulsão de gema de ovo e
telurito de potássio
BS06008 – 10 fraconetes 50 mL
Meio completo
Ágar BAIRD-PARKER gema de
ovo telurito
BM01808 – 20 placas de Ø 90 mm
BM09108 – 120 placas de Ø 90 mm
Meio base – Ágar com plasma de
coelho e fibrinogênio (RPF)
Meio de
confirmação
Conformidade
Solução de telurito de potássio
Emulsão de gema de ovo
Solução de sulfametazina (2)
Meio de
cultura e/ou
confirmação
(3)
BIOKAR Diagnóstico
Suplemento
Seletivo
Sulfametazina 25 mg
BS02808 – 10 flaconetes qsp 500
mL
Ágar BAIRD-PARKER (base)
BK055HA – frasco 500g
BK055GC – embalagem 5 Kg
Total
Total (1)
Total
Total (2)
Solução de telurito de potássio
Solução de fibrinogênio bovino
Solução de plasma de coelho e
inibidor de tripsina
Suplemento
Seletivo
Coelho
Fibrinogênio
BS03408 – 8 flaconetes qsp 100
mL
BS03808 – flaconete qsp 500 mL
Meio completo
Ágar BAIRD-PARKER
BM06708 - 20 placas de Ø 90 mm
BM15908 - 20 placas de Ø 55 mm
Ágar BAIRD-PARKER (KIT)
BT00508 – 6 flaconetes 90 mL
base + 6 flaconetes adicionais
BT01008 – 6 flaconetes 190 mL
base + 6 flaconetes adicionais
Caldo cérebro coração (BCC)
Plasma de coelho
Caldo Cérebro Coração
BK015HA – frasco 500g
Plasma de coelho liofilizado
BR00208 – 10 flaconetes para 20
reações
Total
Total
Total
Total
Total
Reagente de Reagente para teste de
confirmação aglutinação com latex
-
-
(1) a triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína.
(2) adição facultativa, justificada pela suspeita da presença de Proteus.
(3) ambiente favorável às águas susceptíveis a serem contaminadas por uma outra flora que possa
mascarar as colônias pesquisadas.
*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.
ANEXO A: outras normas de referência em microbiologia da água
Enterovírus (concentração
por lã de vidro e detecção
por cultura celular)
Pesquisa
XP T 90-451
T 90-451
Março 1996
Enterovírus humano
(cultura celular pelo
método das placas)
Pesquisa
NF EN 14486
T 90-452
Janeiro 2005
Detecção e contagem de
bacteriófagos – Parte 1:
Contagem dos
bacteriófagos ARN F
específicos.
Contagem
NF EN ISO 10705-1
T 90-440-1
Outubro 2001
Detecção e contagem de
bacteriófagos – Parte 2:
Contagem dos colifagos
somáticos.
Contagem
NF EN ISO 10705-2
T 90-440-2
Outubro 2001
Pesquisa e contagem dos
oocistos de
Cryptosporidium e de
cistos de Giardia.
Pesquisa e
Contagem
NF T90-455
T 90-455
Julho 2001
Legionella e/ou Legionella
pneumophila (PCR)
Detecção e
quantificação
NF T 90-471
T 90-471
Abril 2010
ANEXO B: testes para água.
Diretrizes gerais para a contagem de
microrganismos por meio de cultura
NF EN ISO 8199
T 90-400
Dezembro 2007
Medida do índice de substâncias ativas
com azul de metileno (SABM) – método
para análise em fluxo contínuo (CFA)
NF EN ISO 16265
T 90-410
Maio 2012
Determinação de pH
NF EN ISO 10523
T 90-418
Maio 2012
Exames bacteriológicos dos recipientes e
sistemas de armazenamento destinados ao
acondicionamento da água
PR NF T 90-425
T 90-425
Fevereiro 1992
Exame bacteriológico das águas de piscina
NF T 90-421
T 90-421
Julho 2006
Guia de amostragem para análise da
qualidade da água do meio ambiente –
Parte 1: amostragem de águas superficiais.
FD T 90-523-1
T 90-523-1
Fevereiro 2008
Guia de amostragem para análise da
qualidade da água do meio ambiente –
Parte 2: amostragem de água residual.
FD T 90-523-2
T 90-523-2
Fevereiro 2008
Guia de amostragem para análise da
qualidade da água do meio ambiente –
Parte 3: amostragem de águas
subterrâneas.
FD T 90-523-3
T 90-523-3
Janeiro 2008
Diretrizes para a validação dos métodos
microbiológicos.
FD ENV ISO 13843
T 90-460
Outubro 2001
Controle de qualidade dos meios de cultura
Emenda A1
Emenda A2
NF T 90-461
NF T 90-461/A1
NF T 90-461/A2
T 90-461
T 90-461/A1
T 90-461/A2
Julho 2001
Junho 2005
Maio 2007
Critérios para estabelecer equivalência
entre os métodos microbiológicos.
