GAMA GT BIO LIQUID rev 03

GAMA GLUTAMIL TRANSFERASE (GGT)
1. FINALIDADE
Teste cinético optimizado para determinação da GGT em soro ou plasma
(IFCC)
2. INTRODUÇÃO
A Gama Glutamil Transferase (GGT) é uma enzima presente no citoplasma e
membrana celular, que atua no transporte de aminoácidos e peptídeos, bem
como atua no metabolismo do glutation.
3. IMPORTÂNCIA CLÍNICA
A GGT é uma enzima cuja atividade se eleva principalmente nas doenças
hepatobiliares. Nas obstruções da árvore biliar, os aumentos de atividade
verificam-se na faixa entre 5 a 30 vezes em relação aos valores referenciais.
Nas hepatites, o aumento é mais discreto, entre 2 a 5 vezes o valor
referencial. O nível de GGT é extremamente sensível à destruição hepática,
explicando o alto nível de GGT encontrado em casos de alcoolismo.
Quaisquer drogas que atuem sobre o sistema microssomal hepático podem
causar intoxicações que elevam a atividade sérica da GGT.
4. AMOSTRA
a- Preparo do paciente
Recomenda-se um jejum prévio de cerca de 8-12h . A critério médico podese realizar a coleta em prazo diferente.
b- Tipos de amostra
- Soro: recém-obtido e não hemolisado . O soro deve ser separado o mais
rapidamente possível.
- Plasma: pode-se usar plasma coletado com EDTA não hemolisado e
separado o mais rapidamente possível. Plasmas fluoretados, oxalatados ou
citratados fornecem resultados falsamente mais baixos, e os plasmas
heparinados devem ser evitados por provocarem turbidez em contato com o
reagente.
c- Armazenamento e estabilidade
As amostras devem ser mantidas sob refrigeração desde o momento de sua
separação ou congeladas se necessário. A GGT mantém-se inalterada na
amostra até 7 dias sob refrigeração (2-8 oC) e até 4 meses em temperatura
de freezer (- 20 oC).
d- Critérios de rejeição
Rejeitar as amostras hemolisadas,
contaminação microbiana.
ou que apresentem sinais de
e- Precauções e cuidados especiais
Todas as amostras devem ser manipuladas com extrema cautela, pois
podem veicular diversas doenças infecto-contagiosas (hepatite, SIDA etc.).
Seu descarte deve ser feito preferencialmente após sua autoclavação
devendo-se evitar seu descarte diretamente no meio ambiente. Igual
cuidado se recomenda no descarte de outros materiais como ponteiras
plásticas, agulhas e seringas.
5. INFORMAÇÕES GERAIS SOBRE O PRODUTO
A- Princípio de Técnica
L-g-Carboxil-4-Nitroanilida+Glicilglicina
Nitrobenzoato
Z g-Glutamilglicina + 5-Amino-2-
A velocidade de formação de 5-Amino-2-Nitrobenzoato a 405 nm é
diretamente proporcional à atividade de GGT na amostra.
6.MATERIAIS E EQUIPAMENTOS NECESSÁRIOS (porém não fornecidos)
- Espectrofotômetro , fotocolorímetro ( dotado de compartimento de
amostra ou cubeta termostatizada) ou equipamento automatizado;
- Banho-Maria;
- Cronômetro;
- Pipetas graduadas;
- Micropipetador.
7. PROCEDIMENTO TÉCNICO
(para equipamentos manuais e semi-automáticos)
- ajustar o comprimento de onda do equipamento para 405 nm e a
temperatura do compartimento de leitura (cubeta) em 37 oC ;
- deixar os reagentes e amostras adquirirem a temperatura ambiente
Procedimento Técnico
Pipetar 1 mL do reagente de trabalho
Incubar por 3 minutos a 37 oC
Pipetar 0,1 mL de amostra e acionar o cronômetro
Após 1 minuto ler a absorbância inicial (A0) e
depois ler a absorbância após 1,2 e 3 minutos
8. CÁLCULOS
Para se determinar a atividade da GGT na amostra analisada, calcula-se a
variação (D) de absorbância por minuto entre as leituras efetuadas, e
multiplica-se o valor de delta pelo fator cinético 1158
Observação: O fator cinético possui um valor fixo calculado em função da
proporção amostra/reagente e o coeficiente de absorção molar do
cromogênio. Quaisquer alterações na proporção amostra/reagente causam
mudança no valor do fator. Para compensar possíveis distorções no sistema
óptico do equipamento, pode-se checar o fator através do uso de
calibradores apropriados.
9. RESULTADOS
- Unidades utilizadas: U/L.
- Valores de referência
Homens: 0-50 U/L (37 oC)
Mulheres: 0-30 U/L (37 oC)
- Interpretação
Recém-natos e especialmente prematuros têm níveis muito mais elevados,
até 6 vezes ao limite superior normal. Este nível decresce durante o primeiro
ano de vida pós-natal. Atividades de GGT em crianças (3-15 anos de idade) e
em mulheres são quase idênticos.
10. LIMITES DO MÉTODO
- Limites de diluição
A reação mantém-se linear até atingir um delta de absorbância por minuto de
0,515 (cerca de 596 U/L) . Acima deste valor de delta, deve-se diluir a
amostra em solução fisiológica (NaCl 0,85%) e repetir a análise,
multiplicando o resultado final pelo fator de diluição.
- Interferentes
Normalmente as maiores interferências verificam-se com o consumo de
medicamentos (contraceptivos, paracetamol etc.), etanol ou ainda ácido
ascórbico. Recomenda-se a leitura dos textos de Tietz e Young sobre o
assunto para maiores informações.
b- Reagentes
Constituintes
Reagente I (RI)
L-g-1,3 Carboxil-4-Nitroanilida
Reagente II (RII)
Tris 8,25
Glicilglicina
elevadas;
- Quando utilizado em equipamentos de automação, a transferência do
reagente para os recipientes do equipamento deve ser feita cuidadosamente
de forma a evitar possíveis contaminações que venham a interferir em sua
performance;
- Crescimento bacteriano neste reativo inviabiliza sua utilização;
- Os reagentes destinam-se ao uso diagnóstico in vitro, devendo-se evitar seu
contato com a pele, olhos e mucosas.
4 mmol/L
100 mmol/L
100 mmol/L
- Preparo do Reagente de Trabalho: adicionar uma parte de RII a cinco partes
de RI e homogeneizar , podendo ser utilizado logo após seu preparo.
c- Armazenamento e estabilidade
No laboratório devem ser mantidos em geladeira (2-8 oC) aonde se mantém
estáveis até a data de validade expressa em rótulo, desde que isentos de
contaminação química ou microbiana. Após preparado, o reagente de
trabalho é estável por 30 dias em temperatura de geladeira (2-8 oC) .
D- Precauções e cuidados especiais
- Os reagentes não devem ser congelados nem expostos a temperaturas
11. CONTROLE DA QUALIDADE
- Materiais necessários
Amostras de controle originárias de pool de soros preparados pelo próprio
laboratório e/ou controles de origem comercial, mapas e gráficos de controle.
- Periodicidade
Ao iniciar o trabalho com um novo lote de reagentes recomenda-se testar os
mesmos quanto a precisão e exatidão. Durante a execução da rotina,
recomenda-se testar uma amostra de controle junto com cada bateria de
testes.
- Interpretação e avaliação
Como o objetivo do controle de qualidade é garantir que os resultados
liberados sejam compatíveis com a realidade do paciente, o laboratório deve
definir quais são os parâmetros de controle adotados bem como as medidas
para possíveis ações corretivas.
12. ESTATÍSTICAS DO MÉTODO
- Precisão: foram testadas 3 amostras de controle 20vezes obtendo-se
coeficientes de variação entre 0,6 a 2,5%.