NF EN ISO 17994
T 90-462
Dezembro 2004
Amostragem para análises microbiológicas.
NF EN ISO 19458
T 90-480
Outubro 2006
NF EN ISO 8199
T90-400
Diretrizes gerais para a contagem de microrganismos
por meio de cultura
(Janeiro 2008)
Princípio: semeadura de um volume comum de amostra de água, em concordância com
o protocolo da metodologia escolhida em função da origem da água e do microrganismo
pesquisado.
Meio de Cultura
BIOKAR Diagnóstico
Conformidade
-
-
Solução salina
Diluente
Água peptonada
Água peptonada
BM16408 – 2 embalagens 5 L
Solução peptonada salina
Sal-triptona
BK014HA – frasco 500g
BM00808 – 50 tubos 9 mL
BM11408 – 10 frascos 90 mL
BM13508 – 3 embalagens 3 L
Solução
de
concentração
Ringer,
¼
de Solução de RINGER à 1/4
BR00108 – 100 tablets
Água destilada estéril
BM11508 – 50 tubos 18 mL
Solução tampão fosfato
(1) a triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína.
*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.
-
Total (1)
Total (1)
Total
Total
-
PR NF T 90-425
T90-425
Exames bacteriológicos dos recipientes e sistemas de
armazenamento destinado ao acondicionamento da água
(Fevereiro 1992)
Princípios: - Enxaguar com um diluente, então cultivar a suspensão obtida após a filtração
por membrana, ou para os recipientes transparentes incorporar diretamente os
microrganismos viáveis.
- Enxaguar com um diluente, então cultivar a suspensão obtida após a filtração
por membrana.
- Incubação: 20,0 ± 2ºC por 5 dias para contagem de microrganismos viáveis.
37,0 ± 1ºC por 24 e 48 horas para contagem de coliformes (1).
44,0 ± 0,5ºC por 24 e 48 horas para contagem de coliformes
termorresistentes (2).
Meio de Cultura
BIOKAR Diagnóstico
Água destilada
Diluente (3)
Solução
de
concentração
Meio
Cultura
Ringer,
de Ágar
¼
para a contagem
microrganismos viáveis (4)
Ágar Lactose BCP
Conformidade
Água destilada estéril
BM11508 – 50 tubos 18 mL
Total
de Solução de RINGER à 1/4
BR00108 – 100 tablets
Total
de Ágar Contagem de Placa (PCA)
BK144HA – frasco 500g
BK144GC – embalagem 5 Kg
BM01508 – 10 flaconetes 100 mL
BM03308 – 10 flaconetes 200 mL
Ágar Lactose BCP
BK023HA – frasco 500g
Total (5)
Total (5)
(1) se refere à norma NF T 90-414.
(2) se refere à norma NF T 90-413.
(3) no caso de análise frascos lavados, para inibir a influência de desinfetantes halogenados, adicionar
0,16g de tiossulfato de sódio por litro de diluente.
(4) no caso de análise frascos lavados, para inibir a influência de desinfetantes halogenados, adicionar 1g
de tiossulfato de sódio por litro de ágar.
(5) a triptona é uma peptona obtida por digestão pancreática da caseína.
*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.
ANEXO C: Método rápido alternativo em microbiologia da água.
Método COMPASS® Ecc Ágar:
Método de referência: NF EN ISO 9308-1, página 6.
Método de contagem de Escherichia coli e coliformes através de filtração por
membrana das águas de consumo humano.
Princípios: - filtração por membrana de um volume de amostra.
- transferência da membrana para o COMPASS® Ecc Ágar e incubar à 36 ±
2ºC por 24 ± 3 horas.
Colônias características: de
azul à púrpura que pode ser
rodeada por um halo rosa.
Meio Seletivo
Colônias características:
cor rosa.
COMPASS® Ecc Ágar – frasco 500g – BK202HA
COMPASS® Ecc Ágar – 20 placas de Ø 90 mm – BM15308
*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.
ANEXO D: Lista dos principais meios de cultura para a microbiologia da água.