- Exatidão: a análise por regressão linear revelou um coeficiente de
correlação 0,999 comparado com material de outro fabricante, após análise
de 63 amostras com valores entre 15 e 714 U/L a partir da seguinte fórmula:
GGT Laborclin = (0,94 x Atividade outra marca) + 1,9
13. GARANTIA DA QUALIDADE
A Laborclin obedece o disposto na Lei 8.078/90 - Código de Defesa do
Consumidor. Para que o produto apresente seu melhor desempenho, é
necessário :
- que o usuário conheça e siga rigorosamente o presente procedimento
técnico;
- que os materiais estejam sendo armazenados em condições adequadas;
- que os equipamentos e demais acessórios necessários estejam em boas
condições de uso , manutenção e limpeza.
Antes de ser liberado para venda, cada lote do produto é submetido a testes
específicos, que são repetidos periodicamente até a data de vencimento
expressa em rótulo. Os certificados de análise de cada lote podem ser
solicitados junto ao SAC - Serviço de Assessoria ao Cliente, bem como em
caso de dúvidas ou quaisquer problemas de origem técnica, através do
telefone 0800-410027. Quaisquer problemas que inviabilizem uma boa
resposta do produto, que tenham ocorrido comprovadamente por falha da
Laborclin serão resolvidos sem ônus ao cliente, conforme o disposto em lei.
14. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Goldbarg, J.A.; Pineda, E.P.,; Smith, E.E., Friedman, O.M. And
Rutenberg, A.M. Gastroenterology, 44, 12, 1963.
2. Orlowski, M. and Szewczuk, A. Clin. Chim. Acta, 7, 755, 1962.
3. Orlowski, M. and Szewczuk, A. Biochem. Biophis. . Acta, 73, 679,
1963.
4. Szasz, G. Clin. Chem., 15,124, 1969.
5. Rosalki, S.B. And Tarlow, D., Clin. Chem. , 20, 1121, 1974.
6. Persijn, J.P. And Van der Slik, W.J. Clin. Chem. Clin. Biochem., 14, 42,
1976.
7. IFCC Methods for Measurements of Catalytic Concentration of Enzymes
- Part 4: IFCC Method for gamma-glutamyl-transferase, J. Clin. Chem.
Clin. Biochem., 21, 633 ,1983.
8. Freidman, R.B.; Anderson, R.E.; Entire, S.M. And Hinshberg, S.B.; Clin.
Chem. 26:1D 1980.
9. Whitfield, J.B.; Moss, D.W.; Neale, G.; Orme, M.; And Breckenridge, A.
Brit. Med. J.; 1, 316 1973.
10. Szasz, G. In Selected Methods of Clinical Chemestry, Vol. 8, pp. 4753, G.R. Cooper , Ed. AACC, Washington D.C. ,1977.
11. Young, D.S.; Pastaner, L.C. And Gibberman, V. Clin. Chem., 21, 5,
1975.
15. INFORMAÇÕES COMPLEMENTARES
OS PROTOCOLOS PARA EQUIPAMENTOS AUTOMÁTICOS PODEM SER
REQUISITADOS JUNTO AO S.A.C.
16. REGISTRO NO MINISTÉRIO DA SAÚDE: 100.970.10085
17. APRESENTAÇÃO
Lit contendo 2 frascos de 25 mL do reagente I e 2 frascos de 5 mL do
reagente II.
Laborclin produtos para laboratórios ltda.
Dúvidas, sugestões
e/ou reclamações
ligue para o nosso:
LB 172021 - Rev. 03 - 07/04
Rua Cassemiro de Abreu, 521 Pinhais/PR - CEP. 83.321-210
CNPJ: 76.619.113/0001-31 - Inscrição Estadual: 13700129-26
Responsável Técnico: Elisa H. Uemura CRF-PR 4311
www.laborclin.com.br
Indústria Brasileira