PRODUTO
Ágar Seletivo Legionella segundo NEN
APRESENTAÇÃO
BM08108 – 20 placas de Ø 90 mm
Ágar extrato de levedura carvão tamponado BM11208 – 20 placas de Ø 90 mm
(BCYE) segundo NEN
Ágar extrato de levedura carvão tamponado BM11308 – 20 placas de Ø 90 mm
sem L-cisteína (BCYE) segundo NEN
Ágar Bismuto Sulfito
BK004HA – frasco 500g
Caldo Selenito-Cistina
BK009HA – frasco 500g
Ágar Púrpura Bromocresol Lactose
BK023HA – frasco 500g
Ágar Triptona Sulfito Cicloserina (TSC)
BM07708 – 10 flaconetes 200 mL
BM03908 – 50 tubos 20 mL
Meio base desidratado (s/ D-cicloserina)
BK031HA – frasco 500g
Suplemento Seletivo D-cicloserina 200 mg
BS00608 – kit com 10 frascos
Emulsão gema de ovo
BS06608 – 10 frascos 50 mL
Ágar SLANETZ e BARTLEY
Meio completo pré-envazado
BM14608 - 20 placas de Ø 55 mm
BM09408 - 120 placas de Ø 55 mm
Meio desidratado (completo)
BK037HA – frasco 500g
Meio desidratado (base, s/ TTC)
BK129HA – frasco 500g
Suplemento Seletivo TTC 50 mg
BS02708 – 10 frascos qsp 500 mL
Ágar EMB (Levine)
BK056HA – frasco 500g
Ágar XLD (Xilose Lisina Desoxicolato)
BK058HA – frasco 500g
Ágar Hektoen Entérico
BK067HA – frasco 500g
BM02708 – 20 unidades Ø 90 mm
Caldo Lactose
BK082HA – frasco 500g
Ágar Verde Brilhante
BK091HA – frasco 500g
Ágar Tergitol 7
Meio completo pré-envazado
BM14708 - 20 placas de Ø 55 mm
BM09308 - 120 placas de Ø 55 mm
Meio base desidratado (s/ TTC)
BK123HA – frasco 500g
Suplemento Seletivo TTC 12,5 mg
BS02608 – embalagem com 10 frascos
Caldo Peptona tamponada com NaCl pH BK128HA – frasco 500g
7,0
Caldo Müller-Kauffmann
Meio pronto para uso (completo, c/ iodo e
novobiocina
BM10608 – 50 tubos 10 mL
Meio base desidratado (s/iodo nem
novobiocina)
BK10608 – frasco 500g
Suplemento Seletivo Novobiocina 10 mg
BS03308 – embalagem com 10 frascos
Suplemento Seletivo Novobiocina 40 mg
BS05608 – embalagem com 8 frascos
Caldo Rappaport-VASSILIADIS
BK136HA – frasco 500g
Ágar Rose-Gal BCIG
BK142HM – frasco 100g
BK142HA – frasco 500g
Caldo Rappaport-VASSILIADIS Soja (RVS) Meio pronto para uso
BM07408 – 50 tubos 10 mL
Meio desidratado
BK148HA – frasco 500g
Ágar Bile Vermelho Violeta (VRBL)
Meio pronto para uso
BM03408 – 10 flaconetes 100 mL
BM03508 – 10 flaconetes 200 mL
Meio desidratado
BK152HA – frasco 500g
Suplemento Seletivo MUG 50 mg
BS02408 – embalagem com 10 frascos
Caldo CN para Pseudomonas
Meio completo pré-envazado
BM0708 - 10 placas de Ø 55 mm
Meio base desidratado (s/ glicerina)
BK165HA – frasco 500g
Ágar BAIRD-PARKER RPF – pronto para BM06708 - 20 placas de Ø 90 mm
uso
Caldo Acetamida
BM09508 – 7 tubos 5 mL
Ágar King B
BM10508 – 7 tubos 7 mL
*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.
Apresentações
A) Ágar:
PRONTO:
Placas de Petri (ainda não
disponíveis no Brasil):
- Pacote com 120 unidades de
Ø 55 e 90 mm;
- Pacote com 20 unidades de
Ø 55 e 90 mm;
- Pacote com 10 unidades de
Ø 55 e 90 mm.
PRONTO PARA SOLUBILIZAR:
Flaconetes (ainda não
disponíveis no Brasil)::
- 10 flaconetes de 100 mL;
- 10 flaconetes de 200 mL;
- 10 flaconetes de 500 mL;
DESIDRATADO:
Frascos:
- Embalagem de 500g;
- Embalagem de 5 Kg.
*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.
Apresentações
B) Caldos:
PRONTO PARA USO:
Frascos (ainda não
disponíveis no Brasil):
- 10 frascos de 90 mL;
- 10 frascos de 100 mL;
- 10 frascos de 200 mL.
Tubos (ainda não
disponíveis no Brasil):
- 50 tubos de 9 mL;
- 50 tubos de 10 mL;
- 5 tubos de 5 e 7 mL.
Embalagens flexíveis
(ainda não disponíveis no
Brasil):
- 3 embalagens de 3L;
- 2 embalagens de 5L.
DESIDRATADO:
Frascos:
- Embalagem de 500g;
- Embalagem de 5 Kg.
*Disponíveis no Brasil os meios desidratados.
BIOKAR Diagnostics Qualidade
O Controle de Qualidade da Biokar Diagnostics certifica o desempenho de seus
produtos em conformidade com os padrões ISO:
–
–
–
–
–
Testes de desempenho;
Condições de transporte;
Testes de esterilidade;
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BIOKAR Diagnostics é certificada
